芳酸类药物的分析ppt课件.ppt

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1、第五章第五章 芳酸类药物的分析芳酸类药物的分析 第一节第一节 结构与性质结构与性质 第二节第二节 鉴别试验鉴别试验 第三节第三节 特殊杂质检查特殊杂质检查 第四节第四节 含量测定含量测定NH2R NH2脂肪胺芳 胺R COOH羧 酸COOH芳 酸常见的芳酸类药物 (可分3类）COOHOH水杨酸 （pKa2.98）水杨酸类水杨酸类 COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）解热镇痛药解热镇痛药消毒药消毒药COONaOHNH2对氨基水杨酸钠水杨酸类水杨酸类 COOOH水杨酸二乙胺(C2H5)2NH2+苯甲酸（pKa4.20）COOH苯甲酸钠COONa苯甲酸类苯甲酸类防腐药防腐药NH(CH2)3

2、CH3H2NO2SCOOHO布美他尼布美他尼苯甲酸类苯甲酸类布洛芬布洛芬其他芳酸类其他芳酸类CH3CH CH3CHCH2CH3COOH第一节第一节 结构与性质结构与性质 一、结构分析结构分析包括：芳酸、芳酸盐、共同点：苯环、羧基共同点：苯环、羧基 不同点：不同的取代基（如酚羟基、不同点：不同的取代基（如酚羟基、芳伯氨基等）芳伯氨基等） 二、性质性质 （一）物理性质 （1 1）固体）固体 具有一定的熔点具有一定的熔点 （2）溶解性 芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。 游离芳酸类兽药几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；（二）化学性质 1. 芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在36之间，属中等强

3、度的酸或弱酸； X、NO2等吸电子取代基存在使酸性增强酸性增强 CH3、NH2 、OH等斥电子取等斥电子取代基存在使酸性减弱代基存在使酸性减弱 邻位取代间位、对位取代，尤其是邻位取代了酚羟基，由于形成分子内氢健，酸性大为增强 （二）化学性质 2. 芳酸碱金属盐易溶于水，水解，溶液呈碱性，但碱性太弱，所以其含量测定方法为双相滴定法或非水碱量法。 （二）化学性质 4. 取代芳酸类药物可利用其取代基的性质进行鉴别和含量测定。如如: 具有酚羟基的药物可用FeCl3反应鉴别； 具芳伯氨基的药物可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。 （二）化学性质 第二节第二节 鉴别试验鉴别试验 1、FeCl3

4、反应反应 具酚羟基或水解后能产生酚羟基具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物的药物 紫堇色铁配位化合物6pH43 FeClOHArOHR 水杨酸水杨酸( (紫堇色紫堇色) )对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠( (紫红色紫红色) )水杨酸二乙胺水杨酸二乙胺对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 ( (蓝紫色蓝紫色) )直 接 FeCl3 反应 ：酚酚羟羟基基鉴别鉴别直 接 FeCl3反应反应 ：芳芳羧羧基基COOH+FeCl3 +2OH- 加加稀盐酸稀盐酸碱式苯甲酸铁盐碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀的赭色沉淀 白白 色色鉴别鉴别 间 接 FeCl3反应 ：水杨酸阿司匹林 阿司匹林阿司匹林 Ch.P（2000）鉴别鉴别 取本

5、品约取本品约0.1g，加水，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，滴，即显紫堇色。即显紫堇色。鉴别鉴别COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）2、重氮化、重氮化偶合反应偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物 ArNH2HClNaNO2重氮盐橙黄猩红色萘酚OH-NH2R 鉴别鉴别重重氮氮化化HONHCOCH3对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚（扑热息痛）（扑热息痛）对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠 直接： 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 间接：COONaOHNH2对氨基水杨酸钠鉴别鉴别3、水解反应、水解反应醋酸臭气）水杨酸（

6、白色醋酸钠水杨酸钠阿司匹林硫酸 CONa32水杨酸阿司匹林 COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）COOH+FeCl3 +2OH- 鉴别鉴别水煮水煮4 4、溴代反应、溴代反应COONaOHNH2对氨基水杨酸钠OHNH2BrBrBr+ 3Br2+ 3HBr+CO2鉴别鉴别分解产物的反应苯甲酸苯甲酸钠42SOH5、特殊反应、特殊反应鉴别鉴别管壁凝结成白色升华物管壁凝结成白色升华物 UV TLCHPLC鉴别鉴别CH3CH CH3CHCH2CH3COOHUV max: 265nm、273nm TLC仪器法仪器法鉴别鉴别仪器法仪器法COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49） O-H 3100

7、2500 cm-1 酯酯 c=o 1760 cm-1 羧基羧基c=o 1690 cm-1 芳环芳环c-c 1610, 1485 cm-1 芳环邻二取代芳环邻二取代C-H 750 cm-1 O-H 920 cm-1IR 3000 2000 1800 1600 1000 800第三节第三节 特殊杂质检查特殊杂质检查 一、水杨酸中苯酚的检查 1. 杂质来源杂质来源 原料残存（生产过程生产过程中原料反应不完全） 特杂特杂2. 检查方法标准对照法 原理 苯酚在碱性条件下可被铁氰化钾氧化为苯醌，进一步与4-氨基安替比林缩合 有色产物（CHCl3萃取比色) 限 量 ： 0.10%（USP用用 HPLC 检查

8、检查 ）特杂特杂 二、阿司匹林中水杨酸的检查 原料残存（生产过程生产过程中乙酰化不完全） 水解产生（贮存过程贮存过程中水解产生） 1. 杂质来源杂质来源（ 有毒、氧化为醌有色物质）有毒、氧化为醌有色物质）2. 检查方法 标准对照法 反应原理：酚羟基可直接与高铁盐Fe3+反应 限 量 原料：0.1%； 阿司匹林片：0.3%； 阿司匹林肠溶片：1.5%； 阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）法） 特杂特杂其他杂质：其他杂质：乙酰水杨酸酐（乙酰水杨酸酐（ASAN）乙酰水杨酰水杨酸（乙酰水杨酰水杨酸（ASSA）水杨酰水杨酸（水杨酰水杨酸（SSA） 特杂特杂第四节第四节 含量测定含量测定一、中和法一、中和

9、法1. 直接滴定法 pKa 36终点滴定酚酞中性乙醇 NaOH solSSolution终点滴定酚酞中性乙醇 NaOH solSSample终点滴定酚酞中性乙醇 NaOH solS阿司匹林阿司匹林 Ch . P（2000） 取本品约取本品约0.4g，精密称定，加中，精密称定，加中性乙醇性乙醇（对酚酞指示液显中性）（对酚酞指示液显中性）20ml，溶，溶解后，加酚酞指示液解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化滴，用氢氧化钠滴定液（钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。）滴定。 每每lml的氢氧化钠滴定液（的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当）相当于于18.02mg的的C9H8O4。含量含量COOHOCO

10、CH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O含量含量醇中醇中阿司匹林阿司匹林直接滴定法酚酞酚酞（1）测定方法及计算 Ka=3.2710-4 ；反应摩尔比为1 1 （2 2）讨论）讨论 含量含量 中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯键水解。“中性”是对中和法所用的指示剂而言 优点：简便、快速 缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定） 酸性杂质干扰（如水杨酸） 适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药合格原料药的含量测定含量含量2. 2. 水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法 含量含量酯的一般含量测定方法酯的一般含量测定方法USP（25）方法：取本品约）方法：取本品约1.5g，精密，精密

11、称定，加入称定，加入NaOH滴定液（滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸，混合，缓缓煮沸10min，放冷，放冷，加酚酞指示液，加酚酞指示液，用用H2SO4滴定液滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的）滴定剩余的NaOH ，并，并将滴定结果用空白试验校正。将滴定结果用空白试验校正。每每1ml的的NaOH滴定液（滴定液（0.5mol/l）相当于）相当于45.04mg的的C9H8O4。 COOHOCOCH3+ 2NaOHCOONaOH+CH3COONa2NaOH（过量）H2SO4 Na2SO42H2O剩余滴定：水解：含量含量 反应摩尔比为反应摩尔比为1 2 优点：优点： 消除了酯键

12、水解的干扰消除了酯键水解的干扰缺点：缺点： 酸性杂质干扰酸性杂质干扰尚存在尚存在水解后水解后剩余滴定法剩余滴定法含量含量每每1 ml的的NaOH滴定液（滴定液（0.5 mol/l）相当于）相当于 45.04 mg 的的C9H8O4 3. 3. 两步滴定法两步滴定法 如阿司匹林片的测定：如阿司匹林片的测定：阿司匹林片、阿司匹林肠溶片含量含量 取本品取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，

13、加酚酞指示液摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加滴，滴加NaOH滴定液（滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，）至溶液显粉红色，再精密加再精密加NaOH滴定液（滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定）滴定，并将，并将滴定的结果用空白试验校正。滴定的结果用空白试验校正。每每lml的的NaOH滴滴定液（定液（0.1mo1/L）相当于）相当于18.02mg的的C9H8O4。 COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O第第一一步步 中中

14、和和酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸+NaOH钠盐+H2O含量含量两步滴定法两步滴定法第二步 水解后剩余滴定 COONaOCOCH3+NaOHCOONaOH+CH3COONa(定量过量）含量含量两步滴定法两步滴定法2NaOH（过量）H2SO4 Na2SO42H2O 反应摩尔比为1 1剩余滴定：含量含量降低了降低了 酯键水解的干扰酯键水解的干扰本法消除了酸性杂质的干扰，本法消除了酸性杂质的干扰，片剂含量测定结果的计算片剂含量测定结果的计算 %100/%100%片）标示量（）平均片重（）供试品重（）测得量（标示量每片含量标示量gggg含量含量%100%0标示量平均片重）（标示量smFVVT剩余滴定： 4.

15、双相滴定法 芳酸碱金属盐 如苯甲酸钠 Ch.P(2000)COONa+HClCOOH+NaCl水乙醚溶剂：水乙醚 COOHOCOCH3+ 2NaOHCOONaOH+CH3COONa 取本品取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，精密称定，置分液漏斗中，加水加水25m1、乙醚、乙醚50ml及甲基红指示液及甲基红指示液2滴，用滴，用HCl滴定液（滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙加乙醚醚20m1，继续用，继续用

16、HCl滴定液滴定液(0.5mo1/L)滴定，滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每。每1ml的的HCl滴定液（滴定液（0.5mol/L）相当于）相当于72.06mg的的C7H5NaO2。 CO ONa+HClCO OH+NaCl水乙醚是：萃取反应生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底滴定中要强力振摇。随着滴定不断进行，苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。优点：消除了反应产物的干扰优点：消除了反应产物的干扰二、亚硝酸钠滴定法二、亚硝酸钠滴定法 Cl-+22+2+ArNH2 NaNO2 HCl ArNN NaCl H2O含量含量 具芳伯

17、氨基或潜在芳伯氨基（芳具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物酰氨基水解或硝基还原）的药物1. 直接紫外分光光度法直接紫外分光光度法 *注射液注射液 Ch.P（2000）三、紫外分光光度法三、紫外分光光度法含量含量2. 柱分配色谱柱分配色谱紫外分光光度法紫外分光光度法水杨酸的限量测定水杨酸的限量测定 固定相：固定相：FeCl3, SA保留，冰醋酸洗脱，保留，冰醋酸洗脱，306nm测水杨酸的量测水杨酸的量USP（25）阿司匹林胶囊）阿司匹林胶囊 可同时定量可同时定量测定阿司匹林和水杨酸测定阿司匹林和水杨酸 1. 阿司匹林栓剂阿司匹林栓剂 Ch.P（2000） 离子抑制离子抑制 色

18、谱法色谱法 内标法定量内标法定量 2. 对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠 USP（25） 离子对反相离子对反相 HPLC 内标法定量内标法定量四、四、HPLC 3. 酚磺乙胺酚磺乙胺 Ch.P（2000） 正相正相 HPLC 内标法定量内标法定量*鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试鉴别水杨酸及其盐类，最常用的试液是（液是（C）A. 碘化钾 B. 碘化汞钾C. 三氯化铁三氯化铁 D. 硫酸亚铁E. 亚铁氰化钾 *测定阿司匹林片和栓中药物的含量测定阿司匹林片和栓中药物的含量可采用的方法是（可采用的方法是（BC）A. 重量法B. 酸碱滴定法酸碱滴定法C. 高效液相色谱法高效液相色谱法 D. 络合滴定法E.

19、高锰酸钾法 * 两步滴定法测定阿司匹林片的含两步滴定法测定阿司匹林片的含量时，每量时，每1ml氢氧化钠溶液（氢氧化钠溶液（0.1mol/L）相当于阿司匹林（分子量相当于阿司匹林（分子量=180.16）的）的量是（量是（A）A. 18.02mg B. 180.2mgC. 90.08mg D. 45.04mgE. 450.0mg 反应摩尔比为1 1mlmgLgmolgLmolncMT02.1802.18116.1801 . 0T滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数c滴定液浓度，mol/LM被测物的摩尔质量，g/moln1mol 样品消耗滴定液的摩尔数，常用反应摩尔比体现，即反应摩尔比 为1

20、 n*苯甲酸钠的含量测定，苯甲酸钠的含量测定，Ch.P（2000）采用双相滴定法，其所用）采用双相滴定法，其所用的溶剂体系为（的溶剂体系为（D）A. 水乙醇 B. 水冰醋酸C. 水氯仿 D. 水水乙醚乙醚E. 水丙酮 * 双相滴定法可适用的药物为（双相滴定法可适用的药物为（E）A. 阿司匹林B. 对乙酰氨基酚C. 水杨酸D. 苯甲酸E. 苯甲酸钠苯甲酸钠 *含量测定方法(Ch.P 2000）为:A. 直接中和滴定法直接中和滴定法 B. 两步滴定法两步滴定法C. 两者均可两者均可 D. 两者均不可两者均不可阿司匹林片（B）阿司匹林原料药（A）阿司匹林栓剂（D）阿司匹林肠溶剂（B） A两步酸碱滴定

21、法两步酸碱滴定法 B直接酸碱滴定法直接酸碱滴定法C两者皆是两者皆是 D两者皆不是两者皆不是1. 苯甲酸钠的测定（苯甲酸钠的测定（D）2. 盐酸的测定（盐酸的测定（B）3. 酸碱滴定法（酸碱滴定法（C）4. 阿司匹林片的测定（阿司匹林片的测定（A） * 阿司匹林加碳酸钠试液加热后，阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是（淀应是（C）A. 苯酚 B. 乙酰水杨酸C. 水杨酸水杨酸 D. 醋酸钠 E. 醋酸苯酯 * 水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的色产物的反应，要求溶液的pH值是值是（D）A.

22、 pH10.0 B. pH2.0C. pH78 D. pH46 E. pH2.00.1 * 两步滴定法测定阿司匹林片或阿两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是（作用是（B）A. 测定阿司匹林含量B. 消除共存酸性物质的干扰消除共存酸性物质的干扰C. 使阿司匹林反应完全D. 便于观测终点 E. 有利于第二步滴定 * 能用与能用与FeC13试液反应产生现象鉴试液反应产生现象鉴别的药物有（别的药物有（ABC） A苯甲酸钠苯甲酸钠 B水杨酸水杨酸 C对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 D氢化可的松 E丙酸睾酮 * 采用双相滴定法测定苯甲酸钠含采用双相滴

23、定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是（量时，加入乙醚的目的是（A） A. 防止反应产物的干扰防止反应产物的干扰 B. 乙醚层在水上面，防止样品被氧化 C. 消除酸碱性杂质的干扰 D. 防止样品水解 E. 以上都不对 * 采用双步滴定法测定阿司匹林制采用双步滴定法测定阿司匹林制剂含量时，被测组分与标准溶液的反剂含量时，被测组分与标准溶液的反应摩尔比为（应摩尔比为（C） A. 2:1 B. 1:2 C. 1:1 D. 3:1 E. 以上都不对 * 区别水杨酸和苯甲酸钠，最常用区别水杨酸和苯甲酸钠，最常用的试液是（的试液是（C）A. 碘化钾B. 碘化汞钾C. 三氯化铁三氯化铁 D. 硫酸亚铁 E

24、. 亚铁氰化钾 * 在中性条件下，可与三氯化铁试在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成赭色沉淀的药物是（液反应，生成赭色沉淀的药物是（D）A. 水杨酸钠B. 对氨基水杨酸钠C. 乙酰水杨酸D. 苯甲酸钠苯甲酸钠 E. 扑热息痛 * 用直接滴定法测定阿司匹林含量用直接滴定法测定阿司匹林含量（ABE） A. 反应摩尔比为反应摩尔比为1：1 B. 在中性乙醇溶液中滴定在中性乙醇溶液中滴定 C. 用盐酸滴定液滴定 D. 以中性红为指示剂 E. 滴定时应在不断振摇下稍快进行滴定时应在不断振摇下稍快进行 第六章第六章 巴比妥类药物的分析巴比妥类药物的分析（Analysis of Barbitals Dr

25、ugs）一、化学结构与性质一、化学结构与性质 二、鉴别试验二、鉴别试验 三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查 四、含量测定四、含量测定 巴比妥类药物是一类临床常用巴比妥类药物是一类临床常用的的催眠镇静药催眠镇静药。由于这类药物应。由于这类药物应用广泛，容易因不合理使用而引用广泛，容易因不合理使用而引起中毒，因此，需要对本类药物起中毒，因此，需要对本类药物的原料、制剂进行分析，有时也的原料、制剂进行分析，有时也需要对生物样品中微量巴比妥类需要对生物样品中微量巴比妥类药物进行分析。药物进行分析。 第六章第六章第一节第一节 结构与性质结构与性质(The structure and properties)

26、 一、结构分析 CCCONONC OR1R2R3543216HH结结构构通通式式基本基本第六章第六章5,5-取代的巴比妥类药物 CCCONONC OH5C2H5C2HH巴比妥5CCCONONC OH5C2HH苯巴比妥5区别各种巴比妥类药物 环状丙二酰脲、1,3-二酰亚胺基团 决定巴比妥类药物的特性 1. 环状母核部分2. 取代基部分二、性质 (Physical and chemical properties) （一）物理性质 1. 白色结晶或结晶性粉未，具有固定的熔点 2. 游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于有机溶剂。 （二） 化学性质 巴比妥类

27、药物分子结构中都有1,3-二酰亚胺基团，能发生酮式和烯醇式的互变异构，在水溶液中可以发生二级电离。因此，本类药物的水溶液显弱酸性（pKa为7.3-8.4），可与强碱形成水溶性的盐类。 1. 弱酸性弱酸性CCCONONC OHR1R2HCCCONONC OR1R2HHCCCONONC OR1R2HCCCONONC OR1R2+ H+ H+pK1=8+ H+ H+pK2=12弱酸性与强碱的成盐反应：与强碱的成盐反应：CO NHCNCOOHR1R2+ NaOHCO NHCNCOONaR1R2+ H2O弱酸性2. 水解反应水解反应巴比妥类药物 + NaOHNH3+ 2Na2CO3COONaR1R2+2

28、NH3 CONHCNCOOHR1R2+ 5NaOH红色石蕊变蓝红色石蕊变蓝3. 与重金属离子反应与重金属离子反应二银盐白色可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，3323AgNO CONa AgNO55（1） 与银盐的反应与银盐的反应 二银盐白色可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，3323AgNO CONa AgNO55二银盐白色可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，3323AgNO CONa AgNO55二银盐白色可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，3323AgNO CONa AgNO55二银盐白色可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，3323AgNO CONa AgNO55二银盐白色可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，3

29、323AgNO CONa AgNO55CONCNCOCR1R2ONaAg+NaHCO3NaNO3+CONHCNCOCR1R2ONa+ AgNO3+ Na2CO3NaNO3+CONCNCOCR1R2OAgAgAgNO3+CONCNCOCR1R2ONaAgAgNO3+（2） 与铜盐的反应与铜盐的反应 巴比妥类药物 +紫色或紫色 铜吡啶试液吡啶巴比妥类药物 +紫色或紫色 铜吡啶试液吡啶与重金属离子反应与重金属离子反应CR1R2COCONHNHCO水吡啶CR1R2COCONNHC OHCR1R2COCONNHCO-+H+部分离子化N+CuSO42NNCu2+SO42-CR1R2COCONNHC O-2

30、+NNCu2+CR1R2COCONNHCOCR1R2COCONNHCOCuNN紫色紫色配位化合物配位化合物（3） 与钴盐的反应与钴盐的反应紫堇色钴盐巴比妥类药物碱性 无水：无水： 所用试剂均应不含水分所用试剂均应不含水分反应条件：反应条件：碱性：碱性： 异丙胺异丙胺与重金属离子反应与重金属离子反应CO NHCONHCOR1R22+Co2+4(CH3)2CHNH2+CoR2R1CONHCONCOR2R1NCONHCOCONHCH(CH3)2NHCH(CH3)2(CH3)2CHN+H32紫堇色钴盐巴比妥类药物碱性 与重金属离子反应与重金属离子反应（4） 与汞盐的反应与汞盐的反应巴比妥类药物巴比妥类

31、药物+汞盐汞盐白色白色 （可溶于氨试液）（可溶于氨试液）与重金属离子反应与重金属离子反应4. 4. 与香草醛（与香草醛（vanillinvanillin）的反应）的反应 棕红色香草醛巴比妥类药物浓硫酸 芳环取代基的反应芳环取代基的反应 5. 取代基的反应取代基的反应 a. 与NaNO2H2SO4反应 苯巴比妥与NaNO2H2SO4反应生成橙黄色橙红色橙红色 苯巴比妥与甲醛H2SO4反应生成 玫瑰红色环玫瑰红色环 b. 与甲醛H2SO4反应6. 6. 紫外吸收光谱特征紫外吸收光谱特征A. H2SO4溶液溶液(0.05mol/L)B. pH9.9缓冲溶液缓冲溶液C. NaOH溶液溶液(0.1mol

32、/L) (pH 13)巴比妥类药物的紫外吸收光谱巴比妥类药物的紫外吸收光谱Anm与电离程度有关 5,5-5,5-取代的巴比妥类药物取代的巴比妥类药物 在pH=2的酸性溶液中，因不电离，几乎无明显的紫外吸收。 在pH=10的碱性溶液中，发生一级电离，于240 nm处有最大吸收。 在pH=13的强碱性溶液中，发生二级电离，最大吸收红移至255 nm处。 酰胺基团酰胺基团 取代基取代基7. IR吸收光谱特征吸收光谱特征 取巴比妥类药物取巴比妥类药物50g，点于硅胶，点于硅胶GF254薄层板上，以氯仿薄层板上，以氯仿-丙酮（丙酮（4：1）为展开剂）为展开剂展开，薄层板干燥后，喷洒展开，薄层板干燥后，喷

33、洒2%的的HgCl2乙乙醇溶液，随之再喷洒醇溶液，随之再喷洒2%的的1，5-二苯卡巴二苯卡巴腙的乙醇溶液，在紫色背景下可观察到巴腙的乙醇溶液，在紫色背景下可观察到巴比妥类药物的白色斑点。比妥类药物的白色斑点。8. TLC 特征特征 第二节第二节 鉴别试验鉴别试验 (Test of identification)苯巴比妥 Ch.P（2000） 【鉴别】 （1）本品显丙二酰脲类的鉴别反应一、丙二酰脲类反应 取供试品约取供试品约0.1g0.1g，加碳酸钠，加碳酸钠试液试液1ml1ml与水与水10m110m1，振摇，振摇2min2min，滤，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，过，滤液中逐滴加入硝酸银试液

34、，即白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；即白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，白色继续滴加过量的硝酸银试液，白色沉淀不再溶解。沉淀不再溶解。 1. 与银盐的反应与银盐的反应 取供试品约取供试品约50mg50mg，加吡啶溶液，加吡啶溶液（110110）5m15m1，溶解后，加铜吡啶，溶解后，加铜吡啶试液（试液（硫酸铜硫酸铜4g4g，水，水90ml90ml溶解后，溶解后，加吡啶加吡啶30m130m1，即得，即得）1m11m1，即显紫，即显紫色或生成紫色沉淀。色或生成紫色沉淀。2. 与铜盐的反应与铜盐的反应 巴比妥类的钠盐酸 游离巴比妥类药物 过滤 洗涤 干燥 测熔点 二、熔点测定及衍生物

35、熔点测定二、熔点测定及衍生物熔点测定 1. 熔点测定熔点测定 取本品约取本品约0.5 0.5 g g，加水，加水5 ml5 ml溶溶解后，加稍过量稀盐酸，即析出解后，加稍过量稀盐酸，即析出白色结晶性沉淀，滤过；沉淀用白色结晶性沉淀，滤过；沉淀用水洗净，在水洗净，在105105干燥后，依法测干燥后，依法测定，熔点为定，熔点为174174- -178178。苯巴比妥钠的鉴别苯巴比妥钠的鉴别 Ch.P（2000） 苯巴比妥钠 Ch.P（2000） 【鉴别】 三、钠盐的鉴别反应三、钠盐的鉴别反应本品显钠盐的鉴别反应钠盐的鉴别反应钠盐的鉴别反应 2. 与醋酸氧铀锌反应 取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试

36、液，即生成黄色1.焰色反应 取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色 苯巴比妥 Ch.P（2000）【鉴别】 取本品约10 mg，加硫酸2滴与亚硝酸钠约5 mg，混合，即显橙黄色，随即转橙红色. 芳环取代基的反应四、取代基的反应四、取代基的反应 （3）取本品约50 mg，置试管中，加甲醛试液1 ml，加热煮沸，冷却，沿管壁缓缓加硫酸0.5 ml，使成两液层，置水浴中加热。界面显玫瑰红色甲醛硫酸的反应与【鉴别】苯巴比妥 异戊巴比妥、巴比妥、异戊巴比妥、巴比妥、 取异戊取异戊巴比妥或巴比妥巴比妥或巴比妥0.2 g，加氢氧化，加氢氧化钠试液钠试液10 m1，加热煮沸，则产生

37、，加热煮沸，则产生具氨臭的气体。具氨臭的气体。五、水解反应五、水解反应 戊巴比妥戊巴比妥 于瓷盘中放入戊巴比妥于瓷盘中放入戊巴比妥10 10 mgmg和香草醛和香草醛10 10 mgmg，加浓硫酸，加浓硫酸0.15 0.15 m1m1，混合后，放在水浴上加热混合后，放在水浴上加热30 30 s s，即，即产生棕红色。放冷，加产生棕红色。放冷，加9696的乙醇的乙醇0.5 0.5 m1m1，颜色则转变为暗蓝色。，颜色则转变为暗蓝色。六、与香草醛的反应六、与香草醛的反应七、紫外吸收光谱特征七、紫外吸收光谱特征 1. 1. 对照品对照法；对照品对照法； 2. 2. 规定吸收波长法；规定吸收波长法；

38、3. 3. 规定吸收波长和相应的吸收度法；规定吸收波长和相应的吸收度法； 4. 4. 规定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸收系数法； 5. 5. 规定吸收波长和吸收度比值法。规定吸收波长和吸收度比值法。 紫外光谱鉴别常用的方法：紫外光谱鉴别常用的方法：【鉴别】 八、红外光谱法八、红外光谱法 试验药品的红外光吸收图谱与试验药品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集对照的图谱（光谱集*图）一致。图）一致。TLC： 一般采用对照品（或标准品）一般采用对照品（或标准品）比较法，要求供试品斑点的比较法，要求供试品斑点的Rf 值值应与对照品斑点一致。应与对照品斑点一致。九、色谱行为特征九、色谱行为特征

39、TLC、GC、HPLC 十、显微结晶鉴别十、显微结晶鉴别特色鉴别反应特色鉴别反应 巴比妥：巴比妥： 长方形长方形 苯巴比妥：苯巴比妥： 球形球形花瓣状花瓣状1 1药物本身的晶形药物本身的晶形 巴比妥巴比妥 铜吡啶试液铜吡啶试液 十字形紫色结晶十字形紫色结晶 苯巴比妥苯巴比妥 铜吡啶试液铜吡啶试液 细细小不规则或似菱形的浅紫色结晶小不规则或似菱形的浅紫色结晶 2 2反应产物的晶形反应产物的晶形 用碱滴定液测定酸类物质的中和用碱滴定液测定酸类物质的中和法称为法称为酸量法酸量法 用酸滴定液测定碱类物质的中和用酸滴定液测定碱类物质的中和法称为法称为碱量法碱量法 第四节第四节 含量测定含量测定 (Ass

40、ay) 一、酸量法一、酸量法1. 在水醇混合溶剂中的滴定法 弱酸性 pKa 7.38.4 麝香草酚酞NaOH淡蓝色淡蓝色水醇溶溶 解解苯巴比妥苯巴比妥 取本品约取本品约0.5g0.5g，精密称定，加乙醇，精密称定，加乙醇20m120m1溶解后，加麝香草酚酞指示液溶解后，加麝香草酚酞指示液6 6滴，滴，用氢氧化钠滴定液（用氢氧化钠滴定液（0.1 mo1/L0.1 mo1/L）滴定，）滴定，并将滴定结果用空白试验校正，即得。并将滴定结果用空白试验校正，即得。每每l mll ml氢氧化钠滴定液（氢氧化钠滴定液（0.1 mol/L0.1 mol/L）相当于相当于22.63 22.63 mgmg的的C

41、C1111H H1818N N2 2O O3 3。 苯巴比妥苯巴比妥的含量测定的含量测定 原料药：直接滴定法（空白校正） %100)(0smFVVT百分含量T滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数 V滴定时，供试品消耗滴定液的体积（ml） V0滴定时，空白消耗滴定液的体积（ml）ms供试品的质量 F浓度校正因子 标准实测ccF 溶溶 剂剂：二甲基甲酰胺：二甲基甲酰胺 滴定剂滴定剂：甲醇钠（钾）：甲醇钠（钾） 指示剂指示剂：麝香草酚蓝：麝香草酚蓝 2. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 终点指示终点指示：电位法指示（Ag电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极）自身指示 二、银量法二、银量法1.

42、1.原原 理：理：反应摩尔比（反应摩尔比（1111）溶剂系统溶剂系统：甲醇+3%无水碳酸钠含量含量 苯巴比妥：苯巴比妥： 取本品约取本品约0.2 g0.2 g，精密称定，加甲，精密称定，加甲醇醇40 ml40 ml使溶解，再加新制的使溶解，再加新制的3 3无水无水碳酸钠溶液碳酸钠溶液15 m115 m1，照电位滴定法，用，照电位滴定法，用硝酸银滴定液（硝酸银滴定液（0.1 mol/L0.1 mol/L）滴定。每）滴定。每1 ml 1 ml 硝酸银滴定液（硝酸银滴定液（0.1 mo1/L0.1 mo1/L）相）相当于当于23.22 23.22 mgmg的的C C1212H H1212N N2 2

43、O O3 3。 2. 测定方法与计算测定方法与计算含量含量原料药：直接滴定法 %100smTVF百分含量含量含量3. 注意事项注意事项（1 1）无水碳酸钠应新鲜配制）无水碳酸钠应新鲜配制（2 2）AgNOAgNO3 3滴定液应新鲜配制滴定液应新鲜配制（3 3）银电极使用前应进行处理）银电极使用前应进行处理含量含量 凡取代基中含有双键的巴比妥类凡取代基中含有双键的巴比妥类药物，其不饱和键可与溴定量地发生药物，其不饱和键可与溴定量地发生加成反应，故可采用溴量法进行测定。加成反应，故可采用溴量法进行测定。 如司可巴比妥钠及其胶囊的测定原理如司可巴比妥钠及其胶囊的测定原理为：为： 三、溴量法三、溴量法

44、1. 原理原理 含量含量I22Na2S2O32NaINa2S4O6KBrO35KBr6HCl3Br26KCl3H2O +Br2（定量过量）CO NHCNCOCHCH2CH2CH3(CH2)2CHCH3ONaCO NHCNCOCHCH2CH2CH3(CH2)2CHCH3ONaBrBrBr22KI2KBrI2 取溴酸钾3.0 g与溴化钾15 g，加水适量使溶解成1000 ml，摇匀。溴滴定液（0.1 mol/L）的配制：反应摩尔比反应摩尔比1 2含量含量司可巴比妥钠司可巴比妥钠 Ch.P（2000）：）： 取本品约取本品约0.1g，精密称定，置，精密称定，置250ml碘瓶中，加碘瓶中，加水水10m

45、1，振摇使溶解，精密加溴滴定液（，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.1mol/L）25ml，再加盐酸，再加盐酸5m1，立即密塞并振摇，立即密塞并振摇1min，在暗，在暗处静置处静置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10m1，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每正。每1ml溴滴定液（溴滴定液（0.1mo1/L）相当于）相当于13.01mg的的C12

46、H17N2NaO3。2. 测定方法与计算测定方法与计算原料药：剩余滴定法 %1000smFVVT）（百分含量mlmg01.132molg27.260Lmol1 . 0nCMT含量含量3. 注意事项注意事项（1 1）操作中要防止溴和碘的逸失）操作中要防止溴和碘的逸失（2 2）平行条件进行空白试验可减）平行条件进行空白试验可减少溴和碘逸失带来的误差。少溴和碘逸失带来的误差。含量含量四、四、紫外分光光度法紫外分光光度法（一）直接（一）直接UVUV法法 本法是将样品溶解后，根据溶本法是将样品溶解后，根据溶液的液的pHpH值选用其相应的值选用其相应的 maxmax处进行处进行直接测定。直接测定。单组分定

47、量方法：单组分定量方法：含量含量1. 吸收系数法吸收系数法lEAC1%1cm)g/100ml(ClEA%1cm1100)g/ml(1%1cmlEAC2.2. 标准曲线法标准曲线法含量含量3. 对照法对照法 lCElCEAA对%1cm1供%1cm1对供对供对供AACC对供对供CCAA ( (单标法单标法) )含量含量 取取硫喷妥钠硫喷妥钠约约100 mg，精密称定，置于，精密称定，置于200 ml量瓶中，加量瓶中，加NaOH溶液（溶液（1250）使）使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密量取该溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密量取该溶液溶液5 ml移入移入500 ml量瓶中，加量瓶中，加NaOH溶液溶液并

48、稀释至刻度，摇匀。另取并稀释至刻度，摇匀。另取硫喷妥硫喷妥对照品适对照品适量，精密称定，加量，精密称定，加NaOH溶液溶解，并定溶液溶解，并定量稀释至浓度约为量稀释至浓度约为5 g/ml的对照品溶液。的对照品溶液。 随即于大约随即于大约304 nm波长处分别测定以上两种波长处分别测定以上两种溶液的吸收度，以溶液的吸收度，以NaOH溶液作空白。溶液作空白。USP（24）测定硫喷妥钠的方法为：）测定硫喷妥钠的方法为：091.120091.120055001000）（对供对对供对对供对供对供对供AACAACmgmVnAACVCmnCCAACC对照法对照法n稀释倍数 091.120091.120055

49、001000）（对供对对供对对供对供对供对供AACAACmgmVnAACVCmnCCAACC（二）经提取分离后的紫外分光光度法（二）经提取分离后的紫外分光光度法 四、四、 UVUV 称取供试品称取供试品苯巴比妥钠苯巴比妥钠50mg,50mg,置于分液漏斗置于分液漏斗中中, ,加水加水1515mLmL使溶解使溶解, ,加盐酸加盐酸2 2mLmL, ,振摇振摇, ,析出苯巴比析出苯巴比妥妥, ,用氯仿提取用氯仿提取4 4次次, ,每次每次2525mLmL, ,用脱脂棉滤入用脱脂棉滤入250250mLmL量瓶中量瓶中, ,以少量氯仿洗涤分液漏斗和滤器以少量氯仿洗涤分液漏斗和滤器, ,加氯仿加氯仿至刻

50、度至刻度, ,摇匀。精密量取氯仿溶液摇匀。精密量取氯仿溶液5 5mLmL，水蒸干。，水蒸干。残渣先用乙醇残渣先用乙醇5 5mLmL，再用，再用pH9.6pH9.6硼酸盐缓冲溶液溶硼酸盐缓冲溶液溶解，移入解，移入100100mLmL量瓶中，用此缓冲溶液稀释至刻度，量瓶中，用此缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。摇匀，即为供试品溶液。含量含量多组分混合物不经分离的定量方法多组分混合物不经分离的定量方法计算分光光度法计算分光光度法 解方程组法解方程组法 双波长分光光度法双波长分光光度法 差示分光光度法差示分光光度法 导数光谱法导数光谱法 三波长法三波长法含量含量 取两份相等的供试溶液，分别制成