KDY-9820凯氏定氮仪操作规程.docx

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1、KDY-9820凯氏定氮仪操作规程KDY-9820凯氏定氮仪操作规程12一、原理3蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分4解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以5硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。67二、试剂8135%NaOH溶液：935gNaOH溶于65mL水。101122%硼酸溶液：122gH3BO3溶于100mL水。13143甲基红溴甲酚绿混合指示剂：15参照GB/T603-2002化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备16溶液：称取0.1g溴甲酚绿，溶于乙醇(95%)，用乙醇(95%)稀释

2、至100mL17溶液：称取0.2g甲基红，溶于乙醇(95%)，用乙醇(95%)稀释至100mL18取30mL溶液I,10mL溶液，混匀。19204盐酸标准滴定溶液：21参照GB/T601-2002化学试剂标准滴定溶液的制备224.1配制23按表1的规定量取盐酸，注入1000mL水中，摇匀。2425264.2标定27按表2的规定称取于270-300高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸28钠，溶于50mL水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液，用配制好的盐酸溶液滴29定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同30时做空白试验。313233盐酸标准滴定溶液的浓度c(

3、HCl)。数值以摩尔每升(mol/L)表示，计算公式如下：34MVVmHCl)(1000)(c21-?=35式中：36m无水碳酸钠的质量的准确数值，单位为克(g)；37V1盐酸溶液的体积的数值，单位为毫升(mL)；38V2空白试验盐酸溶液的体积的数值，单位为毫升(mL)39MM(32CONa21)=52.994，单位为克每摩尔(g/mol)。40注：盐酸浓度根据样品蛋白含量自行选择。41425催化剂：43硫酸钾:无水硫酸铜=10：1(w/w)44456铬酸洗液：46将10g重铬酸钾粉末置于500ml烧杯中，加水20ml，加热使其溶解。然后边搅47拌边渐渐注入180ml浓H2SO4。4849三、

4、实验步骤：50一、消化51称取0.2g枯燥样品准确到0.0001g移入枯燥消煮管中。参加0.33g催化剂及5210ml硫酸，稍摇匀后于管口放一小漏斗。放入消化炉中，温度升至300后持续1h，53再升温至400消化4h。至液体呈无色澄清透明后，冷却。参加10mL蒸馏水稀释54样品，冷却至室温。5556二、蒸馏571蒸馏水桶中参加10L去离子水，不得有气泄露。58配制35%NaOH溶液3至5L参加碱桶中，不得有气泄露。59配制2%硼酸溶液3至5L参加酸桶中，不得有气泄露。60612打开冷凝水和电源开关。等待2min后，检查液桶内空气能否充满，液桶鼓胀62即可。63643检查空消煮管和三角瓶能否正确

5、放置在托架上。按硼酸键，使硼酸液能够加到65三角瓶中，待正常后再按硼酸键停止。按加碱键，使碱液能够加到消煮管中，待正66常后再按加碱键停止。按蒸馏键，一般2-4min，蒸馏正常即可。67684按转换键，将加硼酸液时间设定为6s，加碱液时间设定为5s。将空三角瓶放在69托盘上，有样品的消煮管放在托架上，要与上端的橡胶塞装紧。按转换键，仪器自70动蒸馏。蒸馏完毕时，会发出提示响声。71725测定结束后，用去离子水冲洗橡胶塞、蒸馏管及硼酸管，将空消煮管和三角瓶正73确放置在托架上。关闭冷凝水及电源，拔出电源插头。747576三、滴定77取下三角瓶，参加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液。用标准盐酸滴定液滴

6、定至灰78色，若过量一滴则溶液变红。可参考附图7980四、计算81粗蛋白含量：0V-VWFM401.1%P?=82其中：83M标准盐酸滴定液摩尔浓度mol/L84W样品重量g85V样品滴定标准盐酸消耗量mL86V0空白样品滴定标准盐酸消耗量mL87F粗蛋白转换系数，一般为6.258889四、注意事项：901消煮管均用铬酸洗液清洗，去离子水润洗，枯燥后使用。912样品称量前枯燥恒重。923加碱量和加酸量根据样品蛋白含量调整。加碱后消煮管内液体颜色应变为咖啡色93或褐色。假如仍为乳白或浅蓝色表明碱量不够，需手动加碱。蒸馏完毕后，保证液94量不超过管体积的1/3。954每个样品至少重复两次，相对标准偏差应当前位置：文档视界KDY-9820凯氏定氮仪操作规程KDY-9820凯氏定氮仪操作规程