骨髓细胞形态学检查ppt课件.ppt
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1、第四章第四章造血检验的基本方法造血检验的基本方法第一节第一节 骨髓象与血象检验骨髓象与血象检验骨髓细胞形态学检查的临床应用骨髓细胞形态学检查的临床应用 1诊断造血系统疾病诊断造血系统疾病 对各类白血病、再障、巨幼贫、恶组、多发性骨髓对各类白血病、再障、巨幼贫、恶组、多发性骨髓瘤等疾病诊断及鉴别诊断具有决定性意义。瘤等疾病诊断及鉴别诊断具有决定性意义。 2协助诊断某些疾病协助诊断某些疾病 协助诊断某些疾病,如缺铁贫、溶贫、脾亢、协助诊断某些疾病,如缺铁贫、溶贫、脾亢、ITP、淋巴瘤的骨髓浸润、淋巴瘤的骨髓浸润、MDS等。等。 3提高某些疾病的诊断率提高某些疾病的诊断率 骨髓检查疟原虫、黑热病小体
2、、骨髓检查疟原虫、黑热病小体、LE细胞、细菌培养、细胞、细菌培养、染色体检查、干细胞培养及分子生物学检查等,皆染色体检查、干细胞培养及分子生物学检查等,皆可提高相应疾病诊断的阳性率。可提高相应疾病诊断的阳性率。适应症适应症凡末梢血有任何类型血细胞不明原因的过凡末梢血有任何类型血细胞不明原因的过多、过少或出现幼稚细胞;多、过少或出现幼稚细胞;不明原因的肝、脾、淋巴结肿大不明原因的肝、脾、淋巴结肿大不明原因的发热、骨痛或恶病质不明原因的发热、骨痛或恶病质疑有血液恶性肿瘤或其他肿瘤转移至骨髓,疑有血液恶性肿瘤或其他肿瘤转移至骨髓,有异常蛋白血症等有异常蛋白血症等恶性血液病化疗后的疗效观察恶性血液病化
3、疗后的疗效观察骨髓活检、造血干骨髓活检、造血干/祖培养、染色体核型分祖培养、染色体核型分析等。析等。禁忌证:禁忌证:因骨髓检查具有技术性强且对因骨髓检查具有技术性强且对病人有一定痛苦等特点,故应严格掌握适应病人有一定痛苦等特点,故应严格掌握适应证。证。1.有明显出血倾向的病人(血友病患者禁有明显出血倾向的病人(血友病患者禁忌作骨髓穿刺)。忌作骨髓穿刺)。2.晚期孕妇作骨髓穿刺术应特别慎重。晚期孕妇作骨髓穿刺术应特别慎重。3.小儿及不合作患者不宜作胸骨穿刺。小儿及不合作患者不宜作胸骨穿刺。4.穿刺部位有炎症或有畸形。穿刺部位有炎症或有畸形。 骨髓标本采集骨髓标本采集 1骨髓取材部位的选择骨髓取材
4、部位的选择 大都采用穿刺法采集,穿刺部位有胸骨、脊突、大都采用穿刺法采集,穿刺部位有胸骨、脊突、髂骨等处。骨髓增生程度依次为:胸骨、刺突、髂骨等处。骨髓增生程度依次为:胸骨、刺突、髂骨,临床常选用髂前或髂后上棘穿刺。髂骨,临床常选用髂前或髂后上棘穿刺。3岁以下岁以下患儿可选择胫骨穿刺。患儿可选择胫骨穿刺。 2骨髓穿刺器材骨髓穿刺器材 消毒骨髓穿刺包:穿刺针、消毒骨髓穿刺包:穿刺针、5ml和和10ml注射器,注射器,纱布纱布2块,孔巾块,孔巾2条,碘酒、条,碘酒、75%酒精、消毒棉签、酒精、消毒棉签、消毒橡皮手套、镊子、消毒橡皮手套、镊子、2%普鲁卡因注射液或利多普鲁卡因注射液或利多卡因注射液、
5、推片、载玻片等。卡因注射液、推片、载玻片等。 3骨髓穿刺技术骨髓穿刺技术 主要包括髂后上棘穿刺术、主要包括髂后上棘穿刺术、髂前上棘穿刺术、胸骨穿刺术髂前上棘穿刺术、胸骨穿刺术 骨髓取材情况判断骨髓取材情况判断 一、取材满意一、取材满意1.抽吸骨髓液时,患者感到有短暂酸痛感。抽吸骨髓液时,患者感到有短暂酸痛感。2.抽出的骨髓液中有较多的黄色小粒。抽出的骨髓液中有较多的黄色小粒。3.镜下可见较多的骨髓特有细胞。镜下可见较多的骨髓特有细胞。4.有核细胞明显增多,且杆状核与分叶核的有核细胞明显增多,且杆状核与分叶核的比值较外周血高。比值较外周血高。 二、取材失败二、取材失败1.与血片完全一样与血片完全
6、一样2.骨髓小粒、油滴少或不见,特有细胞少。骨髓小粒、油滴少或不见,特有细胞少。制片与染色制片与染色 一、一、 制片制片 制备方法同血膜片,但速度要快,制备方法同血膜片,但速度要快,以防凝固。以防凝固。 二、染色二、染色 同血膜,瑞氏法同血膜,瑞氏法 三、镜检三、镜检 中幼粒1/2 晚幼粒-1/4 杆状核1/4最窄处1/3最宽处 分叶核(中幼、晚幼、杆状核、分叶核) 嗜碱粒细胞(早幼、中幼、晚幼、杆状核、分叶核)嗜酸性中幼粒细胞:胞体直径1520um。胞核与中性中幼粒细胞相似。胞质内充满粗大、均匀、排列紧密、有折光感的桔红色特异性嗜酸性颗粒。 细胞呈圆形或椭圆形,直径1016um。胞核明显凹陷
7、呈肾形,但其凹陷程度一般不超过假设核直径的一半。核染质粗糙呈粗块状,排列紧密。胞质量多,呈淡红色。内含嗜酸性颗粒。嗜酸性杆状核粒细胞:细胞呈圆形,直径1015um。胞核狭长,弯曲呈带状,两端钝圆。核染色质粗糙呈块状,染深紫红色。胞质中含特异性嗜酸性颗粒 嗜酸性分叶核粒细胞:胞体直径1116um。胞核多分为近似对称的两叶。胞质中充满密集粗大、大小均匀的桔红色嗜酸性颗粒。 嗜碱性中幼粒细胞:胞体直径1015um。胞核与上述细胞相似,但轮廓不清,染色质结构模糊。胞质内含数量不多、大小不一但较粗大、分布散乱的紫黑色特异性嗜碱性颗粒,颗粒也可覆盖在细胞核上。 嗜碱性晚幼粒细胞:细胞呈圆形或椭圆形,直径1
8、016um稍小。胞核明显凹陷呈肾形,但其凹陷程度一般不超过假设核直径的一半。核染质粗糙呈粗块状,排列紧密。胞质量多,呈淡红色。内含不同的特异性颗粒 嗜碱性杆状核粒细胞:细胞呈圆形,直径1015um。胞核狭长,弯曲呈带状,两端钝圆。核染色质粗糙呈块状,染深紫红色。胞质中含特异性嗜碱性颗粒 嗜碱性分叶核粒细胞:胞体直径1012um。胞核分叶不明显,或呈堆积状。胞质中有稀疏的大小不一、分布不均、呈紫黑色的嗜碱性颗粒,颗粒常覆盖在核上,致使核的轮廓和结构模糊不清。 原淋(Lymphoblast)幼淋(prolymphocyte)淋巴(lymphocyte) 大淋巴细胞 小淋巴细胞原淋巴细胞:细胞呈圆形
9、或椭圆形,直径1018um。胞核大,圆或椭圆形,稍偏位。核染色质细致,呈颗粒状,但较原粒细胞稍粗,着色较深,染色质在核膜内层及核仁周围有浓集现象,使核膜浓厚而清晰。核仁多为12个,小而清楚,呈淡蓝色或无色。胞质量少,呈透明天蓝色,不含颗粒。幼淋巴细胞:圆形或椭圆形,直径1016um。胞核圆形或椭圆形,有时可有浅的切迹。核染色质较致密粗糙,核仁模糊或消失。胞质量较少,淡蓝色,一般无颗粒,或可有数颗深紫红色嗜天青颗粒。 大淋巴细胞:呈圆形,直径1318um。胞核圆形或椭圆形,偏于一侧或着边。染色质常致密呈块状,排列均匀,深染呈深紫红色。胞质丰富,呈透明天蓝色,可有少量大而稀疏的嗜天青颗粒。 小淋巴
10、细胞:呈圆形或椭圆形,直径610um。胞核圆形或椭圆形,或有切迹,核着边,染色质粗糙致密呈大块状,染深紫红色。胞质量极少,仅在核的一侧见到少量淡蓝色胞质,有时几乎不见而似裸核,一般无颗粒。 原浆(plasmablast)幼浆(proplasmacyte)浆细胞(plasmacyte)原浆细胞:圆形或椭圆形,直径1520um。胞核圆形,占细胞的2/3以上,常偏位。核染色质呈粗颗粒网状,紫红色。核仁25个。胞质量多,呈灰蓝色,不透明,核的一侧可有半圆形淡染区,不含颗粒。 幼浆细胞:细胞多呈椭圆形,直径1216um。胞核圆形,占细胞的1/2,偏位。核染色质开始聚集,染深紫红色,可呈车轮状排列,核仁基
11、本消失。胞质量多,呈不透明灰蓝色,近核处有淡染区,有时可见空泡或少数嗜天青颗粒。浆细胞:细胞呈圆形或卵圆形,直径820um。胞核圆形,偏位。核染色质凝聚块,深染,排列呈车轮状。胞质丰富,呈不透明深蓝色或蓝紫色,核的一侧常有明显的淡染区。常可见小空泡,偶见少数嗜天青颗粒。 A.原单(monoblast)B.幼单(promonocyte)C.单核(monocyte)D.吞噬(maerophage)ABC原单核细胞:圆形或椭圆形,直径1525um。胞核较大,圆形或椭圆形。核染色质纤细疏松呈网状,染淡紫红色。核仁13个,大而清楚。胞质丰富,呈浅灰蓝色,半透明如毛玻璃样,边缘常不整齐,有时可有伪足突出,
12、不含颗粒。 幼单核细胞:圆形或不规则形,直径1525um。胞核圆形或不规则形,可有凹陷、切迹、扭曲或折叠。染色质较原单核细胞稍粗,但仍呈疏松丝网状,染淡紫红色。核仁模糊或消失。胞质量多,呈灰蓝色,边缘可有伪足突出,浆内可见许多细小、分布均匀的淡紫红色嗜天青颗粒。单核细胞:圆形或不规则形,直径1220um,边缘常见伪足突出。胞核形状不规则,常呈肾形、马蹄形、笔架形、“S”形等,并有明显扭曲折叠。染色质疏松细致,呈淡紫红色丝网状。胞质丰富,呈淡灰蓝色或淡粉红色,可见多数细小、分布均匀、细尘样淡紫红色颗粒。 原巨(megakaryoblast)幼巨(promegakaryocyte)颗粒巨(gran
13、ular megakaryocyte)产板巨(thrombacytogenous megakaryocyte)裸核(naked nucleous)原巨核细胞:细胞呈圆形或椭圆形,胞体较大,直径1530um。胞核大,占细胞的极大部分,呈圆形或椭圆形。染色质呈深紫红色,粗粒状,排列紧密。可见淡蓝色核仁23个,核仁大小不一,不清晰。胞质量较少,呈不透明深蓝色,边缘常有不规则突起。 幼巨核细胞:细胞呈圆形或不规则形,胞体明显增大,直径3050um。胞核开始有分叶,核形不规则并有重叠。染色质凝聚呈粗颗粒状或小块状,排列紧密。核仁模糊或消失。胞质量增多,呈蓝色或灰蓝色,近核处可出现淡蓝色或淡红色淡染区,可
14、有少量嗜天青颗粒。 颗粒型巨核细胞:胞体明显增大,直径5070um,甚至达100um,外形不规则。胞核明显增大,高度分叶,形态不规则,分叶常层叠呈堆集状。染色质粗糙,排列致密呈团块状,染深紫红色。胞质极丰富,呈淡紫红色,其内充满大量细小紫红色颗粒,有时可见边缘处颗粒聚集成簇,但周围无血小板形成。 产血小板型巨核细胞(成熟型巨核细胞):胞质内颗粒明显聚集成簇,有血小板形成,胞质周缘部分已裂解为血小板,使细胞边缘不完整,其内侧和外侧常有成簇的血小板出现。其余的特征均与颗粒型巨核细胞相同。巨核细胞裸核:产血小板型巨核细胞的胞质裂解成血小板完全脱落后,仅剩细胞核时,称为裸核。 A.网状细胞(retic
15、ulum cell)B.内皮细胞(endothelied cell)C.纤维细胞(fibrocyte)D.组织嗜碱细胞(tissul basophilic cell)E.成骨细胞(osteoblast)F.破骨细胞(osteoclast)G.退化细胞EDA吞噬细胞:单核细胞逸出血管进入组织后转变成吞噬细胞(原称组织细胞、巨噬细胞)。胞体大小变异甚大,直径1550um,有时可至80um。细胞外形呈圆形、椭圆形或不规则形。胞核呈圆形、椭圆形、肾形或不规则形,偏位。核染色质较粗、深染,或疏松、淡染,呈网状结构。可见核仁或无核仁。胞质丰富,呈不透明灰蓝色或蓝色,不含颗粒或有少量嗜天青嗜天青颗粒,常见有
16、小空泡。骨髓细胞学检查的方法骨髓细胞学检查的方法 1低倍镜观察低倍镜观察 判断取材、涂片及染色是否满意;判断取材、涂片及染色是否满意;估计全估计全片巨核细胞数;片巨核细胞数; 观察有无体积较大或成团观察有无体积较大或成团的特殊细胞的特殊细胞 此类细胞多分布在骨髓涂片边此类细胞多分布在骨髓涂片边缘和尾部,如:转移癌细胞、戈谢细胞、尼缘和尾部,如:转移癌细胞、戈谢细胞、尼曼曼-匹克细胞、匹克细胞、Reed-Sternberg细胞、海蓝细胞、海蓝组织细胞等。在观察中须以油镜确证;组织细胞等。在观察中须以油镜确证; 判断有核细胞增生程度判断有核细胞增生程度 选择细胞分布均匀选择细胞分布均匀处,根据骨髓
17、片中有核细胞的密度或有核细处,根据骨髓片中有核细胞的密度或有核细胞与成熟红细胞的比例来估计骨髓有核细胞胞与成熟红细胞的比例来估计骨髓有核细胞的增生程度。的增生程度。 骨髓增生程度分级 有核细胞:成熟红细胞有核细胞占全部细胞百分率有核细胞/1000个成熟红细胞常见原因范围平均范围平均极度活跃1:0.52.01:150238.96521.07351.96白血病明显活跃1:5121:101043.78230.77114.51增生贫血增生活跃1.16321:20111021.5363.6735.34正常骨髓增生减低1:35701:500.517.4119.6110.53慢性再障极度减低1:3001:2
18、00100/HP2.油镜观察油镜观察 骨髓细胞分类骨髓细胞分类 因粒细胞、单核细胞因粒细胞、单核细胞及体积较大的细胞大多分布在骨髓片及体积较大的细胞大多分布在骨髓片尾部或上下边缘,淋巴细胞多在体部。尾部或上下边缘,淋巴细胞多在体部。计数时,应从体尾交界处开始,迂回计数时,应从体尾交界处开始,迂回向尾端移动涂片。如有核细胞特别多,向尾端移动涂片。如有核细胞特别多,可可选择涂片染色最好的部位分类计数选择涂片染色最好的部位分类计数200个或个或500个有核细胞个有核细胞(不包括分裂(不包括分裂象、巨核和破碎细胞),按各细胞的象、巨核和破碎细胞),按各细胞的种类、发育阶段分别计数;种类、发育阶段分别计
19、数;各细胞各细胞系形态学观察。系形态学观察。(2)观察内容观察内容 1.粒细胞系统:粒细胞系统:增生程度、占有核细增生程度、占有核细胞的百分比、各阶段细胞的比例,各胞的百分比、各阶段细胞的比例,各期粒细胞大小、形态,核染色质结构、期粒细胞大小、形态,核染色质结构、核仁(包括大小、数量、颜色、清晰核仁(包括大小、数量、颜色、清晰度)、核形,胞质量、浆色、颗粒等,度)、核形,胞质量、浆色、颗粒等,有无分叶过多或过少、双核、核浆发有无分叶过多或过少、双核、核浆发育不平衡、中毒颗粒、杜勒氏小体、育不平衡、中毒颗粒、杜勒氏小体、空泡和棒状小体等。空泡和棒状小体等。 2.红细胞系统:红细胞系统:增生程度、
20、占有核细增生程度、占有核细胞的百分比、各阶段细胞的比例,幼胞的百分比、各阶段细胞的比例,幼红细胞大小、形态,核染色质结构、红细胞大小、形态,核染色质结构、核仁、核形,胞质量、浆色,有无核核仁、核形,胞质量、浆色,有无核畸形核、多核、核碎裂、核固缩、核畸形核、多核、核碎裂、核固缩、核浆发育不平衡、幼红细胞岛、豪周小浆发育不平衡、幼红细胞岛、豪周小体和嗜碱性点彩等。同时观察成熟红体和嗜碱性点彩等。同时观察成熟红细胞的大小、形态、颜色、中央淡染细胞的大小、形态、颜色、中央淡染区,有无豪周氏小体、卡玻氏环、嗜区,有无豪周氏小体、卡玻氏环、嗜碱性点彩红细胞、多色性红细胞、大碱性点彩红细胞、多色性红细胞、
21、大红细胞等其他异常红细胞。红细胞等其他异常红细胞。 3.单核细胞系统:单核细胞系统:占有核细胞的百分占有核细胞的百分比、各阶段细胞的比例,细胞大小、比、各阶段细胞的比例,细胞大小、形态,核染色质结构、核仁、核形,形态,核染色质结构、核仁、核形,胞质量、浆色、颗粒,有无原始、幼胞质量、浆色、颗粒,有无原始、幼稚细胞和有无异常结构等。稚细胞和有无异常结构等。 4)淋巴细胞系统:)淋巴细胞系统:同上同上 5)浆细胞系统:)浆细胞系统: 同上同上 6)巨核细胞系统:)巨核细胞系统:全片巨核细胞数量、分全片巨核细胞数量、分类一定数量巨核细胞中各阶段细胞的比例,类一定数量巨核细胞中各阶段细胞的比例,巨核细
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