090214高二生物《微生物的实验室培养》.ppt

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1、微生物的实验室培养微生物的实验室培养微生物微生物病毒病毒细菌细菌放线菌放线菌真菌真菌原生动物原生动物原核生物界原核生物界原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界是一切肉眼看不见或看不清楚的微是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。小生物的总称。一、微生物一、微生物 1.1.分类分类特点：小特点：小 简简 低低微生物微生物病毒病毒细菌细菌放线菌放线菌真菌真菌原生动物原生动物原核生物界原核生物界原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界是一切肉眼看不见或看不清楚的微是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。小生物的总称。 1.1.分类分类一、微生物一、微生物病毒的结构病毒的结构 2.2

2、.病毒病毒病病 毒毒 SARS冠状病毒、冠状病毒、 禽流感病禽流感病毒毒朊病毒（蛋白质病毒）朊病毒（蛋白质病毒）病毒的增殖病毒的增殖细菌的外形与大小细菌的外形与大小 3.3.细菌细菌图图1-1 常见的三种细菌典型形态常见的三种细菌典型形态A. 球菌球菌 B. 杆菌杆菌 C. 弧菌弧菌ABC细菌的构造细菌的构造细菌的结构细菌的结构细菌的结构细菌的结构细菌的构造细菌的构造细菌细胞由外向细菌细胞由外向里依次有鞭毛、里依次有鞭毛、菌（纤）毛、荚菌（纤）毛、荚膜、细胞壁、细膜、细胞壁、细胞膜、细胞质，胞膜、细胞质，细胞质中又有液细胞质中又有液泡、储存性颗粒、泡、储存性颗粒、核质等。核质等。伤伤寒寒杆杆菌

3、菌细细胞胞壁壁中中含含毒毒素素细胞壁细胞壁结构特点：结构特点：坚韧且有弹性坚韧且有弹性细胞壁有哪些功能？细胞壁有哪些功能？固定细胞外形；固定细胞外形；保护细胞免受外力的损伤；保护细胞免受外力的损伤；阻拦大分子物质进人细胞；阻拦大分子物质进人细胞；使细胞具有致病性及对噬菌体的使细胞具有致病性及对噬菌体的敏感性。敏感性。芽孢：芽孢：细菌形成的椭圆形的休眠体细菌形成的椭圆形的休眠体芽孢的壁很芽孢的壁很厚厚，对干旱、低温、高温，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又芽孢又小小又又轻轻，可以随风飘散。，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的当环境适宜（如

4、温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。异养菌：异养菌：腐生菌腐生菌寄生菌寄生菌 大部分病原菌大部分病原菌细菌的营养类型细菌的营养类型根据细菌所利用的能源和碳源的不同，根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。将细菌分为两大营养类型。自养菌：自养菌：分类，举例分类，举例?异养菌：异养菌：腐生菌腐生菌寄生菌寄生菌 大部分病原菌大部分病原菌光合自养型：光合自养型：光合细菌光合细菌细菌的营养类型细菌的营养类型根据细菌所利用的能源和碳源的不同，根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。将细菌分为两大营养类型。自养菌：自养

5、菌：分类，举例分类，举例?异养菌：异养菌：腐生菌腐生菌寄生菌寄生菌 大部分病原菌大部分病原菌光合自养型：光合自养型：光合细菌光合细菌化能自养型：化能自养型：硝化细菌，铁细菌，硫细菌硝化细菌，铁细菌，硫细菌细菌的营养类型细菌的营养类型根据细菌所利用的能源和碳源的不同，根据细菌所利用的能源和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。将细菌分为两大营养类型。自养菌：自养菌：分类，举例分类，举例?菌落菌落单个或少数细菌在固体培养基上大单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落

6、。菌落是鉴定菌种的菌落是鉴定菌种的重要依据。重要依据。细菌的细菌的菌落特菌落特征因种征因种而异而异 菌落菌落 4.4.放线菌放线菌结构：结构：单细胞原核单细胞原核分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）（2）繁殖）繁殖孢孢子子丝丝|孢孢子子链霉素、土霉素、四环素、链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素氯霉素、红霉素、庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素，其微生物中发现了几千种抗生素，其中中2/3是由放线菌产生的是由放线菌产生的 应用应用: 5.5.真菌真菌如上图是酵母菌电子显微镜下的形态结构如上图是酵母菌电子显微镜下的形态结构酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌青霉青

7、霉生生 殖殖腐生生活腐生生活孢子生殖孢子生殖 6.6.营养及功能营养及功能微生物化学元素组成：微生物化学元素组成： 6.6.营养及功能营养及功能C、H、O、N、P、S微生物化学元素组成：微生物化学元素组成： 6.6.营养及功能营养及功能C、H、O、N、P、S四大营养类型四大营养类型碳源碳源氮源氮源水水无机盐无机盐微生物化学元素组成：微生物化学元素组成：（二）培养基（二）培养基 人们按照微生物对营养物质人们按照微生物对营养物质的不同要求，配置出供其生长繁的不同要求，配置出供其生长繁殖的营养基质。殖的营养基质。 （1）按物理状态分：）按物理状态分：固体培养基固体培养基和液体培养基、半固体培养基和液

8、体培养基、半固体培养基。 （2）按功能分：）按功能分：选择培养基和鉴选择培养基和鉴别培养基别培养基。 （3）按成分分：）按成分分：天然培养基和合天然培养基和合成培养基成培养基。 1.1.培养基的类型培养基的类型固体培养基：菌落固体培养基：菌落液体培养基：液体培养基：表面生长表面生长均匀混浊生长均匀混浊生长沉淀生长沉淀生长半固体培养基：半固体培养基：无动力无动力 有动力有动力(弥散弥散) 2.不同的微生物往往需要采用不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方不同的培养基配方 2.不同的微生物往往需要采用不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方不同的培养基配方 3.不管哪种培养基，一般都含不管哪种培

9、养基，一般都含有有水、碳源、和氮源、水、碳源、和氮源、 无机盐无机盐等营等营养物质，另外还需要满足微生物生养物质，另外还需要满足微生物生长对长对pH、特殊营养物质以及氧气的、特殊营养物质以及氧气的要求要求。 4.4.培养基的用途培养基的用途 4.4.培养基的用途培养基的用途液体培养基：增菌、工业生产液体培养基：增菌、工业生产固体培养基：纯化（分离），固体培养基：纯化（分离），鉴定、活菌计数、鉴定、活菌计数、保藏菌种保藏菌种半固体培养基：动力检测半固体培养基：动力检测（三）无菌技术（三）无菌技术（三）无菌技术（三）无菌技术1.无菌技术的概念无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生无菌操作泛指在培养

10、微生物的操作中，所有防止杂菌污物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。染的方法。（三）无菌技术（三）无菌技术1.无菌技术的概念无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。染的方法。成功地培养微生物的关键。成功地培养微生物的关键。 （1）消毒定义：）消毒定义：2.消毒与灭菌的概念及两者的区别消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌的定义：）灭菌的定义：（1）消毒定义：）消毒定义：2.消毒与灭菌的概念及两者的区别消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌的定义：）灭菌的定义：3.常用的消毒与灭菌的方法常用的消毒与灭菌的方法消毒

11、的方法：消毒的方法：（1）煮沸消毒法）煮沸消毒法（2）巴氏消毒法）巴氏消毒法（3）化学药剂消毒法）化学药剂消毒法消毒的对象：消毒的对象：实验操作的空间、操作者的衣着和手实验操作的空间、操作者的衣着和手灭菌的方法：灭菌的方法：1.灼烧灭菌灼烧灭菌灭菌的方法：灭菌的方法：1.灼烧灭菌灼烧灭菌灭菌的方法：灭菌的方法：接种工具接种工具2. 干热灭菌干热灭菌（玻璃玻璃器皿、金属工具）器皿、金属工具）160-170 下加热下加热1-2h。3. 高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌（培养基培养基）100kPa、121 下下维持维持15-30min. 1.无菌技术除了用来防止实验室无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他

12、外来微生物污染外，的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？还有什么目的？旁栏思考旁栏思考 1.无菌技术除了用来防止实验室无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？还有什么目的？ 答：无菌技术还能有效避免操作答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。者自身被微生物感染。旁栏思考旁栏思考 2.请你判断以下材料或用具是否需请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管玻

13、棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手实验操作者的双手 2.请你判断以下材料或用具是否需请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手实验操作者的双手 答：（答：（1 1）、（）、（2 2）需要灭菌；）需要灭菌；（3 3）需要消毒。）需要消毒。微生物实验室培养的基本操作程序微生物实验室培养的基本操作程序1. 1. 器具的灭菌器具的灭菌2. 2. 培养基的配制培养基的配制3. 3.

14、培养基的灭菌培养基的灭菌4. 4. 倒平板倒平板5. 5. 微生物接种微生物接种6. 6. 恒温箱中培养恒温箱中培养7. 7. 菌种的保存菌种的保存三、实验操作三、实验操作(一一)制备牛肉膏蛋白胨培养基制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌用于培养细菌)三、实验操作三、实验操作(一一)制备牛肉膏蛋白胨培养基制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于培养细菌用于培养细菌)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方牛肉膏蛋白胨固体培养基配方牛肉膏牛肉膏 5.0g蛋白胨蛋白胨 10.0gNaCl 5.0g琼脂琼脂 20.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000mL1计算、称量计算、称量2溶化溶化

15、3调调pH：pH764过滤：这一步可以省去。过滤：这一步可以省去。5分装：分装过程中注意不要使培分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。不超过三角烧瓶容积的一半为宜。6加塞加塞7包扎包扎操作步骤操作步骤8灭菌灭菌: 将将50ml培养基用玻棒转移至三角锥培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为温度为121，灭菌，灭菌1530min

16、。将培养。将培养基用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，基用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在在160170 下灭菌下灭菌2h。 9倒平板倒平板: 待培养基冷却到待培养基冷却到50 左右时，在酒左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接后观察平板，无杂菌污染才可用来接种种. 10无菌检查：无菌检查： 将灭菌的培养基放入将灭菌的培养基放入37的温室中培的温室中培养养2448小时，以检查灭菌是否彻底。小时，以检查灭菌是否彻底。倒平板技术倒平板技术1.将灭过菌的将灭过菌的培养皿放在火培养皿放在火焰旁的桌面上，焰旁的桌面上，右手拿装

17、有培右手拿装有培养基的锥形瓶，养基的锥形瓶，左手拨出棉塞。左手拨出棉塞。1234倒平板技术倒平板技术2.右手拿锥形右手拿锥形瓶，使瓶口迅瓶，使瓶口迅速通过火焰。速通过火焰。1234倒平板技术倒平板技术12343.用左手的拇指用左手的拇指和食指将培养皿和食指将培养皿打开一条稍大于打开一条稍大于瓶口的缝隙，右瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的手将锥形瓶中的培养基培养基(约约1020mL)倒入培养倒入培养皿，左手立即盖皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。上培养皿的皿盖。倒平板技术倒平板技术12344.等待平板冷等待平板冷却凝固，大约却凝固，大约需需510min。然后，将平板然后，将平板倒过来放置，倒过来放置，使

18、皿盖在下，使皿盖在下，皿底在上。皿底在上。 1.培养基灭菌后，需要冷却到培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板。你用什么办左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？法来估计培养基的温度？问题讨论问题讨论 1.培养基灭菌后，需要冷却到培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板。你用什么办左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。不烫手时，就可以进行倒平板了。问题讨论问题

19、讨论 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？过火焰？ 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。的微生物污染培养基。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，使培养基表面的

20、水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？为什么？ 4.在倒平板的过程中，如果不小在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？为什么？ 答：空气中的微生物可能在皿答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，盖

21、与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微因此最好不要用这个平板培养微生物。生物。（二）纯化大肠杆菌（二）纯化大肠杆菌接种方法有：接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法微生物的接种技术：微生物的接种技术：平板划线的操作方法平板划线的操作方法 交叉划线法交叉划线法 连续划线法连续划线法 平板划线的操作平板划线的操作 一旦划破，会造成划线不均匀，一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一

22、个条状的菌落。处生长，会形成一个条状的菌落。问题讨论问题讨论 1.为什么在操作的第一步以及每为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时线操作结束时,仍然需要灼烧接种环仍然需要灼烧接种环吗？为什么？吗？为什么？ 答：答：操作的第一步灼烧接种环是为了操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源下一次划线时，接种

23、环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。菌污染环境和感染操作者。 2.在灼烧接种环之后，为什么要等在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？其冷却后再进行划线？ 2.在灼烧接种环之后，为什么要等在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死答：以免

24、接种环温度太高，杀死菌种。菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？端开始划线？ 3.在作第二次以及其后的划线操在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，划线的末端开始，能使细菌的数目随能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的

25、菌落。能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。稀释涂布平板法稀释涂布平板法1.将分别盛有将分别盛有9mL水的水的6支试管灭菌，支试管灭菌，并按并按101106的顺序编号。的顺序编号。2.用移液管吸取用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第培养的菌液，注入第二支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮二支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。3.从从101倍稀释的试管中吸取倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注稀释液，注入入102倍稀释的试管中，重复第倍稀释的试管中，重复第2步的操作。步的操作。依次类推，直到完成最后一支试管的稀释。依次类推，直到完成最后一支

26、试管的稀释。注意：注意： 移液管需要经过灭菌。操作时，移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰试管口和移液管离火焰12cm处处. 涂布平板的所有操作都应在火焰附涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第菌操作要求，想一想，第2步应如何进行步应如何进行无菌操作？无菌操作？问题讨论问题讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第菌操作要求，想一想，第2步应如何进行步应如何进行无菌操作？无菌操作？ 应从操

27、作的各个细节保证应从操作的各个细节保证“无菌无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。精灯火焰周围等等。问题讨论问题讨论微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养菌种的保存菌种的保存1.临时保藏临时保藏： 接种到固体斜面培接种到固体斜面培养基，菌落长成后置养基，菌落长成后置于于4冰箱保存。冰箱保存。2.长期保存长期保存： 甘油冷冻管藏法甘油冷冻管藏法本本课课题题知知识识小小结结例例1. 关微生物营养物质的叙述中，正

28、关微生物营养物质的叙述中，正 确的确的( )A.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量典例解析典例解析例例1. 关微生物营养物质的叙述中，正关微生物营养物质的叙述中，正 确的确的( )A.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量典例解析典例解析D 解析：不同的微生物，所需营养物

29、质解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。对于分析。对于A、B选项，它的表达是不完选项，它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如碳；有的碳源可同时是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于如蛋白胨。对于C选项，除水以外的选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；化碳，可

30、作为自养型微生物的碳源；NaHCO3，可作为自养型微生物的碳源，可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而和无机盐；而NaCl则只能提供无机盐。则只能提供无机盐。对于对于D选项，无机氮源提供能量的情况选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如还是存在的，如NH3可为硝化细菌提供可为硝化细菌提供能量和氮源。能量和氮源。例例2. 下面对发酵工程中灭菌的理解下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是不正确的是()A. 防止杂菌污染防止杂菌污染B. 消灭杂菌消灭杂菌C. 培养基和发酵设备都必须灭菌培养基和发酵设备都必须灭菌 D. 灭菌必须在接种前灭菌必须在接种前例例2. 下面对发酵工程中灭菌的理解下面对发酵工程中

31、灭菌的理解不正确的是不正确的是()A. 防止杂菌污染防止杂菌污染B. 消灭杂菌消灭杂菌C. 培养基和发酵设备都必须灭菌培养基和发酵设备都必须灭菌 D. 灭菌必须在接种前灭菌必须在接种前B 解析：灭菌是微生物发酵过程的一个解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。重要环节。A说的是灭菌的目的，因为发说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；以是正确的；B是错误的，因为灭菌的目是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能的是防止杂菌污染，但实际操作

32、中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。C是是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。编号编号成分成分含量含量粉状硫粉状硫10g（NH4）2SO40.4gK2HPO44.0gMgSO49.25gFeSO40.5gCaCl20.5gH2O100ml例例3右表是某微右表是某微生物培养基成分，生物培养基成分，请据此回答：请据此回答：

33、（1）右表培养基）右表培养基可培养的微生物类可培养的微生物类型是型是_.例例3右表是某微右表是某微生物培养基成分，生物培养基成分，请据此回答：请据此回答：（1）右表培养基）右表培养基可培养的微生物类可培养的微生物类型是型是_.自养型微生物自养型微生物 编号编号成分成分含量含量粉状硫粉状硫10g（NH4）2SO40.4gK2HPO44.0gMgSO49.25gFeSO40.5gCaCl20.5gH2O100ml例例3右表是某微右表是某微生物培养基成分，生物培养基成分，请据此回答：请据此回答：（2）若不慎将过）若不慎将过量量NaCl加入培养加入培养基中。基中。如不想浪费此培养如不想浪费此培养基，可

34、再加入基，可再加入_.编号编号成分成分含量含量粉状硫粉状硫10g（NH4）2SO40.4gK2HPO44.0gMgSO49.25gFeSO40.5gCaCl20.5gH2O100ml例例3右表是某微右表是某微生物培养基成分，生物培养基成分，请据此回答：请据此回答：（2）若不慎将过）若不慎将过量量NaCl加入培养加入培养基中。基中。如不想浪费此培养如不想浪费此培养基，可再加入基，可再加入_.含碳有机物含碳有机物 编号编号成分成分含量含量粉状硫粉状硫10g（NH4）2SO40.4gK2HPO44.0gMgSO49.25gFeSO40.5gCaCl20.5gH2O100ml（3）若除去成分）若除去成

35、分，加入（，加入（CH2O），），该培养基可用于培养该培养基可用于培养_.（4）表中营养成分共有）表中营养成分共有_类类.（5）不论何种培养基，在各种成分都）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是溶化后分装前，要进行的是_.（6）右表中各成分重量确定的原则是）右表中各成分重量确定的原则是_.（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分该增加的成分_.（3）若除去成分）若除去成分，加入（，加入（CH2O），），该培养基可用于培养该培养基可用于培养_.（4）表中营养成分共有）表中营养成分共有_类类.（5）不论何种培养基，在各种成分都）不论何种培养基，在

36、各种成分都溶化后分装前，要进行的是溶化后分装前，要进行的是_.（6）右表中各成分重量确定的原则是）右表中各成分重量确定的原则是_.（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分该增加的成分_.固氮微生物固氮微生物 （3）若除去成分）若除去成分，加入（，加入（CH2O），），该培养基可用于培养该培养基可用于培养_.（4）表中营养成分共有）表中营养成分共有_类类.（5）不论何种培养基，在各种成分都）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是溶化后分装前，要进行的是_.（6）右表中各成分重量确定的原则是）右表中各成分重量确定的原则是_.（7）若右表培养基用于菌

37、种鉴定，应）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分该增加的成分_.固氮微生物固氮微生物 3 （3）若除去成分）若除去成分，加入（，加入（CH2O），），该培养基可用于培养该培养基可用于培养_.（4）表中营养成分共有）表中营养成分共有_类类.（5）不论何种培养基，在各种成分都）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是溶化后分装前，要进行的是_.（6）右表中各成分重量确定的原则是）右表中各成分重量确定的原则是_.（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分该增加的成分_.固氮微生物固氮微生物 3 调整调整pH （3）若除去成分）若除去成分，加入（，加入

38、（CH2O），），该培养基可用于培养该培养基可用于培养_.（4）表中营养成分共有）表中营养成分共有_类类.（5）不论何种培养基，在各种成分都）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是溶化后分装前，要进行的是_.（6）右表中各成分重量确定的原则是）右表中各成分重量确定的原则是_.（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分该增加的成分_.固氮微生物固氮微生物 3 调整调整pH 依微生物的生长需要确定依微生物的生长需要确定 （3）若除去成分）若除去成分，加入（，加入（CH2O），），该培养基可用于培养该培养基可用于培养_.（4）表中营养成分共有）表中营养成分共有_类类.（5）不论何种培养基，在各种成分都）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是溶化后分装前，要进行的是_.（6）右表中各成分重量确定的原则是）右表中各成分重量确定的原则是_.（7）若右表培养基用于菌种鉴定，应）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分该增加的成分_.固氮微生物固氮微生物 3 调整调整pH 依微生物的生长需要确定依微生物的生长需要确定 琼脂（或凝固剂）琼脂（或凝固剂）