李鹏鹏正文4.doc

《李鹏鹏正文4.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《李鹏鹏正文4.doc（20页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流李鹏鹏正文4.精品文档.第1章 绪论1.1 课题背景随着人民生活水平的提高，人们对健康日益关注。近年来很多城市民间百姓流行饮用用西藏灵菇发酵的灵菇酸奶。在这一前提下，西藏灵菇及其发酵的牛奶的保健作用及其机理受到了人们的普遍关注1。 将“灵菇”做成切片后在显微镜下观察，认定“西藏灵菇”就是开菲尔的一个品系。 对于在我国民间传饮的这种“西藏灵菇”，至此有3点需要强调。（一）它不是蘑菇，它属于开菲尔中的一个品系，从菌相构成到粒的特性都跟开菲尔极其相似。（二）“西藏灵菇”的抗污染能力没有真正的开菲尔那么强。（三）“西藏灵菇”中含有的菌相与传统的开菲尔

2、粒中的菌相是否一致还在研究中。不过，作为一种保健食品，它有一定的调整肠内菌群，改善人体胃肠内环境和增强免疫功能的作用，但仍需要对“灵菇”做进一步的食品安全性研究，以便尽早将它进行产业化生产。相关研究：由南京农大董明盛教授主持的国家“863”项目“优良微生物发酵剂的研制与开发”（2002AA248041）研究成果“优良食品微生物筛选及功能发酵剂的研制”。课题组通过将PCR-DGGE和生物信息学技术用于分析传统发酵食品的微生物多样性分析及发酵过程中微生物种群动力学，从西藏灵菇、四川泡菜和侗族酸肉等传统发酵食品中筛选了10株具有特殊性能的菌株；以筛选的优良菌株为基础，研制了4种新型组合发酵剂；构建了

3、一种果粒（苹果粒）为固定化载体的培养乳酸菌的方法；将生物胺的产生作为菌株筛选的安全指标，建立了一种改进检测产生物胺乳酸菌的BAP平板法和PCR基因检测方法。同时以ACA包囊作为生物微反应器构建了崭新的微生物包囊化高密度培养技术体系；研制的包囊化乳酸菌发酵剂产品在4条件下贮存两月，活菌体密度为1010cfu/g（湿基）以上（中试规模）；包囊化发酵剂应用于酸奶生产的连续接种，可连续使用30d以上；液芯包囊发酵剂发酵牛奶成本比直投式发酵剂降低50%；包囊化藏灵菇发酵剂发酵的产品完整地保持了传统藏灵菇发酵的风味，为传统发酵食品的工业化生产提供了一种有效的技术，将为我国发酵食品行业发展注入强劲原动力。

4、1.2 西藏灵菇简介“西藏灵菇”的来源2：“西藏灵菇”又名“西藏雪莲”，是源自西藏雪原的特有珍稀菌种，是西藏土生土长的有生命的菌类。十九世纪，因其神秘奇异的功效而被欧洲一位医学院教授发现，样子有点像是缩小了的白色小猴头，大约有蒸熟的米饭粒那么大，拾起一颗，感觉软软的，有点发粘，韧性极好。早在2002年，北京地区曾经就流行过“西藏雪莲”，后经权威部门检测发现所谓神奇的“西藏雪莲”只是一种菌类，它含6070的乳酸菌，其它则是革兰阳性菌、双脂杆菌、酵母菌、芽孢等杂菌，还有一些从没见过的菌类杂菌。它进入人体后转化成蛋白质，水解后又成了氨基酸，而氨基酸有助人体吸收。藏灵菇是天然野生制酸奶的唯一菌种，由藏

5、灵菇制成的酸奶，只有藏灵菇和鲜牛奶，无需加热，含有100%的乳酸活菌，绝无任何添加成份：如增稠剂，添加剂，甜味素，防腐剂，调味素等。常食之可增强身体抵抗力。20世纪初，科学家们发现了一种颗粒状物质，这种物质传说来自西藏，专家猜测来自印、巴，当地人自古以来就在家中泡牛奶喝。科学家在这种物质中发现了许多微生物，比如专门能够利用乳糖的酵母菌，还有乳酸菌（主要包括乳酸球菌、乳酸链球菌、乳酸杆菌）、醋酸菌，此外也有报道称发现过双歧杆菌。这些菌经过长期的相互适应和协同作用形成了复杂的菌相，以这种颗粒为发酵剂在牛乳中发酵后而得到的发酵乳制品被称为酸牛奶酒，在当地叫做开菲尔（也有译作克菲尔）。此种颗粒状物质被

6、称为开菲尔粒。由于开菲尔在发酵过程中产生酒精、乳酸、醋酸，使制品具有独特的发酵风味和清爽的沙口感，深受许多国家人们的喜爱3。西藏灵菇的功效（还在研究中）：1、增强人体机能抵抗力； 2、治疗心脏病、改善动脉硬化、并对胆固醇水平有积极影响作用； 3、治疗胰、肝、脾病； 4、对胆、胆囊及胆结石有极好的疗效；5、缓解胃溃疡及十二指肠溃疡；6、灵菇产生的抗生素具有消炎作用；7、使血压正常；8、治疗胃病，对小便不畅有一定疗效；9、防止病症发展； 10、延缓衰老；11、消除疲劳，并能提供人体每日所需的维生素。 灵菇酸奶的作用4： （一）灵菇酸奶与牛奶不同之处灵菇酸奶比牛奶更容易消化吸收。灵菇酸奶通过发酵，牛

7、奶中的乳糖被分解，很多喝了牛奶肚子咕噜叫的人，如换喝灵菇酸奶就不会发生这种现象，也不会泻肚。 （二）灵菇酸奶与一般酸奶的不同之处灵菇酸奶分解出来的乳酸、碳酸气有独特味道能提高食欲，还能促进唾液分泌和肠蠕动，对体内促进作用比酸奶高。灵菇酸奶对平衡肠道细菌有独特的功效。肠内约有100多种100多亿个细菌生存，其中包括有益于蠕动的有益细菌，也有不利于健康的有害细菌。它们的平衡比例对人体健康至关重大，灵菇酸奶能有效抑制有害细菌，促进有益细菌。特别对高龄者来讲，肠胃蠕动随着有害细菌增多而衰弱，喝灵菇酸奶既可抑制有害细菌，又可促进肠胃蠕动。1.3 D-半乳糖促衰老作用半乳糖(CH2OH(CHOH)4CHO

8、)是单糖的一种，可在奶类产品或甜菜中找到。半乳糖是一种由六个碳和一个醛组成的单糖，归类为醛糖和己糖。半乳糖是哺乳动物的乳汁中乳糖的组成成分，从蜗牛、蛙卵和牛肺中已发现由D-半乳糖组成的多糖。它常以D-半乳糖苷的形式存在于大脑和神经组织中，也是某些糖蛋白的重要成分。半乳糖在植物界常以多糖形式存在于多种植物胶中，例如红藻中的K-卡拉胶就是D-半乳糖和3，6-内醚-D-半乳糖组成的多糖。游离的半乳糖存在于常青藤的浆果中。半乳糖为白色晶体。D-半乳糖和L-半乳糖均天然存在。D-半乳糖一般作为乳糖的结构部分存在于牛奶中，牛奶中的乳糖被人体分解为葡萄糖和半乳糖被吸收利用。因它含有热量，它也会被用作营养增甜

9、剂。半乳糖是乳糖分子的一部分，另一半是葡萄糖。在-乳糖酶的催化作用下，半乳糖可从乳糖的水解作用中得到。双歧杆菌发酵乳糖产生半乳糖，是构成脑神经系统中脑苷脂的成分，与婴儿出生后脑的迅速生长有密切关系。D半乳糖产品说明书别名：D(+)-Glactose,Galactose; brain sugar; d-galactose; D-Galactopyranose分子式：C6H12O6分子量：180.16外观：白色或几乎白色粉末含量(HPLC)：98% min检测项目：外观, 含量, 熔点, 干燥失重, 旋光度贮藏：阴凉干燥处51.4 CAT简介CAT酶测试系统6 Promega公司的CAT酶测试系统

10、有两种方法在转染的细胞中测试氯霉素乙酰转移酶的活力，可用液闪计数（LSC）或薄层层析（TLC）方法。LSC和TLC可平行用于从单个细胞抽提物中完成测试。细胞抽提物与含14C-或3H标记的氯霉素及n-丁酰辅酶A一同保温。氯霉素乙酰转移酶（CAT）将辅酶的n-丁酰基转移到氯霉素上。同位素标记的丁酰基氯霉素可用LS或TLC方法测。CAT 酶测试方法的工作原理 氯霉素乙酰转移酶（CAT），由细菌的药物抗性基因编码，在1个或2个羟基位点上乙酰化药物使氯霉素失活。真核细胞无这一基因，故真核细胞内的无CAT背景活力或很低。这一特点及CAT活力测试的方便及灵敏，使CAT报告基因广泛用于研究哺乳细胞基因表达。使

11、用CAT酶测试系统的优点：CAT酶测试能在2-3小时内完成，酶活力的线性范围达3个数量级，能检测2pg量的CAT。薄层层析测试方法较液闪计数方法的灵敏度低而耗时长，但可用于目测实验结果。1.5 MDA简介简称Malondialdehyde (MDA），分子式OHC-CH2-CHO ，分子量72.0634自由基作用于脂质发生过氧化反应，氧化终产物为丙二醛，会引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合，且具有细胞毒性7。丙二醛是膜脂过氧化最重要的产物之一。植物在逆境下遭受伤害与活性氧积累诱发的膜质过氧化作用密切相关。植物在逆境下遭受伤害（或衰老）与活性氧积累诱发的膜脂过氧化作用密切相关，膜脂过氧化的产

12、物有二烯轭合物、脂类过氧化物、丙二醛、乙烷等。其中丙二醛（MDA：Malondialdehyde）是膜脂过氧化最重要的产物之一，因此可通过测定MDA了解膜脂过氧化的程度，以间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性。丙二醛在高温及酸性环境下可与2-硫代巴比妥酸（TBA）反应产生红棕色的产物3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮（三甲川），该物质在532 nm处有一吸收高峰，并且在660nm处有较小光吸收。根据其532 nm的消光值可计算出溶液中丙二醛的含量。醛、可溶性糖对此反应有干扰，在450 nm处有一吸收峰，可用双组分分光光度法加以排除。 MDA试剂盒产品名称：丙二醛(MDA)ELISA Kit

13、英文名称：Human malondialchehyche,MDA ELISA Kit 产品分类：人肝纤维化早期诊断类ELISA试剂盒Human hepatic fibrosis 预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中丙二醛(MDA)含量。试验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中MDA水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入MDA抗原、生物素化的抗人MDA抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的MDA呈正相关。

14、用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。 第2章 材料和方法2.1 试验材料2.1.1 试验动物小白鼠30只，其中15只雌鼠，15只雄鼠。取于佳木斯大学动物实验中心2.1.2 试验给养鼠粮，水2.1.3 试验器材2.5ml注射器5只、5号钝口针头3个、镊子多个、记号笔1只、笼子4个,消毒用酒精棉、分光光度计、天平等8。2.2主要试验仪器及试剂2.2.1 主要试验仪器试管，解剖器，研钵，移液枪，分光光度计，比色皿，试管架，加热器，恒温箱，离心机，电子天平2.2.2 试验试剂灵菇酸奶，D-gal，生理盐水，CAT、MDA测定试剂盒9（南京建成生物工程研究所提供）2.3试验方法

15、2.3.1 动物分组分组方法：将小白鼠随机分成青年对照组，衰老组和模型组，要求每组5雌5雄。每组分笼饲养，饲养管理与常规育鼠一致，自由饮水和采食。连续喂养30天。2.3.2通过颈背注射方式进行试验青年组每日颈背注射生理盐水，灌服温开水；衰老组每日颈背按100mg/kg剂量注射D-gal，灌服温开水；模型组除按衰老组注射D-gal外，同时灌服与上面两组灌服的温开水等量的灵菇酸奶。小白鼠皮下注射时，通常选用颈背部皮肤。操作时，先用酒精棉球消毒需注射部位的皮肤，再将皮肤提起，使注射针头与皮肤成一定角度刺入皮下。进针时，先沿体轴从头部刺入皮下，再沿体轴方向将针头推进510mm左右。把针头轻轻向左右摆动

16、，容易摆动则表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可缓慢地将药物注入皮下。拔针时左手拇指和食指捏住进针部位片刻，以防止药物外漏。2.3.3观察小白鼠的精神状态、行为及食欲变化临床观察：培养期间每日进行临床观察，记录小白鼠生存状态，如食量，毛色，活跃程度。培养期结束后全部脱颈处死，并观察记录心、肺、肾等器官和组织的状态。在上述剖杀的同时，取小白鼠的心、肝研磨成组织匀浆10。2.3.4CAT活力和MDA含量的测定采用钼酸铵法测定CAT活性，采用TBA反应比色法测定MDA含量。试剂盒的组成与配制：1、试剂一：贮备液：10ml1瓶（天冷时或放冰箱会有部分结晶析出，需热水浴溶解后再使用）；试剂一应用液的

17、配制：用时每瓶加蒸馏水稀释至100ml，4保存。2、试剂二：液体10ml1瓶，410保存。3、试剂三：液体10ml1瓶，410保存。4、试剂四：液体350l2支，4保存，不可冷冻；4号稀释液10ml1瓶，4保存。用时二者按114稀释，可以一次稀释，也可以分次稀释。配好的试剂四4保存，不可冷冻。配好后可保存23个月。注：所用吸嘴最好为专用且消毒处理过的。5、试剂五：粉剂1支，用时加7080热双蒸水75ml溶解后备用，若加热过程中水分蒸发减少，此时必须用蒸馏水补充至75ml配好后的试剂避光4冷藏保存。6、试剂六：粉剂1支，用时加蒸馏水75ml溶解备用，配好后的试剂避光4冷藏保存。7、试剂七：20m

18、l1支；4冷藏保存11。2.3.5记录试验数据记录、计算、分析。计算CAT活力和MDA含量，用SPSS软件进行数据统计分析，得出青年对照组，衰老模型组和灵菇酸奶组三个试验组各种组织CAT活力和MDA含量差异情况12。2.3.6统计学方法实验数据以均数标准差（x(-)s）表示，组间均数比较采用t检验。实验数据以均数标准差表示，组间均数比较采用t检验，应用SPSS11.5统计软件进行分析，试验结果列表中纵列进行比较，标大写角码字母完全不相同者表示两组数值比较差异极显著(P0.01)，标小写角码字母完全不相同者表示两组数值比较差异显著(P0.05)，标有小写角码字母相同者表示两组数值比较差异不显著(

19、P0.05)13。第3章 结果3.1小白鼠的精神状态、行为及食欲变化试验期间小白鼠生存状态，如食量、毛色、活跃程度等观察记录情况14见表3-1。表3-1小白鼠生存状态组别食量毛色活跃程度青年对照组大光亮活跃衰老模型组小暗淡不活跃灵菇酸奶组较大较光亮较活跃由表3-1可知，青年对照组活力强，衰老模型组活力差和灵菇酸奶组比衰老模型组活力强，但比青年对照组活力差。3.2小白鼠心肌组织CAT活力和MDA含量的测定结果根据分光光度值计算得出衰老模型组、青年对照组、灵菇酸奶组小鼠心肌组织中CAT活力、MDA含量15见表3-2。表3-2 小鼠心肌组织CAT，MDA测定数值组别CAT(U/mgprot)MDA(

20、nmol/mgprot)青年对照组15.345.17 Bc4.492.15Bd衰老模型组2.213.73 A9.002.10Ac灵菇酸奶组12.405.04 Bc5.682.80 B d由表3-2可知，小鼠心肌组织CAT，衰老模型组与青年对照组和灵菇酸奶组相比，差异极显著(P0.01)，青年对照组和灵菇酸奶组相比，差异不显著(P0.05)；小鼠心肌组织MDA含量，衰老模型组与青年对照组比较，差异极显著(P0.01)，衰老模型组与灵菇酸奶组比较，差异显著(P0.05)，青年对照组和灵菇酸奶组比较，差异不显著(P0.05)。由此得出，灵菇酸奶可显著增强小鼠心肌组织CAT活力，并降低MDA含量。3.

21、3小白鼠肝脏组织CAT活力和MDA含量的测定结果根据分光光度值计算得出衰老模型组、青年对照组、灵菇酸奶组小鼠肝脏组织中CAT活力、MDA含量16见表3-3表3-3小鼠肝脏组织中CAT、MDA的数值组别CAT(U/mgprot)MDA(nmol/mgprot)青年对照组46.0610.45 Bc2.710.47Bd衰老模型组21.642.21 A5.551.18Ac灵菇酸奶组39.088.86 Bc3.620.59 B d由表3-3可知，小鼠肝组织CAT，衰老模型组与青年对照组和灵菇酸奶组比较，差异极显著(P0.01)，青年对照组和灵菇酸奶组比较，差异不显著(P0.05)；小鼠肝组织MDA含量，

22、衰老模型组与青年对照组和灵菇酸奶组比较，差异极显著(P0.01)，青年对照组和灵菇酸奶组比较，差异显著(P0.05)。由此得出，灵菇酸奶可显著增强小鼠肝组织CAT活力，并降低MDA含量。第4章 讨论衰老的自由基学说是1956年Harman所提出的，该学说认为：机体内时刻产生着自由基，但同时又具有有效的自由基清除系统(如SOD)，二者处于平衡状态，从而使体内自由基维持在正常水平。但随着年龄的增长，这种平衡逐渐被破坏，造成自由基过剩。过多的自由基可与细胞膜中的类脂质发生过氧化，从而导致细胞膜的破坏，致使细胞死亡；同时脂质过氧化的终产物(如MDA)可与DNA、RNA、蛋白质和磷脂等物质结合，损伤细胞

23、膜，引起细胞功能紊乱，使整个机体出现衰老特征17。研究表明，衰老的自由基学说在衰老机制研究中愈来愈显示出重要性1。动物机体有一套有效的抗氧化防御系统，能够及时地清除自由基，保护组织细胞免受其破坏。它主要包括抗氧化酶类以及非酶的抗氧化物质。人体的抗氧化酶主要包括SOD、CAT、GSH - Px等，而抗氧化物质包括谷胱甘肽(GSH)、硫醇类等2。SOD、CAT、GSH-Px活性的变化可反映机体抗氧化能力的变化，MDA含量可间接反映了细胞的损伤程度18。本试验结果表明：西藏灵菇酸奶能明显增强D-gal致衰老小鼠的心、肝组织中CAT活性，提高心、肝组织对自由基的清除能力，阻断自由基反应；明显降低MDA

24、含量，修复细胞的损伤，提高细胞抗衰老能力19。结论通过将灵菇酸奶灌服给人工致衰小鼠，采用对比实验的研究方法，计算灵菇酸奶抗计算氯霉素乙酰转移酶（CAT）活力和丙二醛(MDA)含量，用SPSS软件进行数据统计分析，得出青年对照组，衰老模型组和灵菇酸奶组三个试验组各种组织CAT活力和MDA含量差异情况。证明了灵菇酸奶可可显著增强小鼠组织CAT活力，并降低MDA含量,即菇酸奶的抗氧化作用。研究还表明，西藏灵菇菌中含有多种乳酸菌和酵母菌，乳酸菌是以乳酸杆菌、嗜酸乳杆菌、短乳杆菌和乳酸链球菌等乳酸菌为主体细菌构成的块状共生菌系。这些乳酸菌多为益生菌，张江巍等研究检测到乳酸菌大都具有抗氧化活性。因此，西藏

25、灵菇酸奶清除自由基、抗衰老的可能的机制为：抑制致病菌的生长，阻止它们的入侵和定植，维持动物体肠道菌群平衡；清除肠道内腐败物质与毒素；促进铁、钙及其他营养物质的吸收，从而增强机体免疫能力。故本课题的研究为开发藏灵菇提供了依据，对奶制品业的发展具有一定的意义，对医药业的发展也具有一定的意义20。致谢感谢岳丽红老师和程广东老师孜孜不倦的教诲，感谢王国庆同学的大力帮助。参考文献1 Oishi M, Mochizuki Y,Takasu T,et al.Effectiveness of traditional Chinese medicine in Alzheimer disease.Alzheimer

26、 Dis Assoc Disord,1998,12(3):247-2502 彭昕,聂理,徐朗莱等.中药对自由基清除作用的研究进展J.2002,16(1):48-50 3 Arora Arri,Muralecdharan G,Structure-activity relationship for antioxidant activities of a series of a series of flavonoids in liposomal systemJ. Free radical Biology & Medicine, 1998,24(9):13354 YokozawaT, DangE, L

27、iuZ, Wetal.Antioxi dantac tivity of flavone sandfiavo nolsinvitro. Phyto therapy Research,1997,11(6):446-4495 黄进,杨国宇,李宏基等.抗氧化剂作用机制研究进展J.自然杂志, 200426(2):74-766 先宏,吴可,孙存普等.中药抗氧化活性的主要成分及其自由基清除作用J.国外医学中医中药分册, 2003,25(3):150-1537 徐仁,孙圣刚,刘煜敏等.实验性帕金森病纹状体、大脑皮质和海马组织Mca、CaM、MDA含量的变化J.中华神经科杂志, 2000,33(1)8 郭景仙.

28、中药多糖类成分抗衰老作用的现代研究与应用J.中国自然医学杂志,2000,2(3):191-1929 FekiM, Souissi M, MokhtarE, etal.Vitamin Eand coronary heart diseases in tunisiansJ. Clin Chem,2000,46:1401-140510 刘宇峰,王金英,曲晓军等.西藏灵菇菌的菌相菌学的研究J.中国乳工业.2005,33( 9) 35-3911 刘宇峰,夏海华,孙建华等.西藏灵菇乳对肿瘤的抑制作用J.畜牧兽医科技信息,2005,6:56-5712 陶应龙,陈青,张月明等.食品级藏灵菇培养液对高脂血症患者血

29、脂影响J.中国临床营养杂志, 2005,10:273-27513 张立娜.灵菇菌乳I号、II号对高血压模型大鼠的降压作用的实验研究J.东北林业大学硕士论文, 2004:13-2514 王春敏,李丽秋,杨春佳等.西藏灵菇酸奶对寻常性座疮的治疗作用观察J.中国微生态学杂志, 2005,17(2):151-15215 张慧敏,李远志.开菲尔的营养成分、保健功能及其产品研究进展J.现代食品科技,2006,21(4):118-13216 孙培灵.西藏灵菇优势菌的分离纯化及其发酵特性的研究.东北农业大学硕士学位论文, 2002:1-617 Robinson & Tamime. A new fermente

30、d milk using capsular polysaccharide-producing lactobacillus Kefiranofaciens isolated from Kefir grains Journal of Dairy Research1991, 58:4975-0218 Guzel Seydim,Z.B.; Seydim,A.C.; Green,A.K. Determination of organic acids and volatile flavor substances in kefir during fermentation. Journal of Food C

31、omposition and Analysis , 2000,13(1): 35-4319 Yau-Huei Wei;Ching-You Lu;Chia-Yu Wei. Oxidative Stress in Human Aging and Mitochondrial Disease-Consequences of Defective Mitochondrial Respiration and Im-paired Antioxidant Enzyme System The Chinese Journal of Physiology, 2001,44 (1) 1-1220 S. Parvez,

32、K.A. Malik, S. Ah Kang. Journal of Applied Microbiology , 2006, 100 (6) 1171-118521 GU Youfang , MAO Xinzhi , SHEN Yong2lin. Effect of sd rats infected with fasciola hepatica onfree radicals metabolism in serum and tissues. J ournal of Pathogen B iolog y, 2006, 1 (2)126-131附录1摘要：通过大鼠感染肝片吸虫复制感染模型 ，研究

33、肝片吸虫感染后血清和组织器官抗氧化功能的动态变化。方法将 60只SD大鼠随机分成感染组(n=30)和对照组 (n=30) ,感染组大鼠 1次口服 25个囊蚴，对照组不感染，于感染前(0周)和感染后(l、3、5、7、9周)宰杀。采集血清、肝、肺、心、肾和脾组织，检测感染GSH2Px、SOD、CAT活性和 MDA含量的变化结果：SD大鼠感染肝片吸虫后，血清中GSH2Px先升高后下降 ；CAT活性在感染后下降；MDA含量在前 5周变化不明显。肝组织的GSH2Px活性变化不明显；SOD活性缓慢下降后又缓慢升高；CAT活性降低；MDA含量开始有所升高；稍后有轻微下降；肾脏的GSH2Px活性先缓慢升高，以

34、后则低于对照组，SOD活性呈现平稳下降的趋势，CAT活性开始升高。随后降至低于对照组，MDA含量开始缓慢下降，以后则上升。心组织的GSH2Px活性开始升高，以后迅速下降；SOD活性逐渐升高，然后又缓慢下降，CAT活性逐渐升高，然后又有所下降，MDA含量感染后有所下降。肺组织中的GSH2Px活性逐渐升高以后，逐渐下降；SOD活性5周后开始急剧下降；CAT活性的变化在整个实验期间，除第7周外，其他各周和对照组相比差异均不显著；MDA含量在感染后开始升高，以后又缓慢下降。脾组织中GSH2Px和SOD活性下降；试验组CAT活性先下降，然后升高，MDA含量在前3周变化不明显，基本上处于同一水平，随后缓慢

35、下降，且在第7、9周与对照组差异极显著。结论：自由基参与了肝片吸虫病的发病过程，肝片吸虫感染后机体的器官组织发生了脂质过氧化损伤。关键词：SD大鼠；肝片吸虫；自由基；代谢结果：一.变化的自由基代谢的血清中，trol组水平下降，并达到了在mini2母本在5周和有显著性差异be2 吐温两个组（P0.01）的水平。在周5试验组水平迅速上升，并且显著高于直至年底的对照组的研究。有显著性差异水平的gsh2px活动之间的两个周，6周和9周（P0.01）。超氧化物歧化酶活性血清中两周之间的团体及之前和之后感染的试验组无明显差异。在所有感染期间，超氧化物歧化酶活性的血清水平，不仅在第4周后，试验组明显高于对照

36、组的感染和显著性差异。活动的猫的血清水平，也有一些变化。在试验组的第2周那个水平显著低于对照组（P0.05），从周2开始上升缓慢。试验组血清水平在第2周到第6周仍然高于对照组，但并没有sig2nificant差异。在第七周，试验组的血清水平低于对照组。从本周一到五周后，MDA的血清水平改变，MDA含量的试验组仍低于对照组和有sig2 nificant差异的内容，MDA的血清在第2周（P0.01）。从本周五到去年底，MDA的试验组和对照组基本上是在同一水平（见表1）。病原生物学杂志，2006年4月，第16卷，第2篇：它可以杀死微生物。不过，太多的自由基能造成正常组织周围的伤害10-14。本研究表

37、明gsh2px活动的显着变化，大鼠感染肝片吸虫血清后，gsh2px活动在ser2这个水平缓慢上升，然后下降。在对照组，血清中的超氧化物歧化酶活性变化不大，并保持在同一水平。血清中的CAT活性试验组开始lower2荷兰后，接着缓慢感染。MDA代表脂质过氧化的水平，chan2 olism自由基在人体内表明，自由基是volved平方英寸在病理过程fascioliasis。这可能认为，肝片吸虫，在其成长和发展过程中，分泌大量毒素，从而增加了生产自由基和能清除自由基的各种抗氧化酶。在同一时间内，发生故障，细胞syn2 thesize减少，例如酶和抗氧化酶活性的be2 降到较低。因此，自由基是累积在体内。

38、诱发脂质过氧化的连锁反应，使得apozymaseenzyme2derived产生自由基或enzymepolymer15,16。此外，mdaproducedduringlip2 GES的变化，前5个星期也不明显，从周五，内容MDA含量的试验组低于be2前列感染。不过，两者之间的差异并不显著。这些变化在大鼠的抗氧化血清中表明，感染他帕齐卡有一定的平方英寸注量的抗氧化作用的机构。在metab2编号过氧化可导致两者的联系，两者之间的mole2 cules使酶系统的紊乱。损失活性的酶或减少活动的en2 zymes由于变化的正常结构和Function的酶恶化脂质过氧化作用的组织和细胞17，18。表6的变化显示，自由基的脾脏在大鼠感染fasciol 1他帕齐卡gsh2px （U/mg蛋白），超氧化物歧化酶（U/mg蛋白），猫眼石（U/mg蛋白），丙二醛（ nmol/毫升）21。附录2