核糖含量测定.doc

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1、核糖含量测定核糖含量测定1 1 试剂试剂1.1 0.31mol /L 三氯醋酸称取三氯醋酸 5g，加蒸馏水溶解成 100ml。1.2 0.61 mol /L 三氯醋酸称取三氯醋酸 10g，加蒸馏水溶解成 100ml。1.3 0.019mol /L 三氯化铁-盐酸溶液称取三氯化铁（FeCl36H2O）0.5g，加浓盐酸溶解成500ml，可长期使用。1.4 1%二羟基甲苯（苔黑酚）称取二羟基甲苯 1g，溶于 0.019mol /L 三氯化铁-盐酸溶液中，临用新配。1.5 标准核糖溶液精密称取 D 核糖 20mg，溶于 0.31mol /L 三氯醋酸，准确稀释至 100ml 为 200g /ml 核

2、糖标准贮备液。精密吸取贮备液 2.5ml 于 25ml 容量瓶中，用 0.31mol /L 三氯醋酸稀释至刻度，即为标准核糖溶液（20g/ml）。2 2 操作操作精密量取转移因子待检品 1ml 于试管中，另 0.61mol /L三氯醋酸 1ml，置沸水浴水解 15 分钟，再吸取水解液 0.4ml，加 0.31ml/L 三氯醋酸 1.6ml,及 1%二羟基甲苯 2ml,混匀,再置沸水浴中加热 30 分钟,冷却至室温,在 650nm 波长测定 OD 值,同时准确吸取核糖标准液 1ml,加 0.31mol/L 三氯醋酸 1ml,混匀,其余操作同样品,并做空白对照。3 3 计算计算样品 OD 值核糖含量(g/ml)= 205标准 OD 值