加味平胃散抗脂肪肝的实验性研究.doc

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1、加味平胃散抗脂肪肝的实验性研究王昆 黎华 龚月鹏 周寒 吴红 夏志鸿（贵阳中医学院，贵州贵阳 550002）摘要 目的：研究加味平胃散抗脂肪肝的作用。方法：采用复合致病因素（高脂饲料和乙醇）造成大鼠脂肪肝模型后，使用加味平胃散大、小剂量分别进行治疗，观察血液生化指标及病理形态（大体标本、切片标本和超微结构）。结果：模型组大鼠血液生化中的TC（胆固醇）和TG（甘油三酯）明显升高，肝脏脂肪变严重，细胞内有大量脂滴形成的空泡，而大、小剂量加味平胃散组中的血清TC和TG明显下降，细胞内的空泡也明显减少。结论：加味平胃散抗脂肪肝的形成有显效。关键词：加味平胃散；脂肪肝；实验脂肪肝的发病率，由于生活习惯、

2、饮食结构等多种因素的影响，呈明显上升趋势，并已成为医学界关注和研究的热点。目前西医治疗脂肪肝未见特异性强的药物，且在一定程度上存在着毒副反应，而中医药的治疗在临床上获得一定的效果【1】。本次研究使用中药加味平胃散，观察对大鼠脂肪肝的血液生化及形态的改变。1 材料与方法1.1 实验动物 雄性Wistar大鼠，250g/只左右，由贵阳医学院实验动物中心提供，字号为：SYXY(黔)2002-0001。1.2 药物 加味平胃散：苍术15g、厚朴9g、陈皮9g、甘草6g、黄芪6g、泽泻9g、茯苓12g。以上药品购于贵阳同济堂大药房。加味平胃散经水煎3次，滤渣，浓缩至生药2.0g/ml分装备用，临用前用蒸

3、馏水稀释至所需浓度。1.3试剂 胆固醇为上海化学试剂站分装厂提供，分析纯批号20000625；TC、TG试剂盒为上海合富医疗科技贸易有限公司产品，批号0705010。1.4分组 取大鼠40只，随机分为4组，正常对照组10只，模型对照组10只，平胃散10倍剂量组10只，平胃散5倍剂量组10只。1.5实验方法 常规饲养1周后，除空白对照组予基础饲料外，其余3组均饲以高脂饲料（基础饲料79.5%，猪油20%，胆固醇0.5%），并用40%乙醇灌胃，两天1次，灌胃容积为6 ml/kg。8周后，加味平胃散组给予加味平胃散10倍、5倍剂量分别灌胃，每天1次，灌药容积为8 ml/kg，共4周。正常对照组在实验

4、过程中给予相应的生理盐水灌服，模型对照组也给予相应的蒸馏水灌服。1.6标本采取 12周后动物股动脉取血作TC、TG检测；然后脱臼处死，迅速打开腹腔，取肝脏左叶0.1cm0.1 cm0.6 cm标本2-4块，放入戊二醛中固定，准备进行超薄切片；再取肝脏左叶，放入10%中性甲醛中固定进行组织病理切片、HE染色。1.7检测项目1.7.1血清学指标及检测方法：分离血清，采用酶学比色法，按试剂盒说明书分别进行血清TC、TG的检测。1.7.2 肝组织病理学观察：取肝组织左叶于10%中性甲醛充分固定后，脱水、包埋、切片，用HE染色。光镜下观察肝细胞脂肪变性、坏死及炎症的情况。1.7.3 肝组织超微结构观察：

5、充分修剪的肝组织经2.5%戊二醛固定后，再用1%锇酸固定，经脱水、渗透、Epon812树脂包埋后，进行超薄切片、醋酸铀-柠檬酸铅双染色，透射电镜下观察切片的超微结构。1.8 统计学处理 有关数据XS表示，两组间均数差异采用t检验进行统计分析。2 结果2.1 正常组大鼠毛发光泽，体态活泼，反应敏捷，食量、粪便均正常。模型组和治疗组自实验造模后，出现活动量减少，精神萎靡不振，毛发欠光泽、体重增加等表现。但治疗组开始用药后，活动量增加，体重下降。 2.2 血清TC、TG检测结果 加味平胃散10倍、5倍剂量组TC、TG值均低于模型组（P0.05）。（详见表1）表1 各组大鼠血清TC、TG检测结果比较（

6、XS，U/dl） n TC TG 正常对照组 10 1.7670.265 0.6770.120 模型对照组 10 2.3710.318 1.2670.607 加味平胃散10倍剂量组 10 1.8430.193 0.7240.204 加味平胃散5倍剂量组 10 1.7590.234 0.8040.225 注：与正常组比较，P0.01；与模型组比较P0.05表2 各组大鼠肝脏病理改变比较（n） n 肝细胞疏松化 炎细胞浸润 肝细胞脂肪变 + + + + + + + + +正常对照组 10 10 0 0 0 10 0 0 0 10 0 0 0模型对照组 10 0 0 6 4 0 0 8 2 0 0

7、5 5加味平胃散10倍剂量组 10 2 8 0 0 7 3 0 0 7 3 0 0加味平胃散5倍剂量组 10 5 5 0 0 6 4 0 0 7 3 0 0注：与正常组比较，P0.01；与模型组比较P0.052.3 肝组织病理变化 正常对照组的肝脏体积正常，光滑、红润，光镜下肝小叶结构完整，肝板以中央静脉为中心呈条索状向四周放射样排列，无肝细胞脂肪变性、坏死。模型组大鼠肝脏颜色淡黄，表面有油腻感，光镜下肝细胞水肿、胞浆疏松化，甚至呈现气球样变性，有大量肝细胞脂肪变性，可见散在的肝细胞坏死及少量肝血窦扩张充血。加味平胃散10倍、5倍剂量组的病变基本相同，肝细胞水肿、胞浆疏松化、脂肪变性的程度都较

8、模型组减轻，但仍存在一定程度的水肿和胞浆疏松化。（详见表2）2.4 肝组织超微结构 正常对照组大鼠肝细胞形态结构正常，核仁明显，核膜清晰，胞质内线粒体、高尔基体、粗面内质网等细胞器结构正常。模型组大鼠肝细胞胞浆内可见脂滴且积聚，大多圆形，某些挤压细胞核，使细胞核变形、皱缩、形状不规则，线粒体数量减少，嵴明显变短或消失，粗面内质网减少。加味平胃散10倍、5倍剂量组的病变基本相同，脂滴明显减少，线粒体形态基本正常，内质网基本正常。3.讨论脂肪肝一般因为营养过多、酗酒以及活动量过少等造成热量过剩，或肝脏脂肪代谢障碍而引起。脂肪肝是一种可逆性病变，既可恢复正常，也可进一步发生肝细胞坏死后，纤维组织增生

9、，形成肝硬化【2】。中医中，虽无脂肪肝的病名，但对其病因病机、症状表现很早就有论述。中医理论认为本病肝脏以痰湿内停，淤阻气滞为主要病机。多因饮食失调，肝气郁结，湿热蕴结，中毒所伤等致病。目前西医治疗脂肪肝未见特异性强的药物，且在一定程度上存在着毒副反应。而近年来，大量的临床报道【1】证实中药能改善肝脂质代谢、促进脂肪肝逆转，有效的治疗脂肪肝。而我们采用中药加味平胃散，治疗大鼠脂肪肝模型，实验结果表面，治疗组的TC、TG明显低于模型对照组。肝组织病理学观察亦表明，治疗后肝细胞的胞浆疏松化、炎细胞浸润及脂肪变的程度都明显减轻。而肝组织超微结构进一步显示在使用该药后，胞浆内的脂滴减少，细胞核、线粒体内质网的形态都能基本恢复正常状态。说明该方剂加味有逆转肝细胞脂肪变的作用。参考文献【1】 裴道灵等. 辨证论治脂肪肝168例. 河南中医.2001,21(5)：39-39.【2】 陈杰，李甘地. 病理学.北京：人民卫生出版社，2005，23-25.