2022年显微镜使用方法.docx

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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 试验一 光学显微镜的构造和使用方法 试验目的 1. 熟识光学显微镜各部分的结构和用途,把握显微镜爱护的基本学问；2. 初步把握低倍镜、高倍镜和油镜的使用方法； 试验用品 1. 材料：羊毛装片、血涂片、字母装片、兔脊神经节切片；2. 器材：显微镜、擦镜纸、载玻片、香柏油、二甲苯； 试验内容与方法 一、显微镜的构造显微镜是一种复杂的光学仪器；它是医学试验常用工具之一,其作用是将观看的标本放大,以便观看和分析；一般光学显微镜包括机械装置和光学系统两大部分,如图 1-1 所示；一机械装置1. 镜座：位于最底部的构造,为整个显微镜的基座,用以支持着整个镜

2、体,起稳固作用；2. 镜柱：为垂直于镜座上的短柱,用以支持镜臂；3. 镜臂：为支持镜筒和镜台的呈弓形结构的部分,是取用显微镜时握拿的部分；镜筒直立式光镜在镜臂与其下方的镜柱之间有一倾斜关节,可使镜筒向后倾斜肯定角度以便利观看,但使用时倾斜角度不应超过 45 ,否就显微镜由于重心偏移简单翻 ss 倒；4. 调剂器：也称调焦螺旋,为调剂焦距的装置,位于镜臂的上端镜筒直立式光镜或下端镜筒倾斜式光镜,分粗调剂器 大螺旋和细调剂器小螺旋两种；粗调剂器可使镜筒或镜台作较快或较大幅度的升降,能快速调剂好焦距 , 适于低倍镜观 察时调焦；细调剂器可使镜筒或镜台缓慢或较小幅度地升降,使用于在低倍镜下用粗调节器找

3、到物体后,在高倍镜和油镜下进行焦距的精细调剂,藉以对物体不同层次、深度的结构做细致地观看；5. 镜筒：位于镜臂的前方, 它是一个齿状脊板与调剂器相接的圆筒状结构,上端装载目镜,下端连接物镜转换器；依据镜筒的数目, 光镜可分为单筒式和双筒式；单筒光镜又分为直立式和倾斜式两种 , 镜筒直立式光镜的目镜与物镜的光轴在同始终线上 , 而镜筒倾斜式光镜的目镜与物镜的中心线互成 45 角 , 在镜筒中装有使光线转折 45 的棱镜；双筒式光镜的镜筒均为倾斜式的；名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 7 页精选学习资料 - - - - - - - - - 6. 物镜转换器：又称旋转盘,位于镜

4、筒下端的一个可旋转的凹形圆盘上,一般装有 24个放大倍数不同的接物镜；旋转它就可以转换接物镜；旋转盘边缘有肯定卡,当旋至物镜和镜筒成直线时,就发出“ 咔” 的响声,这时方可观看玻片标本；7. 镜台：也称载物台 , 是位于镜臂下面的平台,用以承放玻片标本；载物台中心有一圆形的通光孔,光线可以通过它由下向上反射；8. 标本推动器：位于镜台的后方或侧面边缘,连一可动弧形弹簧夹；其上方或下方一侧有两个旋钮,转动旋钮可调剂推动器,使玻片标本前后或左右移动；标本推动器上有纵横游标尺,用以测定标本在视野中的方位及其大小；游标尺一般由主标尺a 和副标尺 b 组成；副标尺的分度为主标尺的 9/10 ；使用时,第

5、一看副标尺的 0 点位置；然后看主、副标尺的一样点；如图 i-2 所示,副标尺的 0 点主标尺的 26 与 27 之间,副标尺的 6与主标尺的 32 一样,即 6 与主标尺上的一个分度线正对,就此标尺所表示的数值为；图 1-2 游标尺的用法 二 光学系统1. 反光镜：是装在镜台下面、镜柱前方的一面可转动的圆镜,它有平凹两面；平面镜聚光力弱,适合光线较强时使用；凹面镜聚光力强,适于光线较弱时使用；转动反光镜,可将光源反射到聚光镜上,再经镜台中心圆孔照明标本；2. 聚光镜：在镜台下方,是一组透镜,用以集合光线增强视野的亮度；镜台上方有一调剂旋钮,转动它可升降聚光镜；往上升时增强反射光,下降时减弱反

6、射光；3. 可变光栏：是在聚光镜底部的一个圆环状结构；它装有多片半月形的薄金属片,叠合在中心成圆孔形；在圆环外缘有一突起的小柄,拨动它可使金属片分开或合拢,用以掌握光线的强弱,使物像变得更清晰；4. 目镜： 装在镜筒上端, 其上一般刻有放大倍数 用以指示要观看的某一部分； 如 5 ,10 ；目镜内常装有一指示针,名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 7 页精选学习资料 - - - - - - - - - 图 1-1 显微镜的结构1. 目镜 2. 镜筒 3. 物镜转换器 4. 物镜 5. 通光孔 6. 聚光器 7. 光圈8. 反光镜 9. 粗调剂器 10. 细调剂器 11. 镜

7、臂 12. 推动器 13. 载物台14. 倾斜关节 15. 镜柱 16. 镜座 17. 照明装置 18. 粗调限位环凸柄标本推动器上有纵横游标尺,用以测定标本在视野中的方位及其大小；游标尺一般由主标尺 a 和副标尺 b 组成；副标尺的分度为主标尺的 9/10 ；使用时,第一看副标尺的 0 点位置；然后看主、副标尺的一样点；如图 i-2 所示,副标尺的 0 点主标尺的 26 与 27 之间,副标尺的 6 与主标尺的 32 一样,即 6 与主标尺上的一个分度线正对,就此标尺所表示的数值为；5. 物镜：装在物镜转换器上,一般分低倍镜、高倍镜和油镜三种；低倍镜镜体较短,放大倍数小；高倍镜镜体较长,放大

8、倍数较大；油镜镜体最长,放大倍数最大在镜体上刻有数字,低倍镜一般有4 、 10 ,高倍镜一般有40 、 45 ,油镜一般是90 、 100 , 表示放大倍数；显微镜放大倍数的运算：目镜放大倍数 物镜放大倍数二、显微镜的使用方法 一 低倍镜的使用=显微镜对实物的放大倍数；名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 7 页精选学习资料 - - - - - - - - - 1. 把显微镜放在桌面的左侧,镜臂对向胸前,坐下进行操作；用手转动粗调螺旋,使镜筒 上升,然后转动物镜转换器,使低倍镜对准镜台中心圆孔当转动到听见“ 咔” 声响,或同时亦 感到有阻力时立刻停止转动,说明物镜已与镜筒成始

9、终线；2. 对光：拨动聚光镜底部圆环的小柄,使光栏完全打开；旋转聚光镜升降螺旋,使聚光镜 上升到和镜台相平；用左眼两个眼睛都要睁开在目镜上观看,同时用手调整反光镜,对好光 源；要求视野到达完全匀称光明；3. 放置玻片标本：取蛙血玻片标本放在镜台上,有盖玻片的一面朝上；玻片两端用移动器夹住,然后转动螺旋,使玻片上要观看的标本对准镜中心圆孔；留意, 镜台上的刻度可以标示玻片的坐标位置；4. 调剂物距：转动粗调螺旋,使低倍镜距玻片标本左右；留意：必需从显微镜侧面观看物镜与玻片的距离；切勿用眼在目镜上观看的同时转动粗调螺旋,以防镜头碰撞玻片造成损坏；用左眼从目镜上观看,用手渐渐转动粗调螺旋下降镜台,当

10、视野中显现物像时,再调剂细调螺旋,直至视野中显现清晰的物像很多椭圆形的红细胞为止；假如物像不在视野中心,可略微移动玻片位置留意：移动玻片的方向与观看物像移动的方向恰好是相反的；反复练习上述各操作步骤,做到快速娴熟地找到标本,以及取光合适即较娴熟的应用反光镜、光栏和聚光镜； 二 高倍镜的使用1. 肯定要先在低倍镜下找到要观看的标本物像后,并把要放大的部分移至视野正中,同时调剂到最清晰程度,才能进行高倍镜的观看；2. 转动物镜转换器,使高倍镜转到镜台中心圆孔处；转换高倍镜时速度要慢,要细心,并从侧面进行观看 防止高倍镜碰撞玻片；假如高倍镜遇到玻片,说明低倍镜的物距没有调剂好,应重新进行操作；3.

11、调剂物距：转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观看；这时物像往往不清晰、或者要观看的部分不在视野当中,可用细调螺旋渐渐向上或向下转动切勿用粗调螺旋即能清晰看到物像；一般只需转动半圈或一圈就能到达要求；在高倍镜下,可见蛙血红细胞呈椭圆形,外被细胞膜,膜内为浅红色细胞质,中心有一圆形呈蓝紫色的细胞核； 三 油镜的使用1. 第一在高倍镜下找到所要观看的标本后,把所要观看的部分移至视野中心；2. 转动物镜转换器,移开高倍镜,在标本上所要观看的位置加一滴镜油香柏油；3. 转动物镜转换器,转换油镜,使之对准镜台中心圆孔处,浸在油滴中；4. 转换好油镜后,用左眼在目镜上观看；物像如不清晰,可用细调螺旋渐渐向上或向

12、下转动,即能清晰地看到物像；如仍看不清标本,需重新用低倍镜、高倍镜观看,然后再转换油镜；名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 7 页精选学习资料 - - - - - - - - - 5. 观看完标本后, 用滴加上二甲苯的擦镜纸擦拭洁净油镜镜头,再用另一张清洁的擦镜纸盖在玻片标本上,滴上 12 滴二甲苯,轻拉擦镜纸,将玻片上的镜油擦去；留意,勿擦坏标本；三、使用显微镜留意事项1. 持镜时要一手紧握镜臂,一手托住镜座,绝不能一把提起显微镜便走,以防目镜从镜筒滑出或反光镜脱落；2. 轻拿轻放,不要把显微镜放在试验台边缘一拳,防止碰翻落地；3. 显微镜光学系统部件要用清洁的擦镜纸轻轻

13、揩擦,切勿口吹、手抹或用粗布揩擦；4. 使用时先用 低倍镜调整光线；观看活体标本或染色较浅 的标本时,要适当关小可变光栏便视野变暗,方能看得清晰；5. 放置玻片标本时要对准镜台孔正中心,并且不能反放玻片,如标本玻片反放时高倍镜下看不到物像,并简单压坏玻片或物镜；6. 观看时要 双目睁开 ,切勿闭上一只眼睛；左眼观看视野,右眼用以绘图；低倍镜用粗调螺旋调剂物距,高倍镜要用细调螺旋,粗、细调剂螺旋都不能单方向过度地旋转；单向上升粗调螺旋会压碎镜片和损坏物镜；7. 不要任凭取出目镜,以防尘土落人物镜上；也不要任意拆卸任何零件,以防损坏；8. 使用完毕后,转动粗调螺旋使镜台下降,取下玻片,转动物镜转换

14、器,使物镜离开聚光孔；再上升镜台使物镜接近镜台不要对着镜台孔；然后以右手握镜臂,左手托镜座轻轻放人镜箱中；9. 每次使用显微镜之前,先按显微镜登记卡片逐项检查显微镜各部分有无损坏；如发觉损坏,应准时向老师报告；使用之后,认真填写显微镜使用登记卡片；四、操作练习一低倍镜、高倍镜的使用练习1. 观看文字或字母装片：取一片字母装片,用低倍镜观看,反复练习对光、调光、标本放置和调剂焦距等；如将玻片前后左右移动时,留意物像与玻片移动方向是否一样,玻片上的字母是正像仍是反像,为什么.2. 观看羊毛片或头发交叉装片：取一张毛发交叉装片,先用低倍镜观看,找到两根毛发后,再将毛发交叉点移到视野中心,然后换高倍镜

15、观看,再稍微转动细调剂器,观看不同层次,判定哪条毛发在上方,哪条位于下方；二油镜的使用练习名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 7 页精选学习资料 - - - - - - - - - 1. 取一张血涂片或取血一小滴,滴于清洁的载玻片一端,另取一张边缘平整的载玻片,按照图 1-3 所示做成血涂片；先用低倍镜再用高倍镜进行观看；图 1-4 蛙血涂片图 1-5 运动神经细胞2. 用油镜观看,并辨论红细胞、白细胞和淋巴细胞,比较三种物镜的放大倍数和辨论率；3. 观看兔脊神经节切片示固定染色的细胞取兔脊神经节切片标本先在调好光线的低倍镜下观看固定染色的标本需调较亮光线,低倍镜下找到要观

16、看的标本,为淡紫色的神经节切面,在其外围包有被膜,且向内伸入,形成神经节的结缔组织支架,节内有很多大小不等的神经细胞,呈散在分布；整而清晰的圆形图 1-6 感觉神经细胞然后转换高倍镜,挑选完神经细胞认真观看其内部结构；可见到在细胞中心有一圆形核,核内有着色为深紫红色的圆形核仁及染色质颗粒, 核与细胞膜之间是匀称浅紫色的细胞质,在细胞的外面围有假设干个被囊细胞,它起爱护神经细胞的作用；在神经细胞之间仍可看到有轴索横断面和很多神经纤维,多呈交叉排列；s 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 7 页精选学习资料 - - - - - - - - - 图 1-3 血涂片的制备方法4.

17、观看完毕,务必将油镜按正确方法擦净；五、其它几种显微镜简介目前在生物学和医学讨论中,常用的显微镜,仍有以下几种：1. 双筒解剖显微镜：解剖较小标本或观看玻片标本的全貌时,需使用解剖显微镜,以观看自然状态下较小的实体正像和较大的玻片标本,或解剖细小生物；2. 暗视野显微镜： 是一种具有暗视集中器或中心遮光板的显微镜；即在聚光镜上加一特别装置, 使光线从集光器透镜的边缘衍射或反射到标本上,经标本反射投入物镜内,使整个视野变暗,故能在视野中见到被检物体衍射之图像；这种显微镜可观看运动着的有机体；3. 荧光显微镜：其特点是以紫外光为光源,利用紫外光照耀,使标本内的荧光物质激发出不同颜色的荧光,以讨论标

18、本内某些物质的特点和位置；有些物质本身能发出荧光,有些物质需经荧光染料染色后才能发出荧光；4. 相差显微镜：活细胞在一般光镜下,一般不能辨论其微小结构；这是由于各微小结构的折光性很近似或比照不够显著的缘故；相差显微镜就是在聚光器下装一个环状光栏,其物镜是安有相板的相差物镜；环状光栏的作用是造成空心的光线锥,使直射光和衍射光别离；相板的作用是使直射光和衍射光发生干预,导致相位差变成振幅差 察活细胞中不同染色的微细结构； 即明暗差 ,使反差加强；所以,可以观5. 倒置显微镜：物镜位于标本的下方,而光源位于标本的上方；主要用于细胞培育时观看培育瓶中细胞的生长情形； 试验报告与摸索题 绘图1. 绘制兔脊神经节细胞 高倍视野 ；2. 绘制蛙血细胞 油镜视野 ；摸索题名师归纳总结 1. 怎样区分低倍镜、高倍镜和油镜,为什么用高倍镜或油镜时,必需从低倍镜开头.第 7 页,共 7 页2. 假如在高倍镜下末找到你所要看的物象,应从哪些方面找缘由.3. 经过哪些步骤才能在物镜下找到清晰的物像.- - - - - - -