分子生物学考试复习题下.doc
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1、【精品文档】如有侵权,请联系网站删除,仅供学习与交流分子生物学考试复习题下.精品文档.三、选择题1、RNA 合成的底物是- -。A dATP, dTTP , dGTP , d CTP BATP, TTP , GTP , CTPC ATP ,GTP, CTP,UTP D 、GTP, CTP,UTP,TTP2模板DNA的碱基序列是3TGCAGT5,其转录出RNA碱基序列是:A5AGGUCA3 B5ACGUCA3C5UCGUCU3 D5ACGTCA3E5ACGUGT33、转录终止必需 。A、终止子B、因子C、DNA和RNA的弱相互作用 D上述三种4、在转录的终止过程中,有时依赖于蛋白辅因子才能实现终
2、止作用,这种蛋白辅因子称为- -。A 因子 B 因子 C 因子 D IF因子5识别RNA转转录终止的因子是:A因子 B因子 C因子 D因子 E因子6DNA复制和转录过程有许多异同点,下列DNA复制和转录的描述中错误的是: A在体内以一条DNA链为模板转录,而以两条DNA链为模板复制B在这两个过程中合成方向都为53C复制的产物通常情况下大于转录的产物D两过程均需RNA引物EDNA聚合酶和RNA聚合酶都需要Mg2+ 7、核基因mRNA 的内元拼接点序列为 。A、AGGUB、GAUGC、GUAG D、UGGA8、真核生物mRNA分子转录后必须经过加工,切除-,将分隔开的编码序列连接在一起,使其成为蛋
3、白质翻译的模板,这个过程叫做RNA的拼接。A 外显子 B 启动子 C 起始因子 D 内含子9、在真核生物RNA pol的羧基端含有一段7个氨基酸的序列,这个7肽序列为Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser ,被称作 。 A C末端结构域 B 帽子结构 C Poly(A)尾巴 D 终止子10真核生物RNA的拼接需要多种snRNP的协助,其中能识别左端(5)拼接点共有序列的snRNP是: AU1 snRNP BU2 snRNP CU5 snRNP EU2 snRNP+ U5 snRNP四、是非题1、所有的启动子都位于转录起始位点的上游。( X )2、RNA分子也能像蛋白酶一样,以其
4、分子的空间构型产生链的断裂和和合成所必须的微环境。( 对 )3、真核生物的mRNA中的poly A 尾巴是由DNA编码,经过转录形成的。( X )4、在大肠杆菌RNA聚合酶中,亚基的主要功能是识别启动子。( X )5、所有起催化作用的酶都是蛋白质。( X )五、问答题1. 简述转录的基本过程?答:全酶与启动子结合的封闭型启动子复合物的形成( R位点被因子发现并结合 ) 开放型启动子复合物的形成: RNApol的一个适合位点到达10序列区域,诱导富含AT的Pribnow 框的“熔解”, 形成1217bp的泡状物,同时酶分子向10序列转移并与之牢固结合 开放型启动子复合物使RNApol聚合酶定向
5、两种复合物均为二元复合物(全酶和DNA )在开放型的启动子复合物中,RNApol的I位点和E位点的核苷酸前体间形成第一个磷酸二酯键 (亚基);三元复合物形成; +1位多为CAT模式,位于离开保守T 69 个核苷酸处 因子解离 核心酶与DNA的亲和力下降起始过程结束核心酶移动进入延伸过程2. 试比较原核和真核细胞的mRNA的异同.原核生物原核生物mRNA 的半衰期短。许多原核生物mRNA以多顺反子形式存在。其5端无帽子结构,3端没有或只有较短的poly(A)。 原核细胞mRNA(包括病毒)有时可以编码几个多肽。 原核生物常以AUG(有时GUG,甚至UUG)作为起始密码子真核生物:其5端存在帽子结
6、构。 绝大多数真核生物mRNA具有poly(A)尾巴。 其RNA最多只能编码一个多肽。 真核生物几乎永远以AUG为起始密码子。3. 以E.coli为例,说出Prok.启动子结构及各部分功能。答:启动子由两个部分组成:上游部分 CAP-cAMP结合位点(基因表达调控的正控制位点) CAP:降解物基因活化蛋白,环腺苷酸(cAMP)的受体蛋白下游部分 RNApol的进入(结合)位点 ,35 10,包括识别位点和结合位点 1) Sextama 框:-35序列,位于复制起点上游35个核苷酸处的6核苷酸序列,能被RNA聚合酶全酶识别并结合。其中,亚基在识别中起关键作用。 2) Pribonow 框:-10
7、序列,位于-10处的6核苷酸序列(TATAAT),能使RNA聚合酶识别DNA双链中的反义链,确保转录的链和方向无误。4 真核生物的RNA聚合酶是如何区分的?有几类? 分别转录哪些RNA?根据对 - 鹅膏蕈碱的敏感性不同而分三类:RNApol:最不敏感(动、植、昆) RNApol :最敏感 RNApol :不同种类的敏感性不同转录产物:RNApol:核仁 活性所占比例最大 转录rRNA(5.8S、18S、 28S) RNApol:核质 主要负责 hnRNA、snRNA 的转录 hnRNA(mRNA 前体,核不均一RNA) snRNA(核内小分子 RNA )RNApol :核质 负责 tRNA、5
8、S rRNA、Alu序列和部分 snRNA 5 真核生物-25 -35区、-70 -80区的保守序列分别是什么?Sextama框 (Sextama Box),-35序列, 大多数启动子中共有序列为TTGACACAAT框(CAAT box):其一致顺序为GGGTCAATCT,是真核生物基因常有的调节区,位于转录起始点上游约-80-100bp处,可能也是RNA聚合酶的一个结合处,控制着转录起始的频率。6 真核生物有几种启动子? 真核生物中有三种不同的RNA聚合酶,因此也有三种不同的启动子:RNA pol启动子、RNA pol启动子、RNA pol启动子。7 说明poly(A)在分子生物学实验中的应
9、用价值。a) 可将 oligo (dT) 与载体相连,从总体RNA中分离纯化mRNAb) 用寡聚dT(oligo (dT))为引物,反转录合成 cDNA 8 Euk.mRNA帽子的种类。帽子0 (Cap-0) m7GpppXpYp-(共有)m7G N7甲基鸟苷帽子1 (Cap-1) m7GpppXmpYp-第一个核苷酸的 2-O 位上产生甲基化 (A N6 位甲基化)帽子2(Cap-2) m7GpppXmpYmp第二个核苷酸的 2-O 位上产生甲基化(A、G、C、U)9 真核生物mRNA的3poly(A)的编码情况及其准确生成的机制为何?大多数真核生物的mRNA 3末端都有由100200个A组
10、成的Poly(A)尾巴。生成:a、 RNA末端腺苷酸转移酶(poly(A) 聚合酶)催化前体ATP 反应如下: Mg+ 或 Mn+多聚核糖核酸+nATP 多聚核糖核酸(A)n + nPPib、添加位点内切酶(360KDa)切除一段序列 由poly(A) 聚合酶催化添加poly(A)内切酶的识别位点(有其它因子参与) 切点上游 1320bp处的AAUAAA, 切点下游的 GUGUGUG (单细胞Euk.除外)10 增强子最早在哪里发现?简述它的5个作用特点。SV40的两个正向重复研究得最清楚(DR),-107 -178 、-179 -250 ; 各 72bp . 该增强子的特点如下: 对依赖于T
11、ATA框的转录的增强效应高于不依赖的情况 距离效应: 离72bp越近的容易起始转录 转录方向离开72bp的起始序列优先转录 细胞类型的选择:不同类型中作用有差异11 剪接体由哪些成分组成?试述剪接过程中各组分的组装过程及其剪接机制。剪接体:是以五个不同的小核核糖核酸以及不下于一百个蛋白质所组成的大型核糖核酸蛋白质复合物,称为小核核糖蛋白。剪接体剪接及自剪接涉及两个步骤的生物化学过程。两个步骤均需要在RNA间进行转酯反应。但是tRNA剪接则没有交醋化/转酯化过程。剪接体及自剪接交酯化反应的发生有特定的次序。首先,一个在内含子的特定“剪接分支位点”核苷酸会与这个内含子的第一个核苷酸产生转酯化反应,
12、形成两个RNA分子,一个是“内含子套索”另一个则是内含子前的外显子。第二,第一个外显子最后的核苷酸会与第二个外显子的首个核苷酸产生转酯化反应,连接外显子并释放内含子套索。12 真核生物mRNA前体内含子剪接的信号序列特征是什么?mRNA前体中内含子的两端边界存在共同的序列,这些序列可能是产生mRNA前体剪接的信号。多数细胞核mRNA前体中内含子的5边界序列为GU,3边界为AG。13 剪接分支位点核苷酸是什么?腺嘌呤核糖核苷酸14什么是选择性剪接?说明选择性剪接在果蝇性别决定中的作用机制。选择性剪接是指透过对同一个基因转录的相同pre-mRNA使用不同的剪接选择,产生不同的mRNA异构物,最后产
13、生多种相似却又独特的蛋白质,或是产生出稳定性低的mRNA产物以达到调节基因表现的目的。15. I型内含子发生改变后,可以产生其他酶的活性吗?如果可以,是哪些活性?这意味着I型内含子的催化中心有什么特点? 答:可以。这些活性包括:RNA聚合酶、内切核酸酶、磷酸酶、连接酶的活性。将I 型内含子转变成这些酶的能力表明它能结合于RNA的糖磷酸骨架并能催化在它前后的几个不同反应。例如,连接是剪切的相反反应。16. 转录涉及模板链和编码链的分离,解释在转录中单链DNA是怎样被保护的。答: 转录过程中控板与编码链分离时,聚合酶覆盖了整个转录泡从解旋位点到螺旋重新形成位点,因此单链的DNA被保护起来。与复制不
14、同,转录不需要单链结合蛋白的参与。17. 哪三个序列对原核生物mRNA的精确转录是必不可少的? 答: -35(RNA聚合酶结合位点)、-10(RNA荣合酶起始位点)启动子序列和终止子;18 原核生物与真核生物启动子的主要差别?原核生物 TTGACA - TATAAT-起始位点 -35 -10真核生物增强子-GC -CAAT-TATAA5mGpp起始位点 -110 -70 -2519一双链DNA分子如下图所示,在体内它编码五个氨基酸残基的多肽: 3TAC ATG ATC ATT TCA CGG AAT TTC TAG CAT GTA5 5ATG TAC TAG TAA AGT GCC TTA A
15、AG ATC GTA CAT3试问:(1)哪条链是转录的模板链?5ATG TAC TAG TAA AGT GCC TTA AAG ATC GTA CAT3 (2)写出该五个氨基酸残基的多肽。AUG CUA GAA AUU CCG (UGA)分析:5UAC AUG AUC AUU UCA CGG AAU UUC UAG CAU GUA33AUG UAC UAG UAA AGU GCC UUA AAG AUC GUA CAU57 试证明一个基因中只有一条DNA链作为模板被转录。 答:若基因两条链均被转录,而RNA聚合酶只能以5 3方向合成,所以两条DNA链会以相反方向转录。两信使携带着彼此互补的反
16、向核苷酸序列,编码不同的多肽。虽然某些DNA顺序能被双方向转录,但这不是常见现象。最早的明确证据是通过研究噬菌体SP8感染枯草杆菌(Bacillus subtilis)得到的。 SP8的DNA很特别:一条链(重链)富含嘌呤,另一链(轻链)则富含嘧啶。若把双链DNA温和加热,两条链分离(即DNA变性),可用密度梯度离心分离两条链。 1963年,Julius Marmur和Paul Doty用SP8感染枯草杆菌细胞后提取RNA,发现它只能与噬菌体DNA的“重”链杂交(即互补配对形成DNA-RNA杂合分子)。而不会与轻链杂交。显而易见,信使只可以与一条DNA链(重链)互补,因而DNA双链中只有一条链
17、作为转录的模板(图A7.8)。 Marmur和Doty很幸运地选用SP8做实验,因为它的全部基因都是同一条DNA链中转录而来。而另一些噬菌体,包括T4和噬菌体,部分基因由一条链转录而其他基因则由另一条链转录;因此若用这些噬菌体而不是SP8做实验,则不能成功地说明问题。8 有一个被认为是mRNA的核苷酸序列,长300个碱基,你怎样才能: (1)证明此RNA是mRNA而不是tRNA或rRNA。 (2)确定它是真核还是原核mRNA。答:根据序列组成进行判断: (1)此序列太长不可能是tRNA。如果它是rRNA,应该含有许多特殊元件,如:假 尿嘧啶和5甲基胞嘧啶; 同时应具有可以形成发夹环的反向重复序
18、列。如果 是mRNA则应有AUG起始密码子、一段相应的氨基酸密码子和一个相应的终止密码子构成的可读框。 (2)所有的真核生物mRNA在5端都含有一个7甲基鸟苷,而且大多数还在3端 有一个长的po1yA尾巴。这些都是原核生物mRNA所不具有的,但是原核生物mRNA靠近5端有l个核糖体结合序列(SD序列)。22、 详述怎样加工才能使真核生物mRNA 成熟一、首、尾修饰1、5端加帽 成熟真核生物mRNA,其结构5端形成-m7GpppmXpYp-帽子结构2、3端加尾 多数真核生物mRNA3端都有多聚(A)尾,长约100200个核甘酸。二、真核生物mRNA的剪接剪接就是在细胞核中,除去 hnRNA中的内
19、含子,并在连接酶的作用下,将外显子各部分连接起来的过程。此过程有如下特点:(1)mRNA前体的剪切部位是在内含子末端的特定部位。已发现大多数内含子都以GU为5端的起始,而其末端则为AG-OH-3。因此把5GU.AG-OH-3称为剪接接口(splicing junction)或边界序列。剪接后,GU或AG不一定被剪除掉。(2)套索结构的形成及剪接 剪接过程分两步反应进行。A、 按A Klessing的模式,内含子弯曲成套索状,形成 套索RNA(larial RNA)。B、内含子以套索形式被剪切下来,外含子相连接。(3)剪接体的形成 剪接体(spliceosome)是由几种非特异小核核糖核蛋白(U
20、snRNP)与mRNA前体结合而成。UsnRNP是一族snRNA,参与剪接作用的有多种UsnRNP。23 何谓RNA编辑?RNA编辑生物学意义如何?RNA编辑:指基因转录产生的mRNA分子中,由于核苷酸的缺失,插入或置换,基因转录物的序列不与基因编码序列互补,使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成,不同于基因序列中的编码信息现象。RNA编辑具有重要的生物学意义:. 校正作用;调控翻译;扩充遗传信息1)形成/删除AUG, UAA, UAG, UGA2)改变codon信息3)扩大编码的遗传信息量较大程度地改变了DNA的遗传信息,使该基因的DNA序列仅是一串简略意义模糊的序列或称为隐秘基因、模糊基因 4)中
21、心法则的发展第五章一、名词解释1翻译: 以mRNA为模板,氨酰-tRNA为原料直接供体,在多种蛋白质因子和酶的参与下,在核糖体上将mRNA分子上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。2密码子: mRNA中碱基顺序与蛋白质中氨基酸顺序的对应关系是通过密码实现的, mRNA中每三个相邻的碱基决定一个氨基酸,这三个相邻的碱基称为一个密码子。3密码的简并性: 个氨基酸具有两个以上密码子的现象。4同义密码子: 为同种氨基酸编码的各个密码子,称为同义密码了。5变偶假说: 指反密码子的前两个碱基(3-端)按照标准与密码子的前两个碱基(5-端)配对,而反密码子中的第三个碱墓则有某种程度的变动,使其
22、有可能与几种不同的碱基配对。6移码突变: 在mRNA中,若插入或删去一个核苷酸,就会使读码发错误,称为移码,由于移码而造成的突变、称移码突变。7同功受体: 转运同一种氨基酸的几种tRNA称为同功受体。8Anticodon: 指tRNA反密码子环中的三个核苷酸的序列,在蛋白质合成过程中通过碱基配对,识别并结合到mRNA的特殊密码上。9多核糖体: mRNA同时与若干个核糖体结合形成的念珠状结构,称为多核糖体。10Paracodon: tRNA 分子上决定其携带氨基酸分子的区域称副密码子。11Signal peptide: 某种分泌蛋白质及细胞膜蛋白质等,以前体物质多肽的形式合成,其N末端含有作为通
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