DNA-RNA-蛋白质凝胶成像分析系统ppt课件.ppt

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1、仪仪 器器 培培 训训DNA，RNA，蛋白质，蛋白质凝胶凝胶成像分析系统成像分析系统UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统 目的与要求目的与要求 了解了解UVP凝胶成像分析系统的用途，熟悉其操作步骤和注意事项凝胶成像分析系统的用途，熟悉其操作步骤和注意事项 培训内容培训内容 UVP凝胶成像分析系统的基本原理与实验流程凝胶成像分析系统的基本原理与实验流程 考核题目考核题目UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统用途：用途：凝胶成像系统凝胶成像系统UVPUVP是目前最常见的图象拍摄、是目前最常见的图象拍摄、 分分析和处理系统。广泛应用于析和处理系统。广泛应用于DNA/RNADNA/RNA

2、凝胶，蛋白质凝胶凝胶，蛋白质凝胶等电泳不同染色（如等电泳不同染色（如EBEB、考马氏亮蓝）、考马氏亮蓝） ，X-X-光片光片 等非等非化学发光成像的扫描检测和定性定量分析。是分子生物化学发光成像的扫描检测和定性定量分析。是分子生物学研究、法医学研究、法医DNADNA鉴定、临床基因诊断、疾病控制等实鉴定、临床基因诊断、疾病控制等实验室的必备设备。验室的必备设备。UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统RNARNA凝胶凝胶DNADNA凝胶凝胶蛋白质凝胶蛋白质凝胶图像采集系统图像采集系统 采用数码摄影将摄取的图象直接输入计算机系统。采用数码摄影将摄取的图象直接输入计算机系统。 在暗箱中的紫外灯照

3、射下在暗箱中的紫外灯照射下,通过调节变焦光圈、变焦倍数及焦距使样品通过调节变焦光圈、变焦倍数及焦距使样品清晰及大小适当。图象摄取获得以后清晰及大小适当。图象摄取获得以后,通过通过Labwork软件中图象处理软件中图象处理菜单的菜单的“亮度亮度”和和“优化优化”项进行亮度调整和图象优化项进行亮度调整和图象优化,以降低图象以降低图象本底噪声。一般经过这样处理以后能得到清晰的凝胶图片。本底噪声。一般经过这样处理以后能得到清晰的凝胶图片。图像分析系统图像分析系统 采用凝胶成像系统采用凝胶成像系统Labwork软件将摄取的图像中的软件将摄取的图像中的DNA/RNA/蛋白凝蛋白凝胶胶/胶片进行定性、定量分

4、析。定量分析是利用软件灰度胶片进行定性、定量分析。定量分析是利用软件灰度/密度扫描的密度扫描的功能，将所得条带用虚线框框住，进行密度功能，将所得条带用虚线框框住，进行密度/灰度扫描，可以用目的灰度扫描，可以用目的条带密度条带密度/标准条带密度的比值来对目的条带进行半定量。标准条带密度的比值来对目的条带进行半定量。 图像打印系统图像打印系统 将摄取的图像通过与计算机相连的打印机生成打印文件。将摄取的图像通过与计算机相连的打印机生成打印文件。UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统 操作规则操作规则1、在熟悉仪器的基本性能，向相关老师提出申请，获得允许之后，开机使用。、在熟悉仪器的基本性能，向

5、相关老师提出申请，获得允许之后，开机使用。 2、仪器操作规程：、仪器操作规程： 用酒精棉球将暗盒中的透视屏擦拭干净用酒精棉球将暗盒中的透视屏擦拭干净 将凝胶置于屏上（蛋白凝胶于白光屏，核酸凝胶于紫外屏）将凝胶置于屏上（蛋白凝胶于白光屏，核酸凝胶于紫外屏） 调整调整CCD位置使凝胶置于视野合适位置后插上电源位置使凝胶置于视野合适位置后插上电源 打开电脑进入打开电脑进入Labwork工作状态工作状态 打开相应的透射光源准备扫描打开相应的透射光源准备扫描 进入摄像状态，调整光圈和焦距扫描进入摄像状态，调整光圈和焦距扫描 用用JPG格式文件保存图像格式文件保存图像 关闭光源，关闭光源，CCD电源和电脑

6、电源和电脑 取出凝胶并用酒精棉球擦净透视屏取出凝胶并用酒精棉球擦净透视屏 盖上防尘盖盖上防尘盖 3、DNA/RNA凝胶含有凝胶含有EB，操作时应戴手套。严禁机箱外及实验室任何地方污染，操作时应戴手套。严禁机箱外及实验室任何地方污染EB。4、请勿随意改动取相参数，如需积分，取完后将积分值回到初始值。、请勿随意改动取相参数，如需积分，取完后将积分值回到初始值。 5、使用完后请在记录本上登记。、使用完后请在记录本上登记。6、插入软盘前，要先查毒，确认无毒后使用，以确保系统的正常工作。、插入软盘前，要先查毒，确认无毒后使用，以确保系统的正常工作。7、凝胶成像系统电脑为图像扫描分析专用，不得作其它用途，

7、不得修改电脑设置。、凝胶成像系统电脑为图像扫描分析专用，不得作其它用途，不得修改电脑设置。8、关机后，将插线板开关及电源都关闭。、关机后，将插线板开关及电源都关闭。UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统 溴化乙锭（溴化乙锭（EB），），EB是一种强致癌物，在实验中使用EB时，应遵守以下操作规程：遵守以下操作规程：1、在、在EB专用实验室进行专用实验室进行EB的操作。所有的操作。所有EB操作必须戴手套，在特操作必须戴手套，在特定的区域内完成，严禁将接触过定的区域内完成，严禁将接触过EB的手套等杂物带出其工作区。的手套等杂物带出其工作区。2、EB粉末应存放在特定的容器内，密封保存。容器外用牛

8、皮纸包裹，粉末应存放在特定的容器内，密封保存。容器外用牛皮纸包裹，并标明购买日期及有效期，再放于较大容器内，存放于特定的地方，并标明购买日期及有效期，再放于较大容器内，存放于特定的地方，并由专人保管。并由专人保管。3、EB储备液的配制及存放：称取储备液的配制及存放：称取EB粉末应用普通托盘天平称量，粉末应用普通托盘天平称量，不能用电子天平，在称取不能用电子天平，在称取EB粉末时，应戴手套、口罩，在天平下放粉末时，应戴手套、口罩，在天平下放张大纸，在两个托盘上放同样大小的较大纸张后，再称量。称量后应张大纸，在两个托盘上放同样大小的较大纸张后，再称量。称量后应及时将原容器盖好密封后放回原处。及时将

9、原容器盖好密封后放回原处。EB储备液应存放于固定的容器储备液应存放于固定的容器内，再放于纸盒中，并在盒外显著标明内，再放于纸盒中，并在盒外显著标明“强致癌物强致癌物EB”，放在冰箱中，放在冰箱中固定的地方。固定的地方。4、在、在EB专用实验室进行实验或使用仪器时，接触专用实验室进行实验或使用仪器时，接触EB溶液或样品溶液或样品（如载玻片、胶、盛胶板）时必须戴手套，且有（如载玻片、胶、盛胶板）时必须戴手套，且有EB污染的物品只能污染的物品只能接触凝胶图像分析仪的箱内及荧光显微镜的载物台，严禁接触过接触凝胶图像分析仪的箱内及荧光显微镜的载物台，严禁接触过EB的手套接触仪器的其他操作部分。的手套接触

10、仪器的其他操作部分。5、含、含EB的溶液及接触过的溶液及接触过EB的手套等杂物应按相关规定进行处理。的手套等杂物应按相关规定进行处理。UVPUVP凝胶成像分析系统凝胶成像分析系统考核题目考核题目1. UVPUVP凝胶成像分析系统的主要用途是什么？凝胶成像分析系统的主要用途是什么？ 2. UVPUVP凝胶成像分析系统由哪几部分构成？各部分凝胶成像分析系统由哪几部分构成？各部分功能是什么？功能是什么？3. UVP UVP凝胶成像分析系统的操作规程是什么？注凝胶成像分析系统的操作规程是什么？注意事项有哪些？意事项有哪些？4.实验室使用实验室使用EBEB的操作规程有哪些？注意事项是的操作规程有哪些？注意事项是什么？什么？ 第四部分完第四部分完