2022年生化考研重点知识总结 .pdf
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1、生化考研重点知识总结第一章单糖多糖与碘显色,至少需要的葡萄糖残基数:6 唾液淀粉酶激活剂:Cl-几个典型非还原糖:蔗糖、糖原、淀粉形成 N-糖肽键的单糖或衍生物是:第二章油脂几个非饱和脂肪酸双键数:油酸: 1亚油酸: 2亚麻酸: 3 人不能自身合成的必须脂肪酸: 亚油酸、亚麻酸四种脂类转运脂蛋白:CM :乳糜微粒,转运外源性三酰甘油酯VLDL:极低密度脂蛋白,转运内源性三酰甘油酯LDL:低密度脂蛋白,转运内源性胆固醇HDL :高密度脂蛋白,转运外源性胆固醇第三章氨基酸与蛋白质几种主要氨基酸及三字母缩写两特殊: Pro、Gly 芳香: 酪( Tyr )色( Trp/Try ,吸光最强 )苯( P
2、he)八种必需氨基酸:甲携来一本亮色书,Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr侧链为羟基氨基酸:苏( Thr )丝( Ser)酪( Tyr )酸性氨基酸:天( Asp)谷( Glu)对应两酰胺:Asn、Gln碱性氨基酸:赖( Lys)精( Arg)组( His )其它: 丙氨酸( Ala )精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 12 页PI PI 的计算: PI=(PK1+PK2 ) /2=(PK1+PKRCOOH)/2=(PK2+PKRNH2)/2 PH的计算: PH=PK1+Lg (R/R+)=PK
3、2+Lg (R-/R)PH =7 的水中溶蛋白,PH=6 ,则该蛋白PIPI 时有 R-蛋白二级结构螺旋: Sn=3.613,存在 Pro 时不形成螺旋,右手螺旋折叠: 同/ 反向,肽键中H与 O成氢键,轴距0.35nm 转角: 转角处为 Gly超二级结构:无规卷曲、结构域三级结构: 作用力( 二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力)蛋白结构分析N端分析法: FDNB ( Sanger)、 PITC(Edman )、 DNS-Cl(丹磺酰氯)、氨肽酶法C端分析法: 羧肽酶法、无水肼解法羧肽酶 A:不能水解C端为 Lys、 Arg、Pro 的肽键; 羧肽酶 B:能水解 C端为 Lys、A
4、rg 的肽键; C端倒数第二位是Pro 时, A、 B都不能水解打开二硫键:还原法(巯基化合物,碘乙酸保护)、氧化法(过甲酸)专一切断:胰蛋白酶( Lys、Arg-COOH肽键); CNBr(Met-COOH 肽键);胰凝乳蛋白酶();显色反应Follin酚: 蓝色,酚基( Tyr )、吲哚基(Trp),组分( CuSO4+磷钼酸)Millon:红色,酚基( Tyr ),组分( HgNO3+Hg(NO3)2)坂口反应:红色,胍基( Arg),组分(萘酚,NaClO)黄色反应:黄色,芳香氨基酸,组分(浓HNO3)双缩脲反应:紫红色,肽键,多肽,组分(NaOH+CuSO4)乙醛酸反应:紫色,吲哚基
5、(Trp)几种重要氨基酸提供活性甲基的:S-腺苷 Met 形成 N-糖肽键的: Asp 胶原蛋白中含量高的氨基酸:Gly 、Ala 、Pro、HO-Pro、 HO-Lys 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 12 页蛋白分离纯化技术:透析、超滤;密度梯度离心;凝胶过滤;PI 法、盐析、有机溶剂法;电泳、离子交换;吸附层析;亲和层析凝胶过滤大分子先出,凝胶电泳相反:机理分子运动速度决定因素:大小、电荷量、形状蛋白离子交换层析与洗脱:凝胶电泳三效应:电荷、分子筛、浓度效应蛋白含量测定测 N: 凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林
6、酚显色吸光测 M : 沉降离心、凝胶过滤(凝胶排阻层析)、SDS-PAGE 凯氏定氮:HNO2反应,生成的N2中氨基酸占1/2 其它分离二硫基的肽段可用:SDS-PAGE 几个主要氨基酸的PI 值:几种重要蛋白:镰刀贫血病:GluVal ,第 6 位与烷化剂(碘乙酸)反应的氨基酸:Cys(半胱氨酸)第四章酶学酶活化中心组成:结合部位、催化部位计算: 活力单位( IU、Kat )、比活力(IU/mg)、转化数 / 转化周期、米氏方程各可逆抑制作用的动力学特点:Km 、Vmax 几个抑制作用:竞争抑制( 丙二酸对琥珀酸脱氢酶);有有机磷(与丝氨酸羟基共价不可逆 ); CO 、CN (作用于Cyta
7、a3);不可逆抑制(重金属、有机砷、CN化物、硫化物、CO )酶促反应初速度与E 、 T有关以“三点结合”模型作用的酶:甘油激酶酶的专一性专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶:以 O2为直接氢受体的氧化酶:VC氧化酶、细胞色素氧化酶别构酶两独立功能部位:活性中心、变构中心精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 12 页动力学曲线:S型, 其它为双曲线具有效应:协同效应、变构效应典型代表 血红蛋白: 协同效应、波尔效应、变构效应酶分离纯化要求: 纯化倍数高、回收率高纯化倍数 =比活力 / 纯化前总比活力回收率 =活力单位数 / 纯化前活
8、力单位数方法: 同蛋白质竞争性抑制剂:增S 可减弱抑制作用患尿黑酸症的病人是由于:缺少尿黑酸氧化酶(尿黑酸氧化酶遗传缺陷)第五章核酸反向互补配对:ACG-CGT (U)N-苷键: ( C1-C5),嘌呤( N9-C1),嘧啶( N1-C1)SnRNA :核仁不均一RNA ,功能( 促进转录、 )核酸分离技术凝胶电泳: 三效应、分子运动速度决定因素见蛋白质离子交换层析:阳离子交换层析,核苷酸脱下顺序:UG CA 阴离子交换层析,核苷酸脱下顺序:CAUG 亲和层析: 可用亲和层析法分离的核酸:mRNA (PolyA 尾) DNA 测序三法:加减法(Sanger 、 1975),化学断裂法,双脱氧终
9、止法(Sanger 、1977、原理 )不能形成两性离子的核苷酸是UMP : 原因cNMP 最重要的cNMP :cAMP 、cGMP cAMP :第二信使cAMP分子内有: 环化的磷酸二酯键cAMP与 cGMP :生物作用并不是完全相反第六章分子生物学与基因工程精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 12 页基因组学启动子组成3部分: 识别部位( -35、CG/CAAT ),结合部位(-10、TATA ),转录起始点高度重复序列:卫星 DNA 、小卫星DNA 、微卫星DNA 原核生物基因重叠类型:基因家族按特点分三类:简单多基因
10、家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家族基因家族按组成分三类:DNA复制DNA复制方式: 线性 (眼型), 环状 【(大肠杆菌)、滚环(病毒质粒)、D型(线粒体、叶绿体)】DNA复制需引物:转录不需引物原核 DNA聚合酶功能:损伤修复、校正、合成DNA 基因工程酶RNase:RNaseA(嘧啶 3 5) 、RNaseT1 (G的 3 5)、 RNaseT2 (A的 3 5)DNA连接酶所需能量:原核 ATP 、真核 NAD+ 转移水解DNA-RNA 中的 RNA的酶: RNaseH 、逆转录酶(有RNaseH活性)牛脾磷酸二酯酶水解RNA所得产物: 5磷酸切开,产生3单磷酸核苷蛇毒磷酸二
11、酯酶水解RNA所得产物: 3-OH切开,产生5单磷酸核苷核酸合成酶:DDDP (依赖 DNA的 DNA聚合酶)、 RDDP (依赖RNA的 DNA聚合酶)、 DDRP(依赖 DNA的 RNA聚合酶)RNAPol2: RNAPolB ,合成 hnRNA ,分布在核质中RNA用强碱水解产生:2 - 核苷酸、 3- 核苷酸混合物限制内切酶切割特点:4-8bp 、6bp 主要,成黏性、平齐末端,成回文序列,甲基化难切tRNA 结构含稀有碱基最多:D(二氢尿嘧啶)、(假尿嘧啶)、I (次黄嘌呤)四环四臂五区:D臂、 TC臂、氨基酸臂(受体臂)、反密码子臂二级: 三叶草三级: 倒 L 基因表达DNA重组过
12、程中DNA连接四方式: 粘性末端连接、同聚物加尾法、加衔接物连接法、加精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 12 页DNA接头连接法转位: 三类转位因子【(插入序列IS)、转座子( Tn)、可转座噬菌体】,转位后遗传效应(突变、产生新基因、染色体畸变)转录: 转录 5端常见起始核苷酸是G 、A,原核终止子在终止位点前有PolyU 翻译: 参与肽链延伸的因子(EF-Tu、EF-TS、移位酶 /G 因子),肽基转移酶催化组分( 23SrRNA ),蛋白合成时生成肽键的能量来自高能酯键水解转录抑制剂:利福平、利迪链霉素、放线素D、
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