最新十五章蛋白质的合成转运和加工幻灯片.ppt

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1、 催化功能区：ATP tRNA 受体双 tRNA 反密码 寡聚物的 和氨基酸位点 螺旋结合区 子结合区 形成 核苷酸折叠或反向 -螺旋或 平行的-折叠 -折叠桶 类酶 类酶 图 15-2 氨基酰 tRNA 合成酶含有 34 个不同的功能区 (仿 B.Lewin:GENES ,1997，Fig 9.8) 第二节第二节 肽链的合成肽链的合成一一.在细菌中翻译的起始在细菌中翻译的起始IF-3是30S亚基与mRNA起始位点的特 异结合所必须的。IF-2是特异地和起始tRNA结合并把它 带到起始复合体中。IF-1仅作为完整的起始复合物的一部分,可能和起始复合物的稳定性有关,而不是提供任何识别特异成份。2

2、. 起始复合物的形成 (1) IF-3和核糖体30S rRNA结合 使16S RNA和mRNA的S-D顺序结合 a.使30S 保持游离 b.形成起始复合体 I (2) IF-2 + GTP + 氨酰甲硫氨酸 中间复合体。 (3) IF-1置换出 IF-3, 50S亚基可和30S亚基结合。 (4) 50S+30S 复合体III，释放IF-1,IF-2。 原核生物翻译起始因子 表 15-2 E.coli 蛋白质合成起始所需的三种起始因子因子质量（KDa）因子/核糖体功能IF32325%亚基解离与 mRNA 的结合IF297.3?起始 tRNA 的结合与 GTP 水解IF1 915%循环因子？ In

3、itiation factors 30S subunits Separate Pool of free with initiation subunits ribosame Initiation Elogation Termination 图 15- 翻译起始需要游离的核糖体亚基67 起始反应的成分起始tRNA IF-2 30S-mRNA复合体 IF-1 IF-3 核糖体 30S IF-2 GTP FMet fMet fMet IF-1 IF-2 IF-3 GDP Pi 70S核糖体 起始反应的产物 图 15- 原核生物翻译起始复合体的装配 Only fMet tRNAf enters part

4、ial P site on 30S subunit bound to mRNA fMet AUG NNN P A 50S subunit Only aa-tRNA enters A site on complet 70S ribosome fMet aa AUG NNN P A 图15- 翻译起始时的进位反应 二二. 起始起始tRNA的特点的特点翻译时的第一个密码子是怎样被识别的呢？(一)小亚基上16SrRNA3端的六核苷酸(3-UCCUCC-5） 和Shine-Dalgarno顺序（5-AAACAGGAGG-3）互补，相互结合，使下游的AUG起始密码子定位在P位上。(二) 核糖体结合位点也含

5、有一个信号起始密起始密码子码子（initiation codon）AUG。 起始和延伸Met-tRNAs的区别两种tRNA本身有差别；氨基酸的状态不同。Formyl Met MetA A AA C CA C CA A AC A G CG C G C A AA A G A A* CAU CAU 图 15- 起始 tRNAf-Met 和延伸 tRNAm-Met 的差异 fMet-tRNA与Met-tRNA有什么不同？ Met-tRNAmMet在受体臂末端的一对碱基是GC，在fMet-tRNAfMet是CA，C可以和延伸因子IF-2结合。tRNAfMet在反密码子环的茎上有3对G-C,若发生突变将会

6、阻止其进入P位点。tRNAfM e t的反密码子环上的是A，tRNAmMet是烷基化腺嘌呤。tRNAfMet TC环端是A，tRNAmMet的相应位置是G，作用不清。 Terminus structure A O R2 O HFormyl C N H C C N H C group O C N H C C H CH2 O R3 S CH3 A O R2 O HAmino C N H C C N H C group H C N H C C H CH2 O R3 S CH3 A O R2 O R2 C N H C N H C Amino C N H C Cacid H CH2 O R3 图 15-

7、 在细菌中新生肽首位的Met 被切除 Aminopeptidase Deformylase三真核生物蛋白质合成的起始三真核生物蛋白质合成的起始表15-3 真核生物蛋白质合成中涉及的各种辅助因子因子分 子 量(KDa）结构功能eIF-3550多聚体40S 三元复合体和mRNA 结合，和Cap 有强的亲和力eIF-4F(CBP-)220多聚体5 帽结合蛋白，具有解链酶活性eIF-4E(CBP-)24单体结合mRNA5 端，解链eIF-115单体帮助mRNA 的结合，形成40S 起始复合物eIF-4B80单体结合mRNA，解链酶eIF-4A44.4单体结合mRNA 和ATP,水解ATP，解链eIF-623单体阻止40S 和60S 亚基结合eIF-5150单体介导eIF-2 和eIF-3 从起始复合体中释放出来eIF-4C单体40S 和60S 亚基结合eIF-235结合GTP，由磷酸化控制eIF-238可能是循环因子eIF-255 三体结合Met-tRNAfeIF-1A17.5单体核糖体解聚，结合60S 亚基起始eIF-3A25单体核糖体解聚，结合60S 亚基25 结束语结束语