生物高三生物复习提纲技术实践.doc

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1、【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流生物高三生物复习提纲技术实践.精品文档.高三生物复习提纲（技术实践）考纲中有关选修一的要求：“见生物科考查的能力”中的“2、实验与探究能力要求”。考纲展示考纲解读1微生物的分离和培养利用平板划线法和稀释涂布平板法对微生物进行分离与培养2某种微生物数量的测定学会利用平板计数法或显微计数法测定微生物的数量3培养基对微生物的选择作用学会配制选择培养基，并尝试从土壤中分离某些细菌（如分解纤维素和尿素的细菌）4利用微生物的发酵来生产特定的产物及微生物在其他方面上的应用尝试利用微生物生产果酒、果醋、腐乳、泡菜等食品5酶活力测定的一般原理和方法学会如何测定

2、酶活力6酶在食品制造和洗涤等方面的应用知道相关酶在果汁制作和洗涤中的作用7植物组织培养尝试植物组织培养的过程8蛋白质的提取和分离尝试用凝胶色谱法或电泳法对血红蛋白进行提取和分离9PCR技术的基本操作和应用知道PCR技术的原理并尝试进行操作10DNA的粗提取与鉴定掌握DNA粗提取的原理及过程知识点一发酵的常用菌种l、发酵：是指利用微生物的某些特性为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术，在 的条件下都有可能进行。2、几种发酵菌种的比较 菌种项目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类代谢类型繁殖方式适宜条件下出芽生殖二分裂孢子生殖二分裂生产应用发酵条件前期需氧，后期不需氧一直需氧一

3、直需氧无氧发酵的适宜温度1825（最适为20）303515181820特别提醒：酵母菌的繁殖需大量能量，而发酵过程进行无氧呼吸，故果酒制作的前期应 ，而后期应 。 果醋制作过程中要求 ，缺氧时醋酸菌的生长、增殖都会受到影响，另外醋酸的生成也会受到影响。腐乳制作过程中盐、香辛料、酒精均可起到 作用，由于越接近瓶口，微生物污染越重，故豆腐加盐时，越近瓶口处盐用量 。例1、在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是( )A让发酵装置接受光照 B给发酵装置适时排气C向发酵装置通入空气 D将发酵装置放在45处例2、如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是( )A过程和都只能发生在缺氧条

4、件下B过程和都发生在酵母细胞的线粒体中C过程和都需要氧气的参与D过程所需的最适温度基本相同例3、在制作腐乳时，加卤汤密封腌制过程中，对腐乳风味和质量无影响的因素是( )A酒的种类和用量 B周围环境中的湿度C香辛料的组成和用量 D腌制的温度和时间知识点二微生物的实验培养培养基的概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其生长繁殖的 。1培养基的类型（了解，重点掌握选择培养基）划分标准培养基种类特点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂，如琼脂观察微生物的运动、分类、鉴定固体培养基微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培

5、养基培养基成分明确（用化学成分已知的化学物质配成）分类、鉴定用途选择培养基培养基中加入 ，以 不需要的微生物的生长， 所需要的微生物的生长 （如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐）鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入 不同种类的微生物，如可用伊红一美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）2、培养基的营养构成：一般都含有 等营养物质，另外还需要满足微生物生长对 ，例如：生长因子（即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物，如维生素、某些氨基酸、嘌岭、嘧啶）以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。3、

6、无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有 的方法。 (2)关键： 比较项目条件结果常用的方法 较为温和的物理或化学方法仅杀死_对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）_消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法 强烈的理化因素杀死_，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、_灭菌特别提醒：用酒精消毒时， 杀菌效果最好。原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱4、纯化大肠杆菌的实验操作(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：计算 溶化 。特别提醒：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的温度也比较高， ，既可以使培养基表面的水分更好

7、地挥发：又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。(2)纯化大肠杆菌的原理：在培养基上将聚集的菌种稀释分散成_，形成_，此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。(3)接种技术 平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面 ，操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的 ，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面。特别提醒：平板划线法为什么要在第一次以后的每一次划线的起点放在上一次划线的末产端？提示：目的是使每一次划线后菌体数目减少，培养之后形成的菌落是由 繁殖而成。5、菌种的保藏(1)短期保存：固体斜面培养基上 保存，菌种易被污染或产生变异。

8、(2)长期保存： 。6、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)分离的原理土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们体内能合成 。这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。实验室中微生物筛选的原理：_（包括营养、温度、pH等），_。 (2)分离分解尿素的细菌所使用的特定培养基：分离分解尿素的细菌的培养基应为 ，培养基中的_源只有 ，加入 (3)统计菌落数目：常用方法有 、 。 【l】显微镜直接计数法原理：利用特定 ，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。方法：用计数板计数。 缺点： 。例：【实验】探究培养液中酵母菌数量的动态变化（必修三）一实验目的：1通过探究培养液中酵母菌种群数量的

9、变化，尝试建构种群增长的数学模型。2用数学模型解释种群数量的变化。3学会使用血球计数板进行计数。二实验原理：1在含糖的液体培养基（培养液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群，通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。2养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素。三方法步骤：1酵母菌的培养。将10mL的无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中。将酵母菌接种入试管的培养液中混合均匀。将试管在28条件下连续培养7天。2酵母菌的显微镜计数。抽样检测法。稀释：将酵母菌作适当的稀释，菌液如不浓则不必稀释。加样。将盖玻片放在计数室上。接着，摇匀菌液

10、后，且吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。多余培养液用滤纸吸去。计数。稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，先用低倍镜找到计数室的位置，然后用高倍镜计数。每个计数室选5个(另一种规格选4个)中方格(可选4个角和中央的中方格，或只选取4个角)，每次取样要计数3次，求平均值，换算成每毫升菌液中所含的酵母菌总数。四、血球计数板的结构：血球计数板通常是一块特制的载玻片，其上有4条槽构成3个平台。中间的平台又被一短横槽隔成两半，每边的平台上各刻有一个方格网（如图A、B）。每个方格网共分9个大方格，中间的大方格为计数室（如图C）计数室的刻度一般有两种规格，一种

11、是一个大方格分成16个中方格，以4个中方格为一排，每1中方格中有25个小方格，整个计数室内有1625=400个小方格（如图D所示）。另一种是一个大方格分成25个中方格，以5个中方格为一排，每1中方格中有16个小方格，整个计数室内有1625=400个小方格（如图E所示）。每1个小方格边长为0.05mm0.05mm，加上盖玻片后的空间深度为0.lmm。每个大方格的边长为lmmlmm，面积为lmm2，由于盖上盖玻片后的空间深度为0.1mm。所以计数室的体积为0.1m3。五、计算公式：计数时，通常数5个（另一种规格数4个）中方格的总数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上25（或16），得出一个大方格中

12、的菌数，最后换算成1mL菌液的菌数。现以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设5个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，则一个大方格中的菌数为A/525B。所以1mL酵母菌培养液中的菌数=A/525B101000。教材讨论题答案：1从试管中吸出培养液进行计数之前，为什么要将试管轻轻震荡几次？答：目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，减少误差2本实验需要设置对照吗？如果需要，请讨论对照组应怎样设计和操作；如果不需要，请说明理由。答： 3需要做重复实验吗？为什么？答： 4怎样记录结果？记录表怎样设计？（答案见下表） 时间（天）重复实验 1234567l23平均5如果一个小方格内酵母菌过多，难

13、以数清，应当采取怎样的措施？答：提高菌种培养液的稀释倍数。6对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？答：应只计数相邻两边及其顶角的酵母菌。7影响酵母菌种群数量增长的因素可能是什么？答：养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素。练习题：1下面是探究培养液中酵母菌种群数量与时间变化关系的实验：【实验材料】酵母菌菌种和无菌马铃薯培养液、试管、血球计数板（1 mm1mm方格）、滴管、显微镜等。【资料参考】酵母菌的显微计数方法：血球计数板是带有微小方格刻度的玻璃片，用于在显微镜下对血细胞、微生物的计数；将含有酵母菌的培养液滴在计数板上，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据

14、，估算试管中的酵母菌总数。连续观察7天，并记录每天的数值。根据以上叙述回答下列问题：(1)根据所学知识，该课题的实验假设是：开始在资源和空间充裕的环境中，酵母菌呈J型增长，随着时间的推移，由于_，酵母菌呈S型增长。(2)本实验没有另设置对照实验，原因是_。该实验是否需要重复实验？_，试解释原因_。(3)如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取的措施是_。(4)请你设计表格处理实验的数据。(5)试在该实验的基础上，根据你对影响酵母菌种群生长的因素的推测，确定一个进一步探究的课题：_。2在探究培养液中酵母菌种群数量的变化实验中，采用了如下图所示的血球计数器，该血球计数器的计数室中，以4个中方

15、格为一排，16个中方格为一个大方格，每l中方格中有25个小方格，整个计数室内有1625=400个小方格，每1个小方格边长为0.05mm0.05mm，加上盖玻片后的空间深度为0.lmm。计数时，取原液lmL，加入9mL的无菌水稀释成10倍的样液，用无菌的移液管吸取一滴混合均匀的样液注入血球计数器的计数室内，装满整个计数室，没有产生气泡，成功制片,然后放入显微镜下观察，并计数最左上、最右上、最左下、最右下四角的4个中方格中的细胞数，共200个，则lmL培养液中酵母菌细胞的数量约为_个。【2】稀释涂布平板法（间接计数法，也叫 ）原理；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液

16、中的_ _，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。操作：a设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。(4)设置对照：指设置除了_以外，其他条件都相同的实验，目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。(5)实验流程：土壤取样制备 微生物的培养与观察_。7、分解纤维素的微生物的分离(1)纤维素酶的组成：是一种复合酶，至少包括三种组分，即Cl酶、CX酶和葡萄糖苷酶，在这三种酶的作用下，纤维素最终被催化水解成 。(2)筛选方法： ，即通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。(3)实验操作步骤： 土壤取样 将样品涂布到鉴

17、别纤维素分解菌的培养基上 例1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的下列操作中，不正确的是( )A操作流程是计算、称量、溶化、灭菌和倒平板B将称好的牛肉膏连同称量纸一同倒入烧杯中再加水、去纸C灭菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%琼脂，并使其溶解D将培养基冷却到约50时，在酒精灯火焰附近倒平板例2、在实验室里，从土壤里分离出尿素分解菌所需的培养基属于( )A天然培养基 B鉴别培养基 C选择培养基 D液体培养基知识点三酶的应用（一）酶的制备 l对于细胞内酶：用捣碎机、研磨器等机械将生物组织细胞破碎，使酶从活细胞中释放出来，进入细胞外的溶液中，经 、离心制备成 。2对于分泌到细胞外的酶；直接从分泌物或细胞外的组

18、织间隙中提取，提取过程中注意温度、 等多种环境因素对酶活性的影响。 3酶活力测定的原理：通常以单位时间内，单位体积中 来表示。（二）果胶酶在果汁生产中的作用1果胶酶的组成与作用(1)果胶酶不是一种酶，而是一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。(2)果胶酶可以分解果胶，使 变得更容易；果胶分解后，也使得果汁变得 。2探究果胶酶的适宜温度、pH(1)温度和pH都可以影响 ，在探究果胶酶的最适温度或pH的实验中，自变量分别是 和 ，其他如苹果泥、反应时间等都是 ，可以通过测定 或观察 度来判断酶活性高低。(2)在混合苹果泥和果胶酶之前，要将苹果泥和果胶酶分装在不同的试管中 处理

19、3酶的活性和酶反应速度(1)酶的活性：是指 。酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。(2)酶反应速度：用 单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。(3)影响因素：温度、pH、酶浓度、底物浓度和酶的抑制剂等。4探究温度(或pH)对果胶酶活性的影响(1)实验原理：果胶酶活性受温度(或pH)影响，处于最适温度（或pH）时活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小成正比。（三）探讨加酶洗衣粉的洗涤效果1加酶洗衣粉中常有的酶制剂包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶四种，这些酶的活性受温度、酸碱度和表面活性剂的影响。2加酶洗衣粉去污机理(1)

20、碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子 水解成可溶性的 或小分子肽。(2)脂肪酶：淀粉酶和纤维素酶分别把大分子脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质。（四）酶的应用：利用一定技术使酶既既容易催化反应，又易于回收，可以重复使用。类型固定化酶的种类适用方法优点及不足实例固定化酶 可反复利用，但只催化一种或一类化学反应固定化葡萄糖异构酶固定化细胞 成本低，反应容易，但 固定化酵母细胞例（双选题）下列关于加酶洗衣粉的说法不正确的是( )A加酶洗衣粉的效果总比普通洗衣粉的好 B加酶洗衣粉中常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶等C加酶洗衣粉是将酶直接添加到普通洗衣粉中D加酶洗衣粉相对普通洗衣粉来说有利于环保知识点四植

21、物组织培养1植物组织培养的基本过程2菊花组织培养过程(1)选材：一般选择 植株的茎上部新生的侧枝(2)营养供应：培养基：常用 营养成分：大量元素、微量元素、有机物如蔗糖等、植物激素（如 ） 实验操作过程制备MS固体培养基：配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌外植体消毒接种培养移栽栽培3月季的花药培养(1)花粉发育过程：花粉母细胞（小孢子母细胞）四分体时期单核期双核期花粉粒(2)产生花粉植株的两种途径：(3)影响花药培养的因素：主要因素是 的选择和培养基的 。花药培养一般选择在 ，选择的花粉处于发育过程中的 。知识点五DNA的粗提取和鉴定 1DNA的粗提取(1)根据DNA的 。DNA和蛋白质等其他成分

22、在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。如图表示DNA在NaCl溶液中的溶解度随着NaCl溶液浓度变化而变化的曲线。(2) DNA不溶于 溶液。(3)DNA对酶、高温和 的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080的高温，而DNA在80以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响。2DNA的提纯(1)方案一：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度除去杂质。(2)方案二：直接在DNA滤液中加入 ，其中的 能够分解蛋白质。(3)方案三：将DNA滤液放在 的恒温水浴箱中保温1015min。 3DNA的鉴定(1)所用试剂

23、： 。(2)处理方法：将试剂与DNA溶液混合后 加热5min。(3)现象：溶液颜色 。特别提醒：DNA的鉴定中为什么需要两支试管？原因：一支试管中加入二苯胺试剂，另一支不加，可以通过对比说明通过二苯胺试剂确实可以鉴定DNA。总结：DNA的粗提取与鉴定中用到的试剂及其作用NaCl溶液： 冷却的体积分数为95%的酒精： 二苯胺： 洗涤剂： 嫩肉粉 知识点六血红蛋白的提取和分离l、实验原理：依据蛋白质的 可以将不同种类的蛋白质分离。2、凝胶色谱法：也称 ，是根据 分离蛋白质的有效方法。相对分子量较 的蛋白质在凝胶 移动，路程 ，移动速度较 ，相对分子质量较小的蛋白质易进入凝胶 ，路程 ，移动速度 ，

24、以此可以将不同相对分子质量的蛋白质分离。3、电泳 (1)概念：电泳是指 在电场的作用下发生迁移的过程。(2)特点：蛋白质等在一定pH下会带电，在电场作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，电泳利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、 形状 的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。例：下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有( )A提取细胞中的DNA和蛋白质都需要用蒸馏水涨破细胞B用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质C蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNAD蛋白质和DNA可以用电泳方法进行分离纯化参

25、考答案知识点一发酵的常用菌种l、发酵：是指利用微生物的某些特性为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术，在 有氧和无氧 的条件下都有可能进行。2、几种发酵菌种的比较 菌种项目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧型异养需氧型异养需氧型异养厌氧型繁殖方式适宜条件下出芽生殖二分裂孢子生殖二分裂生产应用酿酒、发面酿醋制作腐乳制作泡菜、酸奶发酵条件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧无氧发酵的适宜温度1825（最适为20）303515181820特别提醒：酵母菌的繁殖需大量能量，而发酵过程进行无氧呼吸，故果酒制作的前期应 通入氧气 ，

26、而后期应 保证严格的无氧环境 。 果醋制作过程中要求 适时通气 ，缺氧时醋酸菌的生长、增殖都会受到影响，另外醋酸的生成也会受到影响。腐乳制作过程中盐、香辛料、酒精均可起到 抑制杂菌生长的作用，由于越接近瓶口，微生物污染越重，故豆腐加盐时，越近瓶口处盐用量 越多。例1、(B) 例2、(C) 例3、(B)知识点二微生物的实验培养培养基的概念：人们按照微生物对 营养物质 的不同需求，配制出供其生长繁殖的 营养物质 。1培养基的类型（了解，重点掌握选择培养基）划分标准培养基种类特点用途用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物（如

27、培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐）鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如可用伊红一美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）2、培养基的营养构成：一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质，例如：生长因子（即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物，如维生素、某些氨基酸、嘌岭、嘧啶）以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。3、无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 (2)关键：

28、防止外来杂菌的入侵比较项目条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌特别提醒：用酒精消毒时， 70%的酒精 杀菌效果最好。4、纯化大肠杆菌的实验操作(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：计算 称量 溶化 灭菌 倒平扳 。特别提醒：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的温度也比较高， 将平板倒置 ，既可以使培养基表面的水分更好地挥发：又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。(2

29、)纯化大肠杆菌的原理：在培养基上将聚集的菌种稀释分散成单个细胞，形成单个菌落，此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。(3)接种技术 平板划线法和稀释涂布平板法 平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面 连续划线 ，操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的 梯度稀释 ，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面。特别提醒：目的是使每一次划线后菌体数目减少，培养之后形成的菌落是由 单个菌体 繁殖而成。5、菌种的保藏(1)短期保存：固体斜面培养基上 4 保存，菌种易被污染或产生变异。(2)长期保存： 20甘油管在冷冻箱中保藏 。6、土壤中分解

30、尿素的细菌的分离与计数土壤中的细菌之所以能够分解尿素，是因为它们体内能合成 脲酶 。这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 (2)分离分解尿素的细菌所使用的特定培养基：分离分解尿素的细菌的培养基应为 选择培养基 ，培养基中的氮源只有 尿素 ，加入 酚红染色剂（变红）(3)统计菌落数目：常用方法有 显微镜直接计数法 、 稀释涂布平板法 。 【l】显微镜直接计数法原理：利用特定 细菌计数板或血细胞计数板 ，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。方法：用计数板计数。 缺

31、点： 不能区分死菌与活菌 。例：练习答案：1(1)环境中资源和空间逐渐变得有限，代谢废物积累(2)该实验在时间上形成前后自身对照 需要 为了提高实验数据的准确性(3)增加菌种培养液的稀释倍数(4)（2分。横表头时间共7天写对得1分，纵表头重复实验（3次以上）和“平均”答全得1分） 时间（天）重复实验 1234567l23平均 (5)酵母菌的种群数量与营养物质（溶氧或pH或代谢废物等）的变化关系2. 8l07【2】稀释涂布平板法（间接计数法，也叫 活菌计数法 ）原理；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多

32、少活菌。操作：a设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30300 的平板进行计数。(4)设置对照：指设置除了越测试的条件以外，其他条件都相同的实验，目的是排除实验组中 非测试因素 对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。(5)实验流程：土壤取样制备 培养基 微生物的培养与观察细菌的计数。7、分解纤维素的微生物的分离(1)纤维素酶的组成：是一种复合酶，至少包括三种组分，即Cl酶、CX酶和葡萄糖苷酶，在这三种酶的作用下，纤维素最终被催化水解成 葡萄糖 。(2)筛选方法： 刚果红染色法 ，即通过是否产生 透明圈 来筛选纤维素分解菌。(3)实验操作步骤： 土壤取

33、样 选择培养（可省略） 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 例1、(C) 例2、(C)知识点三酶的应用（一）酶的制备 l对于细胞内酶：用捣碎机、研磨器等机械将生物组织细胞破碎，使酶从活细胞中释放出来，进入细胞外的溶液中，经 过滤 、离心制备成 粗酶液 。2对于分泌到细胞外的酶；直接从分泌物或细胞外的组织间隙中提取，提取过程中注意温度、 pH 等多种环境因素对酶活性的影响。 3酶活力测定的原理：通常以单位时间内，单位体积中反应物的 减少 量或产物的增加量来表示。（二）果胶酶在果汁生产中的作用1果胶酶的组成与作用(1)果胶酶不是一种酶，而是一类酶的总称，包括 多

34、聚半乳糖醛酸酶 、果胶分解酶 和果胶酯酶等。(2)果胶酶可以分解果胶，使 榨取果汁 变得更容易；果胶分解后，也使得果汁变得澄清。2探究果胶酶的适宜温度、pH(1)温度和pH都可以影响 酶的活性 ，在探究果胶酶的最适温度或pH的实验中，自变量分别是 温度 和pH ，其他如苹果泥、反应时间等都是 无关变量 ，可以通过测定 果汁体积 或观察 果汁澄清 度来判断酶活性高低。(2)在混合苹果泥和果胶酶之前，要将苹果泥和果胶酶分装在不同的试管中 恒温 处理3酶的活性和酶反应速度(1)酶的活性：是 指酶催化一定化学反应的能力 。酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。(2)酶

35、反应速度：用 单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。(3)影响因素：温度、pH、酶浓度、底物浓度和酶的抑制剂等。4探究温度(或pH)对果胶酶活性的影响(1)实验原理：果胶酶活性受温度(或pH)影响，处于最适温度（或pH）时活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小成正比。（三）探讨加酶洗衣粉的洗涤效果1加酶洗衣粉中常有的酶制剂包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶 和纤维素酶四种，这些酶的活性受温度、酸碱度 和表面活性剂的影响。2加酶洗衣粉去污机理(1)碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子肽。(2)脂肪酶：淀粉酶和纤维素酶分别把大分子脂肪

36、、淀粉和纤维素水解为小分子物质。（四）酶的应用：利用一定技术使酶既既容易催化反应，又易于回收，可以重复使用。类型固定化酶的种类适用方法优点及不足实例固定化酶一种化学结合、物理吸附可反复利用，但只催化一种或一类化学反应固定化葡萄糖异构酶固定化细胞一系列包埋成本低，反应容易，但成本下降固定化酵母细胞例(AC)知识点四植物组织培养(1)选材：一般选择 未开花 植株的茎上部新生的侧枝(2)营养供应：培养基：常用 MS培养基 营养成分：大量元素、微量元素、有机物如蔗糖等、 植物激素（如 生长素和细胞分裂素）3月季的花药培养(3)影响花药培养的因素：主要因素是材料的选择和培养基的组成 。花药培养一般选择在

37、初花期 ，选择的花粉处于发育过程中的单核期。知识点五DNA的粗提取和鉴定 1DNA的粗提取(1)根据DNA的 溶解性 。DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。如图表示DNA在NaCl溶液中的溶解度随着NaCl溶液浓度变化而变化的曲线。(2) DNA不溶于 酒精 溶液。(3)DNA对酶、高温和 洗涤剂 的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受6080的高温，而DNA在80以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响。2DNA的提纯(1)方案一：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度除去杂质。(

38、2)方案二：直接在DNA滤液中加入 嫩肉粉 ，其中的 木瓜蛋白酶 能够分解蛋白质。(3)方案三：将DNA滤液放在 6075 的恒温水浴箱中保温1015min。 3DNA的鉴定(1)所用试剂： 二苯胺试剂。(2)处理方法：将试剂与DNA溶液混合后 沸水 加热5min。(3)现象：溶液颜色 变蓝 。特别提醒：DNA的鉴定中为什么需要两支试管？原因：一支试管中加入二苯胺试剂，另一支不加，可以通过对比说明通过二苯胺试剂确实可以鉴定DNA。总结：DNA的粗提取与鉴定中用到的试剂及其作用NaCl溶液： 不同浓度的NaCl溶液可以溶解或析出DNA 冷却的体积分数为95%的酒精：利用DNA不溶于酒精的特点来提

39、取含杂质较少的DNA二苯胺：在沸水浴的条件下鉴定DNA洗涤剂：溶解细胞膜，使细胞内的DNA释放出来嫩肉粉：其中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质知识点六血红蛋白的提取和分离l、实验原理：依据蛋白质的各种特性 可以将不同种类的蛋白质分离。2、凝胶色谱法：也称 分配色谱法 ，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子量较大的蛋白质在凝胶 外部 移动，路程 短 ，移动速度较 快 ，相对分子质量较小的蛋白质易进入凝胶 内部 ，路程 长 ，移动速度 慢 ，以此可以将不同相对分子质量的蛋白质分离。3、电泳 (1)概念：电泳是指 带电粒子 在电场的作用下发生迁移的过程。(2)特点：蛋白质等在一定pH下会带电，在电场作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，电泳利用待分离样品中各种分子 带电性质 的差异以及分子本身的大小、 形状 的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而