最新培养基4ppt课件.ppt

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1、进入夏天，少不了一个热字当头，电扇空调陆续登场，每逢此时，总会进入夏天，少不了一个热字当头，电扇空调陆续登场，每逢此时，总会想起那一把蒲扇。蒲扇，是记忆中的农村，夏季经常用的一件物品。记想起那一把蒲扇。蒲扇，是记忆中的农村，夏季经常用的一件物品。记忆中的故乡，每逢进入夏天，集市上最常见的便是蒲扇、凉席，不论男女老忆中的故乡，每逢进入夏天，集市上最常见的便是蒲扇、凉席，不论男女老少，个个手持一把，忽闪忽闪个不停，嘴里叨叨着少，个个手持一把，忽闪忽闪个不停，嘴里叨叨着“怎么这么热怎么这么热”，于是三，于是三五成群，聚在大树下，或站着，或随即坐在石头上，手持那把扇子，边唠嗑五成群，聚在大树下，或站着

2、，或随即坐在石头上，手持那把扇子，边唠嗑边乘凉。孩子们却在周围跑跑跳跳，热得满头大汗，不时听到边乘凉。孩子们却在周围跑跑跳跳，热得满头大汗，不时听到“强子，别跑强子，别跑了，快来我给你扇扇了，快来我给你扇扇”。孩子们才不听这一套，跑个没完，直到累气喘吁吁，。孩子们才不听这一套，跑个没完，直到累气喘吁吁，这才一跑一踮地围过了，这时母亲总是，好似生气的样子，边扇边训，这才一跑一踮地围过了，这时母亲总是，好似生气的样子，边扇边训，“你你看热的，跑什么？看热的，跑什么？”此时这把蒲扇，是那么凉快，那么的温馨幸福，有母亲此时这把蒲扇，是那么凉快，那么的温馨幸福，有母亲的味道！蒲扇是中国传统工艺品，在我国

3、已有三千年多年的历史。取材的味道！蒲扇是中国传统工艺品，在我国已有三千年多年的历史。取材于棕榈树，制作简单，方便携带，且蒲扇的表面光滑，因而，古人常会在上于棕榈树，制作简单，方便携带，且蒲扇的表面光滑，因而，古人常会在上面作画。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇诸名，实即今日的蒲扇，江浙称之为面作画。古有棕扇、葵扇、蒲扇、蕉扇诸名，实即今日的蒲扇，江浙称之为芭蕉扇。六七十年代，人们最常用的就是这种，似圆非圆，轻巧又便宜的蒲芭蕉扇。六七十年代，人们最常用的就是这种，似圆非圆，轻巧又便宜的蒲扇。蒲扇流传至今，我的记忆中，它跨越了半个世纪，也走过了我们的扇。蒲扇流传至今，我的记忆中，它跨越了半个世纪，也走过

4、了我们的半个人生的轨迹，携带着特有的念想，一年年，一天天，流向长长的时间隧半个人生的轨迹，携带着特有的念想，一年年，一天天，流向长长的时间隧道，袅道，袅 一、培养基的配制一、培养基的配制 培养基是绝大多数微生物试验的基础。因此，培培养基是绝大多数微生物试验的基础。因此，培养基的质量是微生物试验成功与否的关键因素。养基的质量是微生物试验成功与否的关键因素。适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。验是提供优质培养基的保证。 配制配制 将准确称量的各组分或脱水培养基加入溶将准确称量的各组分或脱水培养基加入溶剂中，完全溶解，如需要可

5、适当加热。所有的培剂中，完全溶解，如需要可适当加热。所有的培养基对热都有或多或少的敏感，因此当培养基需养基对热都有或多或少的敏感，因此当培养基需要加热溶解时，应注意不要加热过度，否则会使要加热溶解时，应注意不要加热过度，否则会使培养基颜色变深。培养基颜色变深。 配制培养基所用的器具应能方便控制加热和不断配制培养基所用的器具应能方便控制加热和不断搅拌。当培养基需要添加其它组分时，添加后也搅拌。当培养基需要添加其它组分时，添加后也应将其充分混匀。应将其充分混匀。 分装分装 配制的培养基根据试验需要分装试管、配制的培养基根据试验需要分装试管、倾注平皿、制备斜面（高层短斜面或低层高斜倾注平皿、制备斜面

6、（高层短斜面或低层高斜面）。面）。 经灭菌的培养基分装，应在无菌环境下按无菌经灭菌的培养基分装，应在无菌环境下按无菌要求操作，避免污染。要求操作，避免污染。 对热敏感的培养基如糖发酵培养基其分对热敏感的培养基如糖发酵培养基其分装容器一般应预先进行灭菌，以保证培养装容器一般应预先进行灭菌，以保证培养基的无菌性。基的无菌性。 矫正矫正pH 配制培养基必须矫正配制培养基必须矫正pH，干燥培养，干燥培养基也必须对基也必须对pH进行验证，高压灭菌前的进行验证，高压灭菌前的pH应比最终应比最终pH值高值高0.2左右。矫正左右。矫正pH后的培后的培养基应加热、过滤，使培养基澄清。养基应加热、过滤，使培养基澄

7、清。 2、培养基的灭菌、培养基的灭菌 灭菌方法及条件不当可直接影响培养基质灭菌方法及条件不当可直接影响培养基质量，培养基灭菌方法和条件，应通過无菌性试量，培养基灭菌方法和条件，应通過无菌性试验和促生长试验进行验证，验证方法同验和促生长试验进行验证，验证方法同中國中國药典药典2010年版年版附录灭菌法。商品化的成品附录灭菌法。商品化的成品培养基或自配的培养基若采用不适当的加热和培养基或自配的培养基若采用不适当的加热和灭菌条件，有可能引起颜色变化、透明度降低、灭菌条件，有可能引起颜色变化、透明度降低、琼脂凝固力或琼脂凝固力或PH的变化，而不符合培养基质的变化，而不符合培养基质量的要求。量的要求。

8、培养基的灭菌应按照生产商提供或使用者验培养基的灭菌应按照生产商提供或使用者验证的参数进行。商品化的成品培养基必须附证的参数进行。商品化的成品培养基必须附有所用灭菌方法的资料。有所用灭菌方法的资料。 不同种类培养基应采用不同的灭菌方法，配不同种类培养基应采用不同的灭菌方法，配制好的培养基灭菌一般多用流通蒸汽灭菌和制好的培养基灭菌一般多用流通蒸汽灭菌和滤膜过滤除菌。滤膜过滤除菌。 流通蒸汽灭菌流通蒸汽灭菌是最常用的最有效的灭菌法，是最常用的最有效的灭菌法， 121，15min( 121，30min)或或116，40min可杀死所有的细菌芽孢。可杀死所有的细菌芽孢。 滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌 如配制

9、的培养基含有不耐热成分可采用滤膜过滤如配制的培养基含有不耐热成分可采用滤膜过滤除菌和血清凝固器除菌。除菌和血清凝固器除菌。 滤膜过滤除菌采用孔径滤膜过滤除菌采用孔径0.22um的滤膜过滤器，的滤膜过滤器，滤膜材质依过滤物品的性质及目的而定。不得对滤膜材质依过滤物品的性质及目的而定。不得对被滤过成分有吸附作用，不得有物质释放和纤维被滤过成分有吸附作用，不得有物质释放和纤维的脱落，也不得使用含有石棉的滤器。滤器和滤的脱落，也不得使用含有石棉的滤器。滤器和滤膜在使用前应进行验证，并进行灭菌。膜在使用前应进行验证，并进行灭菌。 血清凝固器血清凝固器80100、30min，连续三天，间，连续三天，间歇灭

10、菌歇灭菌。 3、培养基的贮藏、培养基的贮藏 商品化培养基应根据使用说明书上的要求进商品化培养基应根据使用说明书上的要求进行储存。培养基标签上应标有批号，生产日期、行储存。培养基标签上应标有批号，生产日期、有效期及培养基的有关特性。所采用的保藏和有效期及培养基的有关特性。所采用的保藏和运输条件应使培养基最低限度失去水分并提供运输条件应使培养基最低限度失去水分并提供机械保护。机械保护。 脱水培养基或单独配方组分应在适当的条脱水培养基或单独配方组分应在适当的条件下贮存，如低温、干燥和避光，所有的件下贮存，如低温、干燥和避光，所有的容器应密闭，尤其是盛有脱水培养基的容容器应密闭，尤其是盛有脱水培养基的

11、容器器. 配制好的培养基应配制好的培养基应验证的条件下贮藏。验证的条件下贮藏。保存在保存在225避光的环境。避光的环境。 若保存于非密闭容器中若保存于非密闭容器中，一般在三周内，一般在三周内使用使用, 若保存于密闭容器中，一般在一年内若保存于密闭容器中，一般在一年内使用使用. 琼脂培养基不得在琼脂培养基不得在0或或0以下存放，防以下存放，防止冷冻破坏凝胶特性。止冷冻破坏凝胶特性。 琼脂平板最好现配现用，如置冰箱保存，一琼脂平板最好现配现用，如置冰箱保存，一般不超过一周，且应密闭包装，若延长保存，般不超过一周，且应密闭包装，若延长保存，保存期需经验证确定。保存期需经验证确定。 培养基灭菌后应立即

12、取出，不得储藏在高压培养基灭菌后应立即取出，不得储藏在高压灭菌器中，避免影响培养基的质量。灭菌器中，避免影响培养基的质量。 固体培养基灭菌后的再融化应在加热的水浴固体培养基灭菌后的再融化应在加热的水浴中或采用流通蒸汽进行，只允许一次，融化的中或采用流通蒸汽进行，只允许一次，融化的培养基应放在培养基应放在4550的水浴中，不得超过的水浴中，不得超过8小时。小时。 使用过的培养基（包括失效的培养基）应按使用过的培养基（包括失效的培养基）应按照国家污染废物处理相关规定进行。照国家污染废物处理相关规定进行。 二、培养基的质量控制二、培养基的质量控制 经实验室配制或由生产厂生产的培养基的质经实验室配制或

13、由生产厂生产的培养基的质量高度依赖于其如何制备，采用不适宜方法量高度依赖于其如何制备，采用不适宜方法制备的培养基将影响微生物的生长或复苏，制备的培养基将影响微生物的生长或复苏，从而影响试验结果的可靠性。从而影响试验结果的可靠性。 所有配制好的培养基均应进行验证，验所有配制好的培养基均应进行验证，验证方法参照证方法参照中国药典中国药典2010年版年版附录附录无菌检查或微生物限度检查项下有关规无菌检查或微生物限度检查项下有关规定进行。定进行。 实验室配制的培养基监控项目实验室配制的培养基监控项目 外观、性状、外观、性状、pH、促生长试验、定期的稳、促生长试验、定期的稳定性检查以及培养基有效期的确定

14、。定性检查以及培养基有效期的确定。 验证时间验证时间 由同一批脱水培养基配制培养基时，若采由同一批脱水培养基配制培养基时，若采用已验证的配制和灭菌程序，那么可不进行批用已验证的配制和灭菌程序，那么可不进行批批促生长试验。如果培养基制备的方法未经验批促生长试验。如果培养基制备的方法未经验证，那么，配制的每一批培养基必须进行促生证，那么，配制的每一批培养基必须进行促生长试验。长试验。 试验方法试验方法 根据培养基的用途参照根据培养基的用途参照中国药典中国药典2010年年版版附录无菌检查或微生物限度检查项下有关附录无菌检查或微生物限度检查项下有关规定进行。规定进行。 培养基的有效期培养基的有效期 是

15、指已通过促生长试验的培养是指已通过促生长试验的培养基在整个有效期内均需符合这些相应的标准。每基在整个有效期内均需符合这些相应的标准。每批培养基储存的时间将取决于一定存放条件（包批培养基储存的时间将取决于一定存放条件（包括容器和密封性）的培养基组成成分的稳定性。括容器和密封性）的培养基组成成分的稳定性。 试验结果处理 当批培养基不符合促生长试验，应寻找造成当批培养基不符合促生长试验，应寻找造成不合格的原因。不合格的原因。 这个调查包括采取适当的行动以防止问题的这个调查包括采取适当的行动以防止问题的重复出现。重复出现。 如果未找到原因或还没有解决有关培养基的如果未找到原因或还没有解决有关培养基的促

16、生长问题，那么任何不符合要求的批次均不促生长问题，那么任何不符合要求的批次均不能使用。能使用。 一些用于进一步鉴定微生物的诊断试剂，如革一些用于进一步鉴定微生物的诊断试剂，如革兰染色、氧化酶试验试剂等。它们与培养基相兰染色、氧化酶试验试剂等。它们与培养基相似点是质量控制试验。在试剂用于未知样品鉴似点是质量控制试验。在试剂用于未知样品鉴定前，选择正确的标准质控菌，按使用说明上定前，选择正确的标准质控菌，按使用说明上的要求进行质控试验。的要求进行质控试验。 用于环境监控的培养基应特别小心防护。尤其用于环境监控的培养基应特别小心防护。尤其是用于关键区域监控的培养基最好要双层包装是用于关键区域监控的培

17、养基最好要双层包装和终端灭菌，如果不能采用终端灭菌的培养基，和终端灭菌，如果不能采用终端灭菌的培养基，那么在使用前应进行那么在使用前应进行100%的预培养。这样的预培养。这样是为了防止将外来的污染带到环境中及避免出是为了防止将外来的污染带到环境中及避免出现假阳性结果。现假阳性结果。 1、测定、测定PH值值 每批培养基灭菌后均应测定每批培养基灭菌后均应测定PH值值；在冷却；在冷却至室温（至室温（25）后，以无菌操作取出少量培）后，以无菌操作取出少量培养基进行测定。养基进行测定。除非经验证表明培养基的除非经验证表明培养基的PH允许的变化范围很宽，否则，培养基的允许的变化范围很宽，否则，培养基的PH

18、的的范围不得超过规定的范围不得超过规定的0.2。 2、一般性状、一般性状 制成平板或分装于试管的培养基应检查；容制成平板或分装于试管的培养基应检查；容器和盖子的破裂，装量。器和盖子的破裂，装量。 固体培养基因水分流失而造成表面产生裂缝固体培养基因水分流失而造成表面产生裂缝或涟漪。或涟漪。其他其他 如溶血，可能冷藏温度下形成的结晶，如溶血，可能冷藏温度下形成的结晶，大量的汽泡，微生物污染，氧化还原指示剂的大量的汽泡，微生物污染，氧化还原指示剂的状况，批数量和有效期的检查和记录，培养基状况，批数量和有效期的检查和记录，培养基的无菌检查等。的无菌检查等。 液体培养基应观察培养基的颜色，是液体培养基应

19、观察培养基的颜色，是否有沉淀，微生物污染，氧化还原指示否有沉淀，微生物污染，氧化还原指示剂的状况，批数量和有效期的检查和记剂的状况，批数量和有效期的检查和记录等。录等。3、培养基的促生长和抑制性能试验、培养基的促生长和抑制性能试验 无菌检查用培养基无菌检查用培养基 使用前应进行适用性试使用前应进行适用性试验，适用性试验包括无菌性检查和灵敏度检查，验，适用性试验包括无菌性检查和灵敏度检查，无菌性试验是检查培养基灭菌是否完全，灵敏无菌性试验是检查培养基灭菌是否完全，灵敏度检查是确定培养基的质量好坏、稳定与否，度检查是确定培养基的质量好坏、稳定与否，这对检验结果有极为重要的影响。培养基的灵这对检验结

20、果有极为重要的影响。培养基的灵敏度检查法如下：敏度检查法如下： 灵敏度检查灵敏度检查 菌种菌种 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌CMCC(B)26 003 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌 CMCC(B)10 104 枯草芽胞杆菌枯草芽胞杆菌 CMCC(B)63 501 生孢梭菌生孢梭菌 CMCC(B)64 941 白色念珠菌白色念珠菌 CMCC(F)98 001 黑曲霉黑曲霉 CMCC(F)98 003 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 好氧性革兰阳性菌好氧性革兰阳性菌 和铜绿假单胞菌和铜绿假单胞菌 好氧性革兰阴性菌好氧性革兰阴性菌 枯草芽胞杆菌枯草芽胞杆菌 好氧性芽胞杆菌好氧性芽胞杆菌 生孢梭菌生孢梭菌

21、厌氧菌厌氧菌 白色念珠菌白色念珠菌 酵母菌酵母菌 黑曲霉黑曲霉 真菌真菌 这几类菌基本上代表了自然界常见的微生物这几类菌基本上代表了自然界常见的微生物,也是药也是药品中常见的污染菌；品中常见的污染菌； 。 灵敏度检查培养基接种量灵敏度检查培养基接种量试验菌试验菌 培养温度培养温度 培养基培养基 培养时间培养时间 接种管数接种管数 装装 量量 () (天天) （ 支）支） （ 支）支） 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 3035 硫乙醇酸盐流体硫乙醇酸盐流体 3 2 12铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌 3 2 12 生孢梭菌生孢梭菌 3 2 12白色念珠菌白色念珠菌 2328 改良马丁改良马丁 5 2 9

22、黑曲霉黑曲霉 3 9 每种菌液接种量含菌小于每种菌液接种量含菌小于100cfu 同时做同时做1支空白对照支空白对照 结果判定结果判定 空白对照管应无菌生长空白对照管应无菌生长。若加菌的培养基管均生长良好，判该培养若加菌的培养基管均生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。基的灵敏度检查符合规定。若加菌的培养基管不生长或生长不好，判若加菌的培养基管不生长或生长不好，判该培养基的灵敏度检查不符合规定，不能用于该培养基的灵敏度检查不符合规定，不能用于无菌试验，并寻找造成不合格的原因。无菌试验，并寻找造成不合格的原因。 培养基的适用性检查可在供试品的无菌检查前培养基的适用性检查可在供试品的无菌检查前或

23、与供试品的无菌检查同时进行。或与供试品的无菌检查同时进行。 微生物限度检查微生物限度检查(计数培养基计数培养基)培养基培养基的适用性检查的适用性检查 微生物限度检查微生物限度检查(计数培养基计数培养基) 使用使用前应进行适用性试验，适用性试验包括前应进行适用性试验，适用性试验包括促生长、抑制及指示能力检查。促生长、抑制及指示能力检查。菌种菌种大肠埃希菌大肠埃希菌 CMCC（B）26003金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 CMCC（B）26003枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌 CMCC(B)63501 白色念珠球菌白色念珠球菌 CMCC（B）98001黑曲霉黑曲霉 CMCC（F）98003 检查方法 菌种

24、菌种 培养基培养基 加入菌数加入菌数 培养温度培养温度 培养时间培养时间 （cfu） （） （h） 大肠埃希菌大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 营养琼脂营养琼脂 50100 3035 48 枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌 黑曲霉黑曲霉 玫瑰红钠琼脂玫瑰红钠琼脂 50100 2328 72 白色念珠球菌白色念珠球菌 白色念珠球菌白色念珠球菌 酵母浸出粉胨酵母浸出粉胨 50100 2328 72 葡萄糖琼脂葡萄糖琼脂 菌悬液制备后在室温下放置应在菌悬液制备后在室温下放置应在2小时内使用，小时内使用，若保存在若保存在28可以在可以在24小时内使用。黑曲小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在霉孢子悬液可

25、保存在 28，在验证过的贮，在验证过的贮存期内使用。存期内使用。 结果判定结果判定 被检培养基上的菌落平均数不得小于对照被检培养基上的菌落平均数不得小于对照培养基菌落平均数的培养基菌落平均数的70%，且菌落形态、，且菌落形态、大小应与对照培养基上的菌落一致。判该大小应与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。培养基的适用性检查符合规定。 控制菌检查用培养基的适用性检查控制菌检查用培养基的适用性检查控制菌检查用培养基的促生长、抑制及指示能力检查控制菌检查用培养基的促生长、抑制及指示能力检查控制菌检查控制菌检查 培养基培养基 特性特性 试验菌株试验菌株大肠埃希菌大肠埃希菌 胆盐乳糖

26、胆盐乳糖 促生长能力促生长能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 抑制能力抑制能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 MUG 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 曙红亚甲蓝曙红亚甲蓝 或麦康凯或麦康凯 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 大肠埃希菌大肠埃希菌大肠菌群大肠菌群 乳糖胆盐乳糖胆盐 促生长能力促生长能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 抑制能力抑制能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 乳糖发酵乳糖发酵 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 曙红亚甲蓝曙红亚甲蓝 或麦康凯或麦康凯 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 大肠大肠埃希菌埃希菌 沙门菌沙门菌 营养

27、肉汤营养肉汤 促生长能力促生长能力 乙型付伤寒沙门菌乙型付伤寒沙门菌 四硫磺酸钠亮绿四硫磺酸钠亮绿 促生长能力促生长能力 乙型付伤寒沙门菌乙型付伤寒沙门菌 抑制能力抑制能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 胆盐硫乳琼脂或沙门、胆盐硫乳琼脂或沙门、 志贺氏属琼脂培养基志贺氏属琼脂培养基 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 乙型付伤寒沙门菌乙型付伤寒沙门菌 曙红亚甲蓝琼脂曙红亚甲蓝琼脂 或麦康凯琼脂或麦康凯琼脂 培养基培养基 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 乙型付伤寒沙门菌乙型付伤寒沙门菌 三糖铁琼脂三糖铁琼脂 培养基培养基 指示能力指示能力 乙型付伤寒沙门菌乙型付伤寒沙门菌铜绿假单铜绿

28、假单 胆盐乳糖胆盐乳糖 促生长能力促生长能力 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌胞菌胞菌 抑制能力抑制能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 溴化十六烷基三溴化十六烷基三 促生长能力促生长能力 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌 甲铵琼脂甲铵琼脂 抑制能力抑制能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 绿脓菌素测定绿脓菌素测定 用培养基用培养基 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌金黄色葡金黄色葡 亚碲酸盐肉汤亚碲酸盐肉汤 促生长能力促生长能力 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 萄球菌萄球菌 抑制能力抑制能力 大肠埃希菌大肠埃希菌 卵黄氯化钠琼脂促生长能力卵黄氯化钠琼脂促生长能力+指示能力指示能力 金黄色葡萄

29、球菌金黄色葡萄球菌 或甘露醇盐琼脂或甘露醇盐琼脂 抑制能力抑制能力 大肠埃希菌大肠埃希菌梭菌梭菌 梭菌增菌培养基梭菌增菌培养基 促生长能力促生长能力 生孢梭菌生孢梭菌 哥伦比亚琼脂哥伦比亚琼脂 促生长能力促生长能力 生孢梭菌生孢梭菌 白色念白色念 沙氏葡萄糖肉汤沙氏葡萄糖肉汤 促生长能力促生长能力 白色念珠菌白色念珠菌珠菌珠菌 沙氏葡萄糖琼脂沙氏葡萄糖琼脂 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 白色念珠菌白色念珠菌 念珠菌显色培养基念珠菌显色培养基 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 白色念珠菌白色念珠菌 吐温吐温80玉米琼脂玉米琼脂 促生长能力促生长能力+指示能力指示能力 白色念珠菌白

30、色念珠菌 检查方法 1、液体培养基促生长能力检查、液体培养基促生长能力检查 增菌培养基促生长能力检查增菌培养基促生长能力检查 分别接种不大于分别接种不大于100cfu的试验菌于被检培养基和对照培养基中，的试验菌于被检培养基和对照培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度及最在相应控制菌检查规定的培养温度及最 短培养时间下培养。与对照培养基管比较，被短培养时间下培养。与对照培养基管比较，被 检培养基管试验菌应生长良好。检培养基管试验菌应生长良好。 2、固体培养基促生长能力检查、固体培养基促生长能力检查 固体培养基促生长能力检查固体培养基促生长能力检查 取试验菌各取试验菌各0.1ml（含菌数（含菌数

31、50100cfu）分别涂布于被）分别涂布于被检培养基和对照培养基平板中，在相应控制菌检培养基和对照培养基平板中，在相应控制菌检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。检查规定的培养温度及最短培养时间下培养。被检培养基与对照培养基生长的菌落大小形态被检培养基与对照培养基生长的菌落大小形态特征应一致。特征应一致。 3、培养基抑制能力检查、培养基抑制能力检查 液体培养基抑制能力检查接种不少液体培养基抑制能力检查接种不少于于100cfu的试验菌于被检培养基中，的试验菌于被检培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度在相应控制菌检查规定的培养温度及最长时间下培养，试验菌应不得及最长时间下培养，试验菌应不得生

32、长。生长。 4、固体培养基指示能力检查、固体培养基指示能力检查 培养基指示能力检查培养基指示能力检查 取试验菌各取试验菌各0.1ml（含（含菌数不大于菌数不大于100cfu)分别涂布于被检培养基分别涂布于被检培养基和对照培养基平板上，在相应控制菌检查规和对照培养基平板上，在相应控制菌检查规定的培养温度及时间下培养。被检培养基中定的培养温度及时间下培养。被检培养基中试验菌生长的菌落形态、大小、指示剂反应试验菌生长的菌落形态、大小、指示剂反应情况等应与对照培养基一致。情况等应与对照培养基一致。 结果判定结果判定 被检培养基的菌落数不得小于对照培养基被检培养基的菌落数不得小于对照培养基菌落数的菌落数

33、的70%，且菌落形态大小应与对，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致。判该培养基的适照培养基上的菌落一致。判该培养基的适用性检查符合规定。用性检查符合规定。 说说 明明 1、在实验室中，培养基若使用同一批脱水、在实验室中，培养基若使用同一批脱水培养基，并采用已验证过的配制和灭菌方法配培养基，并采用已验证过的配制和灭菌方法配制那么由同一批脱水培养基配制的培养基可制那么由同一批脱水培养基配制的培养基可以不必批批进行灵敏度检查。如果培养基制备以不必批批进行灵敏度检查。如果培养基制备的方法不经验证，那么，必须对每一批配制的的方法不经验证，那么，必须对每一批配制的培养基进行灵敏度试验。培养基进行灵敏

34、度试验。 2、使用商品化培养基必须注意其有效期，有使用商品化培养基必须注意其有效期，有效期是指已通过促生长试验的培养基在整个有效期是指已通过促生长试验的培养基在整个有效期内均需符合这些相应的标准。每批培养基效期内均需符合这些相应的标准。每批培养基的存放时间将取决于存放条件（包括容器和密的存放时间将取决于存放条件（包括容器和密封性）和培养基组成成分的稳定性。封性）和培养基组成成分的稳定性。 3、当批培养基不符合促生长试验，应寻找造成当批培养基不符合促生长试验，应寻找造成不合格的原因。这个调查包括采取适当的行动不合格的原因。这个调查包括采取适当的行动以防止问题的重复出现。如果未找到原因或还以防止问

35、题的重复出现。如果未找到原因或还没有解决有关培养基的促生长问题，那么任何没有解决有关培养基的促生长问题，那么任何 不符合要求的批次均不能使用。不符合要求的批次均不能使用。 4、用于进一步鉴定微生物的诊断试剂，如革用于进一步鉴定微生物的诊断试剂，如革蓝染色、氧化酶试验试剂等。它们与培养基蓝染色、氧化酶试验试剂等。它们与培养基相似点是培养基质量控制试验。在试剂用于相似点是培养基质量控制试验。在试剂用于未知样品鉴定前，应选择正确的标准质控菌，未知样品鉴定前，应选择正确的标准质控菌，按规定进行试验。按规定进行试验。 5、培养基的有效期是指已通过促生长试验、培养基的有效期是指已通过促生长试验的培养基在整个有效期内均需符合这些相应的的培养基在整个有效期内均需符合这些相应的标准。标准。 每批培养基有效期时间长短取决于存放条件、每批培养基有效期时间长短取决于存放条件、培养基组成成分等多种因素。培养基组成成分等多种因素。