基因工程的原理及技术1.doc

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1、【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流基因工程的原理及技术1.精品文档.基因工程的原理及技术1 生物分子间特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质-DNA复合体”获得DNA片段信息的过程图。据图回答：（1）过程酶作用的部位是 键，此过程只发生在非结合区DNA，过程酶作用的部位是 键。（2）、两过程利用了酶的 特性。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（3）若将得到的DNA片段用于构建重组质粒，需要过程的测序结果与 酶的识别序列进行对比，以确定选用何种酶。（4）如果复合体中的蛋白质为RNA酶聚合，则其识别、结合DNA序列区为

2、基因的 （5）以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有 （多选）A.分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提取rRNA “汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）B.用无水乙醇处理菠菜叶片，提取叶绿体基粒膜上的光合色素来源:中国教育出版网C通过分子杂交手段，用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）D将抑制成熟基因导入番茄，其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终止后者翻译，延迟果实成熟。【答案】（1）磷酸二酯，肽“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（2）专一性（3）

3、限制性核酸内切酶 （4）启动子（或转录起始区）（5）A、C、D【解析】（1）DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯键，蛋白酶作用的部位是肽键。（2）过程利用了各种酶催化一种或一类化学反应的特性，即专一性。（3）DNA要构建重组质粒，需要用限制性核酸内切酶切割，再与质粒重组。（4）RNA聚合酶识别和结合在基因的启动子上，驱动基因转录。（5）蛋白酶能特异性的酶解蛋白质，分子杂交手段也是利用各物质分子结合的特异性，抑制成熟基因转录出的mRNA与催化成熟酶基因的mRNA碱基互补结合，也具有特异性，光和色素易溶于有机溶剂，与酒精并不是特异性的溶解，所以选ACD。来源:z,zs,tep.co“汉水丑生的生物

4、同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）m【试题点评】本题考查了基因工程的想过知识，主要考查学生对知识的理解和应用能力，难度较小。2 黄曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）回答下列问题：( 1 ) AFB1属于 类致癌因子。( 2 ) AFB1能结合在DNA 的G 上，使该位点受损伤变为G ，在DNA复制中，G 会与A配对。现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突

5、变为 。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（3）下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图据图回答问题： 在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株，经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶过程l 应选择 菌液的细胞提取总RNA ，理由是 过程中，与引物结合的模版是 检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用 方法。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）( 4 ）选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果见下表：来源:中国

6、教育出版网据表回答问题： 本实验的两个自变量，分别为 。 本实验中，反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是 。 经测定，某污染饲料中AFB1含量为100g/kg ，则每千克饲料应添加 克AFB1解毒酶解毒效果最好同时节的了成本。（5）采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高每的活性出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的 序列。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【答案】( 1 )化学( 2 ) （3）甲 甲菌液细胞的AFB1解毒酶基因已转录生成了mRNA，而在乙菌液细胞中该基因未转录AFB1解毒酶基因的 cDNA. 抗原-抗体杂

7、交 (4） AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量。 B组（或B组+A组） 5 (5）脱氧核苷酸序列。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【解析】黄曲霉毒素B1 （AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。来源:中&国教&育出&版网( 1 ) 黄曲霉毒素B1（AFB1）是化学物质，AFB1属于化学类致癌因子。( 2 ) AFB1能结合在DNA 的G 上使该位点受损伤变为G ，在DNA复制中，G 会与A配对。现有受损伤部位的序列为，经两次复制后

8、，该序列突变为。（3） 在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株经测定甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶过程l 应选择甲菌液的细胞提取总RNA ，理由是因为甲菌液细胞含解毒酶，意味着完成了基因的表达，所以应选择甲菌液的细胞提取总RNA 过程中，根据图示，可以看出与引物结合的模版是cDNA. “汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记） 检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，检测对象为蛋白质，应采用抗原-抗体杂交方法。（4） 本实验的两个自变量，分别为AFB1的有无和AFB1解毒酶的含量。 本实验中反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照

9、组是B组。 经测定，某污染饲料中AFB1含量为100g/kg ，则每千克饲料应添加5克AFB1解毒酶AFB1的残留量最少，解毒效果最好继续添加AFB1解毒酶解解毒效果不变，因此节约了成本。（5）采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高酶的活性出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【试题点评】本题以“黄曲霉毒素B1”为材料背景，考查了致癌因子，DNA复制，基因工程，蛋白质工程和实验设计，是一道很好的综合题，考查学生的知识的理解和运用能力，以及对实验分析能力和分析探究能力。难度适中

10、。3.天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（ ）A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞【解析】提取矮牵牛蓝色花的mRNA，逆转录得到DNA，然后扩增，可获得大量的基因B，A正确；从基因文库中获取目的基因，只要根据目的基因的

11、相关信息和基因文库中的信息进行筛选对比即可，不需要用限制酶进行切割，B错误；目的基因与质粒的连接需要用DNA连接酶，而不是DNA聚合酶，C错误；目的基因需要和运载体连接后形成重组质粒再导入，而且应该用农杆菌进行感染，而不是大肠杆菌，D错误。【答案】A来源:中_国教_育出_版网【试题点评】本题主要考查基因工程，在这部分，工具酶的选择和操作过程是常考内容，难度适中。4 根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）限制性内切酶切割分子后产生的片段，其末端类型有和。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（2）质粒运载体用EcoR切割后产生的片段如下：为使运载体与目的基因

12、相连，含有目的基因的DNA除可用EcoR切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是。（3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即DNA连接酶和DNA连接酶。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（4）反转录作用的模板是，产物是。若要在体外获得大量反转录产物，常采用技术。（5）基因工程中除质粒外，和也可作为运载体。来源:（6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【答案】（1）黏性末端 平末端（2） 切割产生的DNA

13、片段末端与EcoR切割产生的相同（3） Ecoli T4（4） mRNA（或RNA） cDNA （或DNA） PCR（5） 噬菌体 动植物病毒（6）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【解析】（1）当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，而当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的则是平末端。（2） 为使运载体与目的基因相连，不同的限制酶应切割出相同的黏性末端，它们必须要能识别相同的核苷酸序列，并且使每条链中相同的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。（3） DNA连接酶，根

14、据酶的来源不同，可以将这些酶分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为Ecoli DNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4DNA连接酶。来源:中.教.网z.z.s.tep（4） 反转录是以RNA为模版来合成DNA的过程。可以在体外短时间内大量扩增DNA的技术叫PCR（多聚酶链式反应）“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（5） 基因工程中除质粒外，还有噬菌体的衍生物、动植物病毒等。（6） 大肠杆菌细胞外有细胞壁和细胞膜，能阻止其他物质的进入，只能通过Ca2+处理细胞，使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞。【试题

15、评价】通过基因工程的操作过程及基因工程的工具及工具酶的作用，考查学生识记能力与理解分析能力。难度较小。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）5如图18所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的EF区域 (0.2kb)，那么所形成的重组质粒pZHZ2_。A既能被E也能被F切开 B能被E但不能被F切开C既不能被E也不能被F切开 D能被F但不能被E切开【答案】55.A【解析】.用限制酶从基因组DNA上切下目的基因，并取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000

16、对碱基)上相应的EF区域 (0.2kb)，用DNA连接酶连接后形成重组质粒，则在重组质粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位点，形成的重组质粒pZHZ2既能被E也能被F切开，故本题选A。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）6已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点08kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样 品，据表4所列酶切结果判断目的基因的大小为 kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图19中。来源:56.1.2 见右图【解析】56. 根据题中信息，原来质粒长度为3.7

17、kb切去EF之间的还有3.5kb，插入目的基因后构成重组质粒，重组质粒长度为1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，可推导出目的基因长度为1.2kb。重组质粒中G的切割位点距E的切割位点0.8kb，单独用限制酶G切割后产生1.6kb和3.1kb的两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的G酶识别位点外，还有一个G酶识别位点；H的酶切位点距F0.5kb，用H单独酶切产生1.2kb和3.5kb两种片段，说明在重组质粒中含有另外一个H的酶切位点，根据题中信息提示“将目的基因内部的限制酶G和H的识别位点标注在图19中”，可确定在EF之间分别含有G和H的一个识别位点。可断定G的识别位点，在举例E点

18、右侧0.8kb处，H的识别位点在距F左侧0.7kb处。7（16分）子叶黄色（Y，野生型）和绿色（y，突变型）是孟德尔研究的豌豆相对性状之一。野生型豌豆成熟后，子叶由绿色变为黄色。（1） 在黑暗条件下，野生型和突变型豌豆的叶片总叶绿素含量的变化见图10。其中，反映突变型豌豆叶片总叶绿素含量变化的曲线是_。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（2）Y基因和y基因的翻译产物分别是SGRY蛋白和SGRy蛋白，其部分氨基酸序列见图11。据图11推测，Y基因突变为y基因的原因是发生了碱基对的_和_。进一步研究发现，SGRY蛋白和SGRy蛋白都能进入叶绿体。可推测，位点_的

19、突变导致了该蛋白的功能异常，从而使该蛋白调控叶绿素降解的能力减弱，最终使突变型豌豆子叶和叶片维持“常绿”。（3）水稻Y基因发生突变，也出现了类似的“常绿”突变植株y2，其叶片衰老后仍为绿色。为验证水稻Y基因的功能，设计了以下实验，请完善。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（一）培育转基因植株：植株甲：用含有空载体的农杆菌感染_的细胞，培育并获得纯合植株。植株乙：_，培育并获得含有目的基因的纯合植株。（二）预测转基因植株的表现型：植株甲：_维持“常绿”；植株乙：_。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（三）推测结论：_。【答案

20、】 （1）A （2）替换 增加 （3）（一）突变植株y2 用含有Y基因的农杆菌感染纯合突变植株y2 （二）能 不能维持“常绿” （三）Y基因能使子叶由绿色变为黄色“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【解析】（1）根据题干所给信息“野生型豌豆成熟后，子叶由绿色变为黄色”，可推测出野生型豌豆成熟后，子叶发育成的叶片中叶绿素含量降低。分析图10，B从第六天开始总叶绿素含量明显下降，因此B代表野生型豌豆，A为突变型豌豆。（2）根据图11可以看出，突变型的SGRy蛋白和野生型的SGRY有3处变异，处氨基酸由T变成S，处氨基酸由N变成K，可以确定是基因相应的碱基对发生了替

21、换，处多了一个氨基酸，所以可以确定是发生了碱基对的增添；从图11中可以看出SGRY蛋白的第12和38个氨基酸所在的区域的功能是引导该蛋白进入叶绿体，根据题意，SGRy和SGRY都能进入叶绿体，说明、处的变异没有改变其功能；所以突变型的SGRy蛋白功能的改变就是由处变异引起的。 （3）本实验通过具体情境考查对照实验设计能力。欲通过转基因实验验证Y基因“能使子叶由绿色变为黄色”的功能，首先应培育纯合的常绿突变植株y2，然后用含有Y基因的农杆菌感染纯合的常绿突变植株y2，培育出含有目的基因的纯合植株观察其叶片颜色变化。为了排除农杆菌感染对植株的影响，应用含有空载体的农杆菌感染常绿突变植株y2作为对照

22、。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【试题点评】本题考查生物体的变异、遗传定律的综合应用、遗传学的探究实验等内容和学生提取信息的能力，难度中等。8.（9分）图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp I、BamH I、Mbo I、Sma I4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。请回答下列问题 (1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 连接。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记

23、）(2)若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段，产生的末端是 末端，其产物长度为 。(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma I完全切割，产物中共有 种不同长度的DNA片段。(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是 。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加 的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是 。【答案】（1）脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖“汉水丑生的生物同行”

24、超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（2）平 537bp、790bp、661bp （3）4（4）BamH I 抗生素B 同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向链接【解析】（1）DNA单链中相邻两个碱基之间通过“脱氧核糖磷酸脱氧核糖”连接。（2）Sma I识别的序列为GGGCCC，切割后会产生平末端；图1所示的DNA分子中含有两个Sma I的识别位点，第一个识别位点在左端534bp序列向右三个碱基对的位置；第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基对的位置，从这两个位点切割后产生的DNA片段长度分别为534+3，796-3-3，658+3，即得到的DNA片段长度分

25、别为537bp、790bp和661bp。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（3）在杂合子体内含有基因D和基因d，基因D的序列中含有两个识别位点，经过SmaI完全切割会产生537bp、790bp和661bp三种不同长度的片段，基因d的序列中含有一个识别位点，经过切割后会产生1327bp和 661bp两种长度的片段，综上，杂合子中分离到该基因的DNA片段经过切割后会产生4种不同长度的片段。（4）能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为GGATCC的BamH I和识别序列为GATC的Mbo I，若使用Mbo I会同时破坏质粒中的抗生素A抗性基因和抗生素B抗性

26、基因，所以要用BamH I来切割目的基因和质粒，切割后保留了完整的抗生素B抗性基因，便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌。因为目的基因和运载体是用同种限制酶切割的，目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能进行互补，可能出现目的基因反向连接在运载体上的情况，导致基因D不能正确表达。【试题点评】本题主要考查基因工程的相关知识，主要基因工程的基本操作过程限制酶的作用、目的基因的检测和筛选等。尤其本题中所涉及的限制酶的内容，难度大，要求能准确分析其产物的长度。学生必须具备很好的识图、分析推理能力才能成功作答。来源:z。zs。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）9.肺细

27、胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图。请回答：（）进行过程时，需用 酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为 。（）进行过程时，需用 酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。（）研究发现，let-7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图。据图分析，可从细胞提取 进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 （RASmRNA/RAS蛋白

28、）含量减少引起的。【答案】（10分）“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（1）限制性核酸内切酶（或限制） 启动子（2）胰蛋白（3）RNA RAS蛋白【解析】（1）过程表示基因表达载体的构建，在该过程中需要用限制酶对载体进行切割以便于目的基因的插入（限制性核酸内切酶，简称限制酶，写其他的不得分）；启动子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶结合和识别的位点，RNA聚合酶结合到该位点，可驱动转录过程。（2）过程表示动物细胞培养，培养过程中出现接触抑制后可以用胰蛋白酶处理，使之分散成单个的细胞，之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养。（3）判断目的基因是否在受体细胞中

29、转录，可用分子杂交技术来进行，从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交。根据题中信息“肺组织细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达就增强，引发肺癌”导入let7基因后，肺癌细胞受到抑制，说明RAS基因表达减弱，导致细胞中的RAS蛋白质含量减少进而导致癌细胞受抑制。【试题点评】本题主要考查选修3中有关基因工程和细胞工程中的知识，涉及的知识点主要有表达载体的构建.目的基因的检测.动物细胞培养等。试题难度不大。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）10.甲型血友病是由X染色体上的隐性基因导致的遗传病（H对h为显性）。图

30、1中两个家系都有血友病发病史，III2和III3婚后生下一个性染色体组成是XXY的非血友病儿子（IV2），家系中的其他成员性染色体组成均正常。 图1（1）根据图1， （填“能”或“不能”）确定IV2两条X染色体的来源；III4与正常女子结婚，推断其女儿患血友病的概率是 。（2）两个家系的甲型血友病均由凝血因子VIII（简称F8，即抗血友病球蛋白）基因碱基对缺失所致。为探明IV2的病因，对家系的第III、IV代成员F8基因的特异片段进行了PCR扩增，其产物电泳结果如图2所示，结合图I，推断III3的基因型是 。请用图解和必要的文字说明IV2非血友病XXY的形成原因。“汉水丑生的生物同行”超级群公

31、益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（7） 现III3再次怀孕，产前诊断显示胎儿（IV3）细胞的染色体为46，XY；F8基因的PCR检测结果如图2所示。由此建议III3 。图2（4）补给F8可治疗甲型血友病。采用凝胶色谱法从血液中分离纯化F8时，在凝胶装填色谱柱后，需要用缓冲液处理较长时间，其目的是 ；若F8比某些杂蛋白先收集到，说明F8的相对分子质量较这些杂蛋白 。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（5）利用转基因猪乳腺生物反应器可生产F8。要使乳腺细胞合成F8，构建表达载体时，必须将F8基因cDNA与猪乳腺蛋白基因的 等调控组件重组在一起。F8基因c

32、DNA可通过克隆筛选获得，该cDNA比染色体上的F8基因短，原因是该cDNA没有 。【答案】（1）不能 0（2）XHXh，遗传图解如下：说明： 2产生异常的XhY精子和3产生正常的卵细胞XH结合而成XHXhY在III3形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期，带有基因H的姐妹染色单体移向细胞的同一极，形成XHXH卵细胞，XHXH卵细胞与正常精子结合形成XHXHY受精卵。（3）终止妊娠。（4）洗涤平衡凝胶，并使凝胶装填紧密 大（5）启动子 内含子生2012-7-13标记）【解析】（1）因为2的染色体组成可能是XHXH，也可能是XHXhY，所以不能确定，4的基因型为XHY，所以后代女性中没有患病个体。

33、“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（2）由图可知第一条带是显性，第二条带是隐性，所以3基因型为XHXh，图解如下：在III3形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期，带有基因H的姐妹染色单体移向细胞的同一极，形成XHXH卵细胞，XHXH卵细胞与正常精子结合形成XHXHY受精卵。（3）由题可知，IV3是血友病患者，所以建议III3终止妊娠。（4）采用凝胶色谱法从血液中分离纯化F8时，在凝胶装填色谱柱后，需要用缓冲液处理较长时间，其目的是洗涤平衡凝胶，并使凝胶装填紧密；若F8比某些杂蛋白先收集到，说明F8的相对分子质量较这些杂蛋白较大。“汉水丑生的生物同行”超级群公

34、益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（5）要使乳腺细胞合成F8，构建表达载体时，必须将F8基因cDNA与猪乳腺蛋白基因的启动子和终止子等调控组件重组在一起。F8基因cDNA可通过克隆筛选获得，该cDNA比染色体上的F8基因短，原因是该cDNA没有内含子。（6）为获得更多的转基因母猪，可以采用体细胞克隆技术，将纯合转基因母猪的体细胞核注入去核卵细胞，构成重组胚胎进行繁殖。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【试题点评】本题考查了遗传规律，减数分裂，血红蛋白的提取，基因工程，胚胎工程；遗传规律是近几年的考查热点，但每年考查的都有区别，在解遗传题时，要记住一些常

35、用解题方法，减数分裂的图示是高中生物的基本技能，会画，能理解，能够对遗传规律有个很高的认识，遗传实质都体现在其中。至于选修部分，基因工程、胚胎工程是近几年的考查热点，而血红蛋白的提取，是今年生物考试说明中有，意味着我们要认真阅读考试说明。总体来说，该题是本试卷中的难题，原因是，遗传本身对于学生来说就难，加之选修部分题目较偏僻，从该题可以看出，安徽高考对于选修的考查，与必修部分建立了联系，进行了学科内的综合，希望学生在备考的过程中多加注意。11.高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是A将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中B将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上“汉水丑生的

36、生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）C将转基因植物叶片接种到无菌培养基上“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）D将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上【答案】C【解析】植物组织培养中的外植体必须在严格的无菌环境中进行培养，而且操作的各环节都要注意严格灭菌，必须无菌操作，C对；葡萄酒的制作原理是利用酵母菌无氧发酵时产生酒精，在无氧条件下，大部分微生物都不能生存，随着发酵的进行，酒精度增大，也有杀菌的作用；而制作腐乳时，主要是将毛霉等微生物接种在豆腐上，此过程的加盐、加卤汤等操作均有一定的杀菌作用；选择培养基只能允许目的菌生长，会抑制其他杂菌生长

37、，因此不是严格无菌操作时A、B、D选项的情况下比C选项的受影响要小。【试题点评】本题考查对传统发酵技术的应用、微生物的培养和植物培养技术中无菌操作的掌握。重点要求考生熟悉相应操作过程中的注意事项，这种类型的题目考查的内容相对固定，重点放在细节，难度中等。12.已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。回答下列问题：（1）为了获得丙中蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙中蛋白质的 序列，据此可利用 方法合成目的基因。获得丙中蛋白质的基因还可用 、

38、 方法。（2）在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用 酶和 。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（3）将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗 的危害。（4）若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子 （填“含有”或“不含”）丙种蛋白质基因。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【答案】(15分)（1）基因化学基因文库PCR（每空2分，共8分，其他合理答案也给分）（2）限制 DNA连接（每空1分，

39、共2分）来源:中.教.网z.z.s.tep（3）乙种昆虫 （2分）（4）不含（3分）。【解析】（1）在已知蛋白质的氨基酸序列的情况下，可根据氨基酸和碱基的对应关系，推出合成该蛋白质的基因序列，然后用DNA合成仪通过化学方法来合成目的基因。此外也可以从基因文库中获取目的基因，也可通过PCR方法获取目的基因。（2）构建重组质粒时，需要用限制酶将运载体切开，并用DNA连接酶将目的基因连接到运载体上，从而构建基因表达载体。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（3）愈伤组织中含有丙蛋白，说明丙蛋白的基因得到了表达，在培养成的植株体内也含有丙蛋白，乙昆虫食用丙蛋白后会死亡

40、，则该植株可抵抗乙昆虫的危害。（4）直接用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，仅仅在该叶片内部分细胞中能合成丙蛋白，该植株的种子和其他的营养器官均不含有重组质粒，也就不含有丙中蛋白质的基因。【试题点评】本题以农作物虫害防治为背景考查基因工程的操作流程、基因工程所用的工具、获取目的基因的方法、基因表达载体的构建、目的基因的筛选等内容，难度不大。13.拟南芥是遗传学研究的模式植物，某突变体可用于验证相关的基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）,下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（

41、汉水丑生2012-7-13标记）（1）与拟南芥t基因的mRNA相比，若油菜Tn基因的mRNA中UGA变为，其末端序列成为“”，则Tn比多编码个氨基酸（起始密码子位置相同，、为终止密码子）。汉水丑生的生物同行”超级群整理校对2012-（）图中应为。若不能在含抗生素的培养基上生长，则原因是 .若的种皮颜色为 ，则说明油菜 基因与拟南芥T基因的功能相同。（3）假设该油菜Tn 基因连接到拟南芥染色体并替换其中一个t基因，则中进行减数分裂的细胞在联会时的基因型为 ；同时，的叶片卷曲（叶片正常对叶片卷曲为显性，且与种皮性状独立遗传），用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交，其后代中所占比例最小的个

42、体表现型为 ；取的茎尖培养成16颗植株，其性状通常 （填“不变”或“改变”）。（4）所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥 （填是或者不是）同一个物种。【答案】(16分) “汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（1）2（2）重组质粒（重组DNA分子）；重组质粒未导入；深褐色 p（3）TnTntt；黄色正常；黄色卷曲；不变“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（4）是【解析】本题以一个陌生的基因工程材料考查相关知识，包括基因的功能、遗传规律、基因工程操作步骤以及生物进化的物种鉴定。对题干信息的获取、理解以及对陌生材料的快速适应将是考生的最

43、大障碍。（1）Ta基因的mRNA末端序列为“-AGCGCGACCAGACUCUAA”，它是t基因的mRNA的UGA变成了AGA，所以t基因的mRNA的末端序列应为“-AGCGCGACCUGA”。所以Ta基因比t基因编码的蛋白质中就多AGA和CUC对应的2个氨基酸。（2）目的基因与运载体（质粒）结合形成重组质粒；质粒上有抗生素kan抗性基因，导入了质粒或重组质粒的农杆菌都能在含抗生素kan的培养基上生长；拟南芥T基因控制其种皮深褐色。（3）转基因拟南芥体细胞基因型为Tat,减数分裂细胞联会是已完成DNA复制，所以此时细胞中相应基因组成为TaTatt；假设控制拟南芥叶片形状的基因为B、b，则Tat

44、bbTtBb3/8深褐色正常、3/8深褐色卷曲、1/8黄色正常、1/8黄色卷曲；植物组织培养属于无性繁殖技术，其特点是保持亲本的一切性状。（4）转基因拟南芥与野生型拟南芥之间没有生殖隔离，属于同一物种。14.T-DNA可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T1代）。汉水丑生的生物（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除 ，因为后者产生的 会抑制侧芽的生长。（2） 为筛选出已转化的个体，需将T1代播种在含 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T2代）。汉水丑生的生物同行”超级群整理校对2012-（3） 为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T2代播种在含 的培养基上，获得所需个体。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与 植株进行杂交，再自交 代后统计性状分离比。（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。汉水（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被