毕业论文A0稿.doc
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1、【精品文档】如有侵权,请联系网站删除,仅供学习与交流毕业论文A0稿.精品文档.长沙医学院毕业设计(论文) 课 题 名 称 蔓荆子总黄酮中主要化学成分的研究 学 生 姓 名 陈 小 娟 学 号 12009050601079 系、年级专业 药学系、09级本科药学班 指 导 教 师 李 艳 辉 曹丽芝 职 称 讲 师 主任药师 2013 年05 月01 日诚信声明本文郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在指导老师的指导下,独立进行研究所取得的成果,成果不存在知识产权争议。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以
2、明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。作者签名: 日期: 年 月 日目录中文摘要1Abstract2第一章 引言41.1 蔓荆子化学成分研究41.1.1黄酮类化合物41.1.2 酚类41.1.3 苯丙素类41.1.4 萜类、甾类化合物51.1.5 挥发油、氨基酸等其它成分51.2 黄酮类化合物的研究概况51.2.1 黄酮类化合物的分布51.2.2 黄酮类化合物的结构和分类61.3 黄酮类化合物的生理活性61.3.1 抗氧化及抗自由基作用61.3.2 对心血管系统的作用61.3.3 抗癌、防癌作用71.3.4 抗炎、抗菌、抗病毒作用71.3.5 泻下作用81.3.6 降血糖作用
3、81.4 黄酮类化合物的开发与利用81.4.1 市场前景81.4.2 黄酮资源开发91.5 结语9第二章 仪器与试剂102.1试剂与材料102.2仪器10第三章提取分离113.1预实验113.2 TLC试验探索洗脱体系123.3 硅胶柱层析分离123.4聚酰胺柱层析分离123.5 硅胶柱层析分离流分1-413第四章 结果与讨论16参考文献17致 谢18蔓荆子总黄酮中主要化学成分的研究陈小娟长沙医学院2009级药学专业指导老师:曹丽芝 李艳辉中 文 摘 要目的:蔓荆子为马鞭草科牡荆属单叶蔓荆(Vitex trifolia L. var. simplicifolia Cham.或Vitex rot
4、undifolia L.)或三叶蔓荆(Vitex trifolia L.)的干燥成熟果实,主要产于山东、广西、云南、江西、浙江、福建、及广东等地。为常用中药,具有疏散风热、清利头目、止痛的功效,临床上用于治疗风热、感冒头痛、偏头痛等症。据报道,蔓荆子的主要活性成分是黄酮类化合物,为丰富蔓荆子的应用基础研究成果,为开发和利用传统中药蔓荆子,本论文对蔓荆子药材中黄酮类化合物进行了研究。方法:实验主要采用有机溶剂提取;聚酰胺柱层析;硅胶柱层析等方法。结果:从蔓荆子总黄酮中分离得到了12个混合组分,并分离出一绿色化合物。结论:可采用聚酰胺柱层析和硅胶柱层析的方法对蔓荆子总黄酮中的主要化学成分进行分离。
5、关键词:蔓荆子;黄酮类化合物;分离纯化Studies on the Flavonoids Constituents of the Fruitsof Fructus Viticis Department of Pharmacy, Changsha Medical UniversityXiaojuan ChenAdviser: Lizhi Cao Yanhui LiAbstractObjective:Fructus Viticis is the dried and ripe fruits of Vitex trifolia L. Var. simplicifolia Cham.or Vitex r
6、otundifolia L.,which are plants belong to Vitex of Verbenaceae family. It distributes mainly in Shandong,Guangxi Yunnan,Jiangxi,Zhejiang,Fujian and Guangdong. It is a traditional Chinese medicine be widely used in clinical treatment. Because it has the functions of clearing heat,keeping mind clear a
7、nd killing pain,so it can be used to treat fever,headache,migraine etc. It is reported that flavonoids are main active constituents in Fructus Viticis. In order to better exploit and make good use of this medicine,in this paper we have made studies on flavonoids in fruits of Vitex trifolia L. var. s
8、implicifolia Cham. Methods: In order to investigate the constituents in this plant, sever methods have been used in the process of extraction and separation including polyamide chromatography column(CC), silca-gelCC,pre-TLC and so on. Result:12hybrid components and a pure green componend were isolat
9、ed from Viticis total flavonoids. Conclusion:Polyamide column chromatography and silica gel column chromatography methods can be used to separate the main chemical components in total flavonoids of Fructus Viticis.Key words: Fructus Viticis; flavonoids constituents; isolation and Purification第一章 引言蔓
10、荆子为马鞭草科牡荆属单叶蔓荆(Vitex trifolia L. var. simplicifolia Cham.或Vitex rotundifolia L.)或三叶蔓荆(Vitex trifolia L.)的干燥成熟果实,主要产于山东、广西、云南、江西、浙江、福建、及广东等地。为辛凉解表常用药,具有疏散风热、清利头目、止痛的功效,用于治疗风热、感冒头痛、偏头痛等症,民间有“云南天麻”之称。被收载于1977、1955、1990、2000、2005年中华人民共和国药典,系常用中药。1.1 蔓荆子化学成分研究关于蔓荆子化学成分的研究,据文献报道,从中分离的化学成分主要有黄酮类、酚类、苯丙素类、萜类
11、和甾类化合物等。1.1.1黄酮类化合物目前从文献报道中,黄酮类在蔓荆子中主要有黄酮类、二氢黄酮类及其相应的苷类。已分离的黄酮类成分包括紫花牡荆素,3,6,7-三甲氧基槲皮万寿菊素1,木犀草素,Crysosplenol、penduletin及(2S)-5,3-二羟基-6,7,4-三甲氧基二氢黄酮2,木犀草素-7-氧葡萄糖苷,异荭草素,牡荆素等黄酮类和二氢黄酮类化合物, 现代药理表明,蔓荆子中的黄酮类化合物是蔓荆子中的主要活性成分。1.1.2 酚类目前从蔓荆子中分离出来的酚类主要有4-hydroxybenzoic acid methyl ester, vanillic acid methyl es
12、ter, 4-hydroxy benzaldehyde, 4-hydroxybenzoic acid and ferulic acid, 3,4-二羟基苯甲酸3。1.1.3 苯丙素类根据相关文献报道,已从蔓荆子中分离出的苯丙素类化合物有vitrofolal A, vitrofolal B, vitrofolal C, vitrofolal D, dihydro-diconifery -lalc-b-D-(2-O-p-hydroxybenzoyl) glucoside, dihydro-diconifery-lalc -9-O-b-D-glucoside 等4。1.1.4 萜类、甾类化合物萜类化
13、合物在蔓荆子中主要有二萜类和环烯醚萜类。二萜类化合物是蔓荆子主要的特征成分,至今已从该植物中分离得到多个此类化合物,其中主要为labdane型结构,亦有部分abitane型二萜。已分离得到的成分有蔓荆呋喃萜(rotundifuran)和前蔓荆呋喃萜(prerotundifuran),无羁萜(friedelin)、-谷甾醇、-谷甾醇-D-葡萄糖苷、-谷甾醇-3-O-葡萄糖苷等。日本学者Ono M5等对蔓荆子进行了较深入的研究,已从蔓荆子中分离到数十个二萜类化合物,包括vitexifolin A,vitexifolin B,vitexifolin C,vitexifolin D,vitexifol
14、in E,vitetrifolin D,trisnor -gamma-lactone,iso-ambreinolide等。1.1.5 挥发油、氨基酸等其它成分蔓荆子及其叶中所含挥发油的主要成分为崁烯(camphene)和蒎烯(pinene)6。同时,蔓荆子中还含有多种氨基酸。杨洁等对蔓荆子中各种氨基酸的含量进行了测定,结果测得风干蔓荆子中含18种氨基酸,其中有异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、撷氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸这八种人体必需氨基酸。此外,蔓荆子中亦含有维生素E以及Cu,Zn等无机元素7。1.2 黄酮类化合物的研究概况1.2.1 黄酮类化合物的分布 黄酮类化合物是一类低分子量的广泛
15、分布于植物界的天然植物成分,为植物多酚类的代谢物,数量之多列天然酚性化合物之首,大多具有颜色。从植物系统学的角度,植物体产生黄酮的能力与植物体木质化性质密切相关。因此黄酮类化合物主要分布在维管束植物中,而在其它较低等的植物类群中分布较少。而其中大多集中于被子植物中,如豆科、蔷薇科等。在这些植物中此类化合物的类型最全,结构最复杂,含量也最高。苔类中含有的黄酮类化合物为数不多,而藻类、微生物、细菌中没有发现黄酮类化合物的存在8。有文献记载约有20%的中草药中含有黄酮类化合物,可见其资源之丰富。1.2.2 黄酮类化合物的结构和分类以前,黄酮类化合物主要是指基本母核为2-苯基色原酮的一系列化合物,现在
16、则是泛指两个苯环(A环与B环)通过中央三碳原子相互连接而成的一系列化合物。天然的黄酮类化合物几乎在A、B环上均有取代基,一般是轻基、甲氧基和异戊烯基等。在植物体中,黄酮类化合物因其所在组织不同,其存在状态也呈多样化。在木质部多以昔元形式存在;在花、叶、果实等器宫多以糖试形式存在。根据中央三碳链的氧化程度、B环连接位置(2-位或3-位)以及三碳链是否成环状等特点,可将黄酮类化合物分为黄酮类、二氢黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮醇类、异黄酮类、二氢异黄酮类、黄烷醇类、花色素类、查耳酮类、二氢查耳酮类、双苯毗酮类、橙酮等。1.3 黄酮类化合物的生理活性1.3.1 抗氧化及抗自由基作用 自由基性质活泼,有极
17、强的氧化反应能力,对人体有很大的危害性,在体内自由基和脂质过氧化作用使多种大分子成分,如核酸、蛋白质产生氧化变性,DNA交联和断裂,导致细胞结构改变和功能破坏,而引起癌症、衰老及心血管等退变性疾病9。生物体内常见的自由基有超氧自由基(O2-)、羟自由基(OH)、烷氧自由基(RO)。黄酮类化合物具有清除自由基和抗氧化的能力,其作用机理在于它阻止了自由基在体内产生三个阶段:(l)与O2-反应阻断自由基的引发连锁反应;(2)与金属离子鳌合阻断自由基生成;(3)与脂质过氧基(Roo)反应阻断脂质过氧化过程。1.3.2 对心血管系统的作用1.3.2.1 对血压的影响 黄酮类化合物对高血压引起的头痛、项强
18、、头晕、耳鸣等症状有明显的疗效,尤以缓解头痛、项强为显著。葛根素对正常和高血压动物都有一定的降压作用,静注葛根素能使正常麻醉犬的血压短暂而明显地降低,也能显著降低清醒自发性高血压大鼠(SHR)血压10。从桑根皮中分得的Morucenin A、C及Kuwanon G、H在大白鼠及家兔身上有明显的降压作用11。1.3.2.2 抑制血小板的凝集 黄酮类化合物对凝血因子具有较强的抑制作用,故表现出较好的抗凝血作用。实验表明不同浓度的黄酮类化合物可以不同程度地抑制二磷酸腺昔(ADP)诱导的大鼠血小板凝集,对5-轻色胺和ADP联合诱导的家免和绵羊血小板凝集也有同样的抑制作用12。此外黄酮类化合物还可降低血
19、管内皮细胞轻脯酸代谢,使内壁的胶原或胶原纤维含量相对减少,利于防止血小板粘附凝集和血栓形成,有利于防治动脉粥样硬化。据报道,棚皮素等黄酮类化合物对由ADP、胶原或凝血酶引起的血小板聚集及血栓形成也有抑制作用。这与一些含有黄酮类成分的活血化疲中草药的作用机制可能有某种程度的内在联系13。1.3.2.3对外周血管的影响 静注黄酮类化合物于麻醉犬后,全部动物的脑血流量增加且血管阻力相应降低,还能使乙酞胆碱引起的脑内动脉扩张和去甲肾上腺素引起的收缩减弱,使处于异常状态下的血管功能恢复上常水平14。此外还可以改善异丙肾上腺素引起的小鼠微循环障碍,使毛细血管前小动脉管径增加,流速加快。1.3.3 抗癌、防
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