实验血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳.ppt
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1、血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳目的目的了解电泳技术的一般原理,学习醋酸纤维薄膜电泳的操作实验原理实验原理 带电粒子(为胶体粒子)在电场中向与自身带相带电粒子(为胶体粒子)在电场中向与自身带相反电荷的电极移动,称为电泳。反电荷的电极移动,称为电泳。 不同物质由于带电性质不同,因而在一定的电场不同物质由于带电性质不同,因而在一定的电场强度下移动的速度不同。强度下移动的速度不同。 以氨基酸为例:以氨基酸为例:qU= mv212 在某种pH下,某一AA可显电中性,即带着相等的正负离子(呈兼性离子),此时若在电场中,这一AA既不向正极移动,也不向负极移动,这一pH值被称为这一AA的
2、等电点,以PI表示,AA是一种典型的两性电解质。 一个混合的蛋白质样品由于各蛋白质的等电点不同,在相同的pH溶液中所带的电荷性质不同,电荷的数目不同,在电场中各种蛋白质泳动的速度和方向也不相同。从而使蛋白质混合样分离开来。 溶液的pH值:溶液的pH值决定了带电颗粒的解离程度,也决定了物质所带净电的多少。对蛋白质和氨基酸等两性电解质而言,pH值离等电点越远,颗粒所带净电荷越多,泳动速度也越快,反之越慢。因此,分离某一蛋白质混合物时,应选择一种能扩大各种蛋白质所带电荷量差异的pH值,以利于各种蛋白质的分离。 为使电泳过程中溶液的pH值恒定,必须使用缓冲溶液。本次实验使用的是硼酸-硼砂缓冲溶液。pH
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