《检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质》课件16张PPT.ppt

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1、一一. .实验原理：实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如关有机化合物产生特定的颜色反应。如：. .还原性糖的鉴定：还原性糖的鉴定： 还原性糖还原性糖+ +. .脂肪的鉴定：脂肪的鉴定： 脂肪脂肪+ + 脂肪脂肪+ +斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀苏丹苏丹橘黄色橘黄色苏丹苏丹红色红色一一. .实验原理：实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如关有机化合物产生特定的颜色反应。如： . .蛋白质的鉴定：蛋白质的鉴定： 蛋白质蛋白质+ + 双缩脲试剂双缩脲试

2、剂紫色紫色碘碘蓝色蓝色二二. .目的要求：目的要求： 尝尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质脂肪和蛋白质1 1、还原糖的检测和观察：、还原糖的检测和观察： 选材选材 选择含选择含 量高量高 颜色为颜色为 的植物组织的植物组织 以以苹果苹果. .梨梨为最好。为最好。糖糖白色或近于白色白色或近于白色制制备组织备组织样液：样液：制浆制浆 过过滤滤 取液取液 三三. .实验过程实验过程: :用一层纱布用一层纱布可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀，程中生成砖红色沉淀，说明植物组织说明植物组织样液中含有还原糖。样液中

3、含有还原糖。注入注入2mL2mL苹果组苹果组织样液织样液注入注入1mL1mL刚配制好的刚配制好的斐林试剂斐林试剂水浴加热约水浴加热约2min2min呈色反应呈色反应变成变成砖红色砖红色50-650C的温水的温水结论：结论：甲乙液等量混匀甲乙液等量混匀振荡、混振荡、混合摇匀呈合摇匀呈现蓝色现蓝色 还原糖有还原糖有 。 试剂：试剂： . . 甲甲液：液：0.1g/ml0.1g/ml的的 。 乙乙液：液：0.05g/ml0.05g/ml的的 . . 甲甲乙液必须乙液必须 后再加后再加入样液入样液 中中， 。 必须必须 。葡萄糖，果糖，麦芽糖葡萄糖，果糖，麦芽糖用水浴加热用水浴加热斐林试剂斐林试剂Na

4、OHNaOHCuSOCuSO4 4等量混合均匀等量混合均匀现配现用现配现用注意事项：注意事项：颜色变化：颜色变化：蓝蓝色色棕色棕色砖红色砖红色2 2、脂肪的检测和观察：、脂肪的检测和观察：圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。取材：取材： 花生种子花生种子( (浸泡浸泡3 34h4h），将子叶削成薄片），将子叶削成薄片制片制片取最理想的薄片取最理想的薄片在薄片上滴在薄片上滴2-32-3滴苏丹滴苏丹染液（染液（3min3min）去浮色（用去浮色（用5050酒精）酒精） 制成临时装片制成临时装片观察观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，低倍镜下寻找到已着色的圆形小

5、颗粒，然后用高倍镜观察然后用高倍镜观察结论：结论：注意事项：注意事项： 切片要薄，切片要薄，如厚薄不均就会导致观如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。察时有的地方清晰有的地方模糊。 酒精的作用酒精的作用是：是： 。 需需使用显微镜观察使用显微镜观察 使用不同的染色剂染色时间不同使用不同的染色剂染色时间不同颜色变化：颜色变化： 。洗去浮色洗去浮色橘黄色或红色橘黄色或红色3 3、蛋白质的检测和观察：、蛋白质的检测和观察： 选材：选材： 含含 丰富的丰富的豆豆浆浆或或鸡蛋清鸡蛋清溶溶液。液。蛋白质蛋白质黄豆浆滤液或蛋清稀释液黄豆浆滤液或蛋清稀释液制备组织样液制备组织样液呈色反应呈色反应组

6、织组织样液样液2mL2mL双缩脲试双缩脲试剂剂A A液液1mL1mL双缩脲试双缩脲试剂剂B B液液4 4滴滴摇匀后变摇匀后变成紫色成紫色结论：结论：说明组织样液中存在蛋白质。说明组织样液中存在蛋白质。（3 3）注意事项：）注意事项： 试剂：试剂： 。 A A液：液：0.1g/ml0.1g/ml的的 ； B B液：液： 0.01g/ml0.01g/ml的的 。 先加先加 ，再加，再加 。 鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比双缩脲试剂双缩脲试剂A A液液1ml1mlB B液液4 4滴滴NaOHNaOHCuSO4CuSO4用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免用于蛋

7、白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷实验后粘住试管壁，不易洗刷蛋蛋白白质质的的检检测测结结果果斐林试剂与双缩脲试剂的比较：斐林试剂与双缩脲试剂的比较：A A液液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOHB B液液: :0.010.01g/mLCuSOg/mLCuSO4 4甲液甲液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOH乙液乙液: :0.050.05g/mLCuSOg/mLCuSO4 4紫色物质生成紫色物质生成砖红色沉淀砖红色沉淀先加先加A A液，再加液，再加B B液，不液，不需加热需加热甲液与乙液甲液与乙液先混再用先混再用，且且现配现用现配现用，需需水浴水浴加加热热蛋白质蛋白质还原性糖还原性糖试剂试剂组成组成检验检验结果结果试剂试剂用法用法检测检测对象对象双缩脲试剂双缩脲试剂斐林试剂斐林试剂4 4、淀粉的检测和观察：、淀粉的检测和观察： 取材：取材： 马铃薯匀浆马铃薯匀浆检测检测组织组织样液样液2mL2mL碘液碘液2 2滴滴结论：结论：说明组织样液中存在淀粉。说明组织样液中存在淀粉。注意：注意：常用材料：马铃薯常用材料：马铃薯 试剂：试剂： 。颜色变化：。颜色变化： 。碘液碘液变蓝变蓝摇匀后变摇匀后变成蓝色成蓝色