2017年度届人教出版微生物培养与应用单元检验测试.doc

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1、-/2017届 人教版 微生物培养与应用单元测试1某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具；然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题：(1)对买回来的菌种进行扩大培养，首先需制备试管培养基，写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料：_、_、_、_、_。其中，提供氮源的是_。(2)微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的_。在烧杯中加入琼脂后要不停地_，防止_。(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后将若干个试管扎一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌，压力_kP

2、a，温度_，时间_。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应_。(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意，先向锅内倒入_，把锅内水加热煮沸并将其中原有冷空气彻底排出后将锅密闭。(5)从一支试管向另一支试管接种时注意，接种环要在酒精灯_(填“内”或“外”)焰灭菌，并且待接种环_后蘸取菌种，试管口不能离开酒精灯火焰附近。将接种的试管在适温下培养，长成菌落后放入_冰箱中保藏。解析：(1)牛肉膏蛋白胨固体培养基配方为：牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂蒸馏水5.0 g10.0 g5.0 g20.0 g定容至1 000 mL由配方即可知所需的原料；凡能为微生物生长提供所需氮(或碳

3、)元素的物质即为氮(或碳)源，牛肉膏、蛋白胨均含氮、碳元素。(2)在配制培养基时营养要协调，按培养的微生物对各种成分的需求来确定；在加入琼脂后，要不断搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。(3)玻璃器皿的灭菌应用高压蒸汽灭菌锅，在压力为100 kPa、温度为121 条件下灭菌1530 min。经灭菌后的试管棉塞上沾有培养基后，易被杂菌污染，所以应废弃。(4)高压蒸汽灭菌时，必须先加入水，待加热至排出全部冷空气后才能密闭高压蒸汽灭菌锅。(5)酒精灯外焰温度高，灭菌效果好。接种环经灼烧灭菌后要先冷却再蘸取菌种，否则会烫死菌种，导致实验失败。答案：(1)牛肉膏蛋白胨蒸馏水NaCl琼脂蛋白胨、牛肉膏(2)

4、比例搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂(3)高压蒸汽灭菌锅100121 1530 min废弃(4)适量水(5)外冷却42有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请分析回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于_培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和_。(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小。分解圈大，说明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作

5、应在酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。解析：(1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株，使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基，通过控制碳源这种营养成分，来促进能高效降解原油的菌株的生长，抑制其他微生物的生长。(2)菌种纯化培养时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。(3)当固体培养基上长出单菌落后，可通过比较菌落周围分解圈的大小，来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说，分解圈越大说明该菌株的降解能力越强，反之则越弱。(4)实验室培养微生物的过程中，常用灼烧灭菌法对接种环、接种针、试管口、瓶口等进行灭菌；用高压蒸汽灭菌法对培养基、试管等进行灭菌；用干热灭菌法对玻

6、璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等进行灭菌。实验操作应在酒精灯火焰旁进行，因为酒精灯火焰旁可形成一个无菌环境，可防止微生物的污染。答案：(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰3急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水中细菌、病毒的量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为_。上图所示的四种菌落分布中，不可能由该方法得到的是_。(2)用该

7、方法统计样本菌落数时是否需要对照组？_。为什么？_。(3)有三种材料或用具需要消毒或灭菌：培养细菌用的培养基与培养皿；玻璃棒、试管、烧瓶和吸管；实验操作者的双手。其中，需要消毒的是_，需要灭菌的是_。(4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸、产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具有塞子的试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？_。解析：(1)平板划线法所得菌落集中呈线状，D的菌落分布情况可判断为平板划线法接种。(2)为判断培养基灭菌是否合格，本实验需要对照。(3)消毒是指使用较温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所

8、有的微生物，包括芽孢和孢子。对人的手不能进行灭菌。(4)根据题意，大肠杆菌能发酵乳糖产生气体，故可观察有无气泡产生来判断大肠杆菌的有无。答案：(1)稀释涂布平板法D(2)需要因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)(3)(4)通过无菌操作向试管内注入一定量待测水样，再注入已灭菌的乳糖蛋白胨培养液将试管充满，塞上塞子，混匀后置于37 恒温箱培养24 h。若试管内有气泡生成，则说明水样中有大肠杆菌，否则，说明水样中无大肠杆菌4(2016江西联考)无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：

9、(1)消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理_。皮肤饮用水牛奶注射器培养皿接种环培养基果汁酱油 手术刀ABC D以上全部(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_，接种前要进行_，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。(3)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是_。如图是利用_法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：每次划线前要_；冷却后从上一区划线末端开始划；首尾区_。(4)培养大肠

10、杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对固体培养基应采用的检测方法是_，观察培养基上是否有菌落产生。(5)利用培养基不仅可以分离培养大肠杆菌，也可以进行植物组织培养。与大肠杆菌培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入_。(6)有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是_。解析(1)题中皮肤、饮用水、牛奶、果汁、酱油应做消毒处理，注射器、培养皿、接种环、培养基、手术刀应做灭菌处理。(2)配制培养基时，各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。(3)在微生物的

11、实验室培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。进行平板划线时应每次划线前都要灼烧接种环，冷却后从上一区划线末端开始划，首尾区不连接。(4)接种前检测培养基是否被污染的方法为将未接种(接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间，观察培养基上是否有菌落产生。(5)与大肠杆菌培养明显不同的是，用于植物组织培养的培养基中还需要加入植物激素(生长素和细胞分裂素)。(6)制作泡菜利用的是乳酸菌的乳酸发酵，但乳酸菌对青霉素敏感，加入青霉素会导致乳酸菌死亡，使发酵失败。答案(1)A(2)调整pH高压蒸汽灭菌(3)防止外来杂菌的入侵平板划线灼烧接种

12、环不连接(不重叠)(4)将未接种(接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间(5)植物激素(或生长素和细胞分裂素)(6)青霉素杀死了乳酸菌5、研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。(1)配制好的培养基通常可以使用_法灭菌。与步骤中培养基成分相比，步骤中培养基成分的最大区别是_。(2)接种细菌常用的方法有_。若经过过程后获得的结果为图B所示，则所操作方法如图_所示。(3)步骤后取样测定石油含量的目的是_。对步骤某瓶中细菌计数的方法有两种，一种方法是_，其菌落数可代表活菌数；另一

13、种方法是_，该方法需要借助一块特殊的载玻片，其名称为_。解析(1)培养基灭菌用高压蒸汽灭菌法，为筛选出能分解石油的细菌，所以石油是唯一碳源。(2)接种细菌常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。图B为平板划线法获得的结果，则操作方法如图甲所示。(3)步骤进一步操作是为了筛选出分解石油能力最好的细菌，微生物计数可用稀释涂布平板法和显微镜直接计数法(血细胞计数板计数法)。答案(1)高压蒸汽灭菌石油是唯一碳源(2)平板划线法和稀释涂布平板法甲(3)筛选出分解石油能力最好的细菌稀释涂布平板法显微镜直接计数(血细胞计数板计数法)血细胞计数板(血球计数板)6(2015高考全国卷)已知微生物A可以产生油脂，

14、微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用_染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用_(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以_为碳源的固体培养基进行培养。(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用_直接计数；若要测定其活菌数量，可选用_法进行计数。(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35 、40 、45 温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、

15、6 mg，则上述三个温度中，_条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕_设计后续实验。解析：本题主要考查了植物油脂的染色和提取方法、选择培养基的配制、微生物的计数以及确定酶的最适温度的实验设计等。(1)脂肪可用苏丹染液(或苏丹染液)进行染色。微生物A产生的油脂不易挥发，不能用水蒸气蒸馏法提取，应用萃取法加以提取。(2)能产生脂肪酶的微生物B可存在于含有油料作物种子的腐烂物的土壤中，为了选择培养，固体培养基上应以油脂作为唯一碳源。(3)测定培养液中的微生物的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数；而要测定活菌数，则可利用稀释涂布平板法进行计数。(4)酶量需要最多的温度下，其酶

16、活力最小，即酶活力最小的温度应为45 。三个温度下酶活力最大的温度是40 ，但40 不一定是该酶的最适温度，故应围绕40 设计后续实验。答案：(1)苏丹(或苏丹)萃取法(2)油脂(3)血细胞计数板稀释涂布平板(4)45407(2014高考新课标全国卷)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将_分解成_。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成_色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的_。(3)为从富含纤维素的土壤中分

17、离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分如表)：酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲培养基乙注：“”表示有，“”表示无。据表判断，培养基甲_(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_；培养基乙_(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_。解析：(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，葡萄糖苷酶将纤维二糖分解成葡萄糖。(2)刚果红可与纤维素形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。用含有刚果红的纤维素培养基培养纤维素分解菌时，由于纤维素被

18、分解，红色复合物无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。(3)培养基甲未使用琼脂，为液体培养基，不能用于分离单菌落。含有纤维素和刚果红(CR)的培养基可分离和鉴别纤维素分解菌。答案：(1)纤维二糖葡萄糖(2)红透明圈(3)不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素，不会形成CR纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌8(2014高考新课标全国卷)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一

19、段时间，这样做的目的是_；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为_。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过_灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_。(3)示意图A和B中，_表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中_的含量

20、，同时可使菌体与培养液充分接触，提高_的利用率。解析：(1)取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间，可依据是否产生菌落确定培养基的灭菌效果是否理想。由样品中菌株数计算公式：(CV)M知：1 mL水样中菌株数为(380.1)1003.8104，故每升水样中的活菌数为3.8107。(2)利用接种环接种时，接种环需灼烧灭菌。利用平板划线法分离细菌时，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始，可以将聚集的菌体逐步稀释以便得到单个菌落。(3)稀释涂布平板法是用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面，故培养后产生的菌落应随机分布在培养基表面，即B表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)液体培

21、养基通过振荡可提高溶氧量，同时使菌体与营养物质充分接触，提高营养物质的利用率，从而提高细菌的生长速度。答案：(1)检测培养基平板灭菌是否合格3.8107(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B(4)溶解氧营养物质9(2013高考新课标全国卷)临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：(1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用_法或_法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表面，在37 培养箱中培养24

22、 h，使其均匀生长，布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明_；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素_。解析：本题主要考查微生物培养的相关知识。(1)将细菌接种到固体培养基上的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(2

23、)由(1)获取的致病菌单菌落，经过适当稀释，用涂布法接种至固体培养基表面进一步培养。(3)在检测致病菌对抗生素的敏感性实验中，若含A种抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明周围的致病菌死亡，该致病菌对A种抗生素敏感；若含B种抗生素的滤纸片周围没有出现透明圈，说明致病菌对B种抗生素不敏感；若含C种抗生素的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该致病菌对C的敏感性比对A的弱；若含D种抗生素的滤纸片周围透明圈也比含A的小，说明A、B、C、D四种抗生素的杀菌效果最显著的为A。透明圈中出现的菌落为耐药菌。(4)根据(3)中分析，为达到抗菌目的最好选用抗生素A。答案：(1)划线稀释涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏

24、感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌(4)A10(2014高考四川卷，节选)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_。(2)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_。(3)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心

25、，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_，该实验设计是否合理？为什么？_。解析：(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质包括水、碳源、氮源和无机盐；在培养基中加入苯磺隆作为唯一碳源，可将只能利用此碳源的菌种筛选出来。(2)纯化菌株时，通常用接种环进行划线操作；第二区域划第一条线时，接种环灼烧后未冷却，致使所划第一条线上无菌落。若第二次划线未从第一区域末端开始，则也会导致第二划线区域第一条线上无菌落。(3)由图乙可知本实验的目的是探究能降解苯磺隆的物质是否是该菌种所产生的蛋白质。为使实验设计更合理还需再设置一个对照组，将蛋白酶溶液改为等量的蒸馏水，其余设置不变。答案：(1)氮源和无机盐只有能利用

26、苯磺隆的微生物能正常生长繁殖(2)接种环接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始(3)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理，缺少空白对照11(2016锦州模拟)回答下列微生物培养的问题：(1)如表是某培养液成分含量表，该培养液培养的微生物同化作用类型是_；若用此培养液培养固氮微生物，则应除去的成分是_，应加入的物质是_。编号成分含量(NH4)HCO30.5 gKH2PO43.0 gCaSO40.5 gFeCl20.5 g维生素少许水1 000 mL(2)下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表，据此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量0.5 g1 g0.5 g100 mL牛肉膏、蛋白胨在培

27、养基中的作用是提供_、_、_等营养。要用表中所给材料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的成分是_。表中各成分含量确定的原则是_。培养基配制好后，分装前应进行的工作是_。从配制培养基直到培养完成，所采用的预防杂菌感染的方法是_、_、_等。(3)微生物接种的方法很多，最常用的是_和_。解析：(1)培养基中不含有机碳源，可判断培养的生物同化类型为自养型；若用此培养液培养固氮微生物，则应除去氮源(NH4)HCO3，但需加入有机物提供碳源。(2)根据所培养微生物对各营养成分的需要量配制培养基的成分，若需观察细菌菌落状况需用固体培养基，还需添加琼脂；微生物培养时需对培养基、接种工具进行无菌处理，并进行

28、严格的无菌操作。(3)常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。答案：(1)自养型(NH4)HCO3(或)有机物(2)碳源氮源维生素(或磷酸盐等)琼脂(凝固剂)所培养微生物对各营养成分的需要量调整pH高压蒸汽灭菌烧灼接种环酒精棉擦手(或棉塞塞试管口、在火焰旁接种)(3)平板划线法稀释涂布平板法12(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑_、_和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、_、_等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行_(填“消毒”或“灭菌”)；操作者的双手需进行清洗和

29、_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能_。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。(5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。解析：(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以对培养基

30、和培养皿进行灭菌；消毒是用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养，应保证样品稀释的比例适合。(4)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征进行初步的鉴定。(5)因为有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。答案：(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3

31、)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)灭菌13(2016银川统考)人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有_、_和_。(2)将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在_旁进行操作。接种后的培养皿进行_，并在37 的_中培养。(3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于_培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围

32、会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的_使pH升高，酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力_。(4)与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数()A多B少C相等 D几乎为零解析：(2)微生物培养注意严格按照无菌操作步骤。为防止培养皿中水汽蒸腾凝在盖子上再滴下来导致污染，所以将接种后的培养基倒置后再进行恒温培养。(3)加入酚红指示剂后在分解尿素细菌菌落周围出现红色环带，以鉴别细菌的分解能力，属于鉴别培养基。(4)以尿素为氮源的培养基中仅分解尿素的细菌能存活，故菌落数较少。答案：(1)高压蒸汽灭菌灼烧灭菌干热灭菌(2)酒精灯火

33、焰倒置恒温培养箱(3)鉴别氨越强(4)B14从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从_环境中采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在_条件下培养。(3)接种前要对培养基进行_处理。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。(4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分

34、析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是_，图B效果的接种方法是_。一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_，应当怎样操作才可避免此种现象？_。(5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响，自变量是_，应该保持_(至少答两项)等不变。解析：本题考查微生物的纯化培养技术及实验过程的注意事项。(1)筛选菌种应从适于目的菌种生长、繁殖的环境中寻找，故培养嗜盐菌应从高盐环境中采集。(2)富集培养时培养基及培养条件应能促进目的菌的生长、繁殖。(3)微生物的分离及培养中必须保证无菌，包括培养基的灭菌和操作过程的灭菌等。(4)纯化培养中，接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，后一

35、种方法形成的菌落分布较均匀，前一种方法形成的菌落分布不均匀，先划线的部分菌落密集甚至相连，后划线的部分菌落分布稀疏。(5)探究温度对酶活性的影响时，温度为自变量，酶活性为因变量，其他变量如底物和酶的用量、pH、反应时间等均为无关变量。答案：(1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温(3)高压蒸汽灭菌无菌(4)稀释涂布平板法平板划线法菌液浓度过高增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染严格无菌操作；或用接种环划下一区域前接种环没有灭菌每划一个新的区域前都要对接种环进行灭菌处理)(原因与操作要对应)(5)温度纤维素的量与浓度、反应时间、pH15(2016辽宁统考)利用微生物分解淀粉生产糖浆具有广阔的应用

36、前景。某研究所为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行了如下实验。请进一步完善实验内容并回答相关问题：(1)实验步骤：配制以_为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是_。将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上会出现_和透明圈。将接种针用_法灭菌后，从中的培养基上挑取一定量细菌，接种至_(填“固体”、“半固体”或“液体”)培养基，在恒温摇床上培养24 h，使细菌大量繁殖。取与培养基中相同的成分及配比，并加入少量碘液，使制作的培养基呈蓝紫色，灭菌并调节pH，用_法将过程所获得大量繁殖的细菌接种到该培养基上。培养一

37、段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化及其范围的大小，周围出现_的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。(2)上述实验步骤中，倒平板和接种的操作都应在超净台上的_附近进行。(3)上述实验步骤中，从用途看，所用培养基属于_培养基，和所用培养基属于_培养基。解析：(1)欲筛选出能高效分解淀粉的菌株，培养基中应只有淀粉为唯一碳源，而无其他碳源；将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上会出现菌落和透明圈；为了避免杂菌的污染，接种过程中要进行无菌操作，如对接种针进行灼烧处理，从中的培养基上挑取一定量细菌，接种至液体培养基进行有氧发酵；用稀释涂布平板法将过

38、程所获得大量繁殖的细菌接种到题中制作的培养基上；培养一段时间后，淀粉分解菌菌落周围会出现透明圈。(2)整个实验操作应是无菌的，倒平板和接种的操作都应在超净台上的酒精灯火焰附近进行。(3)从用途看，所用培养基属于选择培养基，和所用培养基属于鉴别培养基。答案：(1)淀粉琼脂菌落灼烧液体稀释涂布平板(涂布分离)较大透明圈(浅色范围大)(2)酒精灯火焰(3)选择鉴别(鉴定)16金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题：(1)按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于_生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行_呼吸。(2)7.5% NaCl肉汤培养基为微生物提供的营养成分包括_，用7.5% NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是_。(3)操作中在血平板上的接种方法是_，接种操作前后需要对接种工具进行_灭菌。(4)在制备血平板时需将pH调节至_(填“微酸性”或“微碱性”)后灭菌，待培养基_后，再加入适量血液。按培养基功能分类，血