微生物期末复习.doc

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1、【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流微生物期末复习.精品文档.本文档分为两类：1.期中考前 2.期中考后第一部分 期中考前【包括第一到第五章】微生物工程：利用微生物生长代谢活动产生的各种生理活性物质来生产商业产品。a淀粉酶的水解产物：糊精，麦芽糖。葡萄糖b淀粉酶的水解产物：麦芽糖P10-11果胶酶：水解杲胶特制，用于果汁，果酒的澄清，苎麻脱胶等。补料：到了生产阶段，由于营养消耗和菌体的进早衰老，自溶，使得产量降低，这时往培养基中加入C,N, 水及其物质，可以延长合成旺盛阶段的时间，可以得到更多产物的过程P89补料作用：丰富了培养基，避免了过早衰老，使产物合成的旺盛期延长。控制了

2、PH值和代谢方向，改善了通气效果，避免了菌体生长可能的抑制；发酵过程中因通气和蒸发，使发酵液体积减小，因此补料还能补足发酵液的体积。补料目的：不使菌体生长繁殖过快，仅仅维持呼吸，即处于半饥饿状态，但是仍能合成产物一类发酵产物的形成和菌体的生长相偶联（下图属于此类型）二类发酵产物的形成和菌体的生长部分偶联三类发酵产物的形成和菌体的生长非偶联种子扩大培养斜面培养基特点：有利于菌体的生长，原料比较精细一级种子（摇瓶）：培养基特点：有利于菌体的生长，所使用的原料已经基本接近于发酵培养基二级种子(种子罐)：培养基的特点：长菌体，更接近于发酵培养基3、一级种子培养基：（葡萄糖、乳糖、蔗糖）、玉米浆 培养条

3、件：27，40小时接种量：200亿孢子/吨 目的：长菌体4、二级种子培养基：同上 培养条件：27、10-14小时 接种量：10%三级种子的特点： 种量更大，生长速度快： 糖酸转化率高且稳无机盐的微量元素使用注意点A. 对于其它渠道有可能带入的过多的某种无机离子和微量元素在发酵过程中必须加以考虑B、使用时注意盐的形式（pH的变化）氮源使用的一些相关问题：q 有机氮源和无机氮源应当混合使用早期：容易利用易同化的氮源无机氮源 中期：菌体的代谢酶系已形成、则利用蛋白质q 有些产物会受氮源的诱导和阻遏 例： 蛋白酶的生产q 有机氮源选取时也要考虑微生物的同化能力q 开发效果好、有针对性的有机氮源仍然是令

4、人感兴趣的课题前体用法：前体使用时普遍采用流加的方法 前体一般都有毒性，浓度过大对菌体的生长不利 苯乙酸，一般基础料中仅仅添加0.07%前体相对价格较高，添加过多，容易引起挥发和氧化，流加也有利于提高前提的转化率促进剂提高产量的机制还不完全清楚，其原因是多方面的。 有些促进剂本身是酶的诱导物；有些促进剂是表面活性剂，可改善细胞的透性，改善细胞与氧的接触从而促进酶的分泌与生产；也有人认为表面活性剂对酶的表面失活有保护作用； 有些促进剂的作用是沉淀或螯合有害的重金属离子。多因子实验：均匀设计、正交实验设计、 响应面分析等。在抗生素发酵生产中往往喜欢所谓的“稀配方”，因为它既降低成本、灭菌容易、且使

5、氧传递容易而有利于目的产物的生物合成。如果营养成分缺乏，则可通过中间补料方法予以弥补。 第二部分 期中考后【从第六章开始】第六章 氧的供需及对发酵的影响对于微生物生长，控制发酵过程中氧饱和度1.第七章PPT(1-2)1.2.分批培养：对于初级代谢产物，在对数生长期初期就开始合成并积累，而次级代谢产物则在对数生长期后期和稳定期大量合成。3.优点：操作简单，周期短，染菌机会少，生产过程和产品质量容易掌握4.缺点：产率低，不适于测定动力学数据5.（可能大题）6.连续培养的优缺点7. 优点 控制稀释速率可以使发酵过程最优化。发酵周期长，得到高的产量。由于D，通过改变稀释速率可以比较容易的研究菌生长的动

6、力学8.9.一般来说微生物在不同体积的反应器中的生长速率是不同的，原因可能是，罐的深度造成氧的溶解度、空气停留时间和分布不同，剪切力不同，灭菌时营养成分破坏程度不同所致。10.直接参数又可分为: 在线检测参数和离线检测参数在线检测参数指不经取样直接从发酵罐上安装的仪表上得到的参数，如温度、pH、搅拌转速；离线检测参数指取出样后测定得到的参数，如残糖、NH2-N、菌体浓度。11.RQ值随微生物菌种的不同，培养基成分的不同，生长阶段的不同而不同。12.总糖指发酵液中残留的各种糖的总量。如发酵中的淀粉、饴糖、单糖等各种糖。 13.还原糖指含有自由醛基的单糖，通常指的是葡萄糖。PPT41.某些产物本身

7、呈酸性或碱性，使发酵液pH变化。如有机酸类产生使pH下降，红霉素、洁霉素、螺旋霉素等抗生素呈碱性，使pH上升。2.pH的控制 （六点） 1、调节好基础料的pH。基础料中若含有玉米浆，pH呈酸性，必须调节pH。若要控制消后pH在6.0，消前pH往往要调到6.56.82、 在基础料中加入维持pH的物质，如CaCO3 ，或具有缓冲能力的试剂，如磷酸缓冲液等、通过补料调节pH 3、 通过补料调节pH 在发酵过程中根据糖氮消耗需要进行补料。在补料与调pH没有矛盾时采用补料调pH3.如（1）调节补糖速率，调节空气流量来调节pH(2)当NH2-N低，pH低时补氨水；当NH2-N低，pH高时补(NH4)2SO

8、44、 当补料与调pH发生矛盾时，加酸碱调pH 5、 不同调pH方法的影响(选择合适的pH调节剂)6、 发酵的不同阶段采取不同的pH值PPT51.什么是液晶状态？液晶状态是指某些有机物在发生固相到液相转变时的过渡状态称为液晶态。2.由固态转变为液晶态的温度称为熔点，以T1表示；3.由液晶态转变为液态的温度称为清亮点，以T2表示。4.T1与T2之间的温度称为液晶温度范围。5.为什么不同微生物对温度的要求不同呢？根据细胞膜脂质成分分析表明，不同最适温度生长的微生物，其膜内磷脂组成有很大区别。嗜热菌只含饱和脂肪酸，而嗜冷菌含有较高的不饱和脂肪酸。6.蛋白质结构研究酶在低温条件下的结构完整性和催化功能

9、：(1)通过自然或诱导突变，将特定残基发生改变的蛋白与其天然结构进行对比；(2)对比同属嗜热、嗜温及嗜冷菌的蛋白结构7.蛋白质的合成许多中温菌不能在0C合成蛋白质，一方面是由于其核糖体对低温的不适应，翻译过程中不能形成有效的起始复合物，另一方面是由于低温下细胞膜的破坏导致氨基酸等内容物的泄露。8.最适温度的选择根据菌种及生长阶段选择根据生长阶段选择在发酵前期由于菌量少，发酵目的是要尽快达到大量的菌体，取稍高的温度，促使菌的呼吸与代谢，使菌生长迅速；在中期菌量已达到合成产物的最适量，发酵需要延长中期，从而提高产量，因此中期温度要稍低一些，可以推迟衰老。因为在稍低温度下氨基酸合成蛋白质和核酸的正常

10、途径关闭得比较严密有利于产物合成。发酵后期，产物合成能力降低，延长发酵周期没有必要，就又提高温度，刺激产物合成到放罐。如何维持适度的菌体浓度和延长分泌期？适当降低培养温度可以延缓菌体的衰老和维持相当数量的有强生产能力的菌丝体存在.根据培养条件选择根据菌生长情况9.10.11.生物热与发酵类型有关微生物进行有氧呼吸产生的热比厌氧发酵产生的热多12.培养过程中生物热的产生具有强烈的时间性。培养初期，产生热量较少。菌体在对数生长期时，菌体繁殖迅速，呼吸作用激烈，菌体也较多，所以产生的热量多，温度上升快，必须注意控制温度。养后期，菌体已基本上停止繁殖，主要靠菌体内的酶系进行代谢作用，产生热量不多，温度

11、变化不大，且逐渐减弱。如果发酵前期温度上升剧烈，有可能染菌，此外培养基营养越丰富，生物热也越大。13.搅拌热在机械搅拌通气发酵罐中，由于机械搅拌带动发酵液作机械运动，造成液体之间，液体与搅拌器等设备之间的摩擦，产生可观的热量。搅拌热与搅拌轴功率有关.14.15.16.17. 计算题以前有考过18. PPT6有些杂菌会使生产菌自溶产生大量泡沫，影响发酵过程的通气搅拌。有的杂菌会使发酵液发臭、发酸，致使pH下降，使不耐酸的产品破坏。污染时间是指用无菌检测方法确准的污染时间，不是杂菌窜入培养液的时间。种子培养期染菌由于接种量较小，生产菌生长一开始不占优势，而且培养液中几乎没有抗生素（产物）或只有很少

12、抗生素（产物）。因而它防御杂菌能力低，容易污染杂菌。如在此阶段染菌，应将培养液全部废弃。发酵前期染菌发酵前期最易染菌，且危害最大。原因 发酵前期菌量不很多，与杂菌没有竞争优势；且还未合成产物（抗生素）或产生很少，抵御杂菌能力弱。染菌措施 可以用降低培养温度，调整补料量，用酸碱调pH值，缩短培养周期等措施予以补救。如果前期染菌，且培养基养料消耗不多，可以重新灭菌，补加一些营养，重新接种再用。（3） 发酵中期染菌 会严重干扰产生菌的代谢。杂菌大量产酸，培养液pH下降；糖、氮消耗快，发酵液发粘，菌丝自溶，产物分泌减少或停止，有时甚至会使已产生的产物分解。有时也会使发酵液发臭，产生大量泡沫。措施 降温

13、培养，减少补料，密切注意代谢变化情况。如果发酵单位到达一定水平可以提前放罐，或者抗生素生产中可以将高单位的发酵液输送一部分到染菌罐，抑制杂菌。 连续灭菌设备流程（书p272）灭菌不彻底的原因培养基灭菌前含有大量杂菌，灭菌时如果蒸汽压力不足，就达不到要求的温度；灭菌时产生大量泡沫或发酵罐中有污垢堆积，就会窝藏大量杂菌，造成灭菌不彻底。为什么蒸汽灭菌时会产生大量泡沫呢？培养基和水的传热系数比空气的传热系数大，如果灭菌时升温太快，培养基急剧膨胀，发酵罐内的空气排出较慢，就会产生大量泡沫，泡沫上升到发酵罐顶，泡沫中的耐热菌就不能与蒸汽直接接触，未被杀死。防止方法： 缓慢开启蒸汽阀门，或加入少量消泡剂.

14、棉花-活性炭过滤器长期使用后，棉花和活性炭的体积被压缩而松动，如果上下端棉花铺得厚薄不均，厚的一边阻力大空气不畅通，薄的一边空气容易通过，久而久之，薄的一边长期受空气顶吹而使棉花活性炭改变位置，造成过滤器失效。过滤器用蒸汽灭菌时，若被蒸汽冷凝水润湿就会降低或丧失过滤效能，灭菌完毕应立即缓慢通入压缩空气，将水分吹干。灭菌方法：可通蒸汽灭菌，也可加入过氧乙酸等化学灭菌剂搅拌半小时，才放下水道。否则由于各罐的管道相通，会造成其它罐的染菌，而且直接放下水道也会造成空气的污染而导致其它罐批染菌。染噬菌体表现为：1、镜检可发现菌体数量明显减少，菌体不规则，严重时完全看不到菌体，且是在短时间内菌体自溶。2、

15、发酵pH值逐渐上升，48小时之内可达8.0以上，不再下降。3、发酵液残糖高，有刺激臭味，粘度大，泡沫多。4、生产量甚少或增长缓慢或停止有无染噬菌体，根本的要做噬菌斑检验二）产生噬菌体的原因主要是由于生产和试验过程中不断不加注意地把许多活菌体排放到环境中去，自然界中的噬菌体就在活菌体中大量生长，造成了自然界中噬菌体增殖的好机会。这些噬菌体随着风沙尘土和空气流动传播，以及人们的走动、车辆的往来也携带着噬菌体到处传播，使噬菌体有可能潜入生产的各个环节，尤其是通过空气系统进入种子室、种子罐、发酵罐。（三）染噬菌体的检测在培养皿上倒入培养生产菌的培养基（加琼脂）作下层。同样的培养基中加入2030培养好的

16、种子液，再加入怀疑染噬菌体的发酵液，摇均匀后，铺上层。培养过夜观察培养皿上是否出现噬菌斑。也可以在上层培养基中不加怀疑染噬菌体的发酵液，而将发酵液直接点种在上层培养基表面，培养过夜，观察有无透明圈出现。第七章PPT7第七节 发酵过程泡沫的形成与控制（一） 泡沫形成的原因1、气液接触2、含助泡剂：在未加助泡剂，但并不纯净的水中产生的泡沫，其寿命在0.5秒之内，只能瞬间存在。摇荡纯溶剂不起泡，如蒸馏水，只有摇荡某种溶液才会起泡。在纯净的气体、纯净的液体之外，必须存在第三种物质，才能产生气泡。对纯净液体来说，这第三种物质是助泡剂。当形成气泡时，液体中出现气液界面，这些助泡剂就会形成定向吸附层。与液体

17、亲和性弱的一端朝着气泡内部，与液体亲和性强的一端伸向液相，这样的定向吸附层起到稳定泡沫的作用。3、起泡速度高于破泡速度：起泡的难易，取决于液体的成分及所经受的条件；破泡的难易取决于气泡和泡破灭后形成的液滴在表面自由能上的差别；同时还取决于泡沫破裂过程进行得多快这一速度因素。高起泡的液体，产生的泡沫不一定稳定。体系的起泡程度是起泡难易和泡沫稳定性两个因素的综合效果。泡沫产生速度小于泡沫破灭速度，则泡沫不断减少，最终呈不起泡状态；泡沫产生速度等于泡沫破灭速度，则泡沫数量将维持在某一平衡状态；泡沫产生速度高于泡沫破灭速度，泡沫量将不断增加选择，填空4、 发酵过程泡沫产生的原因（1） 通气搅拌的强烈程

18、度：通气大、搅拌强烈可使泡沫增多；（2） 培养基配比与原料组成：如培养基适当稀一些，接种量大一些，生长速度快些，前期就容易开搅拌。 （3） 菌种、种子质量和接种量：菌种质量好，生长速度快，可溶性氮源较快被利用，泡沫产生几率也就少。菌种生长慢的可以加大接种量 ；（4） 灭菌质量：培养基灭菌质量不好，糖氮被破坏，抑制微生物生长，使种子菌丝自溶，产生大量泡沫，加消泡剂也无效。常用消泡剂的种类和性能：（1） 天然油脂：一般来说没有明显副作用，如豆油、菜油、鱼油等。油脂如保藏不好，易变质，使酸值增高，对发酵有毒性。此外，有些油是发酵产物的前体，如豆油是红霉素的前体，鱼油是螺旋霉素的前体。（2） 聚醚类消

19、泡剂：GP型的消泡剂亲水性差；GPE型消泡剂亲水性较好，在发泡介质中易铺展。 书本的第三章 微生物的代谢调节和代谢工程P22开始改变微生物代谢调控的方法：1. 通过各种育种方法，选育基因突变株，从根本上改变微生物的代谢。2. 控制微生物的各种培养条件，影响其代谢过程3. 代谢工程（途径工程）：利用基因工程技术改变代谢流，扩展和构建新的代谢途径，或通过关联酶将两个代谢途径连接形成新的代谢流。 第一节 微生物的代谢类型和自我调节微生物的代谢途径：分解代谢，合成代谢分解代谢包括中心途径（TCA、EMP、HMP)和外周途径微生物的合成代谢是利用分解代谢的能量和中间体合成单体物质，及多聚物微生物代谢部位

20、的控制方式：1. 细胞膜对大多数亲水分子屏障作用，又存在输送通道，通道受ATP的影响，并受透性酶的调节2. 调节现有酶量和改变酶分子的活性：原核生物通过现有酶量的调节改变酶分子的活性。3. 限制基质的有形接近，细胞中的基质可存在于位于不同细胞器的代谢库中或结合于不同的部位。微生物自我调节的三个类型都涉及到酶促反应调节。 第二节 酶活性调节酶活性调节包括酶的激活和酶的抑制酶的激活是指在某个酶促反应系统中，某种低相对分子质量的物质加入后，导致原来无活性或活性很低的酶转变为有活性或活性提高，使酶促反应速率提高的的过程酶的抑制是指在某个酶促反应系统中，某种低相对分子质量的物质加入后，导致酶活力降低的过

21、程。激活剂 抑制剂：引起酶活力提高（或获得）或降低（或丧失）的物质。变构调节理论 A. 变构酶随条件变化改变其分子的空间构型，一般分子量巨大，有多个相同的亚基，每个亚基都具有催化和变构调节的位点。B. 另一类变构蛋白（调节蛋白），本身没有催化活性，但可以控制相应的酶的活性，或酶与蛋白质的合成。 第三节 酶合成的调节酶合成的调节主要通过影响酶合成或酶合成的速率控制酶量变化，最终达到控制代谢过程的目的。酶活性调节的效果快，酶量调节的效果慢微生物酶量调节的方式：诱导 阻遏诱导作用：在某种化合物（包括外加的和内源性的积累）作用下，导致某种酶合成或合成速率提高的现象。阻遏作用：在某种化合物作用下，导致某

22、种酶合成停止或合成速率降低的现象组成酶：在微生物细胞内适量的存在，不依赖于酶底物或底物的结构类似物的存在而合成的酶诱导酶（适应性酶）：依赖于某种底物或底物的结构类似物的存在而合成的酶诱导剂：能够诱导某种酶合成的化合物，包括底物，和底物的结构类似物是否是诱导剂主要看能否诱导酶的合成，而不是依据是否为其底物（有个表格，由于没有PPT，没法复制啦)当某种物质加入后，引起细胞代谢速率提高可以是激活，亦可以是诱导，判断：酶的定量分析方法激活只是活性提高，不能使酶的分子数增加阻遏：在某种化合物作用下，导致某种酶合成停止或合成速率下降的现象末端产物阻遏：如果引起阻遏的代谢产物是某种合成代谢途径的终产物分解代

23、谢产物阻遏：迅速利用的能源阻遏异化另一种缓慢利用能源所需酶的合成，代谢产物是某种化合物分解的中间产物DNA分子的四种基因：1. 调节基因R:编码阻遏物生成2. 操纵基因O：阻遏物结合部位并控制相邻结构基因功能3. 启动基因P:RNA聚合酶结合位点4. 结构基因S：可转录为mRNA其中，操纵基因，启动基因和结构基因又构成操纵子当效应物是抑制剂是调节转录停止的情况：正调节和负调节操纵子的负调节其调节基因产物阻止转录的进行。正。类型其R基因产物在诱导物存在下，被转化为转录激活剂。【大肠杆菌的阿拉伯糖分解操纵子】弱化调节弱化子是类似于终止子结构的一段DNA序列，表现为终止子功能，但这种终止作用并不使所

24、有正在翻译中的mRNA全都中途停止，而仅有部分中途停止转录。 第四节 分支生物合成途径的调节同工酶调节：某一分支途径中的第一步反应可由多种酶催化，但这些酶受不同的终产物的反馈调节。 第五节 能荷调节能荷：细胞中ATP、ADP、AMP系统中可为代谢反应供能的高能磷酸键的量度。能荷调节也称腺苷酸调节，系指细胞通过改变ATP、ADP、AMP三者比例来调节其代谢活动。能荷不仅调节形成ATP的分解代谢酶类的活性，也调节利用ATP的生物合成酶类的活性微生物生长期能荷高，静止期能荷下降。 第六节 代谢调控控制不同的发酵条件，实际上是影响微生物自身的代谢调节系统，而改变其代谢方向。许多蛋白质、糖类或其他物质降

25、解有关的酶类都是诱导酶。添加生物合成的前体 如：色氨酸生物合成发酵培养中通常采用活量的速效和迟效碳源、氮源的配比，满足生长需要和避免代谢阻遏 分离纯化路线都包括了两个基本阶段： 1）初级分离阶段在细胞培养结束之后，其任务是分离细胞和培养液、破碎细胞释放产物（如果产物在胞内）、溶解包含体、复原蛋白质、浓缩产物和去除大部分杂质等。 2）纯化精制阶段是在初级分离的基础上，用各种高选择性的手段和方法，将目标产物和干扰杂质尽可能地分开，使产物的纯度达到相应的要求，成为各种级别的产品。生物分离纯化方法（四步）A. 不溶物的去除（沉淀法）：过滤、离心、凝聚与絮凝、细胞破碎B. 产物分离 离子交换吸附 萃取

26、膜分离C. 产品的纯化：色谱、电泳、沉淀D. 产品的精制：干燥生化产品的应用面广，许多产品用作医药、食品、试剂等，对含量和纯度要求高工业应用的生物分离技术 回收技术: 絮凝，离心，过滤，微滤 细胞破碎技术: 球磨，高压匀浆，化学破碎 初步纯化技术: 盐析法，有机溶剂沉淀，化学沉淀，大孔吸附树剂，膜分离技术 高度纯化技术: 各类层析，亲和，离子交换 精制与成品加工： 喷雾干燥，气流干燥，冷冻干燥，结晶萃取：利用溶质在互不相溶的两相之间分配系数的不同而使溶质的得到纯化或浓缩的方法n 乳化：液体分散在另一不相溶的液体中的分散体系n 常用的去乳化的方法：过滤和离心、加热、稀释法、加电解质、吸附法、顶替

27、法、转型法常用去乳剂：阳离子表面活性剂（溴代十五烷基吡啶） 阴离子表面活性剂（十二烷基硫酸钠）发酵产物的分类1、菌体2、酶3、代谢产物n 下游加工过程的特点1、成分复杂：细胞、代谢产物、残余培养基2、产品浓度低：传统发酵一般1103、收率低：50左右4、失活问题5、不稳定性6、生物安全问题一、发酵醪的一般特征n 1、含水量高，一般可达9099%n 2、产品浓度低n 3、悬浮物颗粒小，密度与液体相差不大n 4、固体粒子可压缩性大n 5、液体黏度大，大多为非牛顿型流体n 6、产物性质不稳定2、发酵醪预处理的要求:n （1）菌体的分离n （2）固体悬浮物的去除n （3）蛋白质的去除n （4）重金属离

28、子的去除n （5）色素、热原质、毒性物质等有机杂质的去除n （6）改变发酵醪的性质n （7）调节适宜pH值和温度超声波破碎1、 工作原理：在超声波的作用下，液体发生空化作用，空穴的形成，增大和闭合产生极大的冲击波和剪切力，使细胞破碎2、 特点：1）适应于实验室规模的应用（操作简单、液量损失少，可加冰或加冷水，大规模操作时，声能传递和散热困难）2）易失活物质不宜用（超声波可促使产生一些化学自由基因使物失活）3）G-杆菌破碎效果好，酵母菌效果差一、凝胶层析的原理 将具有分子大小网状结构（孔隙）的凝胶粒子浸渍于某种溶液中时，溶液中的溶质分子凡是比网络孔隙小的都能自由进入凝胶粒子内，大的分子由于不能潜

29、入网格便残留在溶液中，所以将分子大小不同的溶液（如蛋白质和硫酸铵）加入到分离柱中，只有小分子物质（硫酸铵）完全能进入凝胶粒子内，而大分子（蛋白质）则被排阻于粒子外，彼此互相筛分，加入洗液后，溶液在分离柱内向下移动，先流出的洗液中，全部含有大分子物质（蛋白质），后流出的洗液中含有小分子物质（硫酸铵），从而达到分离和提纯的目的。凝胶层析法在发酵中的应用n 1、脱盐n 2、凝胶层析法去除热源物质n 3、凝胶浓缩高分子溶液n 4、测定高分子物质的相对分子质量n 5、分析吸附：一种物质从一相移动到另外一相的现象。吸附法的特点：n （1）处理能力较小n （2）对溶质的作用较小n （3）可直接从发酵液中分离所需的产物n （4）溶质和吸附剂之间的相互作用及吸附平衡关系通常为非线形关系优点：操作简单、原料易得，便于土法生产缺点：吸附性能不稳定、选择性不高、吸附剂的容量有限、收率不稳定、不能连续操作，强度大n 吸附剂必须具备的条件：（1）颗粒密度小，表面积大（2）颗粒大小均匀3）吸附能力大，但要容易洗脱下来多次提炼法混合器溶剂发酵液分离器提取液混合器溶剂分离器提取液混合器分离器提取液残余液溶剂残余液残余液n 多级对流萃取（已考过，可能换另外的题型）第一混合器分离器第二混合器分离器第三混合器分离器最后提取液提取液残余液残余液最后残余液提取液溶剂发酵液一级二级三级