专题2微生物的培养与应用.doc
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1、【精品文档】如有侵权,请联系网站删除,仅供学习与交流专题2微生物的培养与应用.精品文档.专题2 微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养目标聚焦1知道培养基的种类、营养要素、配制原则2掌握消毒灭菌的原理和方法3尝试用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养精例点拨【例1】关微生物营养物质的叙述中,正确的是A是碳源的物质不可能同时是氮源B凡碳源都提供能量C除水以外的无机物只提供无机盐D无机氮源也能提供能量【解析】不同的微生物,所需营养物质有较大差别,要针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项,它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同时是氮源,如NH4HCO3;有的碳
2、源同时是能源,如葡萄糖;有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。如二氧化碳,可作为自养型微生物的碳源;NaHCO3,可作为自养型微生物的碳源和无机盐;而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。答案:D【例】培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是 ( )化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线灭菌 高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法 A B C D【解析】培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温,需用干热灭菌;接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果;实验
3、操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;牛奶为不破坏其营养成分可采用巴氏消毒法。答案:A。【例】关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是 ( )A操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯C待培养基冷却至50左右时进行倒平板D待平板冷却凝固约510min后将平板倒过来放置 -【解析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,不能颠倒;牛肉膏容易吸潮,所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻璃棒取出称量纸;待培养基冷却至50,用手触摸锥形瓶刚刚不烫手,并且培养基处于溶化状态;平板冷却几分钟后还需倒置。
4、答案:A。【例】为了检测饮用水中是否含有某种细菌,配制了如下表培养基配方:蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4伊红 Y荚蓝蒸馏水PH10g5g5g2g04g0.065 g100 mL72(1)该培养基所含的碳源有 ,其功能是 。(2)该培养基所含的氮源有 ,其功能是 。(3)该培养基除含碳源、氮源外,还有微生物需要的营养物质是 。(4)该细菌的同化作用类型是 。(5)该培养基可用来鉴别哪种细菌?( )A霉菌 B大肠杆菌C母菌 D乳酸菌【解析】对于异养型微生物来说,含C、H、O、N的物质,既是碳源,也是氮源。各类微生物的最适PH不同,酵母菌、霉菌适宜在偏酸(pH为4560)环境中生长。伊红、美蓝是鉴别大肠
5、杆菌的物质。答案,(1)乳糖、蔗糖、蛋白胨;主要用于构成细胞物质和代谢产物。(2)蛋白胨;主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物。(3)水、无机盐。(4)异养型。(5)B。【例】下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A防止杂菌污染 B消灭杂菌C培养基和发酵设备都必须灭菌 D灭菌必须在接种前【解析】灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A说的是灭菌的目的,因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌),所以是正确的;B是错误的,因为灭菌的目的是防止杂菌污染,但实际操作中不可能只消灭杂菌,而是消灭全部微生物。C是正确的,因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌;发酵所用的
6、微生物是灭菌后专门接种的,灭菌必须在接种前,如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。答案:B基础过关1关于微生物的营养,说法正确的是()A同一种物质不可能既作碳源又作氮源除水以外的无机物仅提供无机盐C凡是碳源都能提供能量D无机氮源也能提供能量关于配置培养液的叙述正确的是制作固体培养基必须加入琼脂发酵工程一般用半固体培养基培养自生固氮菌不需要氮源加入青霉素可得到放线菌下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分表成分千肉膏蛋白胨NaClH2O含量05g1g05g100mL其中的牛肉膏和蛋白胨能够提供 ( ) 碳源 B生长因子 氮源 D包括ABC 获得纯净培养物的关键是 ( ) 将用于微生物培养的器皿、接种用具、
7、培养基等进行灭菌 接种纯种细菌 适宜环境条件下培养 防止外来杂菌的入侵 下列操作与灭菌无关的是 ( ) 接种前用火焰灼烧接种环 接种前用酒精擦拭双手 将平板倒置,放入培养箱中培养 接种要在酒精灯的火焰旁完成 将接种后的培养基和一个未接种的培养良人37恒温箱的目的是 ( ) 对比观察培养基有没有被微生物利用第比分析培养基上是否生有杂菌没必要放入媒介中的培养基为了下次接种是在使用菌种保存应控制的条件是湿度低温烦躁有光隔绝空气适当有氧外科手术器械和罐头食品的消毒,都要以能够杀死什么为标准?球菌杆菌螺旋菌芽孢有关平板划线的正确操作是是用已灭菌的接种环、培养皿、操作过程中不再杀菌打开含菌种的试管需通过火
8、燃灭菌取出菌种后要马上赛上棉塞将沾有菌种的接种环迅速深入平板内,划三至五条平行线即可最后将平版倒置放入培养箱中培养10有关稀释涂布平板法,叙述错误的是( )A首先将菌液进行一系列的梯度稀释B然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面适宜条件下培养D结果都可在培养基表面形成单个的菌落11若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起,采用下列哪组培养基可将它们分离? ( ) A加食盐的培养基和蛋白胨培养基 B伊红一美蓝培养基和无氮培养基 C加青霉素的培养基和液体培养基 D斜面培养基和液体培养基12细菌培养实验中,在试管口加的棉塞,既要能防止杂菌的污染,又要保证通气良好。图中正确的棉塞位置是 ( )1
9、3金黄色葡萄球菌有很强的致病力,还可能引起食物中毒。下述实验结束后的做法错误的是 ( )A对接种环进行灼烧处理带菌培养基须经加热后才能倒掉C带菌培养基须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉D接种后双手须经肥皂洗净,再用75的酒精棉球擦拭14下表所示为某微生物培养基配方,请分析回答: 成分 含量 NaNO3 3g K2HPO4 1s KCl 0.5g MgS047H2O 0.5 FeSO4 0.01g (CH2O) 30g H20 100mL 青霉素 0.1万单位 (1)根据物理性质,该培养基属于培养基;根据用途划分则属于 ,培养基。 (2)根据培养基原料,所培养的微生物的代谢类型是 ,培养的微生物可
10、能是 。 (3)该培养基中的碳源是 。 (4)如果要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标,至少要加入 。 和 ,除去 。成分牛肉膏蛋白胨NaCI H2O含量 05g 1805g100mL 15下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分表,据表回答相关问题:(1) 蛋白胨在培养基中的主要作用是 。 (2)若用表中成分材料配制观察金黄色葡萄球菌菌落状况的培养基,还需要添加的成分是 。(3)培养基配制好时,分装前应进行的工作程序是 。 (4)从配制培养基直至接种培养,所采用的预防杂菌感染的方法是 。 (5)对培养基进行搁置斜面处理的目的是 能力拓展1下表中给出某培养基的配方。请回答牛肉膏蛋白胨 NaCI 琼脂 2 0
11、5g 1g 05g 2g100mL(1)蛋白胨能提供的营养素有 等。琼脂的作用为 。 (2)在各种成分溶化分装前,必须进行的重要步骤是 。 (3)此培养基一般不适用于工业生产,工业生产常用 培养基。 (4)此培养基能培养的细菌的同化作用类型是 。 (5)若要分离出金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入 。 (6)若用此培养基纯化大肠杆菌,最常用的方法是 和 。若在此培养基中加入 和 ,可直接鉴定大肠杆菌,其菌落特征是 2某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答: (1
12、)对买回来的菌种进行扩大培养。首先制备试管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料: 、 、 、 、 ,其中提供氮源的主要是 ;提供碳源的主要物质是 ;琼脂的作用是 ,他不提供营养。(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,配制培养基时各成分要有合适的 。在烧杯中加入琼脂后要不停地 ,防止 。 (3)将配制好的培养基分装到试管中,培养基体积约占试管长度的 。加棉塞后若干个试管一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入 中灭菌,压力是 kPa,温度是 ,时间 。灭菌完毕后拔掉电源。待锅内压力自然降到0时,将试管取出。如果棉塞上沾有培养基此试管应 。 (4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意,先向锅内倒入
13、 。把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排除后将锅密闭。 (5)从一支试管向另一支试管接种时,接种环要在酒精灯 (“内”或“外”)焰灭菌,并且待接种环 后沾取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰附近,将接种的试管放人 冰箱中保藏。课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数目标聚焦1研究培养基对微生物的选择作用2运用相关技术进行微生物数量的测定精例点拨【例1】对细菌群体生长规律测定的正确的表述是A在液体培养基上进行 B至少接种一种细菌 C接种一个细菌 D及时补充消耗的营养物质【解析】细菌群体生长规律的测定是人们在一定条件下进行的。这些条件是:一种细菌、恒定容积的培养基,液体培养基、定时测定细菌总数。在
14、这些条件下,才能测定出细菌的生长规律。测定时只能用一种细菌的子细胞群体的变化规律表达微生物的生长;恒定容积是给微生物提供一定的生存环境;液体培养基才能通过样品推测细菌总数。若接种多种细菌,则会发生种间斗争而不能测定一种微生物的生长规律。在接种时,要保证一定的接种量。答案:A【例2】在微生物群体生长规律的测定中,种内斗争最显著最激烈的时期是A调整期 B对数期 C稳定期 D衰亡期【解析】种内斗争是一种生态因素。种内斗争反应了种内生物对生存空间和生活资源的争夺。在生活空间充裕,营养充足的时候,种内斗争的程度是比较低的。随着微生物个体数目的增加,每个个体的生存空间越来越少,营养物质也越来越少,每个个体
15、对生存空间和资源的争夺也越来越激烈,种内斗争就越来越激烈。由此可知,在稳定期的种内斗争最激烈。在衰亡期,微生物的数目已经开始减少,PH已经极度不适于微生物的生存,次级代谢产物积累到很高的程度,这时的微生物的生存斗争主要是与无机环境的斗争。答案:C 【例】分析下面培养基的配方:KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。请回答: (1)在该培养基的配方中,为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是_和 。 (2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用?如果具有,又是如何进行选择的? 【解析】碳源是提供碳元素的物质,氮源是提供氮元素的物质。所以碳源是葡萄糖,氮源是尿素。绝大多
16、数生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,所以这种培养基对微生物有选择作用。选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。答案:(1)葡萄糖;尿素。(2)有选择作用。因为此配方中尿素是惟一氮源,因此,只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 【例】用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是 ( )A涂布了一个平板,统计的菌落数是230B涂布了两个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238C涂布了三个平板,统计的菌落数分别是21、212和256,取平均值163D涂布了三个平板,统计的菌落数分别是210、
17、240和250,取平均值233【解析】在设计实验时,一定要涂布至少3个子板,作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性,所以A、B不正确。C项虽涂布了3个子板,但是,其中1个子板的计数结果与另两个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,因此,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。答案;D。基础过关 1在做分离分解尿素的细菌实验时,A同学从对应稀释倍数为106的培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能是 ( )采用的土样不同 培养基被污染 操作出现失误 没有设置对照A BC 2在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生
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