高中生物实验知识点总结 2.docx
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1、精品名师归纳总结高中生物试验学问点总结一、光学显微镜的结构、呈像原理、放大倍数运算方法结构:光学部分:目镜、镜筒、物镜、遮光器(有大小光圈)和反光镜(有平面镜和凹面镜)机械部分:镜座、倾斜关节、镜臂、载物台(上有通光孔、压片夹)、镜头转换器、粗、细准焦螺旋。注:目镜无旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越小。物镜有旋转螺丝,镜头越长,放大倍数越大。呈像原理:映入眼球内的是倒立放大的虚像。(物镜质量的优劣直接影响成像的清晰程度) 放大倍数:目镜和物镜二者放大倍数的乘积)注:显微镜放大倍数是指直径倍数,即长度和宽度,而不是面积。二、显微镜的使用:置镜(装镜头)对光置片调焦观看1. 安放。显微镜放置在桌前略
2、偏左,距桌缘810cm 处,装好物镜和目镜(目镜5 物镜10)2. 对光。转动转换器,使低倍镜对准通光孔,选取较大光圈对准通光孔。左眼凝视目镜,同时把反光镜转向光源,直至视野光亮匀称适度。 调剂视野亮度只可用遮光器和反光镜,光线过强,改用较小光圈或用平面反光镜。光线过弱,改用较大光圈或用凹面反光镜。选低倍镜选较大的光圈选反光镜(左眼观看)3. 观看。将切片或装片放在载物台上,标本正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋(顺时针), 俯首侧视镜筒渐渐下降,直到物镜接近切片(约0.5cm),左眼观看目镜, (反时针)旋转粗 准焦螺旋,使镜筒渐渐上升,看到物像时稍微来回旋转细准焦,直到物像清晰。(找不到物 像
3、时, 可重复一次或移动装片使标本移至通光孔中心)。观看时两眼都要睁开, 便于左眼观看,右眼看着画图。侧面观看降镜筒左眼观看找物像细准焦螺旋调清晰4. 高倍镜的转换。找到物像后,把要观看的物像移到视野中心,把低倍镜移走,换上高倍镜,只准用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰,直到物像清晰为止。次序:移装片转动镜头转换器调反光镜或光圈调细准焦螺旋注:换高倍物镜时只能移动转换器,换镜后,只准调剂细准焦和反光镜(或光圈)。问 1:低倍镜换为高倍镜后,如看不到或看不清原先的像,可能缘由?(ABC)A、物像不在视野中B、焦距不在同一平面C、载玻片放反,盖玻片在下面D、未换目镜可编辑资料 - - - 欢迎下载精
4、品名师归纳总结问 2:放大倍数与视野的关系:放大倍数越小,视野范畴越大,看到的细胞数目越多,视野越亮,工作距离越长。 放大倍数越大,视野范畴越小,看到的细胞数目越少,视野越暗,工作距离越短。故装片不能反放。5. 装片的制作和移动:制作:滴清水放材料盖片移动:物像在何方,就将载玻片向何处移。(缘由:物像移动的方向和实际移动玻片的方向相反)6. 污点判定: 1)污点随载玻片的移动而移动,就位于载玻片上。2) 污点不随载玻片移动,换目镜后消逝,就位于目镜。换物镜后消逝,就位于物镜。3) 污点不随载玻片移动,换镜后也不消逝,就位于反光镜上。7. 完毕工作。使用完毕后,取下装片,转动镜头转换器,逆时针旋
5、出物镜,旋进镜头盒。 取出目镜,插进镜头盒,盖上。把显微镜放正。试验一:观看 DNA、RNA 在细胞中的分布(必修一P26) 一试验目的:初步把握观看DNA 和 RNA 在细胞中分布的方法二试验原理:1. 甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA 和 RNA 的亲和力不同,甲基绿使DNA 出现绿色,吡罗红使 RNA 出现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA 和 RNA 在细胞中的分布。2. 盐酸能够转变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的DNA 和蛋白质分别,有利于DNA 与染色剂结合。三方法步骤:操作步骤留意问题说明取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净,滴一滴质量分
6、数为0.9%的 NaCl 溶液用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片在酒精灯下烘干 防止污迹干扰观看成效保持细胞原有形状可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结消毒为防止感染,漱口防止取材失败固定装片水解将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中,用300C 水浴保温 5min转变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,促进染色体的DNA 与蛋白质分别而被染色冲冼涂片用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S洗去残留在外的盐酸染色滴 2 滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min观看先低倍镜观看, 挑选染色匀称、 色泽浅的区域,移至视野中心,调剂清晰后才换用高倍物镜观看使观看成效正
7、确试验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18) 一试验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质二试验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。1. 可溶性仍原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用, 可生成砖红色的 Cu 2O沉淀。如:葡萄糖 + Cu OH 2葡萄糖酸 + Cu 2O(砖红色) + H 2O,即 Cu OH 2被仍原成Cu 2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2. 脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色(或被苏丹染液染成红色)。淀粉遇碘变蓝色。3. 蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有许多肽键,在碱性NaOH
8、 溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。 ) 三试验材料1. 做可溶性仍原性糖鉴定试验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨。(由于组织的颜色较浅,易于观看。 )2. 做脂肪的鉴定试验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,试验前一般要浸泡34小时(也可用蓖麻种子) 。3. 做蛋白质的鉴定试验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。四、试验试剂斐林试剂 (包括甲液: 质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和乙液: 质量浓度为 0.05g/ mL CuSO4 溶液)、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂(包括A 液:质量浓度为 0.1g/ mL NaOH 溶液和B 液:质量浓度为 0.
9、01g/ mL CuSO4 溶液)、体积分数为 50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结五、方法步骤:(一)可溶性糖的鉴定操 作 方 法 注 意 问 题 解 释1. 制备组织样液。(去皮、切块、研磨、过滤)苹果或梨组织液必需暂时制备。因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。2. 取 1 支试管,向试管内注入2mL 组织样液。3. 向试管内注入 1mL 新制的斐林试剂,振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、 乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂。切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试剂很不稳固, 甲、
10、乙液混合储存时,生成的Cu OH 2在 70900C 下分解成黑色CuO 和水。甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cu OH 2生成。4. 试管放在盛有 50-650C 温水的大烧杯中, 加热约 2 分钟, 观看到溶液颜色: 浅蓝色 棕色 砖红色(沉淀) 最好用试管夹夹住试管上部, 使试管底部不触及烧杯底部, 试管口不朝向试验者。也可用酒精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试管,造成烫伤。缩短试验时间。(二)脂肪的鉴定操 作 方 法 注 意 问 题 解 释花生种子浸泡、 去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡 34 小时,新花生的
11、浸泡时间可缩短。由于浸泡时间短, 不易切片,浸泡时间过长,组织较软,切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观看。在子叶薄片上滴 23 滴苏丹或苏丹染液,染色1 分钟。染色时间不宜过长。用吸水纸吸去薄片四周染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。酒精用于洗去浮色, 不洗去浮色, 会影响对橘黄色脂肪滴的观看。同时,酒精是脂溶性溶剂,可将花生细胞中的脂 肪颗粒溶解成油滴。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结用吸水纸吸去薄片四周酒精,滴上12 滴蒸馏水,盖上盖玻片。滴上清水可防止盖盖玻片时产愤怒泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处,可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。装片不宜久放。
12、时间一长,油滴会溶解在乙醇中。试验一观看 DNA 和 RNA 在细胞中的分布试验原理: DNA 绿色, RNA 红色分布:真核生物 DNA 主要分布在细胞核中,线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA。 RNA 主要分布在细胞质中。试验结果 : 细胞核呈绿色 ,细胞质呈红色 .试验二 物质鉴定仍原糖 + 斐林试剂砖红色沉淀脂 肪 + 苏丹 III 橘黄色脂 肪 + 苏丹 IV 红色蛋白质 + 双缩脲试剂紫色反应1、仍原糖的检测(1) 材料的选取:仍原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜。(2) 试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL 的 NaOH 溶液,乙液: 0.05g/mL 的 CuSO4
13、 溶液),现配现用。(3) 步骤:取样液 2mL 于试管中加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合匀称后再加入)水浴加热2min 左右观看颜色变化(白色浅蓝色砖红色)模拟尿糖的检测1、取样:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液2、检测方法:斐林试剂(水浴加热)或班氏试剂或尿糖试纸3、结果:(用斐林试剂检测)试管内发生显现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未显现砖红色沉淀的是正常人的尿液。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结4、分析:由于糖尿病患者的尿液中含有仍原糖,与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无仍原糖,所以没有发生反应。2、脂肪的检测(1) 材料的选取:含脂
14、肪量越高的组织越好,如花生的子叶。(2) 步骤: 制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中心染色(滴苏丹染液 23 滴切片上 2 3min 后吸去染液滴体积分数50%的酒精洗去浮色吸去余外的酒精)制作装片(滴 12 滴清水于材料切片上盖上盖玻片)镜检鉴定(显微镜对光低倍镜观看高倍镜观看染成橘黄色的脂肪颗粒)3、蛋白质的检测(1) 试剂:双缩脲试剂(A 液: 0.1g/mL 的 NaOH 溶液, B 液: 0.01g/mL 的 CuSO4 溶液)(2) 步骤:试管中加样液2mL加双缩脲试剂 A 液 1mL,摇匀加双缩尿试剂B 液 4 滴, 摇匀观看颜色变化 紫色 考点提示:(1)常见
15、仍原性糖与非仍原性糖有哪些?葡萄糖、果糖、麦芽糖都是仍原性糖。淀粉、蔗糖、纤维素都是非仍原性糖。(2 仍原性糖植物组织取材条件?含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。(3研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对试验有何影响?加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中仍原性糖削减,使鉴定时溶液颜色变化不明显。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结(4)斐林试剂甲、乙两液的使用方法?混合的目的?为何要现混现用? 混合后使用。产生氢氧化铜。氢氧化铜不稳固。(5仍原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化的次序为:浅蓝色 棕色 砖红色(6) 花生种子切片为何要薄
16、?只有很薄的切片,才能透光,而用于显微镜的观看。(7) 转动细准焦螺旋时,如花生切片的细胞总有一部分清晰,另一部分模糊,其缘由一般是什么?切片的厚薄不匀称。(8) 脂肪鉴定中乙醇作用?洗去浮色。(9) 双缩脲试剂 A、B 两液是否混合后用?先加A 液的目的。怎样通过对比看颜色变化? 不能混合。先加 A 液的目的是使溶液呈碱性。先留出一些大豆组织样液做对比。试验三 观看叶绿体和细胞质流淌1、材料:新奇藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞暂时装片2、原理:叶绿体在显微镜下观看,绿色,球形或椭球形。用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。学问概要:取材 制片 低倍观看 高倍
17、观看考点提示:(1为什么可直接取用藓类的小叶,而不能直接取用菠菜叶?由于藓类的小叶很薄,只有一层细胞组成,而菠菜叶由许多层细胞构成。(2)取用菠菜叶的下表皮时,为何要稍带些叶肉?表皮细胞除保卫细胞外,一般不含叶绿体,而叶肉细胞含较多的叶绿体。(3怎样加快黑藻细胞质的流淌速度?最适温度是多少?进行光照、提高水温、切伤部分叶片。25左右。(4) 对黑藻什么部位的细胞观看,所观看到的细胞质流淌的现象最明显?可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结叶脉邻近的细胞。(5) 如视野中某细胞中细胞质的流淌方向为顺时针,就在装片中该细胞的细胞质的实际流淌方向是怎样的?仍为顺时针。(6) 是否一般细胞的
18、细胞质不流淌,只有黑藻等少数植物的细胞质才流淌? 否,活细胞的细胞质都是流淌的。(7) 如观看植物根毛细胞细胞质的流淌,就对显微镜的视野亮度应如何调剂?视野应适当调暗一些,可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。(8) 在强光照耀下,叶绿体的向光面有何变化?叶绿体的受光面积较小有一面面对光源。试验四 观看有丝分裂1、材料:洋葱根尖(葱,蒜)2、步骤:(一)洋葱根尖的培育(二)装片的制作制作流程:解离漂洗染色制片1. 解离: 药液 : 质量分数为 15%的盐酸 ,体积分数为 95%的酒精 1 : 1 混合液 .时间 : 35min . 目的 : 使组织中的细胞相互分别开来.2. 漂洗:用清水漂洗约1
19、0min.目的: 洗去药液 ,防止解离过度 ,并有利于染色 .3. 染色:用质量浓度为0.01g / mL 或 0.02g / mL 的龙胆紫溶液 或醋酸洋红液 染色 3 5min目的 : 使染色体着色 ,利于观看 .4. 制片 : 将根尖放在载玻片上 , 加一滴清水 ,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片 ,在盖玻片上再加一片载玻片 . 然后用拇指轻轻的按压载玻片. 目的: 使细胞分散开来 ,有利于观看 .(三)观看1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂。2、换高倍镜下观看:分裂中期分裂前、后、末期分裂间期。(留意各时期细胞内染色体形状和分布的特点) 。其中,
20、处于分裂间期的细胞数目最多。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结考点提示:(1培育根尖时,为何要常常换水?增加水中的氧气,防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。(2) 培育根尖时,应选用老洋葱仍是新洋葱?为什么? 应选用旧洋葱,由于新洋葱尚在休眠,不易生根。(3) 为何每条根只能用根尖?取根尖的正确时间是何时?为何?由于根尖分生区的细胞能进行有丝分裂。上午10 时到下午 2 时。由于此时细胞分裂活跃。(4) 解离和压片的目的分别是什么?压片时为何要再加一块载玻片?解离是为了使细胞相互分别开来,压片是为了使细胞相互分散开来。再加一块载玻片是为了受力匀称,防止盖玻片被压破。(5) 如所观看的
21、组织细胞大多是破裂而不完整的,其缘由是什么? 压片时用力过大。(6解离过程中盐酸的作用是什么?丙酮可代替吗?分解和溶解细胞间质。不能,而硝酸可代替。(7为何要漂洗?洗去盐酸便于染色。(8细胞中染色最深的结构是什么?染色最深的结构是染色质或染色体。(9) 如所观看的细胞各部分全是紫色,其缘由是什么? 染液浓度过大或染色时间过长。(10) 为何要找分生区?分生区的特点是什么?能用高倍物镜找分生区吗?为什么?由于在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂。分生区的特点是: 细胞呈正方形, 排列紧密,有的细胞处于分裂状态。不能用高倍镜找分生区,由于高倍镜所观看的实际范畴很小,难以发觉分生区。(11) 分生
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