SYSMEX五分类血液分析仪XT-2000i检测原理及临床应用.ppt

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1、l二分群时代：淋巴细胞、非淋巴细胞l三分群时代：（大细胞、中间细胞、小细胞）l五分类时代：淋巴、单核、中性粒、嗜酸粒、 嗜碱粒五分类血球方法学概览五分类血球方法学概览n方法学方法学第一代：纯物理原理第一代：纯物理原理(CD-3700，SE-9000)激光、射频、电阻激光、射频、电阻第二代：物理第二代：物理+化学（化学（SYSMEX SF-3000，），）酶染色、颗粒染色酶染色、颗粒染色特异性溶血特异性溶血第三代：物理第三代：物理 +分子生物学（分子生物学（SYSMEX XT-1800i/XT-2000i）分子生物学技术（分子生物学技术（DNA、RNA染色）染色）lXT-2000i检测报告组成l

2、白细胞系统的检测原理和临床病例分析l红细胞系统参数的临床意义l网织红细胞的参数l血小板系统参数的临床意义l标本采集的要求l参数参数 30项项l研究参数研究参数 2项（项（IG，IG）l处理速度处理速度: 80标本标本/小时小时l检测模式检测模式: 4种模式种模式（CBC, CBC+DIFF CBC+RET,CBC+DIFF+RETl标本量标本量: 手动进样手动进样: 85 ul 自动穿刺自动穿刺: 150 ul 末梢血预稀释进样：末梢血预稀释进样：40ul+160ul稀释液稀释液（一）2个直方图、4个散点图（二） 30项数字结果： RBC、WBC、PLT、HGB、HCT、MCV、MCH、MCH

3、C、RDW-SD、RDW-CV、MPV、PCT、PDW、P-LCR、NEU%/#、MNON%/#、LYM%/#、EO%/#、BA%/#、 RET %/#, IRF, LFR, MFR, LFRXT 分析流程分析流程检测模块分析原理检测通道图形RBC/PLTWBC 鞘 流 电 阻 法 半导体激光FCMRBC/PLT通道PLT直方图参数PLTHGBHGB通道比色法HGB 全全 血血 标标 本本 DIFF通道RET通道DIFF散点图WBC#BasoRETPLT-OIRFRET散点图LymphMonoNeut+BaEO*IG - researchRET半导体激光FCMWBC/Ba通道WBC/BA散点图

4、RBC直方图RBC only for XT-2000i lDIFF散点图、WBC/BASO散点图l：白细胞总数l：中性粒细胞l：淋巴细胞l：单核细胞l：嗜酸性粒细胞l：嗜碱性粒细胞l：绝对值：百分数半导体激光和流式细胞的应用半导体激光和流式细胞的应用侧向散射光侧向散射光RNA/DNA含量含量细胞内部结构细胞内部结构细胞体积大小细胞体积大小前向散射光前向散射光侧向荧光侧向荧光激光束激光束分光镜WBC/BASO 原理原理n步骤步骤1: 吸入吸入标本标本通过通过 SRV吸入标本血样和试剂吸入标本血样和试剂n步骤步骤2: 溶血溶血 STROMATOLYSER-FB使红细胞溶血使红细胞溶血 除嗜碱性粒细

5、胞以外的除嗜碱性粒细胞以外的WBC 收缩收缩n步骤步骤3: 分析分析分析前向散射光和侧向散射光的散射图分析前向散射光和侧向散射光的散射图BASO 试剂系统试剂系统BASOother WBCRBCHemolysed(Acid, hypotonic solution)保持原形脱浆收缩溶血 WBC DIFF 分类通道原理分类通道原理n步骤步骤1: 吸入吸入从从 SRV吸入血液和试剂吸入血液和试剂n步骤步骤2: 溶血溶血 STROMATOLYSER-4DL 溶解溶解RBC - WBC膜被轻微损伤，打孔膜被轻微损伤，打孔 (acid, hypotonic solution)n步骤步骤3: 染色染色(RN

6、A and DNA) STROMATOLYSER-4DS 染色染色 染液染液: 荧光染料荧光染料 ( Polymethine Dye)n步骤步骤3: 分析分析 分析前向散射光和荧光的散点图分析前向散射光和荧光的散点图溶血溶血(WBC membrane is weakly damaged)染色染色RNA DNADiff 试剂系统试剂系统Blast原核细原核细胞胞, IG.未成未成熟粒细胞熟粒细胞异常淋巴细胞异常淋巴细胞 等等高荧光浓度高荧光浓度低荧光浓度低荧光浓度高荧光浓度高荧光浓度正常细胞正常细胞WBC分类分类-散点图（正常标本）散点图（正常标本）淋巴淋巴单核单核 中性中性嗜酸嗜酸 侧向荧光侧

7、向荧光(RNA ,DNA)红细胞碎片红细胞碎片 侧向散射光侧向散射光(内部结构内部结构)分类分类-散点图散点图(异常标本异常标本)淋巴淋巴单核单核 中性中性嗜酸嗜酸 侧向荧光侧向荧光(RNA ,DNA)红细胞碎片红细胞碎片 侧向散射光侧向散射光(内部结构内部结构) 异型淋巴异型淋巴IG核左移核左移该病例为儿童急性粒细胞白血病（AML-M2），患儿因突发高热而前来就诊，首次血常规检查发现，外周血原始细胞占71%，幼稚红细胞占2%。)急淋（ALL）-L1急淋（急淋（ALLALL）L1L1l直方图l：红细胞总数l：血红蛋白浓度l：红细胞压积l：平均红细胞体积l：平均血红蛋白量l：平均血红蛋白浓度l：

8、红细胞体积分布宽度特点：曲线波峰左移，峰底变宽，显示小细胞不均一性。特点：曲线波峰右移，波底增宽，显示明显的大细胞不均一性。特点：小峰左移，峰底变窄， 典型的小细胞均一性贫血。红细胞体积分布宽度的临床意义一、定义：红细胞体积分布宽度（Red blood cells volume Distribution Width）是反映周围血红细胞体积异质性的参数，用所测单个红细胞体积的变异系数来表示（CV=SD/X也可用SD表示）。RDW-SD指把直方图顶点的高度定为100%，自下而上高度为20%时的红细胞分布宽度；RDW-CV指假定红细胞直方图分布曲线为正规分布曲线时，把标准偏差除以MCV，再乘以100

9、所得出的数值。l缺铁性贫血与轻型地中海的鉴别诊断l有关缺铁性贫血的早期诊断与治疗l用于贫血的形态学分类(MCV/RDW)RDW是两者鉴别的参考指标：1、IDA患者RDW100%升高；2、轻型地中海贫血患者基本正常 Uchida对对1648例学生进行了各项指标的观察，例学生进行了各项指标的观察，结果显示：结果显示： MCV RDW MCV RDW 正常人正常人 （89894fl4fl）（）（12.7 12.7 0.7 0.7）% %隐性缺铁前期（隐性缺铁前期（89894fl4fl）（）（13.7 13.7 0.7 0.7）% %隐性缺铁期隐性缺铁期 (86(866fl6fl）（）（14.0 14

10、.0 1.51.5）% %IDAIDA患者患者 79fl 79fl （15.6 15.6 1.71.7）% %MCVRDW形态学分类形态学分类 常见疾病分类常见疾病分类正常正常正常正常正细胞均一性正细胞均一性急性失血性贫血急性失血性贫血正常正常异常异常正细胞不均一性正细胞不均一性 早期缺铁性贫血早期缺铁性贫血增高增高正常正常大细胞均一性大细胞均一性部分再生障碍性贫血部分再生障碍性贫血增高增高异常异常大细胞不均一性大细胞不均一性 巨幼细胞性贫血巨幼细胞性贫血减低减低正常正常小细胞均一性小细胞均一性轻型轻型地中海贫血地中海贫血减低减低异常异常小细胞不均一性小细胞不均一性 缺铁性贫血缺铁性贫血lDN

11、A/RNA核酸荧光染色核酸荧光染色l参参 数：数：RET, IRF, LFR, MFR, HFR, PLT-O 内置全自动内置全自动RET分析及成熟度分类分析及成熟度分类 激光染色法检测激光染色法检测PLTRET 试剂系统试剂系统Staining: Ploymethine: RNAOxazine: DNARETWBCRBCHigh LevelFluorescenceLow Level FluorescenceVery High LevelFluorescenceReagent: RETSEARCH II (Diluent + Dye)Fluorescence(RNA)RET-散点图散点图For

12、ward Scatter(Volume)MFRHFRLFRPLTRBC-ORETWBCIRFv RET是一个独立的监测骨髓造血功能恢复的参数v IRF是评估造血功能恢复的可靠依据 v IRF是评估造血功能恢复比RET更敏感的指标 RET增高：表示骨髓造血功能旺盛。急性溶血性贫血，急性失血等明显增高。增生性贫血，骨转移等轻度升高。 RET减少：肾脏，内分泌疾病，溶贫再生危象，再生障碍性贫血，放化疗后等。 PLT-I报告报告PLT-O 用于明显的病理性标本用于明显的病理性标本正常正常当明显病理性标本当明显病理性标本存在存在RBC碎片，异常直方图碎片，异常直方图，等等，等等PLT-OXT-2000i

13、以电阻抗法PLT-I为准当出现异常标本时， XT-2000i会转换用光学法PLT-O检测PLT-I/O 散射图散射图 直方图直方图( (直流阻抗法直流阻抗法)散射图散射图(光学法光学法)PLT-I: RBC/PLT通道通道v电阻抗每次检测电阻抗每次检测20-25万个细胞，而万个细胞，而RET通道内激光通道内激光法每次只能检测法每次只能检测60000个细胞，其中个细胞，其中PLT3000个个v电阻抗法的电阻抗法的PLT数目的准确性与重复性比较数目的准确性与重复性比较好好PLT-O: RET/PLT-O通道通道v激光法对激光法对PLT的形态鉴别能力强的形态鉴别能力强v异常标本中的小异常标本中的小R

14、BC、WBC碎片、或碎片、或PLT数目较少数目较少时，激光法能更准确地将时，激光法能更准确地将PLT鉴别出来鉴别出来l红细胞低鉴别线红细胞低鉴别线RL(%)10%l血小板低鉴别线血小板低鉴别线PL(%)9% l血小板高鉴别线血小板高鉴别线PU(%)39%l血小板高鉴别线血小板高鉴别线PU(%)23FL 和和PU20%l存在细胞碎片存在细胞碎片l存在红细胞凝集存在红细胞凝集l血小板高鉴别线血小板高鉴别线PU%13%和和PLT35FL45% 和和 PLT-I#80 x109/LlPLT-I115% l直方图l：血小板计数l：血小板体积分布宽度l：平均血小板体积lP C T：血小板压积l：大血小板比

15、例 l在多种疾病中PLT直方图均可发生改变，如：特发性血小板减少性紫癫，特点是血小板数量减少，巨大血小板增多，直方图表现为曲线峰右移，而窄峰图则常因PLT减少所致。l影响因素：l曲线峰左移，可能存在细胞浆碎片；l曲线峰右移，常表示存在异常红细胞 （裂细胞或极端小的红细胞）。l参考值：参考值：0.13-0.43l体积超过体积超过12fl的的PLT占总占总PLT的比率的比率 l对检测血小板凝集、与红细胞的重叠以对检测血小板凝集、与红细胞的重叠以及监视血小板造血功能等有意义及监视血小板造血功能等有意义l参考值：参考值：9.4-12.5 fll是反映骨髓造血功能是否良好的指标。是反映骨髓造血功能是否良

16、好的指标。l用于病情观察：白血病化疗时，用于病情观察：白血病化疗时，MPVMPV增加是增加是骨髓恢复的第一个征兆骨髓恢复的第一个征兆PLTMPV常见疾病正常 增高慢粒、骨髓纤维化等增高 正常骨髓增生性疾病增高 增高反应性血小板增多症等降低 增高外周血血小板破坏增多降低 降低艾滋病、再生障碍性贫血等MPV与与PLT联合检测的临床意义联合检测的临床意义l静脉血和末梢血因采血方式和部位的不同而静脉血和末梢血因采血方式和部位的不同而 存在较大差别：存在较大差别： 血小板血小板PLT：静脉血末梢血：静脉血末梢血 白细胞白细胞WBC：静脉血末梢血：静脉血末梢血 红细胞红细胞RBC：静脉血略末梢血：静脉血略

17、末梢血针刺采血：针刺采血：皮肤刺破后，导致血小板形成红色血栓皮肤刺破后，导致血小板形成红色血栓活化血小板，使血小板聚集活化血小板，使血小板聚集同时在血管中间形成一运动迅速，成分含量高的液流同时在血管中间形成一运动迅速，成分含量高的液流l1、最好一次穿刺采血成功、最好一次穿刺采血成功l2、使用封闭式真空注射器和厂家生产的、使用封闭式真空注射器和厂家生产的 EDTA-K2抗凝管抗凝管l3、采血后应立即、采血后应立即颠倒混匀数次颠倒混匀数次，使血液与抗，使血液与抗 凝剂充分混合，防止血液凝集凝剂充分混合，防止血液凝集l4、只能在、只能在室温下保存标本室温下保存标本，低温（，低温（4）保存）保存 可使血小板计数结果减低可使血小板计数结果减低XS-1000 i XS-800i l半导体激光核酸荧光流式技术l微量末梢血20uL进行WBC五分类和计数l精确定量的幼稚粒细胞参数IGl最新的XP中文操作系统l操作维护简便l超低运行成本 CBCDIFF 2.62元/标本lSNCS在线质控远程维护功能追求新境界，创造新价值追求新境界，创造新价值