人教版必修二第六章第2节基因工程及其应用(共59张PPT).ppt
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1、能发光的水母能发光的水母不能发光的热带斑马鱼不能发光的热带斑马鱼第二节第二节基因工程及其应用基因工程及其应用 基因工程又叫做基因工程又叫做基因拼接技术基因拼接技术或或DNADNA重组技术重组技术。这种技。这种技术是在生物体外,通地对术是在生物体外,通地对DNADNA分子进行分子进行人工剪切和拼接人工剪切和拼接,对,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生人类所行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生人类所需要的基因产物。需要的基因产物。 通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的个别通
2、俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的个别基因基因复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,胞里,定向地改造生物的遗传性状(目的)。定向地改造生物的遗传性状(目的)。 基因工程概念的理解基因工程概念的理解原理原理操作环境操作环境操作对象操作对象操作水平操作水平基本过程基本过程结果结果基因重组基因重组生物体外生物体外基因基因DNADNA分子水平分子水平剪切、拼接、导入、表达剪切、拼接、导入、表达定向改造生物的遗传性状,定向改造生物的遗传性状,获得人类需要的基因产物。获得人类需要的基因产物。G A A T T C C T TA A G C
3、C C G G G G G G C C C C T T A A G A A T T C G 黏性末端黏性末端平末端平末端限制性核酸内切酶能识别特定的核苷酸序列:限制性核酸内切酶能识别特定的核苷酸序列:C C CG G G G G G C C C 限制酶限制酶SmaI限制性核酸内切酶作用的是限制性核酸内切酶作用的是DNADNA分子中的什么键?分子中的什么键?磷酸二酯键磷酸二酯键即脱氧核糖、磷即脱氧核糖、磷酸之间的连接酸之间的连接 GP AP识别一种特定的核苷酸序列识别一种特定的核苷酸序列, 并在特定的切点上切割并在特定的切点上切割DNADNA分子分子. .1.1.来源来源2.2.功能功能3.3.
4、作用部位作用部位4.4.作用结果作用结果主要是从主要是从原核生物中原核生物中分离纯化而来分离纯化而来磷酸二酯键磷酸二酯键切割切割DNADNA产生产生黏性末端或平末端黏性末端或平末端小结:限制性核酸内切酶小结:限制性核酸内切酶 CCTGCAG DCTAAATC GACGTC GATTTAGD课堂演练课堂演练例例. 下面哪项不具有限制酶识别序列的特征下面哪项不具有限制酶识别序列的特征( )AGAATTC BGGGGCCCC CTTAAG CCCCGGGG 解析:解析:限制酶识别的各种序具有回文对称的特点。所谓回限制酶识别的各种序具有回文对称的特点。所谓回文对称序列就是当以不同的方向分别阅读文对称序
5、列就是当以不同的方向分别阅读DNADNA的两条互补链的两条互补链时,时,DNADNA的两条链上的碱基序列相同。如的两条链上的碱基序列相同。如A A中的中的DNADNA分子,其分子,其中一条链从左向右阅读碱基序列是中一条链从左向右阅读碱基序列是GAATTCGAATTC,另一条互补链,另一条互补链从右向左阅读碱基序列也是从右向左阅读碱基序列也是GAATTCGAATTC。2.2.限制性内切酶是基因工程中重要的操作工具限制性内切酶是基因工程中重要的操作工具. .下下图为限制性内切酶作用后的粘性末端。据图分图为限制性内切酶作用后的粘性末端。据图分析,这是几种限制酶作用的结果及限制酶识别析,这是几种限制酶
6、作用的结果及限制酶识别的核苷酸序列由几个核苷酸组成的核苷酸序列由几个核苷酸组成_._.26 TTAAC G GCAATT AATTC G GCTTAA3.3.下列所示的黏性末端是由几种限制性内切酶下列所示的黏性末端是由几种限制性内切酶作用产生的作用产生的? ?4 种种 AATTG C CGTTAA CGAATT TTAAG C GACAGTCT4.4.已知某种限制性内切酶在一线性已知某种限制性内切酶在一线性DNADNA分子上有分子上有3 3个酶切位个酶切位点,如图中箭头所指,如果该线性点,如图中箭头所指,如果该线性DNADNA分子在分子在3 3个酶切位个酶切位点上都被该酶切断,则会产生点上都被
7、该酶切断,则会产生a a、b b、c c、d d四种不同长度四种不同长度的的DNADNA片段。现在多个上述线性片段。现在多个上述线性DNADNA分子,若在每个分子,若在每个DNADNA分子上至少有分子上至少有1 1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶切后,这些线性经该酶切后,这些线性DNADNA分子最多能产生长度不同的分子最多能产生长度不同的DNADNA片段种类数是片段种类数是: : A3 B4 C9 D12线性线性DNA分子的酶切示意图分子的酶切示意图CCTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAA
8、ATTCCGTAG 练习使用练习使用EcoRI 剪切目的基因剪切目的基因CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 目的基因目的基因具有相同的黏性末端具有相同的黏性末端目的基因目的基因尝试写出下列序列受尝试写出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端限制酶作用后的黏性末端CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GAATTCCGTAGAATTCGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA GGCATCTT
9、AAAATTCCGTAG 由于具有相同的黏性末端由于具有相同的黏性末端, 不同来源的不同来源的DNA片段可以拼接在一起片段可以拼接在一起形成重组形成重组DNA分子分子作用作用把两条把两条DNA末端之间的缝隙末端之间的缝隙“缝合缝合”起来。起来。G A A T T C C T T A A G 即脱氧核糖、磷酸基之间的连接即脱氧核糖、磷酸基之间的连接 GP APCTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 运载体的作用有哪些?运载体的作用有哪些? 常用的运载体主要有哪些?常用的运载体主要有哪些? 质粒的化学本质是什么?质粒的化
10、学本质是什么? 基因操作的基本步骤基因操作的基本步骤 举例说明什么是目的基因举例说明什么是目的基因 培育转基因动物培育转基因动物, ,目的基因的受体细胞是什么目的基因的受体细胞是什么? ? 与杂交育种、诱变育种相比较,基因工程育与杂交育种、诱变育种相比较,基因工程育种的优点有哪些?种的优点有哪些?阅读思考:阅读思考: 运载体的作用有哪些?运载体的作用有哪些? 常用的运载体主要有哪些?常用的运载体主要有哪些? 质粒的化学本质是什么?质粒的化学本质是什么?小型环状小型环状DNA 质粒质粒质粒存在于细菌、质粒存在于细菌、酵母菌酵母菌等生物中等生物中,是拟是拟核或核或细胞核以外的小型细胞核以外的小型环
11、状环状DNA分子分子。 质粒质粒是基因工程是基因工程最常用最常用的的运载体运载体。3.3.基因的基因的( (运运) )载体载体最常用的质粒最常用的质粒是是大肠杆菌大肠杆菌的质粒的质粒,其中常含有,其中常含有抗药基因抗药基因, ,如四环素的标记基因如四环素的标记基因. . 质粒的质粒的存在与否对宿主细存在与否对宿主细胞生存没有决定性作用胞生存没有决定性作用,但,但复复制只能在宿主细胞内成制只能在宿主细胞内成。注意:注意:质粒与(运)载体的关系质粒与(运)载体的关系目的基因:目的基因:是用于定向改造生物所是用于定向改造生物所需要需要的特定基因。的特定基因。例如:例如:苏云金芽孢杆菌的抗虫基因、苏云
12、金芽孢杆菌的抗虫基因、植物的植物的抗病抗病(抗病毒、抗细菌抗病毒、抗细菌)基因基因、种子贮藏蛋白的基因、种子贮藏蛋白的基因、人的人的胰岛素基因胰岛素基因、干扰素基因干扰素基因等。等。 步骤一:步骤一:提取目的基因提取目的基因 步骤二:目的基因与运载体结合步骤二:目的基因与运载体结合质粒质粒DNADNA分子分子一个切口一个切口两个黏性末端两个黏性末端两个切口两个切口获得目的基因获得目的基因DNADNA连接酶连接酶重组重组DNADNA分子分子( (重组质粒重组质粒) )同一种同一种限制酶处理限制酶处理 步骤二:目的基因与运载体结合步骤二:目的基因与运载体结合CTTCATGAATTCCCTAA GA
13、AGTACTTAAGGGATT CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GAATTCCGTAGAATTCGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA GGCATCTTAAAATTCCGTAG 由于具有相同的黏性末端由于具有相同的黏性末端,不同来源的不同来源的DNA片段可以拼接在一起片段可以拼接在一起.目的基因目的基因质粒的局部质粒的局部DNA片段片段重组重组DNADNA分子分子( (重组质粒重组质粒) ) 步骤三:目的基因导入受体细胞步骤三:目的基因导入受体细胞棉细胞、鲤鱼受精卵、微生物细胞棉细胞、鲤鱼受精卵、微生物细胞动物受精卵具有发育全能性动物
14、受精卵具有发育全能性微生物微生物繁殖快繁殖快、代谢旺盛代谢旺盛、代谢产物多代谢产物多、容易培养容易培养 步骤四:目的基因的检测和鉴定步骤四:目的基因的检测和鉴定根据质粒上的特殊基因根据质粒上的特殊基因(标记基因标记基因)检测检测 步骤四:目的基因的检测和鉴定步骤四:目的基因的检测和鉴定二、基因工程的应用二、基因工程的应用1 1、基因工程与作物育种、基因工程与作物育种3 3、基因工程与环境保护、基因工程与环境保护2 2、基因工程与药物研制、基因工程与药物研制二、基因工程的应用二、基因工程的应用运用基因工程技术,不但可以培养优质、高产、运用基因工程技术,不但可以培养优质、高产、抗性好的农作物及畜、
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