温州医学院 临床免疫学检验系列 (16).ppt

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1、实验六金免疫测定技术,概述,金免疫测定技术：以胶体金颗粒作为示踪物，属于固相膜免疫分析技术胶体金：金盐（HAuCl4）被还原成金原子后形成的金颗粒悬液，因呈稳定的胶体状态。胶体金颗粒聚集后呈现红色。免疫金：胶体金颗粒与蛋白质通过静电引力结合形成的复合物。方法类型：斑点金免疫渗滤试验斑点金免疫层析试验,本次实验以测定尿中人绒毛膜促性腺激素（HCG）为例，来验证斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试验的基本原理，并通过实验熟悉其操作过程及临床应用,实验目的,一、斑点金免疫渗滤试验,实验原理,胶体金颗粒聚集后呈现红色斑点,实验材料,试剂：渗滤装置、免疫金、洗涤液器材：一次性滴管标本：尿液,实验步骤,（

2、1）将渗滤装置平放于实验台上，于加样孔内滴加尿液5滴，待完全渗入。（2）于加样孔内滴加免疫金试剂3滴，待完全渗入。（3）于加样孔内滴加洗涤液23滴，待完全渗入。（4）15min内观察结果,实验结果,在微孔膜中央出现红色斑点者判为阳性反应，说明标本HCG阳性；反之则为阴性反应，说明标本HCG阴性。斑点呈色的深浅相应地提示阳性强度。,注意事项,注意试剂的保存及使用温度注意加入的尿量和免疫金量尽量采集晨尿进行检测,二、斑点金免疫层析试验,阴性,阳性,实验原理,层析条,实验材料,试剂：层析条标本：尿液,实验步骤,（1）将层析条的加样端浸入尿液中25秒，并平放于桌面上。（2）15min内观察结果。,阳性,阴性,无效,实验结果,T,C,注意事项,打开层析条包装后应在1h内应用将层析条插入样品中，样品的液面不能超过试剂条的标记线尽量采集晨尿进行检测注意在规定时间内观察反应结果,临床应用,金免疫测定技术属于固相膜免疫测定技术，具有操作简便、快速以及操作人员不需技术培训，无需特殊仪器设备，试剂稳定、便于保存等特点，因此特别符合POCT项目的要求。只能作为定性试验，主要用于正常体液中不存在的物质（如传染病抗原和抗体等）和正常含量极低而在特殊情况下异常升高的物质（如HCG等）的检测。金免疫测定技术灵敏度不及酶标法和酶发光免疫测定法，在临床应用中应引起高度重视。,