《基因工程及其应用》参考课件.ppt
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1、第第2节节基因工程及其应用基因工程及其应用 能发能发荧光荧光的热的热带斑带斑马鱼马鱼普通热带斑马鱼是不发荧光普通热带斑马鱼是不发荧光的的转基因鲑鱼转基因鲑鱼同时具有高产、同时具有高产、稳产和抗逆性稳产和抗逆性等优良品质的等优良品质的农作物新品种农作物新品种. .抗虫害的玉米抗虫害的玉米 你知道为什么能把人的基因你知道为什么能把人的基因“嫁接嫁接”到细菌上到细菌上吗?你能推测出,这种基因的吗?你能推测出,这种基因的“嫁接嫁接”是怎么实现是怎么实现的吗?你能举出一些类似的、与你的生活关系很密的吗?你能举出一些类似的、与你的生活关系很密切的例子吗?切的例子吗?“嫁接嫁接”了人胰岛素基因了人胰岛素基因
2、的工程菌的工程菌一、基因工程的概念:一、基因工程的概念:又叫做又叫做或或。通俗的说,。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,里,地改造生物的地改造生物的。原理原理操作环境操作环境操作对象操作对象操作水平操作水平基本过程基本过程结果结果基因重组基因重组生物体外生物体外基因基因/DNA/DNA分子水平分子水平剪切剪切拼接拼接导入导入表达表达人类需要的基因产物人类需要的基因产物1 1、 基因的基因的“剪刀剪刀” 专一性:专一性: 识别识别特定核苷酸特
3、定核苷酸序列序列,在,在特定的切点特定的切点切切DNADNA,具具特异性特异性。并裂解并裂解磷酸二酯磷酸二酯键键,产生两个产生两个黏性末端黏性末端。 二、基因操作的工具二、基因操作的工具例:大肠杆菌的一种限制酶能识别例:大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTCGAATTC序列,并在序列,并在G G和和A A之间切开。之间切开。被同一种限制酶切断的几个被同一种限制酶切断的几个DNADNA是否是否具有相同的黏性末端?具有相同的黏性末端?思考思考:2 2、基因的、基因的“针线针线” ” 连接酶的作用:连接酶的作用: 将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个
4、完整的为一个完整的DNADNA分子。分子。连接的部位:连接的部位: 生成磷酸二酯键生成磷酸二酯键DNADNA连接酶的作用过程连接酶的作用过程:连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的端连接起来,使之成为一个完整的DNADNA分子。分子。基因的针线:基因的针线:DNA连接酶连接酶G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割用同种限制酶切
5、割3 3、基因的运输工具、基因的运输工具运载体运载体 常用的运载体:质粒、常用的运载体:质粒、噬菌体和动植物病毒等噬菌体和动植物病毒等标记基标记基因,便因,便于进行于进行检测。检测。 质粒存在于许多质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物细菌和酵母菌等生物中中, ,是细胞染色体外是细胞染色体外能够自主复制的很小能够自主复制的很小的环状的环状DNADNA分子分子. .作为运载体必须具备哪些条件?作为运载体必须具备哪些条件?1 1)能够在宿主细胞中)能够在宿主细胞中复制复制并稳定地并稳定地保存保存。2 2)具多个)具多个限制酶切点限制酶切点,以便,以便与外源基因连接与外源基因连接。3 3)具有某些)具有某
6、些标记基因标记基因,便于进行,便于进行筛选筛选。如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。1 1、细胞染色体(或拟核、细胞染色体(或拟核DNADNA分子)外能自主复制的分子)外能自主复制的小型环状小型环状DNADNA分子;分子;2 2、质粒的存在对宿主细胞无影响;、质粒的存在对宿主细胞无影响;3 3、质粒的复制只能在宿主细胞内完成。、质粒的复制只能在宿主细胞内完成。质粒可作为有何特点?质粒可作为有何特点?从细胞中分从细胞中分离出离出DNA从大肠杆菌从大肠杆菌中提取质粒中提取质粒限制限制 酶酶提取目的基因提取目的基因限制酶限制酶目的基因与目的基因
7、与运载体结合运载体结合DNA连连 接酶接酶目的基因导目的基因导入受体细胞入受体细胞目的基因的目的基因的表达与检测表达与检测三、基因工程操作的基本步骤三、基因工程操作的基本步骤要使目的基因与对应的运载体重组,所需的两种酶是要使目的基因与对应的运载体重组,所需的两种酶是( )( )限制酶连接酶解旋酶还原酶限制酶连接酶解旋酶还原酶 2.2.基因工程的正确操作步骤是()基因工程的正确操作步骤是()使目的基因与运载体结合使目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞检测目的基因的表达是否符合特定性状要求检测目的基因的表达是否符合特定性状要求提取目的基因提取目的基因 1 1、基因工程与
8、作物育种、基因工程与作物育种苏云金杆菌苏云金杆菌转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转鱼抗寒基转鱼抗寒基因的番茄因的番茄转基因耐贮藏番茄(左)和普通番茄(右)转基因耐贮藏番茄(左)和普通番茄(右)不会引起过敏的转基因大豆不会引起过敏的转基因大豆生长快、肉质好的转基因生长快、肉质好的转基因鱼鱼( (中国中国) )乳汁中含有人生长激素的乳汁中含有人生长激素的转基因牛转基因牛( (阿根廷阿根廷) )中国农业大学获得中国农业大学获得的转基因克隆奶牛的转基因克隆奶牛导入人基因具特殊导入人基因具特殊用途的猪和小鼠用途的猪和小鼠2 2、基因工程与药物研制、基因工程与药物研制我国生产的部分基因我国
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- 基因工程及其应用 基因工程 及其 应用 参考 课件
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