细菌检验的商品化、自动化设备(共13页).doc
《细菌检验的商品化、自动化设备(共13页).doc》由会员分享,可在线阅读,更多相关《细菌检验的商品化、自动化设备(共13页).doc(13页珍藏版)》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、精选优质文档-倾情为你奉上第十七章细菌检验的商品化、自动化设备本章考点:(1)微量生化反应系统(2)自动化装置 第一节微量生化反应系统一、常用的微量生化反应系统根据细菌的不同生物学性状及其代谢产物的差异,可采用多种生化反应系统鉴定细菌,现已有商品化的成套产品,它多由1024项生化指标组合而成,通过对结果的判定,得出一个37位的数据,查阅编码手册即可获得相应的细菌名称。常用的微量生化反应系统有以下几种:(一)Micro-ID系统本系统主要用于肠杆菌科的细菌鉴定。它是一块带有15个反应池的塑料板,每个反应池含有一种生化反应培养基及试剂。(二)API系统(目前较常用的微量生化鉴定系统)API系统为一
2、块塑料板,上有20个小杯,每个小杯装有不同的生化反应培养基和指示剂。API系统鉴定范围API-20E肠杆菌科细菌API-20NE非肠杆菌科细菌API Staph葡萄球菌属和微球菌属细菌API Strep链球菌属细菌API Coryne棒状杆菌属细菌API 50CHB芽胞杆菌属等革兰阳性杆菌API NH奈瑟菌属、布兰汉菌属和嗜血杆菌属细菌API Canpy弯曲菌和螺杆菌API-20A厌氧菌(三)Minitek系统该系统为带有l2个凹孔的塑料盘。包括34种生化反应培养基及指示剂的滤纸片。(四)肠杆菌-MBl2E系统该系统为一块96个凹孔的塑料板,分8排。可同时鉴定8份标本。每孔含有一种干燥生化培养
3、基,可提供12项生化反应。(五)氧化发酵鉴定系统该系统主要有氧化发酵管可应用于非发酵菌,也可用于气单胞菌等一部分发酵型细菌的鉴定。二、自动化装置(一)半自动微生物鉴定和药敏系统1.VITEKATB (Automicrobic系统) (1)原理:将肉眼观察的结果输入电脑,结果与数据库内的细菌条目比较,自动得到鉴定结果。ATB敏感试验采用半固体培养基,不同的药敏试条含有不同种类抗生素。在24小时内通过观察有无细菌生长以判断药敏试验结果。(2)操作方法:挑取1至数个纯菌落制备为0.5麦氏单位菌悬液,接种试剂条,经35孵育1824小时,观察结果。2.Microscan Panel使用测试板及快速接种系
4、统,人工判读后将其结果输入电脑,得出结果。(二)全自动微生物鉴定和药敏系统1.VITEK系统:该系统可鉴定各种细菌(包括厌氧菌)、酵母菌及细菌的药敏试验。类型有Vitek-32及Vitek-60及Vitek(有两种规格)。仪器采用数码鉴定原理,每个鉴定卡有30项反应,每3个反应为一组,可得一组10位数的数码。Vitek采用快速荧光法测定细菌。Vitek系统有高级专家系统,对药敏结果进行解释性判读。2.MicroScan自动微生物分析系统:该系统可鉴定各种细菌(包括厌氧菌)、酵母菌及细菌的药敏试验。类型有WalkAway-40,WalkAway-96。仪器应用传统呈色反应法,采用快速荧光法测定细
5、菌。药敏部分采用比浊法进行测定。鉴定板有普通和快速两种,后者采用更为敏感的荧光底物,采用酶学方法分析。 第二节血培养系统一、半自动培养仪BACTECA60系统专用于快检血液、脑脊液、胸水及其他正常无菌体液中的细菌。将待测标本接种于含14C-底物的培养瓶中,活菌将利用14C-标记底物而产生14C02,测定气体量并换算成数值。培养瓶种类有需氧培养瓶、厌氧培养瓶、L型菌培养瓶、结核菌药敏瓶等。缺点是放射性废弃物的处理较为困难。二、全自动血培养仪全自动血培养仪软件功能全,操作简便,具有数据连网共享功能。培养瓶放入仪器后即开始连续孵育、轻度震荡培养和自动检测的全自动过程。1.BACTEC9000系列:包
6、括9240型(240瓶)、9120型(120瓶)和9050型(50瓶)三种。BACTEC9000系列利用荧光探测技术(荧光增强法):全自动连续检测培养瓶内微生物代谢引起的CO2浓度变化,而CO2浓度的改变可直接激活培养瓶底部包埋的对CO2浓度变化高度敏感的荧光物质,在二极管的激发下荧光物质释放荧光,荧光强度变化可直接反应培养瓶内CO2浓度变化。以判定是否有微生物生长繁殖,仪器每十分钟自动进行质控校正,由电脑分析判断细菌培养阴阳性,阳性者发出警报。培养瓶有标准及含树脂(有吸附抗生素作用)的需氧、厌氧瓶、儿童瓶,有真菌培养瓶、分枝杆菌培养瓶。2.BacTAlert系统:该系统为一种全自动微生物培养
7、和监测系统,有120瓶和240瓶两种规格。培养瓶种类有需氧培养瓶、厌氧培养瓶、小儿培养瓶和抗生素中和瓶等。培养瓶底部有特殊的Novel C02感应器,有半渗透性薄膜,将培养基与感应器隔离,只有C02能通过薄膜。当有微生物生长释出C02可渗透至感应器,pH改变使其颜色也改变。仪器每十分种自动检测一次,由电脑分析判断阴阳性。阳性者发出警报。3.VITAL:有VITAL和miniVITAL两种规格。培养瓶有需氧和厌氧培养瓶等。仪器采用荧光法(荧光递减)全自动检测,每隔l5分钟读取每一瓶的荧光读数。自动处理数据,当荧光的光度与对应时间的曲线出现明显倾斜时,检出阳性血培养瓶。本章练习题:A.Micro-
8、ID系统B.API系统C.Minitek系统D.肠杆菌-MB12E系统E.Automicrobic系统(AMS)那一项不属于细菌检验微量生化反应系统答疑编号1正确答案E既可鉴定肠道杆菌又能鉴定厌氧菌的有答疑编号2正确答案B第十八章病原性球菌及检验本章考点:(掌握,熟练掌握)(1)概念(2)生物学性状(3)微生物学检查方法与原理(4)临床意义(致病性、所致疾病)普及共性,单记个性生物学性状形态与结构:革兰染色性,菌体形态,大小,排列状态,特殊结构。培养特性:对气体需求,营养要求,最适pH值,最适温度,在培养基中的生长现象。生化反应:特殊生化。抗原:分类:致病性致病物质所致疾病微生物学检查:针对生
9、物学性状和致病性一、葡萄球菌属(一)概念一群革兰阳性球菌,因常堆聚成葡萄串状而得名。(二)生物学特性1.形态与结构:本属菌革兰染色阳性,呈圆球形,直径0.51.5m,不规则成堆排列,形似葡萄串状,在脓汁、肉浸液培养物中,可见单个,成对或短链排列。无鞭毛和芽胞,有些细菌能形成荚膜。2.培养特性:需氧或兼性厌氧,营养要求不高,通常在肉浸液及肉浸液琼脂或加入血液的培养基上生长良好。最适pH为7.4,最适温度为3537。在普通琼脂平板上经352448h培养,可形成圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐并且不透明的菌落,直径为23mm。可产生不同的脂溶性色素,如金黄色、白色、柠檬色色素。在血琼脂平板上,几乎
10、所有的葡萄球菌可产生、和溶血素。对人致病的主要是溶血素。在液体培养基(普通肉浸液)中生长迅速呈均匀混浊状。3.生化反应:触酶试验(+),对糖的发酵反应不规则,多数能分解葡萄糖、麦芽糖及蔗糖,产酸不产气。多数致病性葡萄球菌能分解甘露醇产酸、液化明胶和产生血浆凝固酶。4.抗原:葡萄球菌水解后,用沉淀法可获得两种抗原,即蛋白抗原和多糖抗原。(1)蛋白抗原:为完全抗原,有种属特异性,无型特异性。存在于葡萄球菌的表面,结合在细胞壁的粘肽部分,具有抗吞噬作用,称葡萄球菌A蛋白(SPA)。(2)多糖抗原:是半抗原,具有型特异性,有三种:A型多糖抗原;B型多糖抗原;C型多糖抗原。5.分类6.抵抗力:对理化因素
11、抵抗力强,耐热,耐干燥,耐高盐,是抵抗力最强的无芽胞细菌。(三)致病性及临床意义 葡萄球菌感染的特点是感染部位组织的化脓、坏死和脓肿形成。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌是引起临床感染最常见的葡萄球菌。1)金黄葡萄球菌2)表皮葡萄球菌是存在于皮肤的正常栖居菌,为医院感染的重要病原菌,它是导致血培养污染的常见细菌之一。3)腐生葡萄球菌是导致尿路感染的常见病原菌之一。(四)微生物学检验方法与原理1.标本采集:根据葡萄球菌感染所致的疾病不同,可采集脓汁、渗出液、伤口分泌物、血液、尿液、粪便、痰液以及脊髓液等。(不同疾病采集不同标本)2.检验方法及鉴定(1)直接镜检:无菌取脓汁、痰、渗出物和
12、脑脊液(离心后取沉渣)涂片,经革兰染色后镜检,如为革兰阳性球菌呈葡萄状排列可初步报告为:“找到革兰阳性葡萄状排列球菌,疑为葡萄球菌”。(2)分离培养:血液标本(静脉血约5ml)注入50ml葡萄糖肉汤或含硫酸镁肉汤增菌培养,迅速摇匀,以防凝固,置35,一般于24h后开始观察有无细菌生长,若均匀混浊,溶血及胶胨状生长,则接种于血琼脂,进一步鉴定,若无细菌生长,于4872h后自行观察(一般以7天为限),并接种血琼脂,以确定有无细菌生长。血液标本也可注入商品血培养瓶培养。脓汁、尿道分泌物、脑脊液离心沉淀物,通常可直接接种血琼脂。351824h培养,可见直径23mm,产生不同色素的菌落。金黄色葡萄球菌在
13、菌落周围有透明的溶血环。尿液标本,必要时作细菌菌落计数。粪便、呕吐物应接种高盐卵黄或高盐甘露醇琼脂平板,经351824h培养,可形成细小菌落,48h后形成典型菌落。(3)鉴定试验 金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌触酶+血浆凝固酶+-甘露醇发酵试验+-新生霉素敏感试验SSR报告:检出“XXX葡萄球菌”(4)耐药性检测:检测耐甲氧西林的金葡菌(MRSA),耐甲氧西林的表葡菌(MRSE),耐万古霉素的金黄色葡萄球菌(VRSA),耐万古霉素的表皮葡萄球菌(VRSE)。NCCLSCLSI推荐用头孢西丁纸片法检测对苯唑西林耐药的葡萄球菌。二、链球菌属(一)概念链球菌属为触酶阴性,兼性厌氧,呈圆形或卵
14、圆形的革兰阳性球菌,在液体培养基中生长时易形成长链而表现为沉淀生长(但肺炎链球菌为混浊生长)。(二)生物学特性1.形态与染色:革兰染色阳性。菌体呈圆形,直径为0.81.0m,呈链状排列,在液体培养基中易成长链。在脓汁标本中为短链,成双或单个散在。无鞭毛、无芽胞、某些菌株在血清肉汤中可有荚膜。2.培养特性:本属细菌大多为需氧或兼性厌氧菌,少数微需氧及专性厌氧。营养要求较高,在含有腹水的培养基上生长良好。最适温度为3537,最适pH为7.47.6,在5%C02环境下生长更好。在血琼脂平板上,经35 1824h培养后可形成灰白色、圆形、凸起、直径为0.10.75mm细小菌落,菌落周围出现不同溶血环。
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 细菌 检验 商品化 自动化 设备 13
限制150内