2022年实验室作业指导书资料.docx

《2022年实验室作业指导书资料.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2022年实验室作业指导书资料.docx（22页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、2022年实验室作业指导书资料 第一部分 水样采集、贮存和运输操作实施细则 一水样的分类 （一）综合水样 把从不同采样点同时采集的各个瞬时水样混合起来所得到的样品称为综合水样。 瞬时水样 对于组成较稳定的水体或水体的组成在相当长的时间和相当大的空间范围改变不大，采瞬时样品具有很好的代表性。 混合水样 是指在同一采样点上于不同时间所采集的瞬时样的混合样。 平均污水样 对于排放污水的企业而言，生产的周期性影响着排污的规律性，在排放流量不稳定的状况下，可将一个排污口不同时间的污水样，依照流量的大小按比例混合。 其它水样 例如为监测洪水期或退水期的水质改变，调整水污案事故的影响等都须采集相应的水样，采

2、集这类水样时，须依据污染物进入水系的位置和扩散方向布点并采样，一般采集瞬时水样。 二地表水和地下水样的采集 （一）水样的类型 （1）表层水 在河流、湖泊可以干脆汲水的场合，可用适当的容器如水桶采样，要留意不能混入漂移于水面上的物质。 （2）肯定深度的水 在湖泊、水库等采集肯定深度的水时，可用直立式或有机玻璃采水器。（3）泉水、井水 对于自喷的泉水，可在涌口处干脆采样，采集不自喷的泉水时，将停滞在抽水管的水汲出，新水更替之后，再进行采样。从井水采集水样，必需在充分抽汲后进行，以保证水样能代表地下水水源。 （4）自来水或抽水设备中的水 采集这些水样时，应先放水数分钟，使积留在水管中的杂质及陈旧水排

3、出，然后再取样。 采集水样前，应先用水样洗涤采样器容器、盛样瓶及塞子 2-3 次（油类除外）。 （二）采样前的打算 a确定采样负责人 主要负责制定采样安排并组织实施。 b制定采样安排 采样负责人在制定安排前要充分了解该项监测任务的目的和要求；应对要采样的监测断面四周状况了解清晰；并熟识采样方法、水样容器的洗涤、样品的保存技术。在有现场测定项目和任务时，还应了解有关现场测定技术。 采样安排应包括：确定的采样垂线和采样点位、测定项目和数量、采样质量保证措施，采样时间和路途、采样人员和分工、采样器材和交通工具以及须要进行的现场测定项目和平安保证等。 c. 采样器材与现场测定仪器的打算 采样器材主要是

4、采样器和水样容器。关于水样保存及容器洗涤方法见表 1-1。本表所列洗涤方法，系指对已用容器的一般洗涤方法。如新启用容器，则应事先作更充分的清洗，容器应做到定点、定项。 采样器的材质和结构应符合水质采样器技术要求中的规定。 表 1-1 水样保存和容器的洗涤 项目 采样 容器 保存剂及用量 保存期 采样量/ ml 容器 洗涤 浊度* GP 12h 250 I 色度* GP 12h 250 I pH* GP 12h 250 I 电导* GP 12h 250 I 悬浮物* GP 14d 500 I 碱度* GP 12h 500 I 酸度* GP 30d 500 I COD G 加 H 2 SO 4 ，

5、pH≤2 2d 500 I 高锰酸盐指数* G 2d 500 I DO* 溶解 氧瓶 加入硫酸锰，碱性 KI 叠氮化钠溶液，现场固定 24h 250 I BOD* 溶解 氧瓶 12h 250 I TOC G 加 H 2 SO 4 ，pH≤2 7d 250 I F- * P 14d 250 I Cl - * GP 30d 250 I Br - * GP 14h 250 I I - GP NaOH，pH=12 14h 250 I SO 4 2- * G，P， 30d 250 I PO 4 3- GP NaOH, H 2 SO 4 调pH=7，CHCl 3 0.5% 7d 250 IV

6、总磷 GP HCl, H 2 SO 4 ，pH≤2 24h 250 IV 氨氮 GP H 2 SO 4 , pH≤2 24h 250 I NO 2 - -N* GP 24h 250 I 项目 采样 容器 保存剂及用量 保存期 采样量/ ml 容器 洗涤 NO 3 - -N* GP 24h 250 I 总氮 GP H 2 SO 4 , pH≤2 7d 250 I 硫化物 GP 1L 水样加NaOH至 pH=9，加入 5%抗坏血酸 5ml，饱和24h 250 I EDTA3ml,滴加饱和Zn（AC） 2 至 至胶体产生，常温蔽光 总氮 GP NaOH，pH≥9 12h 25

7、0 I Be GP HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 B P HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 I Na P HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 II Mg G.P. HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 II K P. HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 II Ca GP HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 II Cr GP NaOH，Ph≥9 14d 250 III Mn GP HNO 3 ，

8、1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 III Fe GP HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 III Ni GP HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 III Cu P HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 III Zn P HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 III As GP HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml，DDTC 法，HCl 2 ml 14d 250 I Se GP HCl，1L 水样加浓 HCl 2ml 14d 250 III

9、 Ag GP HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 2ml 14d 250 III Cd GP HNO 3 ，1L 水样加浓 HNO 3 10ml 14d 250 III Sb GP HCl，0.2（氢化物法） 14d 250 III 项目 采样 容器 保存剂及用量 保存期 采样量/ ml 容器 洗涤 Hg GP HCl，1如水养为中性，1L 水样中加浓 HCl 10ml 14d 250 III Pb GP HNO 3 ，1如水养为中性，1L 水样中加浓 HCl 10ml 14d 250 III 油类 G 加入 HCl 至 pH≤2 7d 250 II 农药类* G 加入抗坏血酸0.

10、01g0.02g 除去残余氯 24h 1010 I 除草剂类* G （同上） 24 h 1010 I 邻苯二甲酸脂类* G （同上） 24 h 1010 I 挥发性有机物* G 用1+10HCl调至pH=2 加入 0.010.02g抗坏血酸除去残余氯 12h 1010 I 甲醛* G 加入 0.20.5g/L硫代硫酸钠除去残余氯 24h 250 I 酚类* G 用 H 3 PO 4 调至pH=2加入0.010.02g抗坏血酸除去残余氯 24h 1010 I 阴离子活性剂 GP 24h 250 IV 微生物* G 加入硫代硫酸钠至 0.20.5g/L 除去残余物，4保存 12h 250 I 生物

11、* GP 不能现场测定时用甲醛固定 12h 250 I 注：（1）*表示应尽量作现场测定； *低温（04）避光保存。 （2）G 为硬质玻璃瓶；P 为聚乙烯瓶（桶）。 （3）为单项样品的最少采样量； 如用溶出伏安法测定，可改用 1L 水样中加 19ml 浓 HClO 4 。 （4）I，II，III，IV 表示表示四种洗涤方法，如下： I：洗涤剂洗一次，自来水洗三次，蒸馏水洗一次； II：洗涤剂洗一次，自来水洗二次，1+3 HNO 3 荡洗一次，自来水洗三次，蒸馏水洗一次； III：洗涤剂洗一次，自来水洗二次，1+3 HNO 3 荡洗一次，自来水洗三次，去离子水一次； IV：铬酸洗液洗一次，自来水

12、洗三次，蒸馏水洗一次。 假如采集污水样品可省去用蒸馏水、去离子水清洗的步骤。 （5）经 160干热灭菌 2h 的微生物、生物采集容器，必需在两周内运用，否则应 重新灭菌；经 121高压蒸汽灭菌 15min 的采样容器，如不马上运用，应于 60将瓶内冷凝水烘干，两周内运用。细菌监测项目采样时不能用水样冲洗采样容器，不能采混合水样，应单独采样后 2h 内送试验室分析。 （三）采样方法 a、采样器 （1）聚乙烯塑料桶 （2）单层采水瓶 （3）直立式采水器 （4）自动采样器 b、采样数量 在地表水质监测中通常采集瞬时水样，所需水样量见 1-1。此采样量已考虑重复分析和质量限制的须要 ，并留有余地。 c

13、、在水样采入或装入容器后，应马上按 1-1 的要求加入保存剂。 d、油类采样：采样前先破坏可能存在的油膜，用直立式采水器把玻璃材质容器安装在采水器的支架中，将其放到 300mm 深度，边采水边向上提升，在到达水面时剩余适当空间 。 e、留意事项 污水采样方法 污水的监测项目根据行业类型有不同要求。 在分时间单元采集样品时，测定 pH、COD、BOD 5 、DO、硫化物、油类、有机物、余氯、粪大肠菌群、悬浮物、放射性等项目的样品，不能混合，只能单独采样。 （2）不同监测项目要求 对不同的监测项目应选用的容器材质、加入的保存剂及其用量与保存期、应采集的水样体积和容器及其洗涤方法等见表 1-1。 （

14、3）实际采样位置的设置 实际的采样位置应在采样断面的中心。当水深大于 1m 时，应在表层下 1/4 深度处采样；水深小于或等于 1m 时，在水深的 1/2 处采样。 （三）留意事项 用样品容器干脆采样时，必需用水样冲洗三次后再行采样。但当水面有浮油时，采油的容器不能冲洗。 采样时应留意除去水面的杂物、垃圾等漂移物。 用于测定悬浮物、BOD 5 、硫化物、油类、余氯的水样，必需单独定容采样，全部用于测定。 在选用特别的专用采样器（如油类采样器）时，应根据该采样器的运用方法采样。 采样时应仔细填写污水采样记录表，表中应有以下内容：污染源名称、监测目的、监测项目、采样点位、采样时间、样品编号、污水性

15、质、污水流量、采样人姓名及其它有关事项等。 凡需现场监测的项目，应进行现场监测。 （四）污水采样时的流量测量 流量测量方法 污水流量计法：污水流量计的性能指标必需符合污水流量计技术要求。 容积法：将污水纳入已知容量的容器中，测定其充溢容器所须要的时间，从而计算污水量的方法。 流速仪法：通过测量排污渠道的过水截面积，以流速仪测量污水流速计算污水量， 量水槽法：在明渠或涵管内安装量水槽，测量其上游水位可以计量污水量。 常用的有巴氏槽。 溢流堰法：是在固定形态的渠道上安装特定形态的开口堰板，过堰水头与流量有固定关系，据此测量污水流量。依据污水量大小可选择三角堰、矩形堰、梯形堰等。 四、水样的保存与运

16、输 （一）水样的保存 （1）导致水质改变的因素 水样采集后，应尽快送到试验室分析。样品久放，受下列因素影响，某些组分的浓度可能会发生改变。 生物因素：微生物的代谢活动，如细菌、藻类和其它生物的作用可变更很多被测物的化学形态，它们可影响很多测定指标的浓度，主要反映在 pH、溶解氧、生化需氧量、二氧化碳、碱度、硬度、磷酸盐、硫酸盐、硝酸盐和某些有机化合物的浓度改变上。 化学因素：测定组分可能被氧化或还原，如六价铬在酸性条件下易被还原为三价铬，低价铁可氧化成高价铁。 物理因素：测定组分被吸附在容器壁上或悬浮颗粒物的表面上，如溶解的金属或胶状的金属，某些有机化合物以及某些易挥发组分的挥发损失。 （2）

17、水样保存方法 1）冷藏或冷冻：样品在 4冷藏或将水样快速冷冻，贮存于暗处，可以抑制生物活动，减缓物理挥发作用和化学反应速度。 2）加入化学保存剂： 限制溶液 pH 值：测定金属离子的水样常用硝酸酸化至 pH12,既可以防止重金属的水解沉淀，又可以防止金属在器壁表面上的吸附，同时在 pH12 的酸性介质中还能抑制生物的活动。用此法保存，大多数金属可稳定数周或数月。测定氰化物的水样需加氢氧化钠调至 pH12。测定六价铬的水样应加氢氧化钠调至 pH8，因在酸性介质中，六价铬的氧化电位高，易被还原。保存总铬的水样，则应加硝酸或硫酸至 pH12。 加入抑制剂：为了抑制生物作用，可在样品中加入抑制剂。在测

18、酚水样中用磷酸调溶液的 pH 值，加入硫酸铜以限制苯酚分解菌的活动。 加入氧化剂：水样中痕量汞易被还原，引起汞的挥发性损失，加入硝酸重铬酸钾溶液可使汞维持在高氧化态，汞的稳定性大为改善。 加入还原剂：测定硫化物的水样，加入抗坏血酸对保存有利。含余氯水样，能氧化氰离子，可使酚类、烃类、苯系物氯化生成相应的衍生物，为此在采样时加入适量的硫代硫酸钠予以还原，除去余氯干扰。 样品保存剂如酸、碱或其它试剂在采样前应进行空白试验，其纯度和等级必需达到分析的要求。 （3）水样的保存条件 不同监测项目样品的保存条件见表 11。可作为水环境监测保存样品的一般条件。此外，由于地表水、废水（或污水）样品的成分不同，

19、同样保存条件很难保证对不同类型样品中待测物都是可行的。因此，在采样前应依据样品的性质、组成和环境条件，要检测保存方法或选用的保存剂的牢靠性。经探讨表明，污水或受纳污水的地表在测定重金属 Pb、Cd 、Cu、Zn 等时，往往需加入酸达到 1%，才能保证重金属不沉淀或不被容器壁吸附。 （二）水样的管理与运输 （1）水样的管理 样品是从各种水体及各类型水中取得的实物证据和资料，水样妥当而严格的管理是获得牢靠监测数据的必要手段。 水样采集后，往往依据不同的分析要求，分装成数份，并分别加入保存剂。对每一份样品都应附一张完整的水样标签。水样标签的设计可以依据实际状况，一般包括：采样目的，监测点数目，位置，

20、监测日期，时间，采样人员等。标签运用不褪色的墨水填写，并坚固地贴于盛装水样的容器外壁上。 （2）水样的运输和交接 水样采集后必需马上送回试验室，依据采样点地理位置和每个项目分析前最长可保存的时间选用适当的运输方式，在现场工作起先之前，就要支配好水样的运输工作，以防延误。 凡能做现场测定的项目，均应在现场测定。 水样运输前应将容器的外（内）盖盖紧。装箱时应用泡沫塑料等分隔，以防破损。箱子上应有切勿倒置等标记。同一采样点的样品瓶应尽量装在同一个箱子中；如分装在几个箱子内，则各箱内均应有同样的采样记录表。运输前应检查所采水样是否已全部装箱。运输时应有特地押运人员。水样交化验室时，应有交接手续。 其次

21、部分 室内分析管理制度 1) 试验室应制定仪器的运用管理制度、平安操作制度、化学制剂的运用管理制度、样品管理制度等，试验人员应严格驾驭，仔细执行。 2) 试验室内整齐、物品摆放整齐、试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、检修，严禁在冰箱内存放私人食品，进入试验室必需穿工作服，外单位人员不得擅自进入，试验室人员严格按标准及要求执行操作规程，不得违章。 3) 试验室内不准会客、吸烟、用餐，不准喧哗、打闹等与试验无关的活动；试验室内不准存放个人物品及与试验无关的物品，严禁带小孩进入试验室和工作间；未经许可不准拉线，钉钉子，张挂图表或移动固定设备。 4) 试验人员娴熟地驾驭本岗位的监测分析制度

22、，对担当的监测项目做到理解原理，操作正确，严守规程，精确无误。接受新项目前，应在试测工作中完成规定的各种质量限制试验，达到要求才能进行新项目的监测。 5) 仔细做好分析测试前的各项技术打算工作，试验用水、试剂、标准溶液、器皿、仪器等均应符合要求，方能进行分析测试，样品在标准方法或技术规范规定的保存期内完成分析测试，若有意外损坏、丢失或失效现象刚好报告，必要时须重新采样，样品测试完毕后所剩余样品，按规范要求，保存期较长的样品，在测定结果报出，质控数据经审核合格后，方可将样品倒掉，按要求保存和处置，防止造成环境污染。 6) 对于试验过程中出现的样品损坏事故，设备损坏事故，停电、停水中断监测事故，被

23、盗事故及影响试验质量的其他事故，要爱护现场刚好报告领导。 7) 试验室环境条件保证满意标准的要求，对各种设施定期检查，发觉问题刚好维护和修理，保证分析工作处于最佳状态，负责地填报监测分析结果，做到数据清楚，记录完整，校对严格，实事求是。 8) 刚好地完成分析测试后的试验室清理工作，做到现场环境清洁，工作交接清晰，做好平安检查。 第三部分 粪大肠菌群分析检测实施细则 粪大肠菌群是总大肠菌群中的一部分，主要来自粪便，在 44.5温度下生长并发酵乳糖产酸产气的大肠菌群称为粪大肠菌群。用提高培育温度的方法，造成不利于来自自然环境的大肠菌群生长的条件，使培育出来的菌主要为来自粪便中的大肠菌群，从而更精确

24、地反映出水质受粪便污染的状况。粪大肠菌群的测定可用多管发酵法。 多管发酵法： 1、 培育基 （1）单倍和三倍乳糖蛋白胨培育液 乳糖蛋白胨培育液 蛋白胨 10 克 牛肉浸膏 3 克 乳糖 5 克 氯化钠 5 克 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1mL 蒸馏水 1010 mL 将蛋白胨、牛肉浸膏、氯化钠、乳糖加热溶解于 1010 mL 蒸馏水中，调整 PH 为 7.27.4，再加入 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1mL，充分混匀，分装于含有倒置的小玻璃管的试管中，置于高压蒸汽灭菌器中，在 115灭菌 20min， 贮存于暗处备用。 依据须要，按上述配方的比例（除蒸馏水外）配成三倍浓缩的乳糖蛋白胨培育液，制法

25、同上。 （2）EC 培育液： 胰胨 20 克 乳糖 5 克 胆盐三号 1.5 克 磷酸氢二钾（K 2 HPO 4 ） 4 克 磷酸二氢钾（KH 2 PO 4 ） 1.5 克 氯化钠 5 克 蒸馏水 1010 mL 将上述成分加热溶解，然后分装于含有玻璃倒管的试管中，置高压蒸汽灭菌器中，在115灭菌 20min，灭菌后 PH 应为 6.9。 2、步骤 （1）水样接种量 将水样充分混匀后，依据水样污染的程度确定水样接种量。每个样品至少用三个不同的水样量接种。同一接种水样量要有五管。 相对未受污染的水样接种量为 10ml、1ml、0.1ml。受污染水样接种量依据污染程度接种 1ml、0.1ml、0.

26、01ml 或 0.1ml、0.01ml、0.001ml 等（见下表）。 水样种类 检测方法 接种量（ml） 101 50 10 1 0.1 0.01 0.001 0.0001 0.00001 较清洁的湖滤膜法 × × × 井水 多管发酵法 × × × 一般的江水 滤膜法 × × × 河水、塘水 多管发酵法 × × × 城市内的河水滤膜法 × × × 湖水、塘水 多管发酵法 × × ×

27、; 城市原污水 滤膜法 × × × 多管发酵法 × × × 如接种体积为 10 ml，则试管内应装有三倍浓度乳糖蛋白胨培育液 5 ml；如接种 1 ml或少于 1ml，则可接种于一般浓度的乳糖蛋白胨培育液 10 ml 中。 （2）初发酵试验 将水样分别接种到盛有乳糖蛋白胨培育液的发酵管中。在 37±0.5下培育 24h±2 h。产酸和产气的发酵管表明试验阳性。如在倒管内产气不明显，可轻拍试管，有小气泡升起的为阳性。 （3）复发酵试验 稍微振荡初发酵试验阳性结果的发酵管，用 3 mm 接种环或灭菌

28、棒将培育物转接到EC 培育液中。在 44.5±0.5温度下培育 24h±2 h，培育后马上视察，发酵管产气则证明为粪大肠菌群阳性。 3.计算和报告结果 依据不同接种量的发酵管所出现阳性结果的数目，从 MPN 表（见下表）中查得相应的 MPN 指数，按总大肠菌群的计算方法计算每升水中粪大肠菌群细菌的 MPN 值。 最可能数（MPN）表 （接种 5 份 10ml 水样、5 份 1ml 水样、5 份 0.1ml 水样时，不同阳性及阴性状况下 101ml水样中细菌数的最可能数和 95可信限值） 出现阳性份数 每101ml水样中细菌数的最可能数 95置信限值 出现阳性份数 每

29、101ml 水样中细菌数的最可能数 95置信限值 10ml 管 1ml 管 0.1ml 管 下限 上限 10ml 管 1ml 管 0.1ml 管 下限 上限 0 0 0 <2 4 2 1 36 9 78 0 0 1 2 <0.5 7 4 3 0 27 9 80 0 1 0 2 <0.5 7 4 3 1 33 11 93 0 2 0 4 <0.5 11 4 4 0 34 12 93 1 0 0 2 <0.5 7 5 0 0 23 7 73 1 0 1 4 <0.5 11 5 0 1 34 11 89 1 1 0 4 <0.5 11 5 0 2 43 15

30、 110 1 1 1 6 <0.5 15 5 1 0 33 11 93 1 2 0 6 <0.5 15 5 1 1 46 16 120 2 0 0 5 <0.5 13 5 1 2 63 21 150 2 0 1 7 1 17 5 2 0 49 17 130 2 1 0 7 1 17 5 2 1 73 23 173 2 1 1 9 2 21 5 2 2 94 28 220 2 2 0 9 2 21 5 3 0 79 25 190 2 3 0 12 3 28 5 3 1 110 31 250 3 0 0 8 1 19 5 3 2 140 37 310 3 0 1 11 2 25

31、5 3 3 180 44 500 3 1 0 11 2 25 5 4 0 130 35 300 3 1 1 14 4 34 5 4 1 173 43 190 3 2 0 14 4 34 5 4 2 220 57 730 3 2 1 17 5 46 5 4 3 280 90 850 3 3 0 17 5 46 5 4 4 350 120 1010 4 0 0 13 3 31 5 5 0 240 68 750 4 0 1 17 5 46 5 5 1 350 120 1010 4 1 0 17 5 46 5 5 2 540 180 1400 4 1 1 21 7 63 5 5 3 920 300 3

32、200 4 1 2 26 9 78 5 5 4 1600 640 5800 4 2 0 22 7 67 5 5 5 ≥2400 假如接种的水样量不是 10 mL、1 mL 和 0.1mL，而是较低的或较高的三个浓度的水样量，也可以查表求得 MPN 指数，再经下面的公式换算成每 101mL 的 MPN 值。 MPN 值=MPN 指数×10（ mL）/ 接种量最大的一管（ mL） 我国目前以 1L 为报告单位，MPN 值再乘 10，即为 1L 水样中的粪大肠菌群数。 第四部分 细菌总数分析检测实施细则 细菌总数测定是测定水中需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌密度的方法。因为细菌能以单独个

33、体、成双成对、链状、成簇等形式存在，而且没有任何单独一种培育基能满意一个水样中全部细菌的生理要求。所以，由此法所得的菌落可能要低于真正存在的或细菌的总数。事实上是指 1mL 水样在一个养分琼脂培育基中，于 37培育 24h 后，所生长细菌菌落的总数。此法主要作为判定饮用水、水源水、地表水等污染程度的标记。 （一）培育基 养分琼脂培育基 （1） 养分琼脂培育基 为削减配置中的误差，尽量选用市售已配好的综合培育基 （二） 水样的稀释 1、 选择稀释度 稀释度要选择相宜，以期在平皿上的菌落总数介于 30300 之间。例如，假如认为干脆水样的标准平皿计数可高达 3000，就应当将水样稀释到 1：101

34、 后，在进行平皿计数。 大多数饮用水水样，未经稀释干脆接种 1ml，所得的菌落总数可适于计数。 （三） 水样的稀释方法 1) 将水样用力振摇 2025 次，使可能存在的细菌凝团成分散状。 2) 以无菌操作方法吸取 10ml 充分混匀的水样，注入盛有 90ml 灭菌水的三角烧瓶中（可放有适量的玻璃珠）混匀成 1：10 稀释液。 （五）计算和报告计数结果 细菌总数是以每个平皿菌落的总数或平均数（例犹如一个稀释度两个重复平皿的平均数）乘以稀释倍数而得来的。各种不怜悯况的计算方法如下： 1、选择平均菌落在 30300 之间，则只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平均菌落数乘其稀释倍数报告（见

35、下表例 1）。 若有两个稀释度，其平均菌落数约在 30300 之间，则应按二者之比值来确定。若其比值小于 2 应报告两者的平均数，若大于 2 则报告其中较小的数值（见表例 2） 第五部分 显微镜室管理制度 （1）防潮 显微镜放置位置应离墙、离地、环境干燥，罩内放 12 袋硅胶作干燥剂，常常检查硅胶是否失效。 （2） 防尘 必需常常保持显微镜的工作环境的清洁，运用完毕加防尘罩，严禁随意开窗。 （3）防震 显微镜是精密仪器，搬动要轻、稳，用右手握镜臂，左手托镜座，不能单手提着走。防止剧烈振动和硬性操作，试验完毕后，应将显微镜光亮度调整到最小，关显微镜，然后再拔下电源插座。 （4） 防腐蚀、防热 显

36、微镜不得于强酸、强碱等腐蚀性物品一起存放。物镜不能接触强酸、碱等化学物品，运用高倍镜视察液体标本时，肯定要加盖玻片，不能受阳光直晒，不要接近热源。 转移的量 培育皿 1ml 0.1ml 1ml 0.1ml 水样 101 无菌稀释水 皿中所含的实际水样量 1ml 0.1 0.01 0.001 （5）光学系统的擦拭，用干净的绒布自镜片中心向边缘依次旋转擦拭，不应反复擦拭、如镜片上有油渍、污物或指痕，可用脱脂棉签蘸上少量乙醇乙醚混合液，擦拭，镜片出现霉点时，可用棉签蘸水润湿后，蘸碳酸钙擦拭，最终应将粉末清除干净。 （6）试验完毕，盖上镜头盖，移去载物台上的玻片，转低倍镜，对准光路，降下镜筒和载物台，

37、盖好防尘罩，登记运用状况，作好清洁工作。 （7）显微镜运用留意事项歌诀： 能用低镜勿用高，操作规程要记牢。 禁手抚摩目物镜，擦镜拭擦效果好。 勿乱转焦转换器，载物台保持干燥。 取送镜时轻拿放，右手握臂左托座。 试验完毕复原样，送回原处保存好。 第六部分 微生物室管理制度 1试验前，超净工作台和无菌室开紫外灯照耀 30 分钟，用 75%的酒精擦手，进入试验室必需穿工作服，进入无菌室换无菌衣，戴好口罩，不必要的物品不得携入室内，非试验人员不得进入试验室，严格执行平安操作规程，同时进入同一无菌室的操作人员不得超过三人。 2室内必需保持清洁卫生，出入更衣，不准将雨具等潮湿物品带入操作间，保持安静，不准

38、在室内吸烟、进食及用手触摸面部，并应尽量削减走动，以防污染或自身感染，非必要物品禁止带入试验室，必要书籍和资料带入后应远离操作台。 3试验室应具有优良的采光条件和照明设备，良好的通风条件，工作台面应保持水平和无渗漏，地面应光滑和简单清洗。 4无菌室内应备有盛装消毒液的标本缸和酒精棉球，被污染的器皿应放入消毒缸内，接种致病菌时，应在台面上铺衬经来苏液浸泡过的纱布，以免菌液飞溅造成污染。室内任何物品未经许可禁止带出细菌培育室，各项试验在操作间进行，接种环用完后应马上火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡于消毒缸内，器皿运用后随时清洗，染菌后应严格高压灭菌，不得乱弃乱扔。 5在进行高压、干烤、消毒等工作时，试验人员不得擅自离现场，仔细视察温度，时间。试验完毕，即时清理现场和试验用具，对染菌带毒物品进行消毒灭菌处理，洗净双手，工作服应常常清洗保持整齐，必要时高压消毒，开紫外灯照耀 30 分钟，切断电源，物品归类还原，待细致检查室内平安后，方可离去。 第22页 共22页第 22 页 共 22 页第 22 页 共 22 页第 22 页 共 22 页第 22 页 共 22 页第 22 页 共 22 页第 22 页 共 22 页第 22 页 共 22 页第 22 页 共 22 页第 22 页 共 22 页第 22 页 共 22 页