2022年牛奶的检测 .pdf

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1、牛乳检验方法一 感官检验。验收牛乳时，应先做感官鉴定，是否有异常气味，如酸味、牛粪味、腥味和煮熟乳气味等。用搅拌棒搅匀牛乳时，观察下列异常点：1色泽是否带红色、绿色或明显的黄色；2是否有大量杂质，如煤屑、豆渣、牛粪、尘埃和昆虫等；3牛乳是否发粘或呈凝块。二杂质度的测定：1仪器： a. 杂质度过滤机； b. 杂质度过滤板。2方法：将杂质度过滤板置于杂质度过滤机上，将滤体慢慢倾入待完全过滤后，用蒸馏水冲洗，将杂质度过滤板与标准板对比得出结果。三净容量的测定：1仪器： 250ml 容量瓶； 10ml 刻度移液管。2方法：将20oC 时的样品从折翼一角小心剪开，缓慢沿容量瓶壁倒入，尽量不形成泡沫，将样

2、品彻底倒净，静置1-2min ，读数，超过刻度线的部分以刻度移液管吸出读数。读数时液面的弯月面应与眼光平行。3将所取样品全部用250ml 量筒测其平均值，要求平均值大于等于250ml 方为合格。四PH值的测定：1仪器： PHS-2C酸度计2方法：将酸度计的电极插入装有纯牛奶的量筒中（纯牛奶保持在 25oC的温度，在水浴中保温） 。待显示数字稳定后，读数。五牛乳新鲜度检验。1滴定酸度： 吸取 10ml 牛乳，置于 250ml 三角瓶中， 加入 20ml 水，再加入 0.5ml0.5%和酚酞乙醇溶液，小心摇匀，用0.1N 氢氧化钠标准溶液滴至微红色（见注），在 1 min 内不消失为止。消耗0.1

3、N 氢氧化钠标准溶液的毫升数乘以10，即得酸度（OT） 。注 ：滴定酸度终点判定标准颜色的制备方法如下。取滴定酸度测定的同批和同样数量的样品如牛乳10ml 置于 250ml 三角瓶中， 加入 20ml 水，再加入 3 滴 0.005%碱性品红溶液， 摇匀后作为该样品滴定酸度终点判定的标准颜色。2酒精试验：于试管内用等量的乙醇（中性）与牛乳混合（一般用12ml 等量混合），振摇后不出现絮片的牛乳符合表1 酸度标准，出现絮片的牛乳为酒精试验阳性乳，表示酸度较高。试验温度以20为标准，不同温度需进行校正。根据收乳标准，采用68O、70 O和 72O的酒精。酒精浓度不出现絮片的酸度68O20 OT 以

4、下70 O19 OT 以下72 O18 OT 以下3煮沸试验：取约10ml 牛乳，放入试管中，置于沸水浴中5min，取出观察管壁有无絮出现或发生凝固现象。如产生絮片或发生凝固，表示牛乳已不新鲜，酸度大于26OT。4利色唑林（刃天青）试验：a 刃天青基础液： 取 100g刃天青 （分析纯） 于烧杯中， 加少量煮沸过的水溶解，入 200ml 容量瓶中，最后加水至刻度，贮藏在冰箱中，此液含刃天青0.05。b 刃天青工作液：用煮沸过的、经玻璃器皿蒸馏的水以1：10 的比例将基础液稀释即可，工作液贮于棕色瓶中，避光保存。c 方法：向刻度试管中加入牛乳10ml，加刃天青工作液1ml ，混匀，用灭菌橡胶塞塞

5、好，但不要塞名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 1 页，共 8 页 - - - - - - - - - 严，在 38 40的水浴中放置5min。当试管加热到57时，用胶塞把管口塞住，慢慢转动试管（不振荡），使受热均匀，用温度计测被检样液温度（可将温度计放在对照组试管中测得），样液温度在 57下维持60 min。经过 20 min 和 60 min 的观察结果按表2 分级。级别乳的质量乳的颜色经过 20 min 经过 60 min 1 良好青蓝色青蓝色2 合格青蓝色蓝紫色3

6、 差青蓝色或蓝紫色粉红色4 劣白色经 20 min 观察后的记录结果，除去白色乳试管，其他试管进行转动，继续放入水浴中保温60 min ，记录结果，试验时试管应避光。试验用试管需在160温度下保温60 min，干燥灭菌后，用无菌胶塞盖紧。所用胶塞应在杀菌釜中灭菌（压力为1 /2；保温 10 min）或煮沸30 min。六 乳的比重测定。本方法规定牛乳比重为20的牛乳与同体积4水的重量比值。1仪器： a. 乳稠计： 20/4 ； b.250ml 的量筒（量筒的高应大于乳稠计的长度。其直径大小应使乳稠计沉入后，量筒内壁与乳稠计的周边距离不小于5） 。2方法：将 10-25 的牛乳样品小心地沿壁注入

7、容积为250ml 的量筒中，加到量筒容积的3/4 勿使发生泡沫，用手拿住乳稠计上部，小心地将它沉入到相当标尺30o处，放手让它在乳中自由浮动。但不能与筒壁接触，待静止 1-2min 后读取乳稠计度数，以牛乳表面层与乳稠计的接触点，即新月形表面的顶点为准。3计算：比重 =1+乳稠计读数 /1000 （温度每上升1比重下降0.002 ）4也可根据牛乳的温度和乳稠计读数查看附表1。计算举例： 牛乳样品温度为16，测得比重为1.0305 ，即乳稠计读数为30.5O。换算成 20时的乳稠计数，查表，同16、 30.5O对应的乳稠计度数为29.5O。却 20时的牛乳比重为1.0295 。七全乳固体的测定：

8、1重量法：（1）仪器：铝皿盒直径50-70mm （2）方法：将皿盒置于105-110 烘箱中烘2h 后至恒重取出，放入干燥器中冷却30 分钟后先称盒重量W1。再将10ml 牛乳注入到皿盒中称重W ，然后放在电热板上烘干。然后再放在105-110 烘箱中烘1.5h 取出，放入干燥容器中0.5hr 后称重 W2，计算。公式：全乳固体（% ）=（W2- W1）/（W- W1） W2 - 烘干后皿盒和牛乳的重量，gW1 -空皿盒的重量，g W -牛乳的重量， g 2计算法：利用下式，可由上述所测得的比重和脂肪含量来计算全乳固体的含量。 T=0.25L+1.2F+0.14 T-全乳固体 % L-乳稠计（

9、 15/15 ）度数 F-脂肪 % 八 乳脂肪的测定（盖脖法） 。1原理：利用硫酸破坏牛乳的胶质性，使牛乳中的酪蛋白钙盐变成可溶性的硫酸酪蛋白化合物和硫酸钙，名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 2 页，共 8 页 - - - - - - - - - 并促使脂肪成为游离的脂肪球与其他成分分开，同时利用异戊醇加速脂肪球的合并、分离，形成脂肪层，从而能在乳脂肪计刻度上反映脂肪含量。2仪器： a. 牛乳乳脂计； b. 乳脂计架； c. 盖勃牛乳专用离心机；d.11ml 牛乳移液管

10、。3试剂： a. 硫酸：比重为1.820-1.825 ；b. 异戊醇：沸点128-132oC、比重 0.8090-0.8115 4方法：量取硫酸 10ml 注入牛乳乳脂计内，颈中勿沾湿硫酸。用11ml 牛乳吸管吸取牛乳样品至刻度。加入同一牛乳乳脂计内。再加入异戊醇1ml，塞紧橡皮塞，充分摇动，使牛乳凝块溶解。将乳脂计放入离心机中转速 1200 转/分，离心 5min（要求温度恒定在40-55 度）取出。立即读数，读数时以液面下限为准，所得数值即为脂肪的百分数。九蛋白质测定 ( 凯氏定氮法 ) ：1仪器： a. 通风橱； b. 凯氏定氮蒸馏装置。2试剂： a. 硫酸铜 硫酸钾（ 1：15） ：分

11、析纯； b.2%硼酸溶液； c.0.1% 甲基红乙醇溶液；d.0.5% 溴甲酚绿乙醇溶液； e.40%氢氧化钠溶液； f.0.05N盐酸溶液。3方法：消化：精密吸取10ml 液体样品称重，移入干燥的500ml 定氮瓶中，加入3.2g 硫酸铜 硫酸钾（ 1：15）混合催化剂及25ml 硫酸使样品全部浸泡在消化液中，防止样品粘附瓶颈上部，稍摇匀后，将瓶以45 度角斜支在电炉上，微火加热，小心瓶内泡沫冲出影响结果。当样品炭化变黑产生泡沫时要减小火力，勿使黑色物质上升到凯氏定氮瓶颈部，当泡沫完全停止，消化液均匀沸腾后，加大火力，直至瓶内容物的颜色逐渐成透明的淡绿色后继续消化0.5-1hr ，若凯氏烧瓶

12、壁上粘有炭化粒时进行摇动，或待瓶内容物冷却数分钟后，用过氧化氢溶液冲下继续消化0.5hr 直至完全透明为止，放冷，加蒸馏水约10ml 放冷后，移100ml容量瓶中加水至刻度，混匀备用，同时作空白试验（除不加样品外其余消化步骤一致）。蒸馏：检查定氮装置各连接部分不漏气，在水蒸汽发生瓶内装水约2/3 加硫酸使水呈酸性目的使水中的NH3不致蒸出，加数粒玻璃珠以防爆沸，加热煮沸定氮蒸汽蒸馏瓶的水。吸取10ml 样液于定氮蒸气蒸馏瓶中，用洗瓶冲洗管壁将塞用水封好，在冷凝器的下端入置一个盛有10ml 硼酸、 2 滴混合指示剂的250ml 锥形瓶。使冷凝器下端的玻璃管正好在液面下，一切准备好后将约10ml1

13、40% 氢氧化钠慢慢加入蒸馏瓶，一切准备好后， 通入蒸气进行蒸馏，蒸馏至锥形瓶内液体内液体在约100-125ml 时即用蒸馏水冲洗冷凝管下端，将洗液一并收集于锥形瓶内，蒸馏途中不得停火断气，否则发生倒吸。滴定：使用微量滴定管以0.05N 的盐酸溶液滴定锥形瓶中的溶液，使之由蓝绿色滴定至紫色为止，同时做空白试验。计算：（V- V0） N0.014 X= F100 10 m 100 X-样品中蛋白质的含量，% ； V-滴定时样品消耗盐酸标准溶液的体积，ml； V0- 滴定时试剂空白消耗盐酸标准溶液体积，ml； N-盐酸标准溶液的当量浓度； 0014-1N盐酸标准溶液的当量浓度； m-样品的质量（体

14、积） ，g（ml） ； F-氮换算为蛋白质的系数牛乳： 6.38 清洗：蒸馏前，要将蒸馏装置清先至少3 次，实验完毕后也要清洗3-4 次。十牛乳掺碱的测定（方法一）。1原理：生鲜牛乳如掺有碱性物质，可使指示剂溴麝香草酚蓝变色。溴麝香草酚蓝又称溴百里香酚蓝，名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 3 页，共 8 页 - - - - - - - - - 是一种酸碱指示剂。PH 值变化范围在6.0 7.6 颜色由黄变蓝，加碱的生鲜牛乳氢离子浓度发生了变化，因而使溴麝香草酚蓝显示出与

15、正常牛乳不同的颜色。同时根据颜色的不同，还可以判断其加碱量的多少。2试剂： 0.04%溴麝香草酚蓝（C27H28O5BR2S）乙醇溶液：称取0.04 gC27H28O5BR2S溶于少量 95% 的乙醇溶液，然后将溶液移至100 ml 容量瓶内，再用95% 乙醇稀释至刻度。3操作：先用洗瓶冲洗试管，然后取鲜牛乳5 ml 于试管中，将试管保持倾斜位置，沿管壁小心向试管中加入 0.04%C27H28O5BR2S乙醇溶液 5 滴，然后将试管轻轻斜转23 回，使其更好的相互接触，但切匆使液体相互配合，然后把试管垂直放置，2 min后根据环层指示剂的颜色特征判定结果。同时与不含碱的正常鲜牛乳对照。4掺碱量

16、的判定：生鲜牛乳中Na2CO3的浓度环层颜色特征无黄0.03% 黄绿0.05% 淡绿0.1% 绿0.3% 深绿0.5%青绿0.7%淡青1.0% 青1.5% 深青玫瑰红酸定性法：1试剂：玫瑰红酸（0.05%乙醇溶液）。2方法：于盛有5ml 牛乳的试管中加入5ml 玫瑰红酸液，用手指堵住管口，摇匀，乳中如无碱性物质则呈黄色，有碱时则呈玫瑰红色，其加入量与颜色的深浅成正比（在检验时应做对照试验）。十一 食盐的检出。 1 原理： CRO42-、Cl-均可与 A反应生成难溶性沉淀，但二者浓度积不同，A2CRO4沉淀遇一定浓度的Cl-而褪色， ACl-作用生成ACl 沉淀，褪色程度与Cl-含量成正比， A

17、Cl 白色沉淀因CRO42-的存在而呈黄色。2试剂：（1）0.009 mol/LA NO3溶液：将 1.533ANO3溶于少量水中，然后移入1000ml 容量瓶中稀释到刻度，制得的溶液保存于棕色的试剂瓶中。（2）10%K2RO4溶液：称取10K2RO4，用少量水溶解，然后移入100ml 容量瓶稀释至刻度。3操作：取 ANO3溶液 5ml 于试管中，滴加K2RO42 滴，混匀，试管中呈红褐色，再取生鲜牛乳1ml 于试管中，充分摇匀。如红褐色消失变为黄色，说明该牛乳为异常乳。正常牛乳中Cl-含量为 0.15%（产乳期）。若呈黄色， Cl-0.16%，折合成 NCl 为 0.26%以上。十二 硝酸盐

18、的检出。1原理：在柠檬酸的酸性溶液中，NO3-能被 Zn 还原为 NO2-，NO3-与氨基笨磺酸及盐酸萘乙二胺作用，能生成红色的偶氮化合物。2试剂：锌粉（Zn）0.6 硫酸钡（ BaSO2） 100柠檬酸（ C6H8O7.H2O ）75硫酸锰（ MnSO4.HO2） 10无水对氨基笨磺酸 （C6H4CNH2） （SO3H） 4 盐酸萘乙二胺（ C10H7NHCH2CH2NH2.2HCl ） 2 研细后，将锌粉与硫酸钡充分混合，再与其它试剂完全混合成固体试剂，密封保持干燥存放于棕色瓶中。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - -

19、- 名师精心整理 - - - - - - - 第 4 页，共 8 页 - - - - - - - - - 3操作：取生鲜牛乳2 ml 于试管中，加上述固体试剂0.3 振荡 1.5 ，若试管中呈红色，说明生鲜牛乳中的含量超过正常值。十三 硫酸盐的检出。1原理：掺入硫酸盐的生鲜牛乳，SO2-的含量高，可以利用玫瑰红酸钡与BaCl2作用，生成红色的玫瑰红酸钡，当 SO2-进入时， SO2-与 Ba2反应生成较细腻的BaSO2沉淀，使玫瑰红酸钠的红色褪去的反应，有过量的硫酸盐存在于牛乳中。2试剂： 20%CH3COOH 溶液：用市销售36% 的分析纯醋酸稀释而得。1% BaCl2溶液：取 1BaCl2

20、.H2O溶于少量水，稀释至100ml。2% 玫瑰红酸钠溶液：取0.2 玫红酸溶于少量水中，稀释到100 ml ，用时现配。3操作：取生鲜牛乳样5 ml ，加 CH3COOH2 滴， BaCl25 滴，玫红酸2 滴，充分振荡，若试管中呈黄色，则为阳性结果。若为红色，则为阴性结果。红色褪去的程度与SO2-的含量成正比。注：若为红色属不正常乳。十四 淀粉酶的检出。1原理：利用碘遇淀粉变蓝的特效反应，检查牛乳中是否存有淀粉酶。2试剂：2% 碘溶液：取4KI 溶于少量水中，然后用此溶液溶解结晶碘2，待结晶碘完全溶解后转入100 ml容量瓶中，加水至刻度。2% 可溶性淀粉液：取2可溶性淀粉，先用少量水搅成

21、糊状，用用沸水浴溶解，冷却后转移至100 ml容量瓶中，加水至刻度。3操作：取鲜牛乳5 ml 于试管中，加入2 滴 2% 可溶性淀粉液，加热至75，保温 5 min ，然后冷却至室温后再加入2 滴 2% 碘溶液，如有淀粉酶存在不显蓝色；而正常乳呈浅蓝深蓝色。4淀粉类物质的检出：取生鲜牛乳5 ml 于试管中，稍稍煮沸，冷却后加入23 滴碘液，若有淀粉类物质存在，则试管中呈蓝色或青蓝色。如有糊精类，则显紫红色。十五 尿素的检出。1 理：尿素能和亚销酸钠在酸性溶液中反应生成CO2、N2气体，生鲜牛乳中如掺有尿素、亚销酸钠后会发生该反应；如无尿素存在，那么引入的NO2-就遗留在生鲜牛乳中，可通过检验N

22、O2-是否存在，判定乳样中有无尿素存在。2试剂：格里斯干试剂：滴石酸89无水对氨基笨磺酸10萘胺1小心在研钵中研细均匀，密封干燥保存在棕色瓶中。1%亚销酸钠水溶液：取1NaNO2用少量水溶解，定容到100ml 容量瓶中。3操作：取鲜牛乳3ml 于试管中，加入1% NaNO2溶液、浓 H2SO4各 1ml，摇匀，待气泡消落，加入0.3格里斯干试剂，混匀观察试管中的颜色变化。（要求 NaNO2的浓度与加入量要准确。 ）正常乳为紫红色。掺尿素样乳试管中无颜色变化或呈黄色，灵敏度为0.01%。4尿的检验：取生鲜牛乳5ml 于试管中，加10%NaOH 溶液 5 滴，再加苦味酸0.5ml ，混匀，加热，立

23、即观察试管颜色的变化。正常生鲜牛乳，颜色呈黄色，掺尿乳则呈橙红色，尿掺入量越大，红色出现的越快。十六 蔗糖的检出。1原理：蔗糖与硫酸反应脱水生成羟甲基呋喃甲醛，再与葱酮缩合成红色化合物。如有还原糖在时，先用碱使还原糖转向异构化，然后再进行蔗糖的测定。2试剂： 0.1%葱酮（ C14H100）溶液：取0.1 葱酮溶于100ml3：1H2SO4溶液中，用时现配。3操作：取生鲜牛乳1 ml 于试管中，加葱酮试剂2 ml ，振荡观察试管中的颜色变化，如在5 min 内变为透明红色，则说明有糖掺入，颜色浓度与掺入量成正比。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - -

24、- - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 5 页，共 8 页 - - - - - - - - - 十七。 蔗糖含量的测定：1 仪器： 250ml三角瓶（蒸馏水洗净烘干）；酸式滴定管（0-50ml 、0.1ml 精确度）；250ml、100ml 容量瓶； 5ml、50ml 移液管。2试剂：20% 的乙酸铅溶液：取20g 乙酸铅溶解于100ml 水中。草酸钾 - 磷酸氢二钠溶液：取草酸钾3g，磷酸氢二钠7g溶解于 100ml 的水中。费林试液（甲液及乙液） ： （1）甲液取34.639g 硫酸铜溶于水中，加入0.5ml 浓硫酸加水至500ml。（2）乙液取173

25、g 洒石酸钾钠及50g 氢氧化钠溶解于水中，稀释到500ml，静止两天后过滤。1% 次甲基蓝溶液；1：1 盐酸；30% 氢氧化钠溶液；0.2% 甲基红 - 乙醇溶液：取0.2g 甲基红溶于100ml20% 乙醇溶液中。3乳糖的测定方法（1）样品处理取 25ml 奶用 50ml 水分数次溶解并洗入250ml 容量瓶中，加入4ml 乙酸铅溶液， 4ml 草酸钾 - 磷酸氢二钠溶液，每次加入试剂是都要途徐徐加入，并摇动容量瓶，用水稀释至刻度，摇匀，静置数分钟，用于干燥滤纸过滤弃去最初25ml，所得样液作滴定用。（2）预备滴定在 50ml 滴定管中注入上述待测液15ml，取费林试液10ml（用甲、乙液

26、各5ml）于 250ml 三角烧瓶中，置电炉上加热，使其在2min 内沸腾，沸腾后关小火焰，保持沸腾状态15S，加入次甲基蓝3 滴，徐徐滴入样液。样液至蓝色完全褪尽为止，读取所用样液的亳升数。（3）精密滴定取 10ml 费林试液（甲、乙液各5ml） ，一次加入比预备滴定量少0.5-1.0ml的样液 , 置于电炉上 , 使其在2min 内沸腾 , 沸腾后关小火焰, 维持沸腾状态2min, 加入 3 滴次甲基蓝液 , 一滴一滴地滴入样液, 待蓝色褪尽即为终点 , 以滴定定量作为计算的依据(在同时测定蔗糖时,此即为转化前滴定量。计算 : F1fl 250100 乳糖（ % ）= 12 V1W 式中

27、:V1-滴定消耗样液是，ml W-样品重， mg F1-由消耗样液的毫升数查表4 所得乳糖数， mg fl-费林试液乳糖校正值4蔗糖测定方法（1）转化前转化糖量的计算利用测乳糖时的滴定量, 自表 4 中查出相对应的化糖量按式 13 计算 F2f2 250100 转化前转化糖量 (%)= 13 V1W 1000 式中 :F2-由测定有乳糖时消耗样液的毫升数查表名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 6 页，共 8 页 - - - - - - - - - 4所得转化糖的毫克数 f

28、2-费林试液蔗糖校正值 V1,W同式 12 （2）样液的转化及滴定取 50ml 样液于 100ml 容量瓶中加20ml 水, 再加入 10ml1:1的盐酸 , 置于 75水浴锅中 , 时时摇动 , 在2min30S 至 2min45S 之间使瓶内升温至69.5 后继续在水浴中保持5min, 取出 ,用冷水冷却 , 当瓶内温度冷却至 35加酚酞指示剂 2 滴, 用 30% 氢氧化钠中和呈中性冷却至20, 用水稀释至刻度,摇匀并在此温度下保温半小时后再滴定。 F3 f3 500100 转化后转化糖量 (%)= 14 V2W 1000 式中 :F3-由 V2 查得转化糖的数，mg V2-转化后消耗样

29、液量，ml f3,W同式 13 蔗糖量计算 : 蔗糖 (%)=(L1-L2) 0.95 15 式中 :L1-转化后转化糖的含量，% L2-转化前转化糖的含量，% 滴定量 ，ml乳糖 ，mg转化 糖，mg滴定量 ，ml乳糖 ，mg转 化糖，mg 15 68.3 50.533 67.851.716 68.2 50.634 67.9 51.717 68.250.7 35 67.9 51.818 68.150.836 67.951.819 68.150.837 67.951.920 68.050.938 67.951.921 68.051.039 67.952.022 68.051.040 67.95

30、2.023 67.951.141 68.052.124 67.951.242 68.052.125 67.951.243 68.0 52.226 67.951.3 44 68.0 52.227 67.851.4 45 68.152.328 68.851.446 68.1 52.329 67.851.547 68.2 52.430 67.851.5 48 68.2 52.431 67.851.6 49 68.2 52.532 67.851.650 68.352.5溶液中乳糖 ,蔗糖共存时 , 测定乳糖时应在滴定量中加上的校正数见表5 表 5 (用 10ml 费林试液 ) 滴定终点时所用的糖液量，

31、ml 蔗糖对乳糖比3:1 6:1 15 0.15 0.30 20 0.25 0.50 25 0.30 0.60 30 0.35 0.70 35 0.40 0.80 40 0.45 0.90 45 0.50 0.95 50 0.55 1.05 十八 抗生素残留的检出。1试剂：脱脂乳：经113、 20min 灭菌。4% 氯化三笨四氮唑溶液： 称取 1g 氯化三笨四氮唑溶液溶于5ml 灭菌蒸馏水中， 装褐色瓶内于7水箱内保存。临用时用灭菌蒸馏水按1：5 稀释。若溶液变为玉色或淡褐色，则不能再用。2操作：（1）菌液制作：将菌种移种脱脂乳，经361水浴培养15h 后，以灭菌脱脂乳1：1 稀释待用。（2）

32、取检样 9ml 于 15150mm 试管内， 80水浴加热5min，冷却 37以下，加菌液1ml，361水浴名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 7 页，共 8 页 - - - - - - - - - 培养 2h，加 0.3ml 氯化三笨四氮唑，361水浴培养30min 观察，如为阳性，再于水浴中培养30min 做第二次观察。每份检样做二份，另外再做阴性和阳性对照各一份。阴性对照管用无抗生素的乳9ml 加菌液和氯化三笨四氮唑。（3）判断方法：准确培养30min，观察结果，如

33、为阳性，再继续培养30min 做第二次观察。在观察时要迅速，避免光照过久干扰，乳中有抗生素存在，则在向检样中加入菌液培养液时细菌不增殖，此时由于加入的指示剂氯化三笨四氮唑不还原，所以不显色。与此相反，如果没有抗生素存在，则加入菌液即进行增殖，氯化三笨四氮唑被还原而显红色，也就是说检样呈乳的原色时为阳性，成红色为阴性。见表如下：显色状态判断未显色者阳性微红色者可疑桃红色红色阴性检测各种抗生素的灵敏度：抗生素名称最低检出量青霉素0.004 单位链霉素0.5 单位庆大霉素0.4 单位卡那霉素5 单位十九。 PH值的测定：1仪器： PHS-2C酸度计2方法：将酸度计的电极插入装有纯牛奶的量筒中（纯牛奶）保持在25oC的温度，在水浴中保温） 。待显示数字稳定后，读数。二十。 细菌总数及大肠菌群检验。见乳的微生物检验。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 8 页，共 8 页 - - - - - - - - -