溶液配制参考.doc

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1、【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流溶液配制参考.精品文档.一、常用溶液的配制 （一）溶液配制注意事项1药品要有较好的质量 试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，GR）、分析试剂（Antalytical reagent，AR）化学纯（Chemical pure，CP）和实验试剂（Laboratory reagent，LR）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。2药品称量要精确。3配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.57.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时

2、应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液11/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，AR）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。2/15Mol/L磷酸氢二钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO42H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。3按附表的比例，配制成不

3、同pH值的缓冲溶液。附表1 磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO4pH1/15Mol/L Na2HPO41/15Mol/L KH2PO45.88.092.07.166.623.45.99.990.17.272.028.06.012.287.87.376.823.26.115.384.77.380.819.26.218.681.47.584.115.96.322.477.67.687.013.06.426.773.37.789.410.66.531.868.27.891.58.56.637.562.57.993.26.86.743.

4、556.58.894.75.36.849.650.48.195.84.26.955.444.68.297.03.07.061.138.98.498.02.0（三）0.15Mol/L PB液附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH0.15Mol/L Na2HPO4（ml）0.15Mol/L NaH2PO4（ml）6.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.0Na2HPO42H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.3g/L。Na2HPO412H2O分子量=358.22 0

5、.15Mol/L溶液含53.7g/L。NaH2PO4H2O分子量=138.00 0.15Mol/L溶液含20.7g/L。NaH2PO42H2O分子量=156.03 0.15Mol/L溶液含23.4g/L。（四）0.2Mol/L PB缓冲液附表3 0.2mol/L PB缓冲液配制法pH0.2 Mol/L Na2HPO4（ml）0.2Mol/L NaH2PO4（ml）5.88.092.06.012.387.76.218.581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58

6、.58.094.75.30.2Mol/L Na2HPO42 H2O溶液35.1g/L Na2HPO412 H2O溶液含71.64g/L 0.2Mol/LNaH2PO4H2O溶液含27.60g/L NaH2PO42 H2O溶液含31.21g/L欲配0.1Mol/L PB缓冲液则在0.2Mol/L PB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时，则在溶液中加0.85的NaCl溶液即可。（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）（0.15Mol/L PH 7.2） NaCl 8.0g KCl 0.2g Na2HPO4 1.15g （如为Na2HPO412H2O，则为2.89g） KH2PO4

7、0.2g将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中，完全溶解后，115高压灭菌10min15min，存在4冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。（六）硼酸盐缓冲液（Borate saline buffer）1硼酸（3BO3）0.2Mol/L硼酸：硼酸12.37g加水至1 000ml。2硼砂（Na2B4O7）0.05Mol/L硼砂：硼砂19.07g加水至1 000ml。附表4 不同pH的0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法pH0.05Mol/L硼砂（ml）0.2Mol/L硼酸（ml）pH0.05Mol/L硼砂（ml）0.2Mol/L硼酸（ml）7.41.09.08.23.56

8、.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0（七）巴比妥缓冲液1pH8.2离子强度0.05Mol/L巴比妥缓冲液 巴比妥钠 47.6g 蒸馏水 3 000ml 1.17N HCl 55.0ml （1.17 N HCl=193ml浓HCl加1 807ml蒸馏水） 将4.76g巴比妥钠溶于3 000ml蒸馏水。 加1.17 N HCl 55ml。 用HCl调节pH到8.2，并加蒸馏水至4 265ml。 2pH8.4 0.06Mol/L巴比妥缓冲液 巴比妥 1.84g 巴比妥钠 10.30g 加蒸馏水至 1 000.00ml 3pH

9、8.6 0.06Mol/L巴比妥缓冲液 巴比妥 1.66g 巴比妥钠 12.76g 加蒸馏水 1 000.00ml（八）0.2Mol/L醋酸盐缓冲液 见表附表5附表5 0.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法pH0.2Mol/LTris（ml）0.1Mol/LHCl（ml）pH0.2Mol/LTris（ml）0.1Mol/LHCl（ml）233723379.108.952558.067.902527.58.928.76257.57.967.822530.08.758.602510.57.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.57.6

10、67.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.5（九）三羟甲基甲烷盐酸缓冲液（TrisHCl缓冲液）不同pH，0.05Mol/L25ml0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷加ml0.1NHCl，加水稀释至100ml（见下表）附表6 TrisHCl缓冲液配制法 pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml) pH0.2Mol/LTris(ml)0.1NHCl(ml)233723379.108.962558.057.902527.58.928.78257.57.967.822530.08.748.6025

11、10.07.877.732532.58.628.482512.57.777.632535.08.508.372515.07.667.522537.58.408.272517.57.547.402540.08.328.182520.07.367.222542.58.238.102522.57.207.052545.08.148.002525.025三羟甲基氨基甲烷（Tris） 分子量=121.14 0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷：Tris24.23g，加水至1 000ml。 0.1NHCl：取HCl8.6ml，加水至1 000ml。（十）0.5Mol/L pH9.5碳酸盐缓冲液 NaHCO3

12、3.70g Na2CO3 0.60g溶于600.00ml蒸馏水中即得。不用时塞紧瓶塞，以免吸收空气中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。（十一）甘油磷酸缓冲液1配制pH8.0磷酸缓冲液 0.1Mol/L Na2HPO4 94.50ml 0.1N NaH2PO4 5.50ml 混合即可29份甘油与1份pH8.0磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液。 用途：用于免疫荧光试验。（十二）Hanks液1贮存液 NaCl 80.00g KCl 4.00g Na2HPO412 H2O 1.52g KH2PO4 0.60g 葡萄糖 4.00g 0.4酚红液 50.00ml 双馏水加至 100.00ml 115高压

13、灭菌15min，冰冻保存。2工作液 贮存液 1份 双馏水 9份 115高压灭菌15min。临用时用灭菌的5.6NaHCO3液调pH值至7.2左右（溶液呈橙红色）。（十三）萘（钠）氏试剂（Nesslers reagent）配方1：氯化汞 6.0g 碘化钾 12.4g 20NaOH 30ml 加蒸馏水至 100ml配方2：碘化汞 11.5g 碘化钾 8g 蒸馏水 50ml （完全溶解后）过滤，加20NaOH 50ml。 用途：检测溶液中氨离子。（十四）阿氏（Alsevers）液 葡萄糖 2.05g 柠檬酸钠 0.80g 氯化钠 0.42g 蒸馏水 100ml 溶解后，以10%柠檬酸调节pH至6.1

14、，过滤，分装，10磅10min灭菌，4保存。（十五）青、链霉素混合液（简称SP液或双抗液） 青霉素（40万U） 5支 链霉素（200万g） 1支 分别溶于100ml灭菌无离子水中或共同溶于200ml灭菌无离子水中，混合后分装小瓶，置-10-20冰箱保存备用（1万单位g/ml）。 临用时，按1%的量加入营养液或其他溶液中，最后浓度是青霉素100U/ml，链霉素100ug/ml。（十六）洗液（清洁液）配方1：重铬酸钾 150g 蒸馏水 300ml 浓硫酸 3 000ml将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩埚中加热溶解，然后慢慢加入浓硫酸，边加边搅拌，见发热过剧则稍停，冷却后再

15、继续加。此为强洗液。盛清洁液的容器要坚固，上加厚玻璃盖，操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套，以保安全。洗液一旦变绿，表示铬酸已经还原，失去了氧化能力，不宜再用。如将这样洗液加热，再加适量重铬酸钾，又可重新使用。配方2：浓硫酸 50% 蒸馏水 50% 重铬酸钾 5%此为中等强度洗液。配方3：重铬酸钾 100g 蒸馏水 1 000ml 加热溶解，冷却后缓慢加入 工业硫酸 100ml此液为弱洗液，为棕红色。使用此液时，必须预先用热肥皂水将玻璃器皿洗净，经自来水冲洗，沥干然后才能浸入，否则该洗液很快失效。二、常用化合物的分子量及当量附表7 常用化合物的分子量及当量化合物分子式分子量当量

16、盐酸HCl36.4636.46氢氧化钠NaOH40.0040.00氢氧化钾KOH56.1156.11草酸H2C2O490.0445.02氯化钠NaCl58.4458.44氯化钾KCl74.5674.56硫酸H2SO498.0849.04醋酸CH3COOH60.0560.05磷酸H3PO498.0032.67磷酸二氢钠NaH2PO4119.98磷酸氢二钠Na2HPO4141.96磷酸二氢钾KH2PO4136.09磷酸氢二钾K2HPO4174.18二乙胺四乙酸二钠（EDTANa2）C10H14N2O8Na2372.24186.12硝酸HNO363.0163.01碘I2253.81126.90碘化钾

17、KI166.01166.01硼酸H3BO361.8320.61碳酸氢钠NaHCO384.0184.01碳酸钠Na2CO3105.9953.00硼砂Na2B4O7381.43四、克分子浓度用1L（1 000ml）溶液中所含溶质的克分子数表示溶液的浓度叫做克分子浓度。通常用字母M表示。物质的量用做单位来表示，在数值上与物质的分子量相同，这个量叫做克分子。例如氯化钠的分子量为58.44，则1个克分子氯化钠的重量是58.44g。将58.44g氯化钠溶解于水，配制成1L溶液，就是1Mol/L氯化钠溶液。NaH2PO4H2O的分子量为138.0,则其1个克分子的重量是138.0克。将69.0gNaH2PO

18、4H2O溶解于水，配制成1L溶液，就是0.5Mol/L磷酸二氢钠溶液。五、离心机与离心力习惯上把每分钟4，000转的离心机称为低速离心机，每分钟20，000转的离心机称为高速离心机，这类离心机有冷冻装置。每分钟20，000以上的离心机称为超速离心机，为了减少空气的摩擦阻力，它的转头是在真空中运转的。由于许多样品（如病毒等）都是极小的颗粒或溶质，它们在重力场中沉降速度极慢，同时还存在扩散作用，只有超速离心所产生的强大的离心力场，才有可能它们彼此分离开。过去的资料中，所用离心条件多用转数表达，现在国际资料中已经改用相对离心力（Relative Centrifugal Force，RCF）表示，因为

19、离心力不仅为转速的函数，也是离心半径的函数。转速相同时，离心半径越长，离心力越大，故仅以转速表达离心力是不科学的。相对离心力的单位用重力加速度Gravity，简写为“g”表示。G=9.8米/秒22530-半径（cm）-20181917151614121311109876543离心力（g）700.000600.000500.000400.000300.000200.000150.000300020001500400070006000500040.00040070.00060.00050.00080.000100.000700600500800100030.00020.00015.00030020

20、01507.0006.0005.0008.00010.000706050801003.0002.0001.5003020154.0001.0001040转速（RPM）50.00045.0005000450040.00035.0004000350030.00025.0003000250020.00015.000200015006.0005.0007.0008.0009.00014.00013.00012.00011.00010.0006005 0070080090014001300120011001000离心力和转速的关系离心力(F)角速度()2离心半径（r）980角速度()转/分260转/分0.10472所以：离心力(F)（转/分0.10472）2离心半径980附图1 离心力计算表注：用尺连接半径线与转速线，与离心力线交叉的数字即尾离心力；用尺连接半径线与离心力线，延伸线与转速线的交叉点为所需转速。