生物实验专题复习.docx

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1、精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -生物试验专题复习序号试验名称1 细胞的观看和测量2 食物中主要养分成分的鉴定3 探究植物细胞外界溶液浓度与质壁分别的关系4 颤藻和水绵细胞的比较观看5 探究酶的高效性6 叶绿体色素的提取和分别7 探究影响光合作用的因素8 酵母菌的呼吸方式9 观看牛蛙的脊髓反射现象10 小麦胚芽鞘的向光弯曲11 DNA分子模型的搭建12 植物细胞有丝分裂的观看13 植物细胞分化的观看14 性状分别比的模拟试验15 果蝇唾液腺细胞染色体观看16 植物物种多样性的调查17 培育基的配制18 微生物的接种以及菌落和抗生素抑菌现象

2、的观看十一、 DNA分子模型的搭建考点提示：1、脱氧核苷酸由哪几部分构成的？（一个磷酸、一个脱氧核糖、一个含氮碱基）2、含氮碱基有哪几种？脱氧核苷酸有哪几种？（A.T.C.G及含有该四种碱基的四种脱氧核苷酸）3、 每个脱氧核苷酸之间是在脱氧核糖 和磷酸 的部位连接。4、DNA 分子的 外侧 是磷酸 和脱氧核糖 ，它们交替连结构成了DNA分子的 基本骨架 ， 内侧 是碱基对 。5、得出 A 和 T 配对， G 和 C 配对，这就是 碱基互补配对原就。6、DNA 双螺旋结构 模型， DNA 分子是向 右螺旋 的结构，螺旋一可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - -

3、- - - - - - - -第 1 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -周就是一个螺距，每个螺距有10 个碱基对，长度为3.4 纳米。7、碱基对的排列次序千变万化，可以看出DNA具有什么性？（多样性 ）强调： 正是由于DNA分子的多样性，所以使我们的自然界丰富多彩。8、每个特定的DNA分子都具有其特定的碱基排列次序，说明DNA仍具有什么性？（特异性）9、脱氧核糖和磷酸交替排列的骨架始终在外侧，碱基互补配对原就始终没变，这又表达了 DNA分子的什么性了？

4、（稳固性 ）10 小结： DNA 分子的结构是由 两条互为平行的多核苷酸链构成，方向 相反 , 外侧由 脱氧核糖 和磷酸 交替连成基本骨架，内侧是 碱基对 。碱基之间 A 与 T 配对， G 与 C 配对，反之亦然。这就是 碱基互补配对 原就。碱基之间靠 氢键 连接， A 和 T 之间 两个 氢键， C 和 G 之间 三个 氢键。经螺旋后形成了一个 双螺旋 的结构。练习：以下模型中， 属于 J.Watson 和 F.Crick 提出的 DNA 双螺旋模型是（ ）ABCD十二、植物细胞有丝分裂的观看在完成了观看洋葱根尖分生区细胞有丝分裂试验后，老师给同学供应了2 份资料。资料一：一份“试验报告”

5、的部分内容（一） 解离： 剪取洋葱根尖5cm，放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精混合液（体积比为1:1 ）的玻璃皿中，在室温下解离3 5min。（二）染色：把根尖放在盛有0.01g/mL 龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3 5 min 。（三）漂洗：将根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。（四）制片：将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上载玻片，用拇指轻轻按压分裂期前期中期后期和末期试验小组 1 计数细胞个数43412试验小组 2 计数细胞个数44303全班计数细胞个数880671885资料二：全班20 个试验小组的试验数据汇总表（注：各小组计数50 个细胞

6、，试验条件与观看计数方法相同）细胞周期间期可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 2 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -计数细胞总数1 000各时期细胞数的百分比88.06.71.83.5（ 1）请改正“资料一”中的3 处错误。 （ 2）如已知洋葱根尖分生区细胞的细胞周期为12.0h ，请依据“资料二” ，在答题卡上的饼状图中表示出间期、前期、中期以及后期和末期所占的时间（单位：h，

7、精确到小数点后一位）。（ 3）有些因素会影响细胞周期各时期的长短，试验过程中也会产生一些误差。因而对整个试验结果可能产生影响的有 。取材时间根尖培育温度解离时间长短载玻片厚度计数的细胞是否属于分生区细胞细胞周期各时期区分是否精确参考答案：（ 1）将“ 5cm”改成“ 2 3mm”。试验操作步骤应改为先漂洗后染色。将“盖上载玻片”改成“盖上盖玻片后，再盖上2 层吸水纸”（ 2）见下图（ 3）十三、植物细胞分化的观看考点提示：1、 为什么观看植物细胞有丝分裂选材是根尖前端2 3 毫米，而观看植物细胞分化试验就挑选整个根尖 .2、 根尖伸长区细胞的分化特点是什么？3、 成熟区分化出那些不同功能的细胞

8、？参考答案：1、 根尖前端2 3mm 处是分生区，有部分细胞在分裂。分生区上部的伸长区和成熟区有不断分化成熟的细胞。2、 细胞有长度上的生长，没有宽度上的生长。3、 输送水分的导管，输送有机物的筛管和具有根毛的表皮细胞十四、性状分别比的模拟试验考点提示：（ 1）小桶中的小球代表什么？（ 2）同一个小桶中的两种小球的数目是否肯定要相同？为什么？（ 3）如将甲桶中小球数目增加一倍，是否会影响试验结果？为什么？可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 3 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - -

9、 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -参考答案：（ 1）小球代表生物产生的配子。（ 2）肯定要相同，由于小球所代表的含不同基因的配子的数量应当是相同的。（ 3）不会影响试验结果。由于每次抓取某种小球的几率不会转变。练习： 甲、乙两位同学分别用小球做遗传定律模拟试验。甲每次分别从I 、小桶中随机抓取一个小球并记录字母组合。乙每次分别从、小桶中随机抓取一个小球并记录字母组合。将抓取的小球分别放回原先小桶后并多次重复。分析以下表达错误选项：A甲、乙重复100 次试验后，统计的Dd 、AB 组合的概率均约为50 B试验中每只小桶内两种小球必

10、需相等，但I、桶小球总数可不等 C乙同学的试验可模拟非同源染色体上非等位基因自由组合的过程 D甲同学的试验模拟的是遗传因子的分别和配子随机结合的过程十五、 果蝇唾液腺细胞染色体观看考点提示：1、果蝇唾腺巨型染色体是大约1000 4000 多条同源染色线精确配对集合而成的多线染色体，这是 染色体多次复制， 但细胞只生长、 不分裂的结果。 染色体长达0.5mm ，粗细是一般体细胞染色体的100 200倍左右，其上有深浅间隔、宽窄不等的染色带，果蝇4 对唾腺染色体上已确定了6000 多条染色带，它们宽窄、疏密、次序、数目恒定，有种的特异性，同种个体的是相同的，不同的种就不一样，因此果蝇多线染色体可以

11、建立染色带及间带分布图，它们的表现和遗传学图大致平行，多数遗传学家认为这些横纹与基因 有对应关系， 所以果蝇唾腺染色体是讨论染色体结构畸变， 基因定位及基因表达 mRNA 合成 的良好材料。2、解离： 在唾腺上加0.4%NaCl溶液， 使细胞充分吸水膨胀，压片时染色体易分散。两分钟后吸去NaCl溶液，滴加 2 滴 1mol/LHCl ，处理 2 分钟，这样粘附在唾腺上的脂肪体简单剔除，也有利于细胞分别和染色体舒展，便于压片。之后反复用清水把HCl 洗净，以免影响染色。 3、染色：醋酸洋红染液染色15 分钟4、压片：加上盖片，覆上吸水纸，再以拇指垂直向下压片十六、物种多样性的调查1、动物物种多样

12、性的调查 例：某种鼠的种群密度调查在调查动物的种群密度时,一般多采纳 标志重捕法 捉放法 。就是在一个有比较明确界限的区域内,捕获肯定数量的动物个体进行标志,然后放回 ,经过一个适当时期标志个体与未标志个体重新充分混合分布后,再进行重捕。依据重捕样本中标志者的比例,估量该区域可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 4 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -的种群总数 ,可运算出某种动物的

13、种群密度。标志重捕法的前提是,标志个体与未标志个体在重捕时被捕的概率相等。在标志重捕法中,标志技术极为重要,在操作中应 留意以下几点：1.标志物和标志方法必需对动物的身体不会产生对于寿命和行为的损害。2.标志不能过分醒目。3.标志符号必需能够维护肯定的时间,在调查讨论期间不能消逝。标志重捕法的应用比较广泛,适用于 哺乳类、鸟类、爬行类、两栖类、鱼类和昆虫等动物。方法：标志重捕法过程：捕获一部分个体，标记、计数（P）后放回原环境一段时间后进行重捕，计数总捕获数（N1）和重捕中标记个体数（P1）。求种群数量（N）：N： P= N 1： P1 说明 ：应尽量防止种群内有迁入或迁出的个体。2、植物物种

14、都样性的调查方法：样方法试验过程一、 材料用具皮尺（或卷尺） ，尼龙绳，木橛子，钢笔（或圆珠笔），计录本等。二、 方法步骤及结果记录1.确定调查对象：本探究所调查的种群是植物或活动性弱的动物。2.选取样方：选取样方留意随机， 样方面积可大可小（0.25 平方米到10 平方米）三、观看现象1、计数2、 运算辛普森多样性指数四、试验结论辛普森多样性指数大，物种多样性程度高 。练习： “标志 记 重捕法 ”是动物种群密度调查中的一种常用取样调查法：在被调查种群的生存环境中，捕获一部分个体M 全部进行标记后释放，经过一段时间后进行重捕，依据重捕中标记个体数m占总捕获数 n 的比例，估量该种群的数量N

15、。某讨论机构对我国北 方草原一种主要害鼠 布氏田鼠进行了调查。调查样方总面积为2hm1hm=10000m 2，随机布设100 个鼠笼，放置l 夜后，统计所捕获的鼠数量、性别等，进行标记后放归。3日后进行重捕与调查。所得到的调查数据如下表。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 5 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -1 假定重捕取样中标记比例与样方总数中标记比例相等，写出样方中种群总数

16、N 的运算公式。2 该草的布氏田鼠的平均种群密度为只 hm。事实上田鼠在被捕获过一次后更难捕获，上述运算所得的平均种群密度与实际种群密度相比可能会偏。3 综合两次捕获情形，该田鼠种群的性别比例 为。4 在上述调查的同时，仍对样方中布氏田鼠的洞口数进行了调查假设样方中只有这一种鼠，平均每 100m2 有3.6个洞口，洞口数与田鼠数的比例关系为。答案： 1N=Mn m2144高38 9 或323642.5： 1十七、 水质污染对生物的影响试验目的： 熟悉水质污染对生物体存活 的影响。试验原理： 污水中的需氧细菌数量与有机物含量成正比 ，需氧细菌能氧化分解亚甲基蓝染料，使它从蓝色 变成 无色 。如水

17、样中需氧细菌越多，亚甲基蓝染液被分解褪色得越快 。合成洗涤剂 是一类普遍使用的生活用品，属低毒有机物。它不易被分解，排入水体或摄入生物体内可逐步蓄积，当蓄积量超过肯定程度时，就会污染水质并影响人体健康。 试验材料： 水蚤、放置1 天的洗碗水、河水、自来水仪器试剂： 显微镜、载玻片、盖玻片、吸管、试管、试管架、量杯、吸水纸、秒表、0.01%亚甲基蓝染液、清水滴瓶、2%洗衣粉溶液试验步骤 ：1 水质有机物污染与需氧细菌数量的关系：取放置一天的洗碗水、河水、自来水各 5mL，分别注入标有 1、 2、3 编号的试管中， 在每支试管中各加 5 滴 0.01%亚甲基蓝染液。把试管放在暖和处。 30 分钟后

18、观看各试管内水样变色情形，并记录结果。2合成洗涤剂污染对生物的影响：取 4 支试管，分别编号4、5、6、7，按以下次序加入相应物质和水蚤。然后每隔10分钟观看1 次，连续 3 次，比较各试管内水蚤活动情形，并记录每支试管内水蚤死亡数目。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 6 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -3无机离子对生物的影响：(1) 取载玻片滴清水吸水蚤镜检 低记录 每分心

19、搏数， 重复 3 次，求平均值 正常值(2) 滴加 1%KCl溶液 1-2 滴对侧引流重复1 次镜检 低记录 水蚤活动状况和心搏变化情形 试验结果 ： 1. 水质有机物与污染与需氧细菌数量的关系：可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结试管钟1洗碗水5302河水5303自来水530编号水样0.01%亚甲基蓝染液 滴放置时间 分试验现象试验结果及分析可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结2合成洗涤剂污染对生物的影响：水蚤存活及活动情形可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结试管水蚤清水 只ml4510055105 滴651

20、025 滴7555ml编号加 2%洗衣粉溶液数量10 分钟后20 分钟后30 分钟后可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结练习：1做试验用的水样需放置一天的缘由是让水中的细菌充分繁衍。2污水中的有机物含量越高，就污水中的好氧细菌 数量越多，后者能氧化分解亚甲基蓝染料 ，使它从蓝色变为无色。3用放置太久的洗碗水做水质污染试验时，不能使0.01亚甲蓝溶液褪色，其合懂得释 是A溶解氧太低，好氧细菌已死亡B亚甲蓝溶液浓度太低C好氧细菌大量繁衍D溶解氧太多十八、培育基的配制与灭菌仪器和试剂烧杯 500 ml 、50ml 、三角烧瓶 250 ml 、量筒、玻璃棒、玻璃漏斗、酒精灯、培育皿、牛皮纸

21、、纱绳、托盘天平、灭菌锅、牛肉膏、蛋白胨、NaCl 、琼脂、 10 NaOH 、10盐酸、精密pH 试纸、超净工作台试验方法1依据培育基配方称取各种原料成分，加入到 500 ml 烧杯的少量自来水中溶解其中可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 7 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -牛肉膏可用50 ml 烧杯称量，并用少许水加热溶解后再加入到本烧杯中，定容至200 ml ，用酒精灯加

22、热至沸腾后加入琼脂2 g长条状琼脂需用剪刀剪成小段，连续加热至琼脂完全 熔化 加热过程中要用玻璃棒不断搅拌，以防琼脂沉淀在杯底被烧焦，然后用热水补足蒸 发缺失的水，使最终容积为200 ml ，用精密pH 试纸测试培育基pH，并用滴管吸取12 滴 10盐酸或10氢氧化钠调剂pH 至 7.2 7.4。2将完全熔化的上述培育基趁热倒入250 ml 的三角烧瓶中留意不要把培育基沾在瓶口上，可通过一个漏斗注入三角烧瓶中，用两层牛皮纸扎紧瓶口后，置于灭菌锅 中于1.5 kg cm2、l21 下灭菌1530 min 。与此同时，仍需将洗净干燥的培育皿如干套用牛皮纸包扎后一起灭菌。3待灭菌后的培育基冷却至50

23、左右时 或临用前加热熔化冷至50左右时 ，在启动的 超净工作台 上打开三角烧瓶的包装纸，并用酒精灯火焰烧瓶口后，将培育基分别倒入灭过菌的培育皿中备用如培育皿显现冷凝水，需将培育皿倒置在30 37温箱内干燥。牛肉膏蛋白胨培育基是一种应用最广泛和最一般的细菌基础培育基，有时又称为通用培育基。 它含有牛肉膏、 蛋白胨和NaCl 。其中牛肉膏为微生物供应碳源和能源 ，蛋白胨主要供应 氮源 ，而 NaCl 供应 无机盐 。在配制固体培育基时仍要加入肯定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。琼脂在40时凝固，通常不被微生物分解利用。由于

24、这种培育基多用于培育细菌，因此， 要用稀酸或稀碱将其pH 调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁衍。培育基配制的一般过程：1称量按培育基配方依次精确称取各成分于烧杯中。2溶化 在上述烧杯中先加入少于所需要的水量，放石棉网上加热，用玻棒搅匀，待药品完全溶解后再补充水分到所需量。如配制固体培育基，将称好的琼脂加入已溶化的药品中，再加热融解。3. 调 pH先用精密pH 试纸测量培育基的原始pH 值。如偏酸， 可用滴管逐滴加入10 NaOH ，边加边搅拌，随时用pH 试纸检测，直至pH 达到所需范畴。如偏碱，就用10 HCl 进行调剂。 pH 值不要调过头，以防止回调而影响培育基内各离子浓度。4. 分装

25、按试验要求将配制好的培育基趁热分装于试管或三角瓶内，不要使培育基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。5加棉塞培育基分装完毕，在试管口或三角瓶口塞上棉塞或泡沫塑料塞及试管帽等，以防止外界微生物进人培育基内造成污染，并保证有良好的通气性能。6包扎加塞后在三角瓶或试管试管须先扎成捆 双层报纸，用一道绳扎好，以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞。用记号笔注明培育基名称、组别、配制日期等。7. 灭菌将包扎好的培育基按各自所需的灭菌时间和温度进行高压蒸汽灭菌或其他方法灭菌。如因特别情形不能准时灭菌，就应放人冰箱内作短期储存。8 无菌检查将灭菌培育基放人37温箱中培育24 28 h，以检查灭菌是否完全。可编辑资料

26、 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 8 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -灭菌 是杀灭物体上全部微生物的过程。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部微生物。高温蒸汽灭菌法属于热力灭菌中的湿热法，是一种最有效的灭菌方法。它是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅（如右图）内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生高温蒸汽。该方法中灭菌的温度取决于蒸气的压力。在一个大气 压下，蒸气的温度

27、是100。假如蒸气被限制在密闭的容器中，随着压力上升，蒸气的温度也相应上升。在1.05kg/cm 2 蒸气压下，温度达到 121.3，维护 15 30min ，导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。同一温度下湿热的灭菌效力、比干热大得多，可杀灭包括细菌 芽胞在内的全部微生物。火焰灭菌直接用火焰灼烧灭菌，快速完全。对于接种环，接种针或其它金属用具 ，可直接在酒精灯火焰上烧至红热进行灭菌。此外，在接种过程中，试管或三角瓶口，也采纳通过火焰而达到灭菌的目的。超净工作台简介：超净工作台是一种局部净化设备，即利用空气干净技术使肯定操作区内的 空间达到相对的无尘、无菌状态。一般用于细胞 及微生物培育的接

28、种过程。练习： 1、细菌培育基常在121压力锅中灭菌，假如只是在100的温度下将细菌培育基灭菌，以下哪一种生物仍会存活A 大肠杆菌B一种青霉C 枯草芽孢杆菌D沙门氏菌2、不同的微生物对养分物质的需要各不相同。以下有关一种以CO2 为唯独碳源的自养微生物养分的描述中，不正确选项A 氮源物质为该微生物供应必要的氮素B 碳源物质也是该微生物的能源物质 C无机盐是该微生物不行缺少的养分物质D水是该微生物的养分要素之一 3、某组织培育试验室的愈伤组织被真菌严峻污染，为查找污染缘由设计了4 个试验，试验条件除图示外共他均相同。以下各图表示试验结果，据图可得出的初步结论是可编辑资料 - - - 欢迎下载精品

29、名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 9 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -A 污染主要不是培育基灭菌时间短造成的B 污染主要来源于组织培育所用的离体组织C 调剂培育基pH 不能解决污染问题D 调剂培育温度不能解决污染问题4、氯苯化合物是重要的有机化工原料，因不易降解，会污染环境。某讨论小组依照以下试验方案（图1）挑选出能高效降解氯苯的微生物SP1 菌，培育基配方如表1.（ 1 ） 配 制 号 固 体 培 养 基 时

30、 ， 除 添 加 号 液 体 培 养 基 成 分 外 ， 仍 应 添 加1% 的 。（ 2）培育基配制时，灭菌与调PH 的先后次序是 。（ 3 ） 从 用 途 上 来 说 ， 号 培 养 基 和 号 培 养 基 分 别 属 于 培 养 基 和 培育基。在号培育基中，为SP1 菌供应氮源的成分是 。（ 4）在养分缺乏或环境恶劣时，SP1 的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为 。（ 5）将 SP1 菌接种在含不同浓度氯苯的号培育液中培育，得到生长曲线（如图2）。从图 2 可知SP1 菌在 培育条件下最早停止生长，其缘由是 。解析：此题主要考查微生物相关学问。固体培育基必需含有适量的琼脂。

31、号培育基是为了获得更多的菌株，配置培育基时应先调PH 后灭菌。属于通用培育基，号培育基是为挑选出SP1 菌株可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 10 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -属于挑选培育基，号培育基成分中含N 物质为硝酸铵，就应由它为SP1 菌株供应氮源。在恶劣环境下一些菌体会形成芽孢休眠体，来度过不良环境。 SP1 菌株是以氯苯为碳源，当氯苯消耗尽菌株因缺少碳源而不能

32、连续生存，故氯苯含量越少， SP1 菌株越早停止生长。答案：（ 1）琼脂（ 2）先调 PH ，后灭菌（ 3）通用挑选硝酸铵（ 4）芽孢（ 5） 20mg/L 氯苯氯苯最早耗尽十九、 微生物的接种以及菌落和抗生素抑菌现象的观看材料挑选大肠杆菌、枯草杆菌、滕黄八叠球菌等细菌菌种及其悬液仪器和试剂接种环、无菌滴管、无菌玻璃刮铲、镊子、记号笔、直尺、酒精灯、牛肉膏蛋白胨固体培育基、分别浸过不同浓度抗生素和无菌水的圆纸片试验方法一、接种和菌落观看1将菌种和接种用具置于启动的超净工作台 上 5 10 min 。2点燃酒精灯，打开菌种试管封口后将管口在火焰上烧一下，并将试管口置于火焰邻近，然后 灼烧 接种环

33、，将接种环于菌种试管培育基无菌落处冷却后刮取少许菌苔，将菌苔用划线法 涂布在牛肉膏蛋白胨固体培育基表面。留意转动培育皿，在三个方向 上划线，使接种物逐步 稀释 ，培育后显现单个菌落 图 1 23。3倒置培育皿，于37下培育2 3 d 后观看和比较各种细菌菌落的外形。二、抗生素对微生物的抑制作用1用三支无菌滴管分别吸取上述三种细菌的悬浮液1 2 滴，滴于三个平板培育基表面，然后分别用三个无菌玻璃刮铲涂匀。 2用无菌镊子将分别浸过不同浓度的某种抗生素和无菌水的圆纸片沥干的 匀称置于上述三个平板培育基表面事先已在培育皿底部用记号笔做好记号。3在 37恒温箱中培育2 3 d 后，在培育皿底部用直尺测量

34、每个圆纸片四周清楚区的宽度，并记录。有超净工作台的学校，上述试验在超净工作台上进行成效更好。常用的 接种方法 有以下几种：1. 划线法这是最常用的接种方法。即在固体培育基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 11 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -2. 点接法 ，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入

35、平板上面，快速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液匀称分布，就可长出单个的微生物的菌落。菌落介绍：菌落（ colony ）单个微生物在相宜固体培育基表面或内部生长繁衍到肯定程度形成肉眼可见有肯定外形结构的子 细胞的群落。将分散的细胞或孢子接种到培育基上，在相宜条件， 使其生长繁衍。由于细胞受到固体培育基表面或深层的限制，子代菌体常以母细胞为中心集合在一起，形成具有一 定外形结构的子细胞群体。各种微生物在肯定条件下形成的菌落特点（如大小、外形、边缘、表面、质的、颜色等）具有肯定的稳固性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。菌落特点与微生物的菌体外形结构特点亲密相关。例如细菌、酵母菌不形成

36、菌丝，其菌落仅生长在固体培育基表面，可用接种工具将其全部挑起，即与培育基结合不紧密。而放线菌、霉菌的菌体大多分化为养分菌丝与繁衍菌丝，其养分菌丝深化培育基中吸取养分，故具有与培育基结合较紧，不易挑起等特点。抑菌圈测量介绍：抑菌圈 测量是微生物分析的经典方法。它是利用抑菌物质在涂布特定试验菌的琼脂培育基可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 12 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -内成

37、球形立体状扩散，抑制试验菌的繁衍，在抑菌物质的四周形成透亮圈 ，即 抑菌圈。 抑菌圈越大说明该细菌对此抑菌物质敏锐性越大，反之越小。抑菌圈测量目前得到了广泛应用，如：抗生素的效价测定。新药的挑选。抑菌活性菌株的挑选。材料抗菌作用的讨论。植物抑菌活性的挑选讨论。抑菌保鲜作用的讨论等等。小课题：用挑选培育基分别土壤中的自生固氮菌1从土壤分别自生固氮菌的试验步骤。1 土壤取样： 通常从菜园土表3 5 cm 以下的土层中取土壤样品。2 土壤样品稀释：通常取土壤10g，放入 无菌研钵 中，注入 无菌水 5 ml ，并用 无菌玻璃棒搅拌匀称，备用。上述过程在超净台上操作。3 培育基配制： 分别自生固氮茵的

38、培育基，通常采纳无氮培育基 。在这种培育基上，其他类型的微生物不能生长，而自生固氮菌能利用空气中的N2 作为氮源进行生长。阿什比无氮培育基成分：葡萄糖10 g 、磷酸二氢钾0.2 g 、硫酸镁 0.2 g 、氯化钠0.2 g、硫酸钙 5 g，蒸馏水1000 ml ， pH7.0。培育基加入1琼脂 需用自来水流水冲洗几天，再用蒸馏水浸泡，洗涤几次，以除去琼脂中的氮 制成固体培育基，经高压灭菌后备用方法见试验1.2。4 接种方法： 在超净台上，将接种环在火焰上灭菌后冷却，蘸取少许上述稀释液，轻轻的点在无氮培育基表面，共点接15 20 处。也可采纳划线法 接种 方法见试验1 3。5 培育： 接种后，

39、将培育皿倒置，放在28 30恒温箱中培育3-4 d。留意：培育时间不宜过长，否就菌落会分泌含氮化合物，引起杂菌生长。6 观看： 观看菌落的外形、大小和颜色。7 镜检 选做 ：取一片酒精消毒处理过的载玻片，烘烤后冷却，在中心滴一滴无菌水。用灭过菌的接种环从单个茵落中挑取少许菌涂在水滴中心，加一滴结晶紫 液0.1g 结晶紫溶解在 100ml 水中制得 染色 1min 。另取一片载玻片倾斜30 45，从液滴左侧向右侧移动，然后自右向左推移，推出一层匀称的菌膜，制成暂时涂片。让涂片自然干燥后，在高倍镜下观看，被染料染成紫色 的细菌是自生固氮茵。自生固氮菌通常呈杆状 或 短杆状 ，四周有 荚膜 ，经常两

40、个细胞连在一起。8 纯化 选做 ：在超净工作台 上用灭过菌的接种环挑取单个茵落，接种在阿什比无氮试管培育基上，经培育后冷藏在冰箱中储存。2小课题影响因素的设计1 土壤取样：从不同深度土层取样，如的表以下4 cm 、8 cm。从不同的土壤取样，如壤土、砂质土。2 土壤样品稀释度：土壤样品10 g，注入无菌水5 ml 、10 ml 。3 接种方法：如点接法、划线法。二、生物试验涉及基本技术归纳可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结学习资料 名师精选 - - - - - - - - - -第 13 页，共 23 页 - - - - - - - - - -可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结资料word 精心总结归纳 - - - - - - - - - - - -1、玻片标本的制作（ 1）压片法，例如洋葱根尖细胞的有丝分裂（ 2）装片法，例如高倍镜下观看质壁分别和复原2、研磨、过滤， 例如酶、色素等3、纸层析技术，例如叶绿素的分别等4、恒温技术 ，例如酶参加的生化反应等5、解离技术 ，例如细胞壁的破环、有丝分裂装片的制作等6、比色技术，例如仍原糖、脂肪和蛋白质含量的鉴定