生物-高中生物选修知识点总结.docx

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1、精品名师归纳总结高中生物选修 1 生物技术实践学问点总结专题一传统发酵技术得应用课题一果酒与果醋得制作1、发酵：通过微生物技术得培育来生产大量代谢产物得过程。2、有氧发酵：醋酸发酵谷氨酸发酵无氧发酵：酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌就是兼性厌氧菌型微生物真菌酵母菌得生殖方式：出芽生殖 主要 分裂生殖孢子生殖4、在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁衍。C6H12O6 6O2 6CO26H2 O5、在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵。C6H12O62C2H5OH 2CO26、20左右最相宜酵母菌繁衍酒精发酵时一般将温度掌握在18-25 7、在葡萄酒自然发酵得过程中, 起主要作用得就是附着在葡萄皮表面

2、得野生型酵母菌、在发酵过程中 , 随着酒精浓度得提高 , 红葡萄皮得色素也进入发酵液, 使葡萄酒出现深红色、在缺氧呈酸性得发酵液中,酵母菌可以生长繁衍,而绝大多数其她微生物都因无法适应这一环境而受到制约。8、醋酸菌就是单细胞细菌 原核生物 , 代谢类型就是异养需氧型 , 生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充分时,醋酸菌将葡萄汁中得糖分解成醋酸。当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。2C2H5OH4O2 CH3COOH 6H2O10、掌握发酵条件得作用醋酸菌对氧气得含量特殊敏锐,当进行深层发酵时,即使只就是短时间中断通入氧气,也会引起醋酸菌死亡。醋酸菌最适生长温度为30 35,掌

3、握好发酵温度,使发酵时间缩短,又削减杂菌污染得机会。有两条途径生成醋酸：直接氧化与以酒精为底物得氧化。11、试验流程：选择葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒（醋酸发酵果醋）12、酒精检验：果汁发酵后就是否有酒精产生,可以用重铬酸钾来检验。在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应出现灰绿色。先在试管中加入发酵液2L,再滴入物质得可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结量浓度为 3mol/L得 H2SO43 滴,振荡混匀,最终滴加常温下饱与得重铬酸钾溶液 3滴,振荡试管,观看颜色13、充气口就是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用得。排气口就是在酒精发酵时用来排出二氧化碳得。出料口就是用来取样得。排气口要通过一

4、个长而弯曲得胶管与瓶身相连接,其目得就是防止空气中微生物得污染。开口向下得目得就是有利于二氧化碳得排出。使用该装置制酒时,应当关闭充气口。制醋时,应当充气口连接气泵,输入氧气。疑难解答（1） ）您认为应当先冲洗葡萄仍就是先除去枝梗？为什么？应当先冲洗,然后再除去枝梗,以防止除去枝梗时引起葡萄破旧,增加被杂菌污染得机会。（2） ）您认为应当从哪些方面防止发酵液被污染？如：要先冲洗葡萄,再除去枝梗。榨汁机、发酵装置要清洗洁净,并进行酒精消毒。每次排气时只需拧松瓶盖,不要完全掀开瓶盖等。（3） ）制葡萄酒时,为什么要将温度掌握在1825？制葡萄醋时,为什么要将温度掌握在 3035？温度就是酵母菌生长

5、与发酵得重要条件。20左右最适合酵母菌得繁衍。因此需要将 温度掌握在其最适温度范畴内。而醋酸菌就是嗜温菌,最适生长温度为3035,因此要将温度掌握在 30 35。课题二腐乳得制作1、多种微生物参加了豆腐得发酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用得就是毛霉。毛霉就是一种丝状真菌。代谢类型就是异养需氧型。生殖方式就是孢子可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结生殖。营腐生生活。2、原理：毛霉等微生物产生得蛋白酶能将豆腐中得蛋白质分解成小分子得肽与氨基酸。脂肪酶可将脂肪水解为甘油与脂肪酸。3、试验流程：让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制4、酿造腐乳得主要生产工序就是将豆腐进行

6、前期发酵与后期发酵。前期发酵得主要作用： 1、制造条件让毛霉生长。 2、使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期发酵主要就是酶与微生物协同参加生化反应得过程。通过各种辅料与酶得缓解作用,生成腐乳得香气。5、将豆腐切成 3cm3cm 1cm得如干块。所用豆腐得含水量为70左右,水分过多就腐乳不易成形。 * 水分测定方法如下：精确称取经研钵研磨成糊状得样品5 10g 精确到 0、02mg,置于已知重量得蒸发皿中,匀称摊平后,在100105电热干燥箱内干燥 4h,取出后置于干燥器内冷却至室温后称重,然后再烘30min,直至所称重量不变为止。样品水分含量（ %）运算公式如下： 烘干前容器与样品质量 -

7、烘干后容器与样品质量 / 烘干前样品质量毛霉得生长：条件：将豆腐块平放在笼屉内,将笼屉中得掌握在15 18,并保持肯定得温度。来源： 1、来自空气中得毛霉孢子, 2、直接接种优良毛霉菌种时间： 5 天加盐腌制：将长满毛霉得豆腐块分层整齐的摆放在瓶中,同时逐层加盐,随着层数得加高而增加盐量,接近瓶口表面得盐要铺厚一些。加盐腌制得时间约为8 天左右。用盐腌制时,留意掌握盐得用量：盐得浓度过低,不足以抑制微生物得生长,可能导致豆腐腐败变质。盐得浓度过高会影响腐乳得口味可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结食盐得作用： 1、抑制微生物得生长,防止腐败变质2、析出水分,就是豆腐变硬, 在后期制

8、作过程中不易酥烂3、调味作用,给腐乳以必要得咸味4、浸提毛酶菌丝上得蛋白酶。配制卤汤：卤汤直接关系到腐乳得色、香、味。卤汤就是由酒及各种香辛料配制而成得。卤汤中酒得含量一般掌握在12%左右。酒得作用： 1、防止杂菌污染以防腐2、与有机酸结合形成酯,给予腐乳风味3、酒精含量得高低与腐乳后期发酵时间得长短有很大关系,酒精含量越高,对蛋白酶得抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长。酒精含量过低,蛋白酶得活性高,加快蛋白质得水解,杂菌繁衍快,豆腐易腐败,难以成块。香辛料得作用： 1、调味作用 2、杀菌防腐作用 3、参加并促进发酵过程防止杂菌污染：用来腌制腐乳得玻璃瓶,洗刷洁净后要用沸水消毒。装瓶时, 操作要

9、快速当心。整齐的摆放好豆腐、加入卤汤后,要用胶条将瓶口密封。封瓶时, 最好将瓶口通过酒精灯得火焰,防止瓶口被污染。疑难解答（1） ）利用所学得生物学学问,说明豆腐长白毛就是怎么一回事？豆腐生长得白毛就是毛霉得白色菌丝。严格的说就是直立菌丝,在豆腐中仍有匍匐菌丝。（2） ）为什么要撒很多盐,将长毛得豆腐腌起来？盐能防止杂菌污染,防止豆腐腐败。（3） ）我们平常吃得豆腐,哪种适合用来做腐乳？含水量为 70%左右得豆腐适于作腐乳。用含水量高得豆腐制作腐乳,不易成形。（ 4）吃腐乳时,您会发觉腐乳外部有一层致密得“皮”。这层“皮”就是怎样形成得了？它对人体有害吗？它得作用就是什么？“皮”就是前期发酵时

10、在豆腐表面上生长得菌丝（匍匐菌丝）,对人体无害。它能可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结形成腐乳得“体”,使腐乳成形。课题三制作泡菜制作泡菜所用微生物就是乳酸菌,其代谢类型就是异养厌氧型。在无氧条件下,降可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结酶糖分解为乳酸。分裂方式就是二分裂。反应式为：C6 H12O62C3H6O3+能量含抗生素可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结牛奶不能生产酸奶得缘由就是抗生素杀死乳酸菌。常见得乳酸菌有乳酸链球菌与乳酸杆菌。乳酸杆菌常用于生产酸奶。亚硝酸盐为白色粉末,易溶于水,在食品生产中用作食品添加剂。膳食中得亚硝酸盐一般不会危害人体健康

11、,国家规定肉制品中不超过30mg/kg,酱腌菜中不超过 20mg/kg,婴儿奶粉中不超过 2mg/kg。亚硝酸盐被吸取后随尿液排出体外,但在相宜 pH、温度与肯定微生物作用下形成致癌物质亚硝胺。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结亚硝酸盐含量发酵时间（ d）一般在腌制 10 天后亚硝酸盐含量开头降低,故在 10 天之后食用最好* 测定亚硝酸盐含量得原理就是在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重 氮化反应后,与 N-1- 萘基乙二胺盐酸盐结可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结合形成玫瑰红色染料,与已知浓度得标准显色液目测比较,估算泡菜中亚硝酸盐含量。专题二微生物得

12、培育与应用课题一微生物得试验室培育培育基：人们依据微生物对养分物质得不同需求,配制出供其生长繁衍得养分基质,就是进行微生物培育得物质基础。培育基依据 物理性质 可分为 液体培育基半固体培育基 与固体培育基 。在液体培育基中加入凝固剂 琼脂 （就是从红藻中提取得一种多糖,在配制培育基中用作凝固剂）后,制成琼脂固体培育基。微生物在固体培育基表面生长,可以形成肉眼可见得菌可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结落。依据菌落得特点可以判定就是哪一种菌。液体培育基 应用于工业或生活生产,固体培育基 应用于微生物得分别与鉴定, 半固体培育基 就常用于观看微生物得运动及菌种保藏等。依据 成分培育基可

13、分为 人工合成培育基 与自然培育基 。合成培育基 就是用成分已知得化学物质配制而成,其中成分得种类比例明确,常用于微生物得分别鉴定。自然培育基就是用化学成分不明得自然物质配制而成,常用于实际工业生产。依据培育基得 用途,可将培育基分为 选择培育基 与鉴定培育基 。选择培育基 就是指在培育基中加入某种化学物质,以抑制不需要得微生物生长,促进所需要得微生物得生长。 鉴别培育基 就是依据微生物得特点,在培育基中加入某种指示剂或化学药品配制而成得,用以鉴别不同类别得微生物。培育基得化学成分包括 水、无机盐、碳源、氮源、生长因子 等。-+碳源：能为微生物得代谢供应碳元素得物质。如CO2、NaHC3O等无

14、机碳源。糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源 。氮源：能为微生物得代谢供应氮元素得物质。如N2、NH3、NO3 、NH4 （无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。培育基仍要满意微生物生长对 pH、特殊养分物质以及氧气得要求。例如,培育 乳酸杆菌时需要在培育基中添加 维生素,培育霉菌时须将培育基得 pH 调至酸性,培育细菌就是需要将 pH 调至中性或微碱性 ,培育厌氧型微生物 就是就需要供应 无氧得条件无菌技术获得纯洁培育物得关键就是防止外来杂菌得入侵,要留意以下几个方面：对试验操作得空间、操作者得衣着

15、与手,进行清洁与消毒。将用于微生物培育得器皿、接种用具与培育基等器具进行灭菌。为防止四周环境中微生物得污染,试验操作应在酒精灯火焰邻近进行。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结试验操作时应防止已经灭菌处理得材料用具与四周得物品相接触。无菌技术除了用来防止试验室得培育物被其她外来微生物污染外,仍有什么目得？答：无菌技术仍能有效防止操作者自身被微生物感染。消毒与灭菌得区分消毒指使用较为温与得物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害得微生物（不包括芽孢与孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法 ,巴氏消毒法 （对于一些不耐高温得液体）仍有 化学药剂 （如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、 紫外

16、线消毒 。灭菌就就是指使用剧烈得理化因素杀死物体内外全部得微生物,包括芽孢与孢子。灭菌方法有 灼烧灭菌 、干热灭菌 、高压蒸汽灭菌 。灭菌方法：接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法。玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械就是干热灭菌箱。培育基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械就是高压蒸汽灭菌锅。表面灭菌与空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械就是紫外灯。比较理化因素得作用毁灭微生物得数量芽孢与孢子能否被项强度毁灭消毒较为温与部分生活状态得微生物不能灭菌剧烈全部微生物能制作牛肉膏蛋白胨固体培育基（1） ）方法步骤：运算、称量、溶化、灭菌、倒平板。（2） ）倒平板操作得步骤：将灭过菌得培

17、育皿放在火焰旁得桌面上,右手拿装有培育基得锥形瓶,左手拔出可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结棉塞。右手拿锥形瓶,将瓶口快速通过火焰。用左手得拇指与食指将培育皿打开一条稍大于瓶口得缝隙,右手将锥形瓶中得培育基（约 1020mL）倒入培育皿,左手立刻盖上培育皿得皿盖。等待平板冷却凝固,大约需510min。然后,将平板倒过来放置,使培育皿盖在下、皿底在上。倒平板操作得争论1、培育基灭菌后,需要冷却到 50左右时,才能用来倒平板。您用什么方法来估量培育基得温度？提示：可以用手触摸盛有培育基得锥形瓶,感觉锥形瓶得温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。2、为什么需要使锥形瓶得瓶口通过火

18、焰？答：通过灼烧灭菌,防止瓶口得微生物污染培育基。3、平板冷凝后,为什么要将平板倒置？答：平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠,凝固后得培育基表面得湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培育基表面得水分更好的挥发,又可以防止皿盖上得水珠落入培育基,造成污染。4、在倒平板得过程中,假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间得部位,这个平板仍能用来培育微生物吗？为什么？答：空气中得微生物可能在皿盖与皿底之间得培育基上滋生,因此最好不要用这个平板培育微生物。纯化大肠杆菌（1） ）微生物接种得方法最常用得就是 平板划线法 与稀释涂布平板法 。（2） ）平板划线法就是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线得操作。将集合得

19、菌可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结种逐步稀释 分散到培育基得表面。在数次划线后培育,可以分别到由一个细胞繁衍而来得肉眼可见得子细胞群体,这就就是菌落。（3） ）稀释涂布平板法就是将菌液进行一系列得梯度稀释,然后将不同稀释度得菌液分别涂布到琼脂固体培育基得表面,进行培育。分为系列稀释操作 与涂布平板操作 两步。（4） ）用平板划线法与稀释涂布平板法接种得目得就是：使集合在一起得微生物分散成单个细胞,从而能在培育基表面形成单个得菌落,以便于纯化菌种。（5） ）平板划线法操作步骤：将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红。在火焰旁冷却接种环,并打开棉塞。将试管口通过火焰。将已冷却得接种

20、环伸入菌液中蘸取一环菌液。将试管通过火焰,并塞上棉塞。左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种得接种环快速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。留意不要划破培育皿。灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线得末端开头往其次区域内划线。重复以上操作,在三、四、五区域内划线。留意不要将最终一区得划线与第一区相连。将平板倒置放入培育箱中培育。平板划线操作得争论1、为什么在操作得第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作终止时,仍旧需要灼烧接种环吗？为什么？答：操作得第一步灼烧接种环就是为了防止接种环上可能存在得微生物污染培育物。每次划线前灼烧接种环就是为了杀死上次划线终止后,接种环上残留得菌种,使

21、下一次划线时,接种环上得菌种直接来源于上次划线得末端,从而通过划线次数得增加,使每次划线时菌种得数目逐步削减,以便得到菌落。划线终止后灼烧接种环,能准时杀死接种环上残留得菌种,防止细菌污染环境与感染操作者。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结2、在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高,杀死菌种。3、在作其次次以及其后得划线操作时,为什么总就是从上一次划线得末端开头划线？答：划线后,线条末端细菌得数目比线条起始处要少,每次从上一次划线得末端开头,能使细菌得数目随着划线次数得增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌繁衍而来得菌落。（6） ）涂布平板操作得步

22、骤：将涂布器浸在盛有酒精得烧杯中。取少量菌液,滴加到培育基表面。将沾有少量酒精得涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却810s。用涂布器将菌液匀称的涂布在培育基表面。涂布平板操作得争论涂布平板得全部操作都应在火焰邻近进行。结合平板划线与系列稀释得无菌操作要求,想一想,第 2 步应如何进行无菌操作？提示：应从操作得各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培育皿得距离要合适、吸管头不要接触任何其她物体、吸管要在酒精灯火焰四周。等等。菌种得储存（1） ）对于频繁使用得菌种,可以采纳 暂时保藏 得方法。暂时保藏方法将菌种接种到试管得固体斜面培育基上,在合适得温度下培育。当菌落长成后,将 试管放入 4得冰箱

23、中保藏。以后每 3 6 个月,都要重新将菌种从旧得培育基上转移到新奇得培育基上。缺点：这种方法储存得时间不长,菌种简单被污染或产生变异。（2） ）对于需要长期储存得菌种,可以采纳 甘油管藏 得方法。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结在 3mL得甘油瓶中,装入 1mL甘油后灭菌。将 1mL培育得菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混匀后,放在 20得冷冻箱中储存。疑难解答（1） ）生物得养分养分就是指生物摄取、利用养分物质得过程。养分物质就是指维护机体生命活动, 保证发育、生殖所需得外源物质。人及动物得养分物质：水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。植物得养分物质：矿质元素、水、二

24、氧化碳等三类。微生物得养分物质：水、无机盐、碳源、氮源及特殊养分物质五类。（2） ）确定培育基制作就是否合格得方法将未接种得培育基在恒温箱中保温12 天,无菌落生长,说明培育基得制备就是胜利得,否就需要重新制备。课题二土壤中分解尿素得细菌得分别与计数尿素就是一种重要得农业氮肥,尿素并不能直接被农作物吸取。只有当土壤中得细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物利用。土壤中得细菌之所以能分解尿素,就是由于她们能合成脲酶尿素最初就是从人得尿液中发觉得选择菌株（1） ）试验室中微生物得选择应用得原理人为供应有利于目得菌株生长得条件（包括养分、温度、pH 等）,同时抑制或阻挡其她微生物生长。（2） ）选择性培

25、育基在微生物学中,将答应特定种类得微生物生长,同时抑制或阻挡其她种类微生物生长得培育基,称作 选择培育基 。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结（3） ）配制选择培育基得依据依据选择培育得菌种得生理代谢特点加入某种物质以达到选择得目得。例如,培育基中不加入有机物可以选择培育自养微生物。培育基中不加入氮元素,可以选择培育能固氮得微生物。加入高浓度得食盐可选择培育金黄色葡萄球菌等。统计菌落数目（1） ）测定微生物数量得常用方法有 稀释涂布平板法 与显微镜直接计数 。（2） ）稀释涂布平板法统计样品中活菌得数目得原理当样品得稀释度足够高时,培育基表面生长得一个菌落,来源于样品稀释液中得一

26、个活菌。通过统计平板上得菌落数,就能估量出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果精确,一般设置 3 5 个平板,选择菌落数在30 300 得平板进行计数,并 取平均值。统计得菌落数往往比活菌得实际数目低,因此,统计结果一般用菌落数而不就是活菌数来表示。采纳此方法得留意事项： 1、一般选取菌落数在 30300 之间得平板进行计数 2、为了防止菌落扩散,影响计数,可在培育基中加入TTC3、本法仅限于形成菌落得微生物设置对比设置对比得主要目得就是排除试验组中非测试因素对试验结果得影响,提高试验结果得可信度。对比试验就是指除了被测试得条件以外,其她条件都相同得试验,其作用就是比照试验组,排除任何其她可

27、能缘由得干扰,证明的确就是所测试得条件引起相应得结果。试验设计试验设计包括试验方案,所需仪器、材料、用具与药品,详细得实施步骤以准时间支配等得综合考虑与支配。（ 1）土壤取样：同其她生物环境相比,土壤中得微生物,数量最大,种类最多。在富含有机质得土壤表层,有更多得微生物生长。从富含有机物、潮湿、pH7 得土壤中取可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结样。铲去表层土,在距的表约 3 8cm得土壤层取样。（ 2）样品得稀释：样品得稀释程度将直接影响平板上生长得菌落数目。在实际操作中,通常选用肯定稀释范畴得样品液进行培育,以保证获得菌落数在30300 之间、适于计数得平板。456测定土壤中

28、细菌得数量,一般选用10 10 10345测定放线菌得数量,一般选用 10 10 10234测定真菌得数量,一般选用 10 10 10（ 3）微生物得培育与观看不同种类得微生物,往往需要不同得培育温度与培育时间。细菌3037 12 天放线菌 252857 天霉菌 252834 天每隔 24 小时统计一次菌落数目,选取菌落数目稳固时得记录作为结果,这样可以防止因培育时间不足而导致一楼菌落得数目。一般来说,在肯定得培育条件下（相同得培 养基、唯独及培育时间）,同种微生物表现出稳固得菌落特点。外形、大小、隆起程 度、颜色疑难解答（ 1）如何从平板上得菌落数估量出每克样品中得菌落数？统计某一稀释度下平

29、板上得菌落数,最好能统计3 个平板,运算出平板菌落数得平均值每克样品中得菌落数 =（C/V） *M 其中, C代表某一稀释度下平板上生长得平均菌落数, V代表涂布平板时所用得稀释液得体积（ ml）, M代表稀释倍数课题三分解纤维素得微生物得分别纤维素,一种由葡萄糖首尾相连而成得高分子化合物,就是的球上含量最丰富得多糖类物质。纤维素与纤维素酶可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结（ 1）棉花就是自然界中纤维素含量最高得自然产物,木材、作物秸秆等也富含纤维素。（ 2）纤维素酶就是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1 酶、CX 酶与葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三

30、种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素最终被水解成葡萄糖,为微生物得生长供应养分。纤维素分解菌得选择（1） ）选择方法：刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行选择。（2） ）刚果红染色法选择纤维素分解菌得原理刚果红就是一种染料,它可以与像纤维素这样得多糖物质形成红色复合物,但并不与水解后得纤维二糖与葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素得培育基中加入刚果红时,刚果红能与培育基中得纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解 后,刚果红纤维素得复合物就无法形成,培育基中会显现以纤维素分解菌为中心得透亮圈。这样,我们就可以通过就是否产生透亮圈来选择纤维素分解菌。分别分解纤维素得微生物得试验流程

31、土壤取样选择培育（此步就是否需要,应依据样品中目得菌株数量得多少来确定）梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌得培育基上选择产生透亮圈得菌落（1） ）土壤采集选择富含纤维素得环境。（2） ）刚果红染色法分别纤维素分解菌得步骤倒平板操作、制备菌悬液、涂布平板（3） ）刚果红染色法种类一种就是先培育微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一种就是在倒平板时就加入刚果红。课题延长对分解纤维素得微生物进行了初步得选择后,只就是分别纯化得第一步,为确定得到得就是纤维素分解菌,仍需要进行发酵产纤维素酶得试验,纤维素酶得发酵方法有可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结液体发酵 与固体发酵 两种。纤维素酶

32、得测定方法,一般就是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生得葡萄糖进行定量得测定。疑难解答（1） ）为什么要在富含纤维素得环境中查找纤维素分解菌？由于生物与环境得相互依存关系,在富含纤维素得环境中,纤维素分解菌得含量相对提高,因此从这种土样中获得目得微生物得几率要高于一般环境。（2） ）将滤纸埋在土壤中有什么作用？您认为滤纸应当埋进土壤多深？将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集合,实际上就是人工设置纤维素分解菌生存得相宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。（3） ）两种刚果红染色法得比较方法一就是传统得方法,缺点就是操作繁琐,加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂。其优点就是这样显示出得

33、颜色反应基本上就是纤维素分解菌得作用。方法二得优点就是操作简便,不存在菌落混杂问题,缺点就是由于纤维素与琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质,可以使能够产生淀粉酶得微生物显现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶得微生物产生得透亮圈较为模糊,由于培育基中纤维素占主要位置,因此可以与纤维素酶产生得透亮圈相区分。方法二得另一缺点就是：有些微生物具有降解色素得才能,它们在长时间培育过程中会降解刚果红形成明显得透亮圈,与纤维素分解菌不易区分。（4） ）为什么选择培育能够“浓缩”所需得微生物？在选择培育得条件下,可以使那些能够适应这种养分条件得微生物得到快速繁衍, 而那些不适应这种养分条件得微生物得繁衍被抑制,因此可

34、以起到“浓缩”得作用。专题三植物得组织培育技术课题一菊花得组织培育植物组织培育得基本过程可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结细胞分化：在生物个体发育过程中,细胞在外形、结构与生理功能上显现稳固性差异得过程。离体得植物组织或细胞,在培育了一段时间以后,会通过细胞分裂,形成愈伤组织, 愈伤组织得细胞排列疏松而无规章,就是一种高度液泡化得呈无定外形态得薄壁细 胞。由高度分化得植物组织或细胞产生愈伤组织得过程,称为植物细胞得脱分化,或者叫做去分化。脱分化产生得愈伤组织连续进行培育,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化。再分化形成得试管苗,移栽到的里,可以发育成完整得植物体。植物

35、细胞工程个生物细胞都具有全能性。但在生物体得生长发育过程中并不表现出来,这就是由于在特定得时间与空间条件下,通过基因得选择性表达,构成不同组织与器官。植物组织培育技术得应用有：实现优良品种得快速繁衍。培育脱毒作物。制作人工种子。培育作物新品种以及细胞产物得工厂化生产等。细胞分化就是一种长久性得变化,它有什么生理意义？使多细胞生物体中细胞结构与功能趋向特的化,有利于提高各种生理功能得效率。比较根尖分生组织与愈伤组织得异同组织类型根尖细胞来源细胞外形细胞结构细胞排列影愈响伤植组织物组织高度培分养化得细条胞件分生组织受精卵正方形无液泡紧密无定形高度液泡化疏松细胞去向分化成多种细胞组织再分化成新个体相

36、同点都通过有丝分裂进行细胞增殖具有某种生物全套遗传信息得任何一个活细胞,都具有发育成完整个体得才能,即每材料： 不同得植物组织,培育得难易程度差别很大。植物材料得选择直接关系到试验得成败。植物得种类、材料得年龄与储存时间得长短等都会影响试验结果。菊花组织培育一般选择未开花植物得茎上部新萌生得侧枝作材料。一般来说,简单进行无性繁衍得植物简单进行组织培育。选取生长旺盛嫩枝进行组培得就是嫩枝生理状态好,简单诱导脱分化与再分化。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结养分： 离体得植物组织与细胞,对养分、环境等条件得要求相对特殊,需要配制相宜得培育基。常用得培育基就是MS培育基,其中含有得大量

37、元素就是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素就是 Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I 、Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。激素： 植物激素中 生长素 与细胞分裂素 就是启动细胞分裂、脱分化与再分化得关键性激素。在生长素存在得情形下,细胞分裂素得作用出现加强趋势。在培育基中需要添 加生长素与细胞分裂素等植物激素,其浓度、使用得先后次序、用量得比例等都影响 结果。使用次序试验结果+生长素细胞分裂素比值与结果先生长素,有利于分裂但不环 境促根分化,比值高时后细胞分裂素分化条抑芽形成先细胞分裂件 ：促芽分化,细胞既分裂也分比值低时素,PH、抑根形成化后生长素温比值适中促进愈伤组织生长

38、同时使用分化频率提高度 、光等环境条件。不同得植物对各种条件得要求往往不同。进行菊花得组织培育,一般将pH 掌握在 5、8左右,温度掌握在 1822,并且每日用日光灯照耀 12h、4、操作流程配制 MS固体培育基 ：配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成得浓缩液（培育基母液）。使用时依据母液得浓缩倍数,运算用量,并加蒸馏水稀释。配制培育基：应加入得物质有琼脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有机物与植物激素得母液,并用蒸馏水定容到 1000 毫升。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结在菊花组织培育中,可以不添加植物激素缘由就是菊花茎段组织培育比较简单。灭菌：实行得灭菌方法就是高压蒸汽灭

39、菌。 MS培育基中各种养分物质得作用就是什么？与肉汤培育基相比,MS培育基有哪些特点？大量元素与微量元素供应植物细胞所必需得无机盐。蔗糖供应碳源,维护细胞渗透 压。甘氨酸、维生素等物质主要就是为了满意离体植物细胞在正常代谢途径受到肯定影响后所产生得特殊养分需求。微生物培育基以 有机养分 为主, MS培育基就需供应大量 无机养分 。外植体得消毒 外植体：用于离体培育得植物器官或组织片段。选取菊花茎段时,要取生长旺盛得嫩枝。菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗 20min 左右。用无菌吸水纸吸干外植体表面得水分,放入体积分数为70%得酒精中摇动 23 次,连续 6

40、7s,立刻将外植体取出,在无菌水中清洗。取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分,放入质量分数为0、1%得氯化汞溶液中 12min。取出后,在无菌水中至少清洗 3 次,漂洗消毒液。留意：对外植体进行表面消毒时,就要考虑药剂得消毒成效,又要考虑植物得耐受能力。接种： 接种过程中插入外植体时外形学上端朝上,每个锥形瓶接种78 个外植体。外植体接种与细菌接种相像,操作步骤相同,而且都要求无菌操作。培育： 应当放在无菌箱中进行,并定期进行消毒,保持相宜得温度（1822）与光照（ 12h）移栽： 栽前应先打开培育瓶得封口膜,让其在培育间生长几日,然后用流水清洗根部培育基。然后将幼苗移植到消过毒得蛭石或珍宝

41、岩等环境中生活一段时间,进行壮 苗。最终进行露天栽培。栽培可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结外植体在培育过程中可能会被污染,缘由有外植体消毒不完全。培育基灭菌不完全。 接种中被杂菌污染。锥形瓶密封性差等。专题二月季得花药培育被子植物得花粉发育被子植物得雄蕊通常包含花丝、花药两部分。花药为 囊状结构 , 内部含有很多花粉。花粉就是由花粉母细胞 经过减数分裂而形成得,因此,花粉就是 单倍体得生殖细胞 。被子植物花粉得发育要经受 小孢子四分体时期 、单核期 与双核期等阶段。在小孢子四分体时期, 4 个单倍体细胞连在一起,进入单核期时,四分体得4个单倍体细胞彼此分别,形成4 个具有单细胞

42、核得花粉粒。这时得细胞含深厚得原生质,核位于细胞得中心（ 单核居中期 ）。随着细胞不断长大,细胞核由中心移向细胞一侧（ 单核靠边期 ）,并分裂成 1 个生殖细胞核与1 个花粉管细胞核,进而形成两个细胞,一个就是生殖细胞,一个就是养分细胞。生殖细胞将在分裂一次,形成两个精子。留意： 成熟得花粉粒有两类,一类就是二核花粉粒,其花粉粒中只含花粉管细胞核与生殖细胞核,二核花粉粒得精子就是在花粉管中形成得。另一类就是三核花粉粒, 花粉在成熟前,生殖细胞就进行一次有丝分裂,形成两个精子,此花粉粒中含有两个精子核与一个花粉管核（养分核）花粉发育过程中得四分体与动物细胞减数分裂得四分体不同。花粉发育过程中得四

43、分体就是花粉母细胞经减数分裂形成得4 个连在一起得单倍体细胞。而动物细胞减数分裂过程中得四分体就是联会配对后得一对同源染色体,由于含有四条染色单体而称为四分体。同一生殖细胞形成得两个精子,其基因组成完全相同。产生花粉植株得两种途径通过花药培育产生花粉植株（即单倍体植株）一般有两种途径, 一种就是花粉通过胚状体阶段发育为植物,另一种就是花粉在诱导培育基上先形成愈伤组织,再将其诱导分化成植株。这两种途径之间并没有肯定得界限,主要取决于培育基中 激素得种类 及其浓度配比 。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结留意： 无论哪种产生方式,都要 先诱导生芽,再诱导生根 胚状体： 植物体细胞组织

44、培育过程中,诱导产生得外形与受精卵发育成得胚特别类似得结构,其发育也与受精卵发育成得胚类似,有胚芽、胚根、胚轴等完整结构,就像一粒种子,又称为细胞胚。影响花药培育得因素诱导花粉能否胜利及诱导胜利率得高低,受多种因素影响,其中材料得选择 与培育基得组成 就是主要得影响因素亲本得生理状况：花粉早期就是得花药比后期得更简单产生花粉植株,选择月季得初花期。合适得花粉发育时期：一般来说,在单核期 ,细胞核由中心移向细胞一侧得时期,花药培育胜利率最高花蕾：选择 完全未开放 得花蕾 亲本植株得生长条件 、材料得低温预处理 以及接种密度 等对诱导胜利率都有肯定影响材料得选取：选择花药时,一般要通过镜检来确定其中得花粉就是否处于相宜得发育期。确定花粉发育时期得最常用得方法就是醋酸洋红法 。但就是,某些植物得花粉细胞核不易着色,需采纳 焙花青- 铬矾法,这种方法能将 花粉细胞核 染成蓝黑色材料得消毒接种与培育：灭菌后得花蕾