2022年生物选修一知识点.docx

《2022年生物选修一知识点.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2022年生物选修一知识点.docx（13页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、精选学习资料 - - - - - - - - - 选修 1课题 1 果酒和果醋的制作一、试验原理1酵母菌的细胞呼吸酵母菌进行有氧呼吸大量繁衍,表达式为：C 6H 12O6+O2 CO 2+H 2O+能量 酶酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳,表达式为：C6H 12O 6C 2H 5OH+CO 2+能量 酶2酵母菌发酵的正确环境酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时,酵母菌大量繁衍,但是不起到发酵成效；在无氧时,繁衍速度减慢,但是此时可以进行发酵；在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁衍,再隔绝氧气进行发酵；20左右最适合酵母菌繁衍, 酒精发酵的正确温度是

2、在 18 25 ,pH 最好是弱酸性；3醋酸菌好氧性细菌,当缺少糖源时和有氧条件下,可将乙醇 （酒精） 氧化成醋酸； 表达式为： C2H5OH CH3COOH+H 2O；当氧气、糖源都充分时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的正确温度是在 30 35二、试验步骤1.对发酵瓶、 纱布、 榨汁机、 盛葡萄汁的器皿等试验用具进行清洗并消毒；先用温水反复冲洗几次 ,再用体积分数为 75%的酒精擦拭消毒,晾干待用；2. 取葡萄 500 g,去除枝梗和腐烂的子粒；3. 用清水冲洗葡萄 12 遍除去污物,留意不要反复多次冲洗；4. 用榨汁机榨取葡萄汁后,将其装入发酵瓶中或将葡萄打成浆后,用洁净的纱

3、布过滤至发酵瓶中,盖好瓶盖；假如没有合适的发酵装置,可以用 500 mL 的塑料瓶替代,但 注入的果汁量不要超过塑料瓶总体积的 2/3；5. 将发酵瓶置于相宜的温度下发酵；6. 由于发酵旺盛期 CO 2的产量特别大,因此需要准时排气,防止发酵瓶爆裂；假如使用简易的发酵装置,如瓶子（最好选用塑料瓶）,每天要拧松瓶盖 24 次,进行排气；7. 10 d 以后,可以开头进行取样检验工作；例如,可以检验酒味、酒精的含量、进行酵母菌的镜检等工作；8. 当果酒制成以后, 可以在发酵液中加入醋酸菌或醋曲,然后将装置转移至 3035 的条件下发酵,适时向发酵液中 充气 ；假如找不到醋酸菌菌种或醋曲,可尝试自然

4、接种,但成效不是很好；假如没有充气装置,可以将瓶盖打开,在瓶口盖上纱布,以削减空气中尘土等的污染；三、留意事项请分析此装置中的充气口、排气口和出料口分别有哪些作用；为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接？结合果酒、果醋的制作原理,你认为应当如何使用这个发酵装置？充气口 排气口出料口答：充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出 CO2 的；出料口是用来取样的； 排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接,其目的是 防止空气中微生物的污染；使用该装置制酒时,应当关闭充气口；制醋时,应将充气口连接气泵,输入氧气；1 名师归纳总结 - - - - - - -第 1

5、 页,共 10 页精选学习资料 - - - - - - - - - 课题 2 腐乳的制作一、试验原理青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种,其中起主要作用的是毛霉 ；1参加豆腐发酵的微生物有2毛霉是一种 丝状真菌 ,常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上,具有发达的白色菌丝；3. 毛酶等微生物产生的蛋白酶 能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶 可将脂肪分解成甘油和脂肪酸；二、试验步骤1. 将豆腐切成3cm 3cm 1cm 的如干块；所用豆腐的含水量为70 左右,水分过多就腐乳不易成形；2. 将豆腐块平放在铺有干粽叶的盘内,粽叶可以供应菌种,并能起到保温的作用；每块豆腐等距离排放,四周留有肯定的间隙

6、；豆腐上面再铺上洁净的粽叶；封严, 以免湿度太高,不利于毛霉的生长；气候干燥 时,将平盘用 保鲜膜 包裹,但不要 3.将平盘放入温度保持在15 18 的地方；毛霉逐步生长,大约5 d 后豆腐表面丛生着直立菌丝； 4. 当毛霉生长旺盛,并呈淡黄色时,去除包裹平盘的保鲜膜以及铺在上面的粽叶,使豆腐块的热量和水分能够快速散失,同时散去霉味；这一过程一般连续 36 h 以上； 5. 当豆腐凉透后,将豆腐间连接在一起的菌丝拉断,并整齐排列在容器内,预备腌制； 6. 长满毛霉的豆腐块（以下称毛坯）与盐的质量分数比为 51 ；将培育毛坯时靠近平盘没长直立菌丝的一面统一朝向玻璃瓶边,将毛坯分层盘立摆放在容器中

7、；分层加盐,并随层加高而增加盐量,在瓶口表面铺盐厚些,以 防止杂菌从瓶口进入；约腌制 8 d；注用盐腌制时, 留意盐都用量； 盐的浓度过低, 不足以抑制微生物生长,可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高,会影响腐乳的口味； 7. 将黄酒、米酒和糖,按口味不同而配以各种香辛料（如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒等）混合制成卤汤；卤汤酒精含量掌握在 12左右为宜；注酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系；酒精含量越高,对蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长；酒精含量过低,蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁衍快,豆腐易腐败,难以成块； 8.将广口玻璃瓶刷洁净后,用高压锅在100

8、蒸汽灭菌30 min ；将腐乳咸坯摆入瓶中,加入卤汤和辅料后,将瓶口用酒精灯加热灭菌,用胶条密封；在常温情形下,一般六个月可以成熟；三、留意事项1. 酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行 前期发酵和后期发酵；前期发酵所发生的主要变化是 毛霉在豆腐（白坯）上的生长；发酵的温度为 15 18 ,此温度不适于细菌、酵母菌和曲霉的生长,而适于毛霉渐渐生长；毛霉生长大约 5 d 后使白坯变成毛坯；前期发酵的作用,一是使豆腐表面有一层菌膜包住, 形成腐乳的“ 体”；二是毛霉分泌以蛋白酶为主的各种酶,有利于豆腐所含有的蛋白质水解为各种氨基酸； 后期发酵主要是 酶与微生物协同参加生化反应的过程；通过腌制并配入各

9、种辅料（红曲、面曲、酒酿） ,使蛋白酶作用缓慢,促进其他生化反应,生成腐乳的香气；2. 毛霉是一种 低等丝状真菌 ,有多个细胞核,进行无性繁衍；毛霉是食品加工业中的重要微生物,它可以产生能够分解大豆蛋白的蛋白酶,常用于制作腐乳和豆豉；2 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 10 页精选学习资料 - - - - - - - - - 课题 3 探讨加酶洗衣粉的洗剂成效一、试验原理1加酶洗衣粉是指含有酶制剂 的洗衣粉,目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶 ,其中,应用最广泛、成效最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶；2碱性蛋白酶能将血渍、奶渍 等含有的大分子蛋白质

10、水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹从衣物上脱落；脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更好的去污才能；3在本课题中,我们主要探究有关加酶洗衣粉的三个问题：一是一般洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤成效有什么不同；二是在什么温度下使用加酶洗衣粉成效最好,三是添加不同种类的酶的的洗衣粉,其洗剂成效有哪些区分；二、试验步骤1 探究用加酶洗衣粉与一般洗衣粉洗涤的成效的不同在 2 个编号的烧杯里,分别注入 500mL 清水；取 2 块大小相等的白棉布,用滴管在每块白布上分别滴上等量的墨水,分别放入烧杯里,用玻璃棒搅拌；将 2 个烧杯分别放入同等温

11、度的温水中,保温5 分钟；2 个烧杯中,用玻璃棒匀称搅拌；保温10 分称取 5 克加酶洗衣粉和5 克一般洗衣粉2 份,分别放入钟；观看并记录 2 个烧杯中的洗涤成效2 探究用加酶洗衣粉洗涤的正确温度条件在 3 个编号的烧杯里,分别注入 500mL 清水；取 3 块大小相等的白棉布,用滴管在每块白布上分别滴上一滴食用油、鸡血、牛奶, 分别放入烧杯里,用玻璃棒搅拌；将 3 个烧杯分别放入 50 摄氏度的热水、沸水和冰块中,保温 5 分钟；称取 5 克加酶洗衣粉 3 份,分别放入 3 个烧杯中,用玻璃棒匀称搅拌；保温 10 分钟；观看并记录 3 个烧杯中的洗涤成效；3 探究不同种类的加酶洗衣粉洗涤的

12、成效污染物蛋白酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉复合酶洗衣粉一般洗衣粉油渍汗渍血渍观看并记录四种洗衣粉分别洗涤三种污染的洗涤成效；三、留意事项1变量的分析和掌握影响加酶洗衣粉洗涤成效的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量,衣物的质料、大小及浸泡时间和洗涤的时间等；在这些因素中,水温是我们要争论的对象,而其他因素应在试验中保持不变；挑选什么样的水温进行试验需要试验者依据当地一年中的实际气温变化来确定水温,通常情形下,冬季、春季、秋季和夏季可分别选取5 、 15 、 25 和 35 的水温,由于这4 个水温是比较符合实际情形的,对现实也有指导意义；3 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 10

13、 页精选学习资料 - - - - - - - - - 2洗涤方式和材料的挑选；在洗涤方式中有机洗和手洗两种方式,应考虑其中哪一种比较科学？哪一种更有利于掌握变量？再 有,洗衣机又可以分为半自动和全自动两种,相比之下,采纳全自动洗衣机比较好,并且应当尽量使用 同一型号小容量的洗衣机,其机械搅拌作用相同；关于洗涤材料的挑选也有一些讲究；用衣物作试验材 料并不抱负,这是由于作为试验材料的衣物,其大小、颜色、洁净程度等应当完全一样,而这并不简单 做到；此外,人为地在衣物上增加污物,如血渍、油渍等,也令人难以接受；因此,选用布料作为试验 材料比较可行；在作对比试验时,可以掌握布料的大小、颜色以及污物的量

14、,使其相同；同时,也便于 洗涤成效的比较；3水量、水质和洗衣粉用量的问题；水的用量和布料的大小是成正比的；做试验用的布料不易过大,水量不易过多,但应当让布料充分 浸泡在水中；水量和洗衣粉的用量可以参考下表；试验时可依据表中的数据换算出实际用量；假如在实 验中使用手洗的方法,如课本中图 4-4 所示,使用 1 000 mL 的烧杯作为容器,可以用 500 mL 的水,洗 衣粉的用量可以用 1 g 或 1.5 g；洗涤方式 机洗 手洗水量 0.5 L 0.5 L 洗衣粉量 0.5 g 1 g 或 1.5 g 其他相关问题简述如下；试验中可以用滴管掌握污物的量,待污物干燥后再进行试验；布料应放在 洗

15、衣粉溶液中浸泡相同的时间；采纳玻璃棒或筷子搅拌的方式模拟洗衣过程；模拟搅拌的时间、次数和 力气应基本相同；课题 4 酵母细胞的固定化一、试验原理1使用固定化酶技术,将这种酶固定在一种颗粒状的载体上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着很多小孔的筛板；酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反应溶液却可以自由出入；生产过程中, 将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转 化成果糖,从反应柱的下端流出；反应柱能连续使用半年,大大降低了生产 成本,提高了果糖的产量和质量；2固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在肯定空间 内的技术,包括 包

16、埋法、化学结合法和物理吸附法；一般来说, 酶 更适合采 用 化学结合法和物理吸附法固定,而 细胞 多采纳 包埋法 固定化；这是由于细 胞个大,而酶分子很小；个大的难以被吸附或结合,而 个小的酶简单从包埋 材料中漏出 ；固定化酶优点：使酶既能与反应物接触,又能与产物分别,仍可以被反复利 用；固定化细胞优点：成本更低,操作更简单,可以催化一系列的化学反应；二、试验步骤1；细胞的活化 称取 lg 干酵母,放入 50 mL 的小烧杯中,加人蒸馏水 10 mL,用玻璃棒搅拌,使酵母细胞混合均 匀,成糊状,放置 1h 左右,使其活化；【注】活化：让处于休眠状态的微生物重新复原正常的生活状态 0.05mo1

17、/L 的 CaCl2 溶液 2；配制物质的量浓度为称取无水 CaCl2 0.83g ；放人 200mL的烧杯中,加入 4 150mL的蒸馏水,使其充分溶解,待用；名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 10 页精选学习资料 - - - - - - - - - 3；配制海藻酸钠溶液称取 0.7g 海藻酸钠,放入50mL小烧杯中；加人10mL水,用酒精灯加热,边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至 次,直到海藻酸钠溶化为止；4；海藻酸钠溶液与酵母细胞混合10 mL；留意,加热时要用小火,或者间断加热,反复几将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温,加人已活化的醉母细

18、胞,进行充分搅拌,使其混合匀称,再转移至注射器中；【注】冷却至室温的目的：防止杀死酵母菌5；固定化酵母细胞以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 CaCl2 溶液中,观看液滴在 CaCl2 溶液中形成凝胶珠的情形；将这些凝胶珠在 CaCl2溶液中浸泡 30 min 左右；【注】 CaCl2溶液的作用：使胶体聚沉6 使用固定化酵母细胞发酵a 将固定好的酵母细胞 凝胶珠 用蒸馏水冲洗 2-3 次；b 将 150mL质量分数为 10%的葡萄糖溶液转移到 200mL的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于 25下发酵 24h；三、留意事项1. 配制海藻酸钠溶液：小火、间断加热、定容,假如加热

19、太快,海藻酸钠会发生焦糊；2. 海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合,留意混合匀称,不要进入气泡3. 制备固定化酵母细胞：高度相宜,并匀速滴入4刚形成的凝胶珠应在 CaCL2 溶液中浸泡一段时间,以便 Ca2+与 Na+充分交换,形成的凝胶珠稳固；检验凝胶珠是否形成,可用以下方法： 用镊子夹起一个凝胶珠放在试验桌上用手挤压,假如不简单破裂,没有液体流出就说明胜利地制成了凝胶珠,仍可以用手将凝胶珠在试验桌上用力摔打,假如凝胶珠很容易弹起,也说明制备的凝胶珠是胜利的；5凝胶珠的颜色和外形假如制作的 凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明 海藻酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少；假如形成的 凝胶珠不是

20、圆形或椭圆形,就说明 海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试；课题 5 DNA 的粗提取与鉴定一、试验原理提取生物大分子的基本思路是选用肯定的物理或化学方法分别具有不同物理或化学性质的生物大分子 ；对于 DNA 的粗提取而言,就是要利用 DNA 与 RNA 、蛋白质和脂质 等在物理和化学性质方面的差异,提取 DNA ,去除其他成分；1 DNA 的溶解性DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl 溶液中溶解度不同,利用这一特点, 挑选适当的盐浓度就能使 DNA 充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分别目的；此外, DNA 不溶于 酒精 溶液,但是细胞中的某些蛋白质就溶于酒精；利用这一

21、原理,可以将 DNA与蛋白质进一步的分别；2 DNA 对酶、高温顺洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解 蛋白质 ,但是对DNA 没有影响；大多数蛋白质不能忍耐6080oC 的高温,而DNA在 80oC 以上 才会变性；洗涤剂能够瓦解细胞膜 ,但对 DNA 没有影响；5 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 10 页精选学习资料 - - - - - - - - - 3 DNA 的鉴定在 沸水浴 条件下, DNA 遇 二苯胺 会被染成 蓝色,因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂；二、试验设计1 试验材料的选取凡是含有DNA 的生物材料都可以考虑,但是使用DNA 含量相对较高 的生物组织,

22、胜利的可能性更大；2 破裂细胞,猎取含 DNA 的滤液动物细胞的破裂比较简单,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入肯定量的 蒸馏水 ,同时用 玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可；假如试验材料是植物细胞,需要先用洗涤剂 溶解细胞膜；例如,提取洋葱的 DNA 时,在切碎的洋葱中加入肯定的 洗涤剂 和食盐 ,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液；留意：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂 细胞膜和核膜的破裂 ,从而释放出DNA；加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？洗涤剂是一些离子去污剂,

23、能溶解细胞膜,有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解；假如研磨不充分,会对试验结果产生怎样的影响 . 研磨不充分会使细胞核内的 DNA释放不完全,提取的 DNA量变少,影响试验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等；此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？可能含有核蛋白、多糖和 RNA等杂质；3 去除滤液中的杂质方案一的原理是 DNA 在不同浓度 NaCl 溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质,不分解 DNA ；方案三的原理是蛋白质和 DNA 的变性温度不同；留意：为什么反复地溶解与析出 DNA ,能够去除杂质？用高盐浓度的溶液溶解 DNA,

24、能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使 DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质；因此, 通过反复溶解与析出 DNA,就能够除去与 DNA溶解度不同的多种杂质；方案二与方案三的原理有什么不同？方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分别；4 DNA 的析出与鉴定将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积 相等 、冷却的 酒精溶液 ,静置 23min,溶液中会显现 白色丝状物 ,这就是粗提取的 DNA ；用玻璃棒 沿一个方向 搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取上面的水分；取两支 20ml 的试管,各加入物质

25、的量浓度为2mol/L 的 NaCl 溶液 5ml ,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解；然后,向两支试管中各加入 4ml 的二苯胺试剂 ；混合匀称后,将试管置于 沸水 中加热 5min,待试管冷却后,比较两支试管 溶液颜色的变化,看看溶解有 DNA 的溶液是否变 蓝 ；三、试验步骤以洋葱为试验材料1称取 30 克已切碎的洋葱,放入研钵中,加入少量石英砂助研,倒入 分研磨；6 10mL 2mol/L 的氯化钠溶液,充名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 10 页精选学习资料 - - - - - - - - - 洋葱含有挥发性刺激物,有效削减刺激,才能使试验

26、顺当进行；上课前,老师可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿,使其凉透但又不能结冰；或将洋葱切成几大块,放入清水泡一会儿,让其挥发性刺激物溶于水, 可以减轻刺激； 然后将洋葱切碎备用；研磨的目的主要是使洋葱细胞破裂,使 DNA 溶于 2mol/L的氯化钠溶液,没必要将洋葱研成粥糊状,后者既铺张时间又影响试验成效；研磨时,切忌使用搅拌器（榨汁机）；使用搅拌器虽可以提高研磨效率,但搅拌器将洋葱切成极细小的颗粒,无法通过过滤将洋葱颗粒剔除；只能将酒精直接倒入滤液中,很多洋葱小颗粒由于轻会漂浮起来,DNA藏在其中,无法辨论；同学看不到白色纤维状粘稠物的DNA ；2研磨后,用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中,得到滤

27、液；3向滤液中加入 95%的酒精溶液 20mL,沿烧杯壁渐渐倒入,不要震惊或搅拌；此时,烧杯中的液体分为上、下两层,下层较浑浊,上层澄清,很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出,用玻璃棒可将其轻轻卷起；这就是记录生命遗传信息的重要物质DNA； DNA析出的过程中,切忌震惊和搅拌（不震惊易于分层,我们就能很简单观看到上清液中的丝状物；搅拌会使特别松软的 DNA断裂成小段,不易取出） ；假如用玻璃棒DNA不易卷起,可改用表面打毛的牙签,DNA提取物就缠绕在牙签上了；4鉴定：取两支试管,编为 1、 2 号,各加入 2mol/L 的氯化钠溶液 2mL,向 1 号试管中加入一些白色纤维状物,振荡使其溶

28、解,然后向两支试管中各加入 2mL二苯胺试剂,沸水浴加热 5 分钟；四、留意事项1以血液为试验材料时,每 100ml 血液中需要加入 3g 柠檬酸钠防止血液凝固；2加入洗涤剂后,动作要 轻缓、柔和 ,否就简单产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作；加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要 轻缓 ,以免 DNA 分子的断裂 ,导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀；3二苯胺试剂要 现配现用 ,否就会影响鉴定的成效；4 DNA 的溶解度与 NaCl 溶液浓度的关系：当 NaCl 溶液浓度低于 0.14mol/L 时,随浓度的上升,DNA 的溶解度降低；当 NaCl 溶液浓度高于0.14mol/L 时,随浓度上升

29、,DNA 的溶解度上升；5盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器；鸡血细胞破裂以后释放出的 DNA,简单被玻璃容器吸附,由于细胞内 DNA的含量原来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的 DNA就会更少；因此,试验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以削减提取过程的 DNA的缺失；微生物的试验室培育一、基础学问1. 培育基：人们依据微生物对养分物质的不同需求,配制出供其生长繁衍的养分基质,是进行微生物培育的物质基础；（ 1）培育基的分类： 培育基依据物理性质可分为液体培育基、半固体培育基和固体培育基；在液体培育基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖,在配制培育基中用作凝固剂）后,制

30、成琼脂固体培育基；微生物在固体培育基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落；依据菌落的特点可以判定是哪一种菌；液体培育基应用于工业或生活生产,固体培育基应用于微生物的分别和鉴定,半固体培育基就常用于观看微生物的运动及菌种保藏等； 依据成分培育基可分为人工合成培育基和自然培育基；7 名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 10 页精选学习资料 - - - - - - - - - 合成培育基是用成分已知的化学物质配制而成,其中成分的种类比例明确,常用于微生物的分别鉴定；自然培育基是用化学成分不明的自然物质配制而成,常用于实际工业生产； 依据培育基的用途,可将培育基分为挑选培育基和鉴定培育

31、基；挑选培育基是指在培育基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长；鉴别培育基是依据微生物的特点,在培育基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的,用以鉴别不同类别的微生物；（ 2）培育基的成分：培育基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等； 碳源：能为微生物的代谢供应碳元素的物质；如 CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等 有机碳源；异养微生物只能利用有机碳源；单质碳不能作为碳源； 氮源：能为微生物的代谢供应氮元素的物质；如 N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等；只有固氮微生物才能利

32、用 N2； 培育基仍要满意微生物生长对 PH、特别养分物质以及氧气的要求；例如,培育乳酸杆菌时需要在培育基中添加维生素,培育霉菌时须将培育基的 pH 调至酸性,培育细 菌是需要将 pH 调至中性或微碱性,培育厌氧型微生物是就需要供应无氧的条件 2. 无菌技术 a. 获得纯洁培育物的关键是防止外来杂菌的入侵,要留意以下几个方面： 对试验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒； 将用于微生物培育的器皿、接种用具和培育基等器具进行灭菌； 为防止四周环境中微生物的污染,试验操作应在酒精灯火焰邻近进行； 试验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与四周的物品相接触；b. 无菌技术除了用来防止试验室的培

33、育物被其他外来微生物污染外,仍有什么目的？答：无菌技术仍能有效防止操作者自身被微生物感染；c. 消毒与灭菌的区分 消毒指使用较为温顺的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子） ；消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）仍有化学药剂（如 酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒； 灭菌就是指使用剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物,包括芽孢和孢子；灭菌方法有灼烧灭 菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌；d 常用器具的灭菌方法： 接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法； 玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱； 培育基、无菌水等使用

34、高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅； 表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯；比较项理化因素的作用强度毁灭微生物的数量芽孢和孢子能否被毁灭消毒较为温顺部分生活状态的微生物不能灭菌剧烈全部微生物能3试验操作（ 1）制作牛肉膏蛋白胨固体培育基 方法步骤：运算、称量、溶化、灭菌、倒平板； 倒平板操作：8 名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页,共 10 页精选学习资料 - - - - - - - - - a. 将灭过菌的培育皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培育基的锥形瓶,左手拔出棉塞；b. 右手拿锥形瓶,将瓶口快速通过火焰；c. 用左手的拇指和食指将培育皿打开一条稍

35、大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培育基（约 1020mL）倒入培育皿,左手立刻盖上培育皿的皿盖；d. 等待平板冷却凝固,大约需 5 10min；然后,将平板倒过来放置,使培育皿盖在下、皿底在上； 倒平板操作的争论 培育基灭菌后,需要冷却到 50左右时,才能用来倒平板；你用什么方法来估量培育基的温度？提示：可以用手触摸盛有培育基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板 了； 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培育基； 平板冷凝后,为什么要将平板倒置？答：平板冷凝后,皿盖上会凝聚水珠,凝固后的培育基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使

36、培 养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培育基,造成污染； 在倒平板的过程中,假如不当心将培育基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板仍能用来培育微生 物吗？为什么？答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培育基上滋生,因此最好不要用这个平板培育微生物；（ 2）纯化大肠杆菌 微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法； 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作；将集合的菌种逐步稀释分散到培 养基的表面；在数次划线后培育,可以分别到由一个细胞繁衍而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌 落； 稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别

37、涂布到琼脂固体培 养基的表面,进行培育；分为系列稀释操作和涂布平板操作两步； 用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使集合在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在 培育基表面形成单个的菌落,以便于纯化菌种；（ 3）平板划线法操作步骤：将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红；在火焰旁冷却接种环,并打开棉塞；将试管口通过火焰；将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液；将试管通过火焰,并塞上棉塞；左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环快速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖；留意不要划破培育皿；灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开头往其次区域内划线；重复以上操作,在三、四、五区域

38、内划线；留意不要将最终一区的划线与第一区相连；将平板倒置放入培育箱中培育； 平板划线操作的争论 1. 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作终止时,仍旧需要灼烧接种环 吗？为什么？答： 操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培育物；每次划线前灼烧接种 环是为了杀死上次划线终止后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上 次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐步削减,以便得到菌落；划线结9 名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页,共 10 页精选学习资料 - - - - - - - - - 束

39、后灼烧接种环,能准时杀死接种环上残留的菌种,防止细菌污染环境和感染操作者；2. 在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线？答：以免接种环温度太高,杀死菌种；3. 在作其次次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开头划线？答：划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开头,能使细菌的数目 随着划线次数的增加而逐步削减,最终能得到由单个细菌繁衍而来的菌落；（ 4）涂布平板操作的步骤：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中；取少量菌液,滴加到培育基表面；将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却 810s；用涂布器将菌液匀称地涂布在培育基表面； 涂布平板操

40、作的争论 1. 涂布平板的全部操作都应在火焰邻近进行；结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第 二步应如何进行无菌操作？提示：应从操作的各个细节保证“ 无菌” ；例如,酒精灯与培育皿的距离要合适、吸管头不要接触任何 其他物体、吸管要在酒精灯火焰四周；等等；（ 4）菌种的储存（ 1）对于频繁使用的菌种,可以采纳暂时保藏的方法；暂时保藏方法 将菌种接种到试管的固体斜面培育基上,在合适的温度下培育；当菌落长成后,将试管放入 4的 冰箱中保藏；以后每 3 6 个月,都要重新将菌种从旧的培育基上转移到新奇的培育基上；缺点：这种方法储存的时间不长,菌种简单被污染或产生变异；（ 2）对于需要长期储存

41、的菌种,可以采纳甘油管藏的方法；在 3mL的甘油瓶中,装入1mL甘油后灭菌；将1mL培育的菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混匀后,放在 20的冷冻箱中储存；（ 5）疑难解答 生物的养分 养分是指生物摄取、利用养分物质的过程；养分物质是指维护机体生命活动,保证发育、生殖所需 的外源物质；人及动物的养分物质：水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；植物的养分物质：矿质元素、水、二氧化碳等三类；微生物的养分物质：水、无机盐、碳源、氮源及特别养分物质五类； 确定培育基制作是否合格的方法将未接种的培育基在恒温箱中保温 制备；1 2 天,无菌落生长,说明培育基的制备是胜利的,否就需要重新10 名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页,共 10 页