gbt 28236-2011 染色体畸变估算生物剂量方法.pdf

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1、ICs 13.100C60中 华 人 民 共 和 国 国 家 朽GB/T2823-2011染色体畸变估算生物剂量方法Me t h o d o F c h r o m o s o m e a b e r r a t i o n a n a Iy s i s Fo rb i o l o g i c a I d o s e a s s e s s m e t11丬30发布2012-05-01 实施串 材 鞴 鏊发 布GB/T28236-20l l目 刂 舀本标准代替GB/T127151991染色体畸变分析估算生物剂量的方法 。本标准与GB/T127151991相比主要变化如下: 补充了标准的范围“也

2、适用于一次比较均匀的全身外照射复合烧伤的病例的生物剂量估箅”; 将可较准确估箅剂量的取血时间改成60d :强调采用培养开始加秋水仙素法和用d c (或“d i c +r )估箅剂量; 增加了不均匀和局部照射的统计检验和生物剂量估箅方法; 原标准基本是引用IAEA第260号技术报告丛书(1986),本标准尽量采用我国的资料,如染色体畸变图、 生物剂量估算的举例、 某些统计分析方法、 取血有效时间和估箅剂量的注意事项等。同时,也参考和引用了IAEA第钔5号技术报告丛书(200D的有关内容。本标准附录A是规范性附录,附录B是资料性附录。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位:中国疾病

3、预防控制中心辐射防护与核安全医学所。本标准主要起草人:白玉书。本标准由中华人民共和国卫生部负责解释。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T127151991。GB/T28236-2011染色体畸变估算生物剂量方法1 范围本标准给出了电离辐射诱发人外周血淋 巴细胞染色体畸变 的剂量-效应 曲线 的建立和用其估算生物剂量的方法 。本标准适用于一次 比较均匀的全身外照射事故受照人员的剂量估算 。本标准也适用于一次 比较均匀的全身外照射复合烧伤的病例剂量估算 。本标准不适用于分次照射 、 长期小剂量累积照射和内照射的生物剂量估算 。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准 。2.1生物剂计 “

4、o 1o g i c a l d o s i m e t e r用 以估算受照剂量的生物体系,该生物体系受到照射后 的反应与受照剂量之间存在着某种定量关系,从而可用来推定受照剂量 。2.2剂-效应 曲线 d o s e r e s p o n s e c u r v e某种物质或生物体系受到照射后的反应与受照剂量之间存在着某种定量关系,可将二者拟合成适当的数学模式,并制备出相应的刻度曲线,称之为剂量-效应曲线,可用其估算受照剂量 。 2.3染色体 c h m m o s o m e基因的载体 。存 在 于细胞 核 内,当细胞分裂 时,在碱性染料作用下着 色较深 。由脱 氧核糖核酸 (DNA)、

5、蛋 白质和少量核糖核酸(RNA)组成 。2.4染色体畸变 c h m m o s o m e a b e r a t i o n正常染色体在物理 、 化学或生物等因素作用下发生的结构和数 目上的异常 。2.5染色体型畸变 c h m m o s o m e t y p e a b e a t i o n照射时处于Go 或G1期的细胞,由于在DNA合成之前,染色体 以一条单体行使其功能,这时诱发的畸变,经S期复制后,形成涉及两条单体的染色体型畸变,主要包括无着丝粒断片 、 微小体 、 无着丝粒环 、 着丝粒环 、 双或多着丝粒体 、 倒位 、 易位 、 插人和缺失等 。2.6染色单体型畸变 c

6、h r o m a t i d -t y p e a b e r a t i o n在S期受照的大多数细胞和G2期受照的细胞,已进行DNA合成,即已形成两个独立 的单体 。所以只诱发染色单体型畸变,主要包括染色单体断裂 、 染色单体互换 、 染色单体间隙和等染色单体间隙等 。2.7非稳定性染色体畸变 u n s t a b 1e c h r o m o s o m e a b e a t i o n非稳定性染色体畸变包括无着丝粒断片、 微小体 、 无着丝粒环 、 双着丝粒体和着丝粒环 。无着丝粒断片、 微小体 、 无着丝粒环,由于无着丝粒,在纺锤体上不能定 向,很快从分裂细胞中丢失 。双着丝粒

7、体和着丝粒环往往在分裂后期形成染色体桥或导致 四倍体而常引起细胞死亡,将上述五种畸1GB/T28236-2011变称为非稳定性畸变 。2.8稳定性染色体畸变 s t a b e c h m El n c ,s o m e a b e m t i c Dn倒位 、 易位 、 插人和缺失等畸变,在细胞分裂时不存在任何力学上的障碍,细胞复制不受影响,可较长时间在体 内存在,称之为稳定性畸变 。3 试剂配制 、 细胞培养和标本制备3.1 试剂配制 3.1.1 培养液配制3.1.1.13.1.1.23.1.1.33.1.1.43.1.1.5备 用 。取RPMI-164010。4g (原包装),水 中。于

8、上述培养液中加人抗,链霉 素l OO IU/m L。 用5%的Na HCo 3u m 过滤除菌 。加人灭活的新将上述培养低温冰箱保存3.1.2 0.2%肝称取Om 3.1.3 秋水称取秋水时配制成2.5存。应用3.1.4 PIIA按使用3.1,5 0。o称取5。3. 1.6 Gi e 【l s a Gi e m s a 染中性甘油(C甲醇(AR)先将Gi e m s a 染料o 水浴箱中2h ,用玻璃棒搅拌,溶解后加入稀释。 3.2 细胞培养和标本制备 3.2.1 培养开始加秋水仙素法 3.2.1.1 将冰冻保存的培养液取出,室温下融化。 3.2.1.2 用肝素溶液湿润灭菌注射器后,抽取静脉血

9、,于每瓶组合培养液内加人0.4m L抗凝血,平行接种2瓶,对过量受照者的样品接种不少于3瓶。根据有关信息,估计受照剂量较大()5Gy )者,接种不少于6瓶。 3.2.1.3 加人PHA,加人量按使用说明确定。 3.2.1.4 加人秋水仙素,最终浓度为0。04u g /m L。 3.2.1.5 混匀,标记姓名、 日期,置人37恒温箱培养。 3.2.1.2 3.2.1.5的操作必须在无菌条件下进行。 3.2.1.6 培养48h 50h ,取出培养瓶,去上清液。 3.2.1.7 加人0。075m o l /L KCl 低渗液8m L,混匀,低渗10m i n 。 3.2.1.8 加人固定液(甲醇:冰

10、乙酸=3:D1m L预固定。2浓度为:青霉素1窿引翱舀r 覆熹 裱 滏:菩蒹 勰分子式:02,分装成小瓶溶于1000m加甘油后研磨片刻,移人小烧杯 内,为原液,用前按Gi e m s a 中,放人37GB/T28236-20113.2.1.9 1000r /m h 离心10m i n ,去上清,再加固定液8m L,混匀 。 3.2.1.10 固定z O m i n ,再离心10m i n ,去上清,重复固定一次 。3.2.1。l 1 冰干法制片,每片滴3滴沉淀物,过火一燃 即可。 3.2.1.12 干燥后e m s a 染色 。 3.2.2 荧光加姬姆萨(FPG)技术 3.2.2.1 将冰冻保

11、存的培养液取出,室温下融化 。 3.2.2.2 用肝素溶液湿润灭菌注射器后,抽取静脉血,于每瓶组合培养液 内加人0.4m L抗凝血,平行接种2瓶,对过量受照者接种不少于3瓶。对估计受照剂量较大()5GD者,接种不少于6瓶。 3.2.2.3 加人PHA,加人量按使用说明确定 。 3.2.2.4 加Br d u (溴脱氧尿嘧啶核苷),最终浓度为15u g /m L。 3.2.2.2 3.2.2.4的操作必须在无菌条件下进行 。 3.2.2.5 混匀,标记姓名 、 日期,置人37恒温箱避光培养46h 加秋水仙素,继续培养至48h 50h收获 。 3.2.2.6 制片后用荧 光染料处 理 。将标本 浸

12、人浓度 为2.5u g /m L的Ho e c h s t 33258溶液(避光), 40m i n 后用蒸馏水冲洗 。 3.2.2.7 晾干后往标本上滴加2Ss C溶液,标本所在玻璃板温度为50 60,用黑光灯或紫外线灯照射30m l n 。 3.2.2.8 晾干后Gk m s a 染色 。4 剂旦-效应 曲线的建立方法4.1 照射条件和培养方法 4.1.1 必须提供可靠的、 明确的样品照射的物理剂量 。受照标本应与照射源保持一定 的距离以达到均匀照射的 目的。有条件的实验室应建立包括不 同辐射类型(如X射线 、 射线 、 中子)、不 同剂量率(低 LET辐射)的剂量-效应 曲线 。在0.1

13、Gy 5。 O Gy 剂量范 围内,剂量率 最好 大于0.3Gy /m i n ,小于 1.O Gy /m i n ,至少要选择8个剂量点 。 4.1.2 选择2 3名成年健康人血样,在370.5条件下进行离体照射,照后在上述温度下放置 2h ,然后采用培养开始加秋水仙素法或FPG技术培养,得到可供分析的第一次有丝分裂(M1)细胞,如果采用前种方法,其秋水仙素浓度对分裂中期细胞的有效阻断率必须达到99%以上。 4.2 计数分析技术 4.2.1 在分析M1细胞时,只记录染色体型畸变中的非稳定型畸变: D 无着丝粒畸变(a c e n t r i c s ,a c e )是一对无着丝粒 的姐妹染色

14、单体,包括无着丝粒断片、 微小体和无着丝粒环 。无着丝粒断片(a c e n t r i c f r a g m e n t s ,f ),又称末端缺失,是一对相互平行 的染色单体,有时易与等染色单体间隙相混淆,其判断标准是:如果两断端距离小于染色单体横径,视为等染色单体间隙,否则为无着丝粒断片;微小体(m l n u t e s ,m ),又称 中间缺失,为一对 比无着丝粒断片小得多的染色单体,呈现一对染色质球状;无着丝粒环(a c e n t c Hn g s ,a r )也称 中间缺失,是一对环形 的无着丝粒染色单体 。 b ) 着丝粒环(c e n t r 忆r i n g s ,r

15、)是一对具有着丝粒的环形染色单体,常伴有一对无着丝粒断片。 o 双着丝粒体(d i c e n t r i c ,由c )是指有两个着丝粒的染色体,常伴有一对无着丝粒断片。多着丝粒体是指具有三个或三个 以上着丝粒的染色体,如三着丝粒体(t r i c e n t r i c ,“)伴有两对无着丝粒断片,四着丝粒体(q u a d c e n t c ,q u a d r i )伴有三对无着丝粒断片 。三着丝粒体计算成两个双着丝粒体,四着丝粒体计算成三个双着丝粒体,即三着丝粒体以上的,应计箅成m -1个双着丝粒体 。在上述畸变中,双着丝粒体是估算生物剂量 的最佳指标,也可将其与着丝粒环合并(双+

16、环,d i c +r )估算剂量,无着丝粒畸变是估算剂量的辅助指标(d 忆和r 图见附录A)。3GB/T28236一泛01l4.2.2 进行显微镜下分析的工作人员,必须具有辐射细胞遗传学的基本知识和实际工作经验,受过专 门训练,能准确识别辐射诱发的各种染色体畸变。为避免主观因素造成的误差,应遵守以下原则: D 建立一个选择细胞的标准,并始终坚持这一标准。例如:选择染色体长度适中、 分散良好、 很少重叠的中期分裂相,分析和记录461个染色体的中期细胞。 b ) 盲法阅片。 发现畸变时,应征得第二者确认。 采用图式法结合统一命名的数字、 字母和符号记录畸变类型和显微镜坐标,以备审核或照相。 4.2

17、.3 一个完整的记录除了标明标本号、 显微镜号、 观察者、 制样和观察 日期以及分析细胞数外,必须 能反映出畸变在细胞中的分布以及交换和组合的染色体数 。 4.2.4 按公式(1)计算各剂量点应分析的 (1)式中: p 畸变细胞率饣应分析p 可在计 4.3 剂效应 4.3.1 根据下 a ) 线性 二次o 幂函式中: (2) (3) (4) (5)r 以D为自 y 每细胞的畸 D吸收剂量,单位为色本底畸变率 ;b 、c 回归系数;尼常数 ; 幂次。4.3.2 剂量-效应曲线回归方程式的拟合步骤:首先将所得数据在算术格纸上作散点图,然后根据不同图像决定采用何种方程式。 o 在算术格纸上散点图呈直

18、线趋势的可采用 =c +3D模式。 b ) 在箅术格纸上散点图呈曲线趋势的,而在双对数格纸上呈直线的,可采用y =尼D刀模式。 c ) 在箅术及双对数格纸上散点图都不能直线化,而呈抛物线形式,可采用y =n +3D+c 丿模式。o 当 丿=尼Dn 中的刀=2,或y =+3D+c D2中的3D=0时,可采用 丿=夕+c D2模式。经验证明,以d c 或“d 忆+尸为指标,对低LET辐射,多适于拟合二次多项式(=色+3D+CD2)和幂函数(y =屁D”)。而高LET辐射多适于直线方程式(丿=+a D)。41=(1_p )96。04r (D)=夕)或每百个细胞的畸变数,%;GB/T28236-201

19、15 染色体0变分析估扪工的原列5.1 由c (或汪c +o 比较准确估箅剂上的范围为0.1Gy 5。O Gy 。 5.2 事故后应在尽早取血,最好在d B h 之内取血,聂迟不要超过s O d 。 5.3 培养条件、 制片方法和染色体畸变的判浙标准应与建立刻度曲线时相同。对估箅剂旦的个体,至少应分析300 500个MI细胞。 5.4 应选择和事故条件按近的刻度曲线进行剂工估箅,在曲线剂工范围内应用,一铰不外推。 5.5 估箅剂量时,除给出平均值以外,同时给出剂工范围的95%可信限。在计箅95%的可信眼时,可以忽喑回归方程式中由于不确定性的染色体畸变率的标准误,只计箅观架细胞甫变率的标准误即可

20、。GB/T28236-2011附 录 A (规范性附录)正确使用本标准的说明A。1 用a c (或 d c 十r )估箅 比较均匀的X射线 、 射线和中子的过量照射 比较准确。本标准也适用于过量外照射复合烧伤的病例 。对不均匀和局部照射准确性较差,一般只能给出相 当于全身均匀照射时的吸收剂量 。A。2 制备剂量-效应曲线时,对供血者 的要求是:不患有急慢性疾病;非放射性工作者;半年 内无射线和化学毒物接触史;无过量受照史;近一个月 内无病毒感染史;不吸烟 。A。3 培养开始加秋水仙素法是培养开始加秋水仙素,可得到大量可供分析 的M1细胞 。实践证明,该方法简单易行,目前 已被国内多个实验室所采

21、用 。A。4 只分析Ml 细胞 。主要用d k 估算剂量 。在正常个体受照的淋 巴细胞 中,d i c 的 剂量反应几乎不受年龄和性别 的影响,在活体和离体照射时,对山c 的剂量反应无显著性差异,本底率又低(0。03%左右),在体内存 留时间较长,其形态特殊易于识别,所以山c 是估算生物剂量 的最好指标 。r 的产额仅仅是d c 的5% 10%,不能单独使用,可与山c 合并(d i c +r )估算生物剂量 。而a c e 可被多种化学诱变剂诱发,本底率较高,在生物剂量估算 中不被使用 。染色体畸变山c 和 r 见图A。1和图A。2。勰冫/岷t k -二 l f 戒 、嗲、屮、J、 飞鼍忄qJ

22、| 1轷矿J螋如飞醪 酴图A。1 4个双宥丝粒体和4对无着丝粒断片图A。2 1个着丝粒环和2对无着丝粒断片A.5 制各剂量-效应曲线时,分析细胞数计算公式是根据染色体畸变细胞率符合二项式分布,若已知畸变细胞率和允许误差,就可以根据二项式分布95%可信限公式求出应计数的细胞数,生物学实验一般容许误差采用15%,这需要计数相当大的细胞数,目前多采用%的容许误差,其公式为:p 1.96 (A。1)1.96=p 2o % (A。2)=(1一p )96。04 p令贝 刂 (A。3)GB/T28236-2011式中: p 畸变细胞率; 为应分析的细胞数。p 可以从预实验中得到,也可以在分析过程中求出。为提

23、高结果的可信限,应分析足够多的细胞数,分析细胞数的多少取决了畸变率。在建立染色体畸变的剂量-效应曲线时,应尽可能满足统计学要求,但由于染色体畸变的本底率相当低,如果对照(正常)剂量点难以满足统计学要求时,至少应分析 10000个M1细胞。如用于个体生物剂量估算,则须计数0 500个中期分裂细胞的染色体畸变,分析细胞越多,估计剂量的95%可信限范围越窄,越可靠。当大剂量急性照射时,畸变率高,需计数细胞数少,分析100 200细胞就可满足统计学要求,而在较小剂量照射时,往往需要计数大量的细胞数。A。6 含有某种畸变的细胞数占所分析的细胞数的份额为畸变细胞率,常以百分率(%)表示。A。6.1 染色体

24、畸变细胞率,属于二项分布,以百分率表示,计算公式如下: p =/100% 。 。 。 。 。 (A。4)式中: p 畸变细胞率,%;茁含畸变的细胞数 ;观察细胞数 。其标准误按下列公式计算:s p 。 (A。5)式中:s p 标准误; p 畸变细胞率; m 观察细胞数。总体率的可信限公式如下:总体率95%的可信限为 夕1.96% A。6)总体率99%的可信限为p 2.58% A。7)A。6.2 染色体畸变率,包括d c 、r 、a c e 和总畸变,属于泊松分布,以每细胞或每100个细胞有多少畸变表示,计算公式为: p 1=多/饣或 p 2=/饣100% (A。8)式中: p 1每细胞 的畸变

25、数,%;p 2每100个细胞畸变数,%;=畸变数;刀分析细胞数 。其标准误计算公式为:s 夕=鲁式中:s 标准误;=畸变数; 饣分析细胞数 。 (A。9)GB/T282362011总体率可信限公式如下:总体率95%的可信限为夕196s p (A。10)总体率99%的可信限为 p 2.58s p (A。11)畸变细胞率 以百分率表示,即每百个被观察细胞 中所见 的畸变细胞数 。而“d k +r ”率所用 的百分率,不代表真正的率,而是观察100个细胞所见的畸变数 目,有的细胞可含1个以上的畸变,有时可超过 100%,a c e 和总畸变率也是如此 。也可用每个细胞含有的畸变数表示 。 A.7 可

26、以通过解方程式的方法计算 回归系数 。 目前,已有各种拟合剂量-效应 曲线 的统计软件,只要输人变量(即D,剂量)、变量 丿(染色体畸变率)和要拟合的数学模式,即可得 出具体的回归系数(即回归方程式)并给出检验回归系数显著性的值以及检验拟合度的相关指数R2。A。8 应用举例:某人受Co 射线一次全身照射,照后48h 取血,采用FPG技术培养淋 巴细胞,分析 300个M1细胞,“d 忆+/共258个,估算其生物剂量 。 p =X/ (A。12)p =300=o .86s p =孺 00535“d i c +r /细胞 的95%可信 限为 夕196s po 。86+1.960。0535=0.964

27、9o .86-1.96 0.0535=0.755 1选择本实验室所建立 的Co 射线 照射 离体人外周血建立 的染色体 畸变(d i c +r )的剂量-效应曲线:丿=7.351210:+3.4037102D+8.0398102D2,该公 式 的剂量 范 围为0.25Gy 5.O Gy ,剂量率为1。O Gy /m i n ,y 为每细胞“d i c + 数,D为剂量(Gy )。按下列公式求解:D= (A13)将0.86、0.7551和 0.9649分别代人丿项(丿=p ),求D。D】、D2、D3分别代表平均 、 下限、 上限剂量(Gy )。o 。86=7.351210+3。403710 Dl

28、 +8。0398 10 D12o 。8526=0。034037冫1+0.080398冫12= =吼Do 。755 1=0.007 351 2+0。034037E)2-0.080398)22o .7477=0.034037冫2十0。080398E22= 站泓GDo .9649=0。007 351 2+0。 034037E)3-0。080398)32o 。9575=0。034037冫3+0.080398E)32战= 4GD结果:平均剂量3.05Gy ,95%可信限下限为2.84Gy ,上限为3.24Gy 。GB/T28236-201l估算的剂量为3。05(2.84 3.24)Gy 。有的实验室将建

29、立的剂量-效应曲线制成软件,直接用染色体畸变率求剂量,只要输人分析细胞数和染色体畸变率,立即可以得到平均剂量和95%可信限剂量。A。9 记录表格如下所示。样品名称:人外周血样品编号:玻片号:显微镜号:送样单位:人淋巴细胞染色体畸变分析剂估箅原始记录共 页,第 页(附图 页,表 页)检测项 目:人淋巴细胞染色体畸变分析检测依据:培养开始加秋水碱法,37培 k m s a 染色,显微镜下分,用“d i c +卢估算受送样 日期:分析细 d i c +r总 畸 “l l00r f m ar_ _ _检测人:校核人:检测 日期:9GB/T28236-2011人淋巴细胞染色体畸变分析剂估箅原始记录(续页

30、)玻片号: 显微镜号:共 页,第 页检测人:校核人:检测 日期: 年 月 日GB/T28236-2011附 录 B(资料性附录)延时性外照射 、 不均匀照射和局部照射时的剂估箅B。1 延时性外照射的生物剂估箅延时照射(p r o t r a c t e d e x p o s u r e )是指在长时期 内受到的低剂量率连续或间断性照射 。例如 比较均匀的剂量率 、 总剂量为几戈(Gy )的X或射线较长时间照射时,剂量平方项的系数下降,此时可引进一个依赖于时间的函数公式可写成: (B。1)式中: y 每细胞的畸 D吸收剂色本底犭、c 回B。2)此处,B。2 不均人体匀照射之均匀和不均最小剂量的

31、相对倍数(于3者,称为不均匀照射:B。2.1 不均在低LET匀照射时则偏离洎松分布 。用 (B。3)B。4)式中:方差 ; 观察细胞。=。为观察到 的 由c 总数,其中多为每细胞含山c 的个数,o 为观察相应 的细胞数,丿为均值( =。/)。当均匀照射时d i c 符合泊松分布,切值(| 1.96| ,方差与均值之 比(/丿)接近1。00,而不均匀或局部照射时,d k 不符合泊松分布,仍值)| 1.96| ,2/y 不接近于1。00,2/y (1。00为欠离散分布,2/y ) 1.00,为过离散分布。举例说明。例如 某人受GCo 射线急性照射,照后38天检查染色体,共分析300个细胞,“d i

32、 c +r ”总数为11丿=夕十+c G莎/莎胞)或每百个细胞 的畸变数,J为照射延续(采用2D。照射 的生物照射后,由于完全均匀的, 限不甚明确,数)表示,对射,而不均GB/T28236-2011134个,估算受照剂量为2.30(2。07 2.50)Gy ,检查是否为均匀照射。本例=300,=。=134,y =134/300=0。狃67 “d i c +卩分布: “d c +卩/细胞细胞数5oo 1234200 73 21 5 1=_伊z O0+r z 3+y 阱 孑 卜簧 300-1=158.167=0.5289等=滞=11:40屮一(m D y= =2.2582 2299(1-扎P勿 1

33、.96,2/)1。00,不服从泊松分布,为过离散分布,故此人受到的是不均匀照射。B。2.2 局部照射或不均匀照射时的受照份额和剂量估算:在局部或高度不均匀照射时,用染色体畸变分析只能给出全身等效剂量,这种剂量表达方式很不确切 。为此,IAEA(1986)介绍用不纯泊松分布方 法及品质值(Qd r )方法估计局部(或不均匀)照射时的受照份额及其相应剂量。B。2.2.1 不纯泊松分布法在局部照射条件下,d i c (或“d 忆+卢)在细胞间的分布是受照部分的泊松分布与未受照射部分分布的叠加,由于未照射部分含有的畸变可以忽硌,该分布与正常泊松分布相比,正常细胞所 占份额相对增 加,分布过于离散,利用

34、该特性,采用最大似然估计数学方法估计受照细胞的份额: y = 茁 1- 饣一 m o =号9r =菏式中:受照份额 ; 观察细胞数 ; m O不含有山c 的细胞数;=-d i c 总数 ; y 受照淋 巴细胞的平均畸变率 。根据公式(B。5)求出 丿,将其代人剂量效应曲线求出受照剂量 。考虑到细胞的间期死亡和有丝分裂延迟效应,r 值尚须修正才能求出受照的实际份额 。 r F=丁责 丁百 p =丐F=彘召Do仍 2(饣一D(1方 。 。 (B。5) 。 。 。 (B。6) B。7)GB/T28236-20l l式中: F实际受照份额; p 达到中期分裂相的细胞与受照细胞总数之 比值 ; D剂量;

35、D在一次击中造成细胞死亡的情况下,使活存细胞 由l O0%减少到37%所需要的剂量 。此时D=D37,而对多靶子细胞D37=D+Dq ,D。或D37可根据实验得 出。下面引用IAEA所举病例 。某人受到6.7192Ir 非均匀照射,伴有局部烧伤,计数1000个中期分裂相,有99个含非稳定 畸变的细胞,d i c 86个,r 2个和60个多余无着丝粒畸变,双着丝粒体分布为: n c /细胞 0 1 2 3 4 5绍 剧 包 梦 攵 932 56 9 1 1 1剂量-效应曲线为:y (双)=157104D+5。0106D2y (无=230 10“D+3.9 106D2用最大似然估计d c 产额 拦

36、矿 耦圹 镧将其代人方程,D=297c Gy 。r =厅于石=旒=0.176DO=27o c Gy , 纟D/D 召-297/2?0召-1【0.33r o .176 F=艽= =0393此人身体受照份额约40%,平均剂量约300c Gy 。 B.2.2.2 Qd r 法该方法考虑“d i c +卩在非稳定性畸变的M1细胞中的出现频率,以此作为品质值,用符号Qd r 表示。假设总的非稳定性畸变在受照细胞间呈泊松分布,“d i c +r ”率为y 1,总畸变率为 ”,总畸变细胞数为佗“,总的“d k +尸数为=, 四=萧=恧 硭 坛 T万仍举上例,=86,m =99y 】=1.57104D+5。0106D2 =2.30104D+3.9106D2 各项分别代人上式印=筅= =圭扣暨宁导锷毕是逻尧壳讠g 历丐用迭代法求解,D=319c Gy ,与不纯泊松分布法求得D为297c Gy 相一致。 上述两种方法都以分布的特征假设为前提,Qd r 法以总畸变分布服从泊松分布为前提,一般情况,这个假设不能得到满足,因而应用此法会带来系统误差。这两种方法都只适用于低LET辐射的急性照 射条件下的局部照射剂量估计,还必须具有含两个或两个以上“d k +尸的细胞时方可应用这两种方法。 总之,局部照射剂量估箅,较为多见,受到学者们的广泛重视,也取得一定进展,但尚需不断完善。 。 B。8)