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1、污泥负荷对生物处理系统的影响(中国环境科学杂志)2014年第八期1材料与方法1.1污水水样污水水样取自上海市Q污水厂沉砂池出水段,用25L灭菌聚乙烯塑料桶盛装后15min内运送至实验室进行实验.1.2活性污泥系统1.2.1反响器设计主体装置为2个一样的圆柱形有机玻璃反响器(图1),内径14cm,高度26cm,有效容积3.85L,采用磁力搅拌器搅拌,增氧泵曝气.系统以SBR的方式运行.1.2.2反响器启动及运行反响器的接种污泥取自上海Q污水厂回流污泥,将污泥接种于2个反响器内,至反响器体积的1/3左右,再参加Q污水厂沉砂池出水至顶端刻度线.保持搅拌和曝气并天天更换一次进水.定期监测反响器混合液污
2、泥浓度(MLSS)和污泥沉降比(SV);当MLSS1000mg/L,SV在30%左右后以为污泥驯化完毕.将两反响器污泥混合液充分混合搅拌后均分至A、B两个反响器中.运行期间,两反响器的运行周期均设置为8h,搅拌器转速为100r/min,DO浓度保持在23mg/L,污泥龄均为8d,周期内进水、反响、沉淀、排水4个反响阶段运行时间两反响器保持一致且分别为2,448,25,5min,通过调节进水水力负荷,使得2个反响器的污泥负荷分别为0.24和0.4kgCOD/(kgMLSSd).根据上述反响条件运行5周,期间定期监测出水COD、浊度等指标,确保反响器处于稳定运行状态.1.3取样及水质分析在反响器稳
3、定运行5周后开场取样,取样点包括进水,2个反响器活性污泥混合液、出水以及剩余污泥,取样量均为50mL.立即监测其污泥浓度(MLSS)、pH值、浊度、化学需氧量(COD)、氨氮(NH4+-N)、硝态氮(NO3-N)、总氮(TN)总磷(TP)等指标,剩余水样置于4保存以用于后续抗药细菌的检测.pH值采用便携式pH计(pH340i,WTW)测定;浊度采用便携式浊度仪(2100P,HACH)测定;COD采用COD快速测定仪(DR2800,HACH)测定;SS、NH4+-N、NO3-N、TN、TP和MLSS采用国标中规定的方法进行测定.1.4抗性异养菌检测采用细菌平板计数(标准)的方法检测磺胺嘧啶抗性异
4、养细菌的数目.向灭菌冷却后的营养培养基(牛肉膏3g/L,蛋白胨10g/L,NaCl5g/L,琼脂15g/L,pH7.20.2)中参加一定量的抗生素试剂,使培养基中的磺胺嘧啶浓度到达512mg/L.培养基中磺胺嘧啶的浓度根据CLSI(2011版)13中规定的各种常见病原菌对磺胺嘧啶具有抗药性的标准中最大值确定.分别取一系列浓度梯度稀释后的水样(或泥样)1mL加至含有上述培养基的皮式培养皿中混合,待冷却凝固后放入恒温培养箱中37培养24h,统计菌落数在20300CFU/mL的培养皿,确定磺胺嘧啶抗性异养细菌的数目.每个梯度浓度的样品均设置3个平行样本.此外,将1mL同样梯度稀释操作的上述水样参加不
5、含磺胺嘧啶的营养培养基中同时进行培养计数操作,用来反映水样中的异养菌总数目.1.5数据分析1.5.1磺胺嘧啶抗性异养菌比例该比例由磺胺嘧啶抗性异养菌数除以相应的总异养菌数得到.1.5.2磺胺嘧啶抗性异养菌净比生长速率采用净比生长速率来描绘污泥负荷对磺胺嘧啶抗性异养菌生长的影响.净比生长速率采用式(1)计算.inineenetwwddxVQXQXXVQXt=+(1)式中:net为磺胺嘧啶抗性异养菌净比生长速率,d1;ddxt为磺胺嘧啶抗性异养菌浓度变化率,CFU/d;X为SBR混合液中磺胺嘧啶抗性异养菌浓度,CFU/mL;Xin为进水中磺胺嘧啶抗性异养菌浓度,CFU/mL;Xe为出水中磺胺嘧啶抗
6、性异养菌浓度,CFU/mL;Xw为剩余污泥中磺胺嘧啶抗性异养菌浓度,CFU/mL;Qin为日进水量,L/d;Qw为日排泥量,L/d;Qe为日排水量,L/d;V为反响器有效体积,L.1.5.3统计分析统计分析测试采用SPSS19.0进行.利用t-分布来检验数据之间的显著性差异,检验经过在显著性水平为0.05下进行.2结果与讨论2.1污泥负荷对活性污泥系统中磺胺嘧啶抗性异养菌浓度分布的影响反响器稳定运行期间主要水质参数见表1.能够看出,尽管两反响器的污泥负荷不同,但它们在好氧条件下进行的有机物降解、硝化反响等都较为充分,讲明两反响器运行稳定,且均处于较优的状态下运行,且两个系统对常规指标的去除效果
7、相近,并未因污泥负荷不同而有明显差异.不同污泥负荷的两反响器系统中各点位磺胺嘧啶抗性异养菌浓度和相对丰度(以所占百分比表示)见图2.进水中磺胺嘧啶抗性异养菌的浓度为(4250250)CFU/mL,所占百分比为17.6%2.6%,由于磺胺类药物价格低廉在水产和家禽养殖使用较广泛14,较高浓度的磺胺类抗生素在我国包括污水厂和其他水环境中也都有检出15,这可能导致微生物对磺胺类抗生素的较高抗药率.在活性污泥混合液样品中,低污泥负荷样品抗药细菌的丰度相比进水无明显改变,浓度为(50001000)CFU/mL,而污泥负荷为0.4的样品浓度显著提高(P0.05),到达(4000010000)CFU/mL,
8、为低污泥负荷样品的8倍.在其他运行条件一致的情况下,污泥负荷有利于磺胺嘧啶抗性异养菌在活性污泥系统中的增殖.污水经处理后反响器出水细菌浓度明显降低(P0.05),去除率分别达97.6%和97.0%,但活性污泥系统无法完全去除水中的抗药细菌,出水中仍含有较高浓度的磺胺嘧啶抗药异养菌,而且浓度随着污泥负荷的升高而显著升高.高污泥负荷下出水抗药细菌的排放浓度是低污泥负荷的10倍.这表明常规工艺出水是环境中潜在的抗药细菌储存库,后续进一步降低抗药细菌风险的处理方法(如氯消毒、紫外消毒)仍特别必要.剩余污泥样品由于污泥的浓缩细菌的浓度大大提高,抗药菌浓度也显著高于其他点位,剩余污泥是污水处理系统中抗药细
9、菌排放的重要方式.比照不同负荷下抗药细菌的浓度发现,较高负荷系统中的抗药细菌浓度(1016677368)CFU/mL仍高于低负荷(6166712583)CFU/mL,但此时两者的相对丰度相差不大(分别为18.7%和17.4%)且和进水相比无显著差距.综合分析污泥负荷对磺胺嘧啶抗药细菌丰度的影响,发现负荷提高使抗药菌在活性污泥、出水和剩余污泥中的浓度均提高.这种提高可能主要是由于负荷提高加快了污泥生长,使抗药细菌在活性污泥系统中的浓度也相应提高,但从抗药细菌的相对丰度看,各点位磺胺嘧啶抗药细菌百分比均不随污泥负荷的提高而发生显著改变(P0.05),表明污泥负荷不会显著改变活性污泥系统磺胺嘧啶抗药
10、细菌的抗药特性.2.2污泥负荷对磺胺嘧啶抗性异养菌生长及排放的影响采用净比生长速率和细菌产量两项指标来反映系统中磺胺嘧啶抗性异养菌的生长状况.从表2能够看出,高负荷下耐磺胺嘧啶异养菌的净比生长速率略高于低污泥负荷,而产量显著高于后者,表明污泥负荷的提高有利于磺胺嘧啶抗药细菌的生长,这也导致高负荷下系统中包括混合液、出水和剩余污泥各点位的细菌浓度均高于低污泥负荷.相比之下两反响器中异养菌总数的比生长速率分别为0.35和0.38d1,不同污泥负荷下异养菌总数的生长速率和产量均高于抗磺胺嘧啶异养菌,可能是由于抗性细菌只占总异养菌的一部分,因此产量低于后者,这也导致在混合液中抗性细菌的比例有所降低.低
11、污泥负荷下磺胺嘧啶抗药菌的排放比高达28.4,讲明在负荷较低的条件下绝大部分抗药菌都是通过剩余污泥的方式排放,其在出水中的排放量只占极小的比例,负荷提高后,通过出水排放的抗药细菌量显著提高,已经接近剩余污泥中的排放量(排放比1.1),成为抗药细菌排放的主要方式之一,随着负荷进一步提高,排放比将进一步降低,但进一步增加负荷可能会影响生物处理工艺对常规污染物的去除效果,使出水水质下降。高污泥负荷反响器由于出水抗药性细菌的排放量显著增加,其排放总量也显著升高,从5.9106CFU/d变为1.8107CFU/d,但由于此时水力负荷是低污泥负荷下的4倍,一样水力负荷下,高污泥负荷的抗性细菌排放量反而有显
12、著降低(P0.05),从抗药细菌风险控制的角度来看,负荷提高更有利于抗药细菌的控制.另外,高污泥负荷下排水将成为抗药性细菌排放的重要形式,就我国目前对污水生物处理工艺出水和剩余污泥的后续处理来看,一般污水厂出水还都会经过深度处理或消毒处理后排放,通常对包括抗药细菌在内的各类微生物有比拟好的杀灭效果;而剩余污泥处理经过复杂,处理费用较高,一般污水厂不会对其进行特别完善的处理,经过常规的浓缩、稳定、脱水经过后,污泥的抗药性风险可能并未有较明显降低,因此小污泥负荷处理污水不利于抗药性风险的控制.另一方面,发展低排泥量的处理工艺,如采用氧化沟或MBR工艺等,可能有助于控制抗药性风险.当然,本研究仅以磺
13、胺嘧啶抗性异养菌为例考察了其在活性污泥系统中的归趋行为,其他常见抗性细菌在污水生物处理工艺的归趋特性以及可能影响抗药细菌分布的其他运行条件,如曝气条件,污泥龄,水力停留时间等需要在以后的研究中进一步讨论.3结论3.1污泥负荷增大0.4kgCOD/(kgMLSSd)使活性污泥系统中混合液、出水和剩余污泥中磺胺嘧啶抗药异养菌的浓度显著提高,分别是低污泥负荷0.24kgCOD/(kgMLSSd)下的8倍、10倍和1.7倍;但污泥负荷改变对抗药细菌的相对丰度无显著影响.3.2污泥负荷的提高有利于活性污泥系统中磺胺嘧啶抗药细菌的生长,净比生长速率和细菌产量分别由0.32d1和2.3106CFU/d提高至0.33d1和3.1106CFU/d.3.3较低污泥负荷下抗药细菌主要通过剩余污泥形式排放,排放比(泥/水)为28.4;负荷提高后,通过出水排放抗药细菌的比例显著提高,排放比(泥/水)达1.1.3.4处理单位污水,2种污泥负荷反响器磺胺嘧啶抗药细菌排放量分别为3.3106CFU/L和2.6106CFU/L,提高污泥负荷有利于活性污泥系统抗药性风险的控制.
限制150内