超声强化碱法从槐米中提取芦丁的工艺分析研究 .docx

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1、精品名师归纳总结毕业设计 论文课 题 名 称超声强化碱法从槐 M 中提取芦丁的工艺争论学 生 姓 名欧阳遵亚学号 0840921152系、年级专业生物与化学工程系08 级食品质量与安全 Time power,the best combinationpH =12,t=5min, P =500W, thePH value ofrutinextractionrate, theprocessing time ofimpact, followed by ultrasonicextraction powerwith minimal impact, whenthePH value of12, theultr

2、asonicprocessing time isfive minutes, theultrasonicpower of500Wwhenbestto extractrutinprocess conditions.Keywords:ultrasound， rutin， Huaimi， extract， ultrasonic cellpulverizer可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结目录中文摘要1英文摘要21 引言42 槐M.43芦丁44 超声波强化碱法提取槐 M中芦丁的意义45试验方法55.1 供试材料、试剂及仪器55.2 试验方法及过程66 结果与争论96.1 PH对芦丁提取率

3、的影响96.2 超声波处理时间对芦丁提取率的影响106.3 超声波处理功率对芦丁提取率的影响116.4 料液比对芦丁提取率的影响116.5 单因素基础上的正交试验117 结论12参考文献12致谢14可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结1 引言槐树SophoraiaponicaL.尤以在槐 M 槐花的花蕾 、果实中芦丁含量最为丰富。中药槐花为豆科植物槐SophoraiaponicaL.的干燥花及花蕾 , 夏季花开放或花蕾形成时采收，准时干燥，除去枝、梗及杂质。前者习称“槐花”，后者习称 “槐 M”。我国大部分的区都有生长。四川有着悠久种植槐树的历史。丘陵的带、房前屋后、山坡上都广泛种

4、植。芦丁 Rutin）是中药槐花 M 中起作用的的有效成分，临床上主要用于治疗高血压及毛细血管出血。因此人们常以槐花M 为原料提取芦丁。本次试验采纳的是超声波强化碱法，方法是在单因素水平基础上进行正交试验提取槐花中的芦丁。比较不同条件下芦丁的提取率，确定槐花中芦丁用超声波强化提取的正确条件，为槐花中芦丁的进一步分别提纯供应肯定的理论依据，也为深化开发和利用槐M供应理论依据。2 槐 M槐 M 广义是为豆科植物槐 、芦丁镁铬盐、多维葡萄糖羟丁芦丁、槲皮素等心血管药物 12。特殊是羟乙基芦丁片 曲克芦丁、维脑路通 13，因其由梁克军 14 等用氯乙醇 -醇介质法第一制得 ,并通过药品鉴定并投料生产。

5、羟乙基芦丁的制备不仅增大了芦丁的溶解度 ,而且扩大了其药理作用和临床应用范畴 15 ，从而扩大了芦丁的需求量。芦丁及其衍生物具有广泛的药理活性 17-18 ，马伯良将芦丁与阿斯匹林和硫酸镁制成芦丁复合物 ,药理试验说明其可减轻缺血性脑损耗等19,20 。芦丁和金属离子可以形成稳固的协作物，具有抗菌、抗肿瘤活性，协作物与DNA 的作用可以转变 DNA 的复制，从而阻碍肿瘤分子的增长 16 。故近年来芦丁金属协作物的争论是药学争论中的一个热点21。4超声波强化碱法提取槐M中芦丁的意义目前多采纳碱提酸沉工艺进行提取，但该工艺提取周期需时较长，而且提取率不抱负。有机溶剂提取率高，但由于有机溶剂的担心全

6、性质，故不易利用。水提和碱提酸沉产率不尽人意。然而超临界流体的提取有着特殊的溶解才能，可设备是昂贵和应用范畴是狭窄的，所以有必要进行争论。近年来，超声波帮助提取广泛应用于有机污染物、自然化合物及生物活性成分的提取，具有很多优点，可以取代目前既耗能源、时间，又造成环境污染，又无法进行有效提取的技术，是一项 “可连续进展 ”的“绿色技术 ”，具有良好的进展前景和庞大的应用潜力 6-7 。本次试验用的是超声波强化碱法，综合利用超声波和碱提取。方法是考察单因素水平基础上进行正交设计提取槐 M中芦丁。比较不同条件下提取的芦丁含量，确定槐M中芦丁可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结用超声波强化

7、碱法提取的正确条件，为槐M花中芦丁的进一步分别提纯供应肯定的理论依据，也为深化开发和利用槐 M供应理论依据。5试验方法5.1 供试材料、试剂及仪器5.1.1原料槐M：在邵阳市红旗路中心大药房购买。芦丁标准品：中国药品生物制品检定所，使用前不需要干燥处理，按C27H30O16运算， 供UV 法测定，本品含量为 92.5%。5.1.2 试剂NaOH：分析纯，长沙分路口塑料化工厂 无水乙醇：分析纯，湖南江虹试剂有限公司NaNO2：分析纯，长沙市国营延风化学试剂厂 AlNO 33:分析纯，天津市恒兴化学试剂制造有限公司5.1.3仪器WFZ UV-4802H 紫外可见分光光度计、 7200分光光度计、电

8、热恒温水浴锅、恒温箱、电子天平、容量瓶、试管、刻度试管、量筒、锥形瓶、玻璃棒、滤纸、烧杯等5.2 试验方法及过程5.2.1超声波萃取原理超声波细胞粉碎机是一种利用强超声在液体中产生空化效应，对物质进行超声处理的多功能、多用途的仪器，能用于动植物组织、细胞、细菌、芽胞菌种的破裂，同时可用来乳化、分别、分散、匀化、提取、脱气、清洗及加速化学反应等等。本试验所用仪器由超声波发生器和超声波换能器组件两大部分组成。超声波发生器 电源）是将220VAC 、50HZ的单相电通过变频器件变为 20-25Hz、约600V的交变电能 ,并以适当的阻抗与功率匹配来推动换能器工作，作纵向机械振动，振动波通过浸入在样品

9、溶液中的钛合金变幅杆对被破裂的各类细胞产生空化效应，从而达到破裂细胞之目的。5.2.2 物料预处理可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结取槐 M50g，置恒温箱 3040干燥 24h 后粉碎，槐 M 粉碎后，取过 4080 目筛的槐 M 粉作为样品。5.2.3 超声波强化碱法提取槐 M中芦丁的简易流程槐 M粉碎称取 2g 置于锥形瓶配置对应 PH 的溶液加入对应的体积 料液比） 用超声波处理 爱护温度设为 40，时间和功率依据试验方案设定）过滤得到样液吸取 1ml 显色并测定吸光度5.2.4 芦丁含量的测定分光光度法是鉴定黄酮类化合物结构的一种重要技术16 ，作为黄酮类物质中的一种，

10、此方法对芦丁也适用，本文采纳分光光度法测定槐花中的芦丁 。依据我系试验室的情形，本文第一是使用 WFZ UV-4802H 紫外可见分光光度计确定芦丁在 400-600nm处的最大吸取波长，然后使用 7200分光光度计在最大波特长测定芦丁的吸光度由于WFZ UV- 4802H紫外可见分光光度计不能常常给我们同学使用，所以在做论文的时候不能统一时间，经与试验室老师商议，吸光度测定改用7200分光光度计）。3 0.30mL ，摇匀后放置 6min, 加4%NaOH2.00mL，再用 30% 乙醇稀释至刻度，摇匀后放置 10mL ，置1cm比色皿中在波长400-600nm 之间，测定吸取谱 ,确定最大

11、吸取波长为 500nm，WFZ UV-4802H 紫外可见分光光度计扫描得下图，可知在波长 400-600nm 之间，其峰值在 500nm处。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结标准曲线制备图5.1 芦丁标准样波长扫描图可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结精密吸取 0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL上述芦丁标准溶液，分别置于 6 支10mL 刻度试管中，按项下的方法，自 “加30% 乙醇至 5mL ”起，同法操作，于 500nm 测定吸光度 30%乙醇作测定空白），并记录数据。数据处理实际称取的

12、芦丁标准品为 0.0131g，而标准品供 UV 法测定，含量为 92.5%，所以经过换算后，将其对应的质量浓度填入下表，单位是mg/ml。表5.3 芦丁标准液浓度 - 吸光度值芦丁标准液体积 ml ）芦丁标准液浓度 mg/ml ）吸光度00010.0242350.29320.0484700.58630.0727050.82040.0969401.04150.1211751.379可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结用Microsoft Excel 工作表处理，得芦丁标准液浓度C 与吸光度 A 的关系曲线的回来方程。图5.2 芦丁标准曲线3 0.30mL ，摇匀后放置 6min, 加

13、4%NaOH2.00mL，再用 30% 乙醇稀释至刻度，摇匀后放置 10min，置1cm比色皿中测定500nm处的吸光度，并记录数据。运算公式得到芦丁的标准曲线后，可以推导出芦丁提取率的运算公式： 第一可以得到芦丁的质量浓度 Cmg/ml）与吸光度 A的关系：5.1）可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结而芦丁提取率 Y与芦丁的质量浓度 C的关系为 即芦丁提取率的运算公式）：5.2）式中：Y为提取率，即芦丁在样品中的含量百分比。 C为芦丁的质量浓度，单位为 mg/ml 。D为显色处理时稀释倍数，为 10，由比色皿最大刻度 10ml）除以吸取样液体积 1ml）得到。V为处理槐 M样品时

14、的液体体积，单位为 ml有料液比有关，比如料液比为 1:40，就V=80ml 假如料液比为 1:50，就V=100ml ）。M为槐M样品的质量，单位为 g。综合公式 5.1和公式 5.2，可得芦丁提取率简化公式：5.3）由于为简化公式，所以式中字母不带单位，仅表示数据。6结果与争论6.1 超声波处理时间对芦丁提取率的影响为了探讨超声波处理时间对芦丁提取率的影响，在其他参数相同的条件下，即将超声波 粉碎机的爱护温度设为40，提取 PH 为 9，功率 400W，料液比 1:50 分别在提取时间为 3、5、7、9、11min 下提取芦丁，所得芦丁提取率与处理时间之间的关系如表6.2 所示。时间min

15、 ）吸光度 平均）芦丁提取率 % ）31.2755.5851.4366.3971.5637.0291.2895.57111.3495.75表6.1 超声波处理时间对芦丁提取率的影响由表6.1可知，开头，随着超声波处理时间的增长，芦丁的提取率也增加，到7min可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结时显现最大值，之后芦丁的提取率便降的很快，到11min时虽说有点回升，但回升不是很明显。之所以跌得很快，应当是处理时间过长造成大量的细胞被完全破坏，使细胞中 其他物质大量的被溶解。6.2 超声波处理功率对芦丁提取率的影响为了探讨超声波处理功率对芦丁提取率的影响，在其他参数相同的条件下，即将超

16、声波粉碎机的爱护温度设为 40，提取时间为 7min，提取 PH为9，分别在提取功率为200、300、400、500、600W下提取芦丁，所得芦丁提取率与处理功率之间的关系如表6.2 所示。功率 W ）吸光度 平均）芦丁提取率 % ）2001.4436.393001.5226.804001.5737.055001.4026.036001.1575.12表6.2 超声波处理功率对芦丁提取率的影响由表6.2可知，芦丁的提取率随着功率的上升而平稳上升，到400W时达到最大值，之后便下降，到 500W后，下降的很快，可能是由于功率过大导致其他物质的溶解量增大， 对芦丁的提取率受到干扰。6.3 PH对芦

17、丁提取率的影响为了探讨 PH 对芦丁提取率的影响，利用氢氧化钠转变溶液的 PH 值，在其他参数相同的条件下，即将超声波粉碎机的爱护温度设为 40，提取时间为 7min，功率400W，分别在提取 PH 为 8、9、10、11、12 下提取芦丁，所得芦丁提取率与 PH 之间的关系如表 6.3 所示。PH吸光度 平均）芦丁得率 %）81.3215.8191.5817.03101.6617.47111.3165.63121.1054.93可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结表6.3 PH 对芦丁提取率的影响由表6.3可知，随着 PH值的增大，槐 M中芦丁的提取率也逐步增大，当 PH为10时

18、，其提取率最大，之后跌落明显，可能是由于 PH值过大，对芦丁的性质和结构有影响。6.4 料液比对芦丁提取率的影响为了探讨料液比对芦丁提取率的影响，在其他参数相同的条件下，即将超声波粉碎机的爱护温度设为 40，提取时间为 7min，功率 400W，PH 值为 10，分别在料液比为1:30、1:40、1:50、1:60、1:70 下提取芦丁，所得芦丁提取率与料液比之间的关系如表表6.4 PH 对芦丁提取率的影响由表6.4可知，料液比的增加对芦丁提取率有明显的影响，料液比达到率达到最大值。6.5 单因素基础上的正交试验1:60时芦丁提取依据单因素试验所得出的结果，在这基础上设计正交试验，其结果如表6

19、.5、表6.6。表 6.5因素水平表水平时间/minC提取功率D 料液比6.4 所示。料液比吸光度平均）芦丁得率 争论进展 J. 化学通报 ,19995:7-13. 7元英进 .中药现代化生产关键技术J. 北京 :化学工业出版社 ,2002,114-118. 8陈友梅主编 .中药化学 .济南 :山东科学技术出版社 ,1988.117. 9龚盛昭，何远伦，杨卓如.微波提取芦丁的协同效应争论J. 食品科学， 2004,25:876-878. 12杨娟 ,冷晓莲 ,邓静 ,等.芦丁与胰 -淀粉酶的作用争论J. 化学争论与应用 ,2006,187:874-877. 13贾冬英 ,耿墨 ,姚开 .苦荞麦

20、茎及籽壳中黄酮类化合物芦丁 的提取及其鉴定 J. 食品科学,1998,199:46-47. 14梁克军 .半合成黄酮化合物 J 1 医药工业 ,1977 ,829 :685 15叶红 ,丁福 1 维脑路通 J 1 内蒙古药学 ,1985 ,4 2 :45 16苏碧泉 ,芦丁金属协作物与DNA 相互作用争论 D. 西北师范高校 ,中国优秀博硕士学位论文全文数据库 硕士 ,2007. 17刘诗平 ,陈尚猛 ,朱卫东。槲皮素及其衍生物活性的争论进展J 。中草药 ,1991 ,22 4 :182 18陈勇 ,张晴 1 五羟基黄酮的药理学争论近况J 。中草药 ,1998 ,298 :569 19马伯良

21、,齐力 ,罗云萍 1 芦丁复合物对兔试验性脑梗塞血浆中TXB2 、62Keto2PGFla 的影响 J .华西药学杂志 ,1996 ,11 2 :72 20马柏良 ,裴颖 ,周志刚 1 芦丁复合物对大鼠脑组织SOD 、Na + 、 K+ 、ATP 酶活力的影响 J . 西北药学杂志 ,1999 ,14 4 :158 21梁红峰 ,陈方 .高脂血症模型小鼠生化指标的变化J. 广东微量元素科学,2004 年04 期.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结致谢为期一个学期的毕业论文 设计）已接近尾声了，我的四年高校生涯也即将圈上一个句号。借这个机会我想对我的母校，我的父母，我的老师和同学表

22、达我由衷的谢意。第一要感谢我的父母对我高校四年的悄悄支持，辛辛苦苦挣的血汗钱多数都用来供我读书，毕业之后就轮到我来报答您们。感谢邵阳学院给了我一个上高校的机会，给了我一个美丽的学习和生活环境，让我的人生更加完善。感谢生化系的老师们，给我四年的学习、成长制造了一个良好的环境，引导我充分利用学校的学习资源，去进展、充实自我，而不曾虚度光阴。在此，我真诚的向您们道一声：“感谢！”。仍需感谢和我一起学习一起生活的同学们，是你们让我这四年的高校生活里布满了感动。这次毕业论文设计我得到了很多老师和同学的帮忙，其中我的论文指导老师曾祥燕老师对我的关怀和支持尤为重要，他仔细的态度，从论文创作的选题、结构、内容

23、、甚至是编排格式上都尽心指导，提出了珍贵看法，让我在专业论文创作上又进了一步。仍有任光云老师教我使用超声波粉碎机，使得我在做试验的过程中更加顺畅，在此我诚心感谢在毕业论文创作过程中帮忙过我的老师和同学。我们班主任谭建新老师，和谭老师也算是有缘，做了我们四年的班主任。虽然平常他比较繁忙，而且接触的机会也不多，但是对整个班级同学学习和生活上无微不至的关 怀，让同学们纷纷称道。有机会他就会给同学们介绍家教或者其他工作，给同学们供应勤工俭学的机会。袁显忠等多位老师在院、系担任重要职务，公务繁忙，但对生化同学会团总支工作的开展赐予了极大的支持。让我愧疚的是，个人才能有限，没能为整个生化系的学 生做出太多

24、奉献，在此深表感谢和歉意。篇幅所限，不便把各位恩师一一列举出来， 表达我的感谢之情，在此对生化其他专业课老师一并表示感谢。他们是：赵良忠主任、余有贵书记、黄大川老师、夏湘老师、刘静霆老师、刘永和老师等。四年期间他们对我的帮忙与教导，我永久不会遗忘，他们的音容笑貌仍然不时出现在我的眼前。各位老师鲜明的个性特点和人格魅力将是我回忆中的高校生涯重要的组成部分。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结最终，我再一次真诚的向帮忙过我的老师和同学表示感谢！感谢培养我的邵阳学院，深厚的学术气氛，舒服的学习环境我将终身难忘！祝母校蒸蒸日上，永创辉煌！生化系诸位老师，诸位恩师的训诲我将牢记于心，祝恩师们身体健康家庭幸福。可编辑资料 - - - 欢迎下载