生理学ABO血型鉴定实验报告.pdf

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1、实验名称： ABO血型鉴定实验人员：实验日期：年月日室温：27大气压： 1 个标准大气压（一）实验目的学习 ABO型血的鉴定原理和方法。观察红细胞凝集现象，了解抗原抗体反应。（二）实验原理血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和 B两种抗原， 而血清抗体分抗A和抗 B 两种抗体。 A抗原加抗 A抗体或 B抗原加抗 B抗体，则产生凝集现象。 血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清（含有抗 B 抗体）与标准B型血清（含有抗A 抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和 B抗原。在 ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含 A、B抗原而分为A、

2、B、AB 、O四型。（三）实验材料消毒采血针；载玻片；消毒棉签；抗A、抗 B血型定型试剂； 75% 乙醇；受检者血液（四）实验步骤（1）取双凹玻片一块， 用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及 B，并分别各滴入A及 B标准血清一滴。（2）细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml 生理盐水的小试管内，混匀，即得约 5红细胞悬液。采血时应注意先用75酒精消毒指尖或耳垂。（3）用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。（4）竹签两头分别混合，搅匀。（5）1030min 后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集

3、现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。（6）判断血型根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。（五）实验结果：表 1 实验情况标准 A血清标准 B血清人血凝集情况不凝集凝集从上表可知：人血与标准A血清（含抗 B 抗体）混合后不发生凝集；人血与标准B血清（含抗 A抗体）混合后发生凝集。（六）讨论：血型通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型。若将血型不相容的两个人的血液滴加在玻片上并使之混合，则红细胞可凝集成簇，这一现象称为红细胞凝集。在补体的作用下，可引起凝集的红细胞破裂，发生溶血。当给人体输入血型不相容的血液时，在血管内可发生红细胞凝集和溶血

4、反应，甚至危及生命。红细胞凝集的本质是抗原 - 抗体反应。红细胞膜上抗原的特异性取决于抗原决定簇，这些抗原在凝集反应中被称为凝集原。能与红细胞膜上的凝集原起反应的特异抗体则称为凝集素。凝集素为- 球蛋白，存在于血浆中。发生抗原- 抗体反应时，由于每个抗体上具有210 个抗原结合位点，因此抗体可在若干个带有相应抗原的红细胞之间形成桥梁，使它们聚集成簇，从而发生凝血。根据红细胞膜上是否存在A 抗原和 B抗原可将血液分为四种ABO血型：红细胞膜上只含有A 抗原者为 A 型；只含 B抗原者为 B型；含有 A 与 B两种抗原者为AB型； A和 B两种抗原均无者为O型。不同血型的人的血清中含有不同的抗体，

5、但不会含有与自身红细胞抗原相对应的抗体。 在 A型血的血清中， 只含有抗 B抗体；B型血的血清中只含有抗A抗体；AB型血的血清中没有抗A和抗 B 抗体；而 O型血的血清中则含有抗A和抗 B 两种抗体。表 2 ABO血型中的抗原和抗体血型红细胞膜上所含的抗原血清中所含的抗体O 无 A也无 B 抗 A和抗 BA A 抗BB B 抗AAB A和 B 无抗 A也无抗 B正确鉴定血型是保证输血安全的基础。常规 ABO血型的定型包括正向定型和反向定型。正向定型是用抗A 与抗 B 抗体检测来检查红细胞上有无A 或 B抗体；反向抗体是用已知血型的红细胞检测血清中有无抗A 或抗 B 抗体，结果见表10-3.同时进行正向定型和反向定型是为了相互印证。表 3 红细胞常规ABO 定型（为发生凝集；为不凝集）正 向 定 型反 向 定 型血型B型血清 A 型血清 O 型血清 A型 B型 O型（抗 A） （抗 B） ( 抗 A，抗 B) 红细胞红细胞红细胞OABAB（七）结论：待检血液的血型为A型