2022年生物选修3知识点 .pdf
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1、生物选修 3 知识点专题 1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过 体外 DNA重组和转基因技术,赋予生物以 新的遗传特性,创造出 更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平 上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术 。(一)基因工程的基本工具1. “分子手术刀”限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物 中分离纯化出来的。(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种 特定 的核苷酸序列,并且使每一条链中特定 部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 断开,因此具有专一 性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏
2、性末端 和平末端 。2. “分子缝合针”DNA连接酶(1) 两种 DNA连接酶( EcoliDNA 连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:相同点:都缝合磷酸二酯 键。区别: EcoliDNA连接酶来源于T4噬菌体 ,只能将双链DNA 片段互补的 黏性末端 之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA 连接酶能缝合 两种末端 ,但连接平末端的之间的效率较低。(2) 与 DNA聚合酶作用的异同:DNA 聚合酶只能将 单个核苷酸 加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个 DNA片段 的末端,形成磷酸二酯键。3. “分子运输车”载体(1)载体具备的条件:能在受体细胞中复制并稳定保存。
3、具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入 。具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。(2)最常用的载体是质粒 , 它是一种 裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子 。(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步: 目的基因的获取1. 目的基因是指:编码蛋白质的结构基因。2. 原核基因采取直接分离 获得, 真核基因是 人工合成 。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法 _。3.PCR技术扩增目的基因(1)原理: DNA双链复制(2)过程:第一步:加热至9095DNA解链 ;第二步:冷却到5560, 引物结合
4、到互补DNA链;第三步:加热至7075, 热稳定 DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 9 页第二步: 基因表达载体的构建1. 目的: 使目的基因在受体细胞中稳定存在 ,并且可以 遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用 。2. 组成: 目的基因 启动子 终止子 标记基因(1)启动子:是一段有特殊结构的DNA片段 ,位于基因的首端 ,是 RNA聚合酶 识别和结合的部位,能驱动基因转录出 mRNA ,最终获得所需的蛋白质 。(2)终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的 尾端 。(
5、3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将 含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因 。第三步: 将目的基因导入受体细胞_1. 转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2. 常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是农杆菌转化法,其次还有基因枪法 和 花粉管通道法 等。将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵 。将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,最常用的原核细胞是大肠杆菌,其转化方法是:先用 Ca2+ 处理细胞,使
6、其成为感受态细胞,再将重组表达载体 DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。3. 重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是 标记基因是否表达 。第四步: 目的基因的检测和表达1. 首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因, 方法是采用 DNA 分子杂交技术。2. 其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA ,方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交 。3. 最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质 ,用相应的抗体进行 抗原抗体杂交。4. 有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转
7、基因抗虫植物是否出现抗虫性状。(三)基因工程的应用1. 植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。2. 动物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。3. 基因治疗: 把正常的外源基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用。(四)蛋白质工程的概念精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 9 页蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成 ,对现有蛋白质进行改造 ,或制造一种 新的蛋白质 ,以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能
8、生产自然界已存在的蛋白质)转录翻译专题 2 细胞工程(一)植物细胞工程1. 理论基础(原理):细胞全能性全能性表达的难易程度:受精卵生殖细胞干细胞体细胞;植物细胞动物细胞2. 植物组织培养技术(1)过程: 离体 的植物器官、组织或细胞 愈伤组织试管苗植物体(2)用途: 微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。(3)地位:是培育转基因植物 、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。3. 植物体细胞杂交技术(1)过程:(2)诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇( PEG )作为诱导剂。(3)意义: 克服了远缘杂交不亲和的障碍。(二)
9、动物细胞工程1. 动物细胞培养(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织 ,将它分散成 单个细胞 ,然后放在适宜的培养基 中,让这些细胞生长和繁殖 。(2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)剪碎用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成 单个细胞 制成 细胞悬液 转入培养瓶中进行原代培养贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代 培养。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 9 页(3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为 细胞贴壁 。细胞数目不断
10、增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制 时,细胞就会 停止分裂增殖,这种现象称为 细胞的接触抑制。(4)动物细胞培养需要满足以下条件无菌、 无毒的环境 :培养液应进行 无菌 处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素 ,以防培养过程中的污染。此外, 应定期更换培养液,防止 代谢产物积累对细胞自身造成危害。营养 :合成培养基成分:糖、氨基酸、 促生长因子、 无机盐、 微量元素等。 通常需加入 血清、血浆 等天然成分。温度 :适宜温度:哺乳动物多是36.5 0.5 ;pH:7.2 7.4 。气体环境 :95% 空气 5% CO2。O2是细胞代谢 所必需的, CO2的主要作用是 维持培养液的 pH。
11、(5)动物细胞培养技术的应用:制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。2. 动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞 核移植(比较容易)和体细胞 核移植(比较难)。(2)选用去核 卵( 母) 细胞 的原因:卵 ( 母) 细胞 比较大,容易操作;卵 ( 母 )细胞 细胞质多,营养丰富 。(3)体细胞核移植的大致过程是:(右图)核移植胚胎移植(4)体细胞核移植技术的应用:加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育;保护濒危物种,增大存活数量;生产珍贵的医用蛋白;作为异种移植的供体;用于组织器官的移植等。(5)体细胞核移植技术存在的问题:克隆动物存在着
12、健康 问题、表现出 遗传和生理 缺陷等。3. 动物细胞融合精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 9 页(1)动物细胞融合也称细胞杂交 ,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个 细胞遗传信息的单核细胞,称为杂交细胞 。(2)动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似,常用的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等。(3)动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究 细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。(4)动
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