细胞培养污染问题及解决方案.docx
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1、细胞培养污染问题及解决方案 一、细菌污染 状态:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。 预防和补救: 1.仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间和压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要检查培养液是否存在浑浊现象! 2.可在培养液或血清中加支原体预防剂。 3.若细胞一旦污染,建议加支原体清除剂,能清楚常见的革兰氏阴性和阳性菌。 二、霉菌及真菌污染 状态:肉眼观察培养基发现培养基颜色基本无变化,不浑浊,但是培养基中由絮状漂浮物,显微镜下观察,若感染真菌可看
2、到分叉细丝状的结构(不同种类结构不同),若感染霉菌显微镜下可看到片状的结构,不透明,真菌及霉菌对影响细胞的生长影响不大。 预防和补救: 1.保证细胞房的干净整洁,干燥的环境(潮湿的环境利于霉菌及真菌的生长)。 2.控制外来人员进出实验室。 3.对实验室及培养箱进行彻底消毒。 4.若细胞非常珍贵,且不易获得,可以对污染的细胞采取如下操作。 悬浮细胞:收集细胞并离心,用PBS漂洗,重复此操作数次。贴壁细胞:用PBS轻轻冲洗细胞,丢弃,重复此操作数次。 三、支原体感染 状态:镜下黑色,多为多形,培养液一般会浑浊,国内血清很多没做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的
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- 细胞培养 污染 问题 解决方案
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