温州医学院 临床免疫学检验系列 (2).ppt

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1、第二章抗原抗体反应,温州医科大学检验医学院吕建祎,2,第一节抗原抗体反应的原理第二节抗原抗体反应的特点第三节影响抗原抗体反应的因素第四节抗原抗体反应的类型,内容提要,3,抗原抗体反应(antigen-antibodyreaction):是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。体内：溶菌、杀菌、中和毒素、促进吞噬等作用，有时亦可引起免疫病理损伤。体外：凝集反应、沉淀反应、溶血反应等。,抗原表位与抗体超变区的结构互补性和亲和性，由抗原、抗体分子空间构型所决定的抗原表位与抗体超变区必须紧密接触,第一节抗原抗体反应的原理,1.静电引力：相反电荷之间（electrostaticforces）2.范

2、德华引力:原子、分子之间发生，极化作用最小（vanderWaalsinteractions）3.氢键:H和电负性大的N、O，最具特异性（hydrogenbond）4.疏水作用力:疏水基团接触，对水分子排斥，作用最大（hydrophobicinteractions）,抗原抗体结合力示意图,一、抗原抗体结合力,氢键,离子键,疏水作用力,范德华引力,离子键,二、抗原抗体的亲和性和亲合力,亲和性(affinity)：抗体分子上一个抗原结合点与相应的抗原表位之间的结合强度，取决于两者空间构型互补的程度K=K1结合常数/K2解离常数,亲和力与亲和性、与抗体结合价、抗原的有效抗原表位数目相关,亲合力(avi

3、dity):一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,8,亲水胶体,疏水胶体,转化,NaCl,可见反应,三、亲水胶体转化为疏水胶体,抗原抗体为蛋白质，带负电荷，表面有水化层,抗原抗体结合使表面电荷减少，水化层变薄，失去亲水性,特异性可逆性比例性阶段性,第二节抗原抗体反应的特点,10,特异性：抗原与抗体结合反应的专一性,抗原抗体反应特异性示意图,分子基础:抗原表位与抗体分子超变区之间空间构型的互补性,一、特异性,两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应,交叉反应（crossreactions）,抗原抗体交叉反应示意图,外-斐试验：斑疹

4、伤寒的诊断（变形杆菌与立克次体有相同的抗原表位）,二、可逆性,可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性,影响因素：抗体对相应抗原的亲合力亲合力环境因素对复合物的影响pH、离子强度,动态平衡,K=K1/K2,Ag+AbAg-Ab,临床应用:亲和层析纯化抗原或抗体,比例性：抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系,三、比例性,14,前带(prezone)：抗体过量后带(postzone)：抗原过量等价带(equivalencezone)：抗原抗体比例合适,沉淀量与抗原抗体的比例关系,注意临床应用！,第一阶段：特异性结合阶段，反应快，数秒至数分钟内完成，肉眼

5、不可见第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象，数分钟、数小时到数日不等，且受电解质、温度和酸碱度等影响,四、阶段性,抗原、抗体反应物的自身因素反应的环境因素,第三节影响抗原抗体反应的因素,一、反应物自身因素,抗原:理化性状(颗粒性、可溶性、单价抗原)表位种类和数目抗体:来源(R型或H型)浓度亲和性,18,电解质:0.85%NaCl溶液或各种缓冲液酸碱度:pH6pH9温度:1540，37最适，4冷凝集适当的振摇或搅拌加速反应,二、环境因素,凝集反应沉淀反应补体参与的反应中和反应标记免疫反应,抗原和抗体性质的不同和反应条件的差异、反应现象不同,第四节抗原抗体反应的类型,20,22,总结,抗原抗体反应概念抗原抗体之间的结合力涉及静电引力、范德华引力、_和_。抗原抗体反应的特点是_,_,_,_。影响抗原抗体反应的因素包括反应物的自身因素和环境因素。抗原抗体反应包括_、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型。,