【原创】近六年高考分析:蛋白质的提取和分离.ppt
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1、1【原创】【原创】20132013届高三生物资料届高三生物资料2蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离3(1)pH(1)pH对不同蛋白酶的活力影响有差异。据图对不同蛋白酶的活力影响有差异。据图1212可知,可知,_更适宜作为食品添加剂,理由是更适宜作为食品添加剂,理由是_。蛋白酶的活力可用蛋白酶的活力可用_的量来表示。的量来表示。 (20122012广东)广东) 2929食品种类多,酸碱度范围广。生物兴趣小食品种类多,酸碱度范围广。生物兴趣小组拟探究在食品生产应用范围较广的蛋白酶,查阅相关文献,组拟探究在食品生产应用范围较广的蛋白酶,查阅相关文献,得知:得知:木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶 由图可以看出,
2、木瓜蛋白酶的由图可以看出,木瓜蛋白酶的活性不随活性不随pHpH的变化而变化的变化而变化 单位时间内底物消耗(产物产生)单位时间内底物消耗(产物产生) “汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。4(2)该蛋白酶的提取工艺流程如下:该蛋白酶的提取工艺流程如下:兴趣小组分别对酶保护剂浓度、提取液兴趣小组分别对酶保护剂浓度、提取液pHpH进行了探究实验。进行了探究实验。结果显示,酶保护剂浓度在结果显示,酶保护剂浓度在0.020.020.06mol/L0.06mol/L范围内,酶活力较范围
3、内,酶活力较高;提取液高;提取液pHpH在在6.06.08.08.0范围内,酶活力较高。他们认为,要进范围内,酶活力较高。他们认为,要进一步提高粗酶制剂的酶活力,以达到最佳提取效果,还需对酶保一步提高粗酶制剂的酶活力,以达到最佳提取效果,还需对酶保护剂浓度和提取液护剂浓度和提取液pHpH进行优化,并确定以此为探究课题。请拟定进行优化,并确定以此为探究课题。请拟定该课题名称,设计实验结果记录表。该课题名称,设计实验结果记录表。29 29 (1616分)食品种类多,酸碱度范围广。生物兴趣小组拟分)食品种类多,酸碱度范围广。生物兴趣小组拟探究在食品生产应用范围较广的蛋白酶,查阅相关文献,得知:探究在
4、食品生产应用范围较广的蛋白酶,查阅相关文献,得知:“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。5(2)该蛋白酶的提取工艺流程如下:该蛋白酶的提取工艺流程如下:课题:探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适课题:探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适pHpH单位时单位时间内底间内底物的消物的消耗量耗量提取液的提取液的pH6.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.0酶酶保保护护剂剂的的浓浓度度0.020.030.040.050.066【解析解析】(1 1)审题结合图形和
5、文字,在题目中已经提供了信息)审题结合图形和文字,在题目中已经提供了信息“食食品种类多,酸碱度范围广品种类多,酸碱度范围广”,所以选择的食品添加剂应该有,所以选择的食品添加剂应该有较广的酸碱适应范围。从图形中,可以看出木瓜蛋白酶的适较广的酸碱适应范围。从图形中,可以看出木瓜蛋白酶的适应范围最广,所以可以选作食品添加剂。酶的活力,一般用应范围最广,所以可以选作食品添加剂。酶的活力,一般用酶催化的底物消耗量或者产物生成量来表示。酶催化的底物消耗量或者产物生成量来表示。(2 2)实验设计,应该明确实验目的:探究酶保护剂的最适)实验设计,应该明确实验目的:探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适浓度和提取
6、液的最适pHpH值,所以可以将酶保护剂的浓度和提值,所以可以将酶保护剂的浓度和提取液的取液的pHpH值作为自变量,因变量为单位时间内底物的消耗量。值作为自变量,因变量为单位时间内底物的消耗量。7(20122012安徽)安徽) 3131(2424分)甲型血友病是由分)甲型血友病是由X X染色体上的隐染色体上的隐性基因导致的遗传病(性基因导致的遗传病(H H对对h h为显性)。图为显性)。图1 1中两个家系都有血中两个家系都有血友病发病史,友病发病史,22和和33婚后生下一个性染色体组成是婚后生下一个性染色体组成是XXYXXY的非的非血友病儿子(血友病儿子(IV2IV2),家系中的其他成员性染色体
7、组成均正常。),家系中的其他成员性染色体组成均正常。 “汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。(1)根据图)根据图1, (填(填“能能”或或“不能不能”)确定)确定IV2两条两条X染色体的来源;染色体的来源;III4与正常女子结婚,推断其女儿患血友病与正常女子结婚,推断其女儿患血友病的概率是的概率是 。0不能不能“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。8(2 2
8、)两个家系的甲型血友病均由凝血因子)两个家系的甲型血友病均由凝血因子(简称(简称F8F8,即,即抗血友病球蛋白)基因碱基对缺失所致。为探明抗血友病球蛋白)基因碱基对缺失所致。为探明IV2IV2的病因的病因,对家系的第,对家系的第、IVIV代成员代成员F8F8基因的特异片段进行了基因的特异片段进行了PCRPCR扩扩增,其产物电泳结果如图增,其产物电泳结果如图2 2所示,结合图所示,结合图1 1,推断,推断33的基因的基因型是型是 。请用图解和必要的文字说明。请用图解和必要的文字说明IV2IV2非血友病非血友病XXYXXY的形成原因。的形成原因。X XH HX Xh h “汉水丑生的生物同行”超级
9、群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。9“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。图解如下:图解如下:在在3 3形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期,带有基因形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期,带有基因H H的姐的姐妹染色单体移向细胞同一极,形成妹染色单体移向细胞同一极,形成X XH HX XH H的细胞,的细胞,X XH HX XH H卵细胞与正卵细胞与正常精子结合形成常精子结合形成
10、X XH HX XH HY Y受精卵受精卵10(3)现)现III3再次怀孕,产前诊断显示胎儿(再次怀孕,产前诊断显示胎儿(IV3)细胞的染色)细胞的染色体为体为46,XY;F8基因的基因的PCR检测结果如图检测结果如图2所示。由此建议所示。由此建议III3 。“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。(4)补给)补给F8可治疗甲型血友病。采用凝胶色谱法从血液中分可治疗甲型血友病。采用凝胶色谱法从血液中分离纯化离纯化F8时,在凝胶装填色谱柱后,需要用缓冲液处理较长时,在凝胶装填色谱
11、柱后,需要用缓冲液处理较长时间,其目的是时间,其目的是 ;若;若F8比某些杂蛋白先收集到,说明比某些杂蛋白先收集到,说明F8的相对分子质量较这些杂蛋的相对分子质量较这些杂蛋白白 。洗涤平衡凝胶,并使凝胶装填紧密洗涤平衡凝胶,并使凝胶装填紧密 终止妊娠终止妊娠 大大“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。11(6)为获得更多的转基因母猪,可以采用体细胞克隆技术,)为获得更多的转基因母猪,可以采用体细胞克隆技术,将纯合转基因母猪的体细胞核注入将纯合转基因母猪的体细胞核注入 ,构成,
12、构成重组胚胎进行繁殖。重组胚胎进行繁殖。 (5)利用转基因猪乳腺生物反应器可生产)利用转基因猪乳腺生物反应器可生产F8。要使乳腺细胞。要使乳腺细胞合成合成F8,构建表达载体时,必须将,构建表达载体时,必须将F8基因基因cDNA与猪乳腺蛋与猪乳腺蛋白基因的白基因的 等调控组件重组在一起。等调控组件重组在一起。F8基因基因cDNA可通可通过克隆筛选获得,该过克隆筛选获得,该cDNA比染色体上的比染色体上的F8基因短,原因是该基因短,原因是该cDNA没有没有 。内含子内含子 启动子启动子 去核的卵母细胞去核的卵母细胞 “汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品
13、,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。12【解析解析】(1 1)因为)因为22的染色体组成可能是的染色体组成可能是X XH HX XH H,也可能是,也可能是X XH HX Xh hY Y,所以不能确定,所以不能确定,44的基因型为的基因型为XHYXHY,所以后代女性中,所以后代女性中没有患病个体。没有患病个体。(2 2)由图可知第一条带是显性,第二条带是隐性,所以)由图可知第一条带是显性,第二条带是隐性,所以33基基因型为因型为X XH HX Xh h,图解如下:,图解如下:在在III3III3形成卵细胞过程中的减数第二次分裂后期,带有基因形成卵细胞过程
14、中的减数第二次分裂后期,带有基因H H的姐妹染色单体移向细胞的同一极,形成的姐妹染色单体移向细胞的同一极,形成X XH HX XH H卵细胞,卵细胞,XHXHXHXH卵卵细胞与正常精子结合形成细胞与正常精子结合形成XHXHYXHXHY受精卵。受精卵。 “汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。13说明:说明:2 2产生正常的
15、产生正常的Y Y精子和精子和3 3产生异常的卵细胞产生异常的卵细胞X XH HX Xh h结合而成结合而成X XH HX Xh hY Y“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。14说明:说明:2 2产生异常的产生异常的X Xh hY Y精精子和子和3 3产生正常的卵细胞产生正常的卵细胞X XH H结合而成结合而成X XH HX Xh hY Y或或或或说明:说明:2 2产生异常的产生异常的X Xh hY Y精精子和子和3 3产生正常的卵细胞产生正常的卵细胞X XH H结合而成结合
16、而成X XH HX Xh hY Y或或或或说明:说明:2 2产生异常的产生异常的X Xh hY Y精精子和子和3 3产生正常的卵细胞产生正常的卵细胞X XH H结合而成结合而成X XH HX Xh hY Y或或或或说明:说明:2 2产生异常的产生异常的X Xh hY Y精精子和子和3 3产生正常的卵细胞产生正常的卵细胞X XH H结合而成结合而成X XH HX Xh hY Y或或说明:说明:2 2产生正常的产生正常的Y Y精子和精子和 3 3产生异常的卵细胞产生异常的卵细胞X XH HX Xh h结合结合而成而成X XH HX Xh hY Y说明:说明:2 2产生正常的产生正常的Y Y精子和精
17、子和 3 3产生异常的卵细胞产生异常的卵细胞X XH HX Xh h结合结合而成而成X XH HX Xh hY Y“汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。15【解析解析】(3 3)由题可知,)由题可知,IV3IV3是血友病患者,所以建议是血友病患者,所以建议III3III3终止妊娠。终止妊娠。(4 4)采用凝胶色谱法从血液中分离纯化)采用凝胶色谱法从血液中分离纯化F8F8时,在凝胶装填色谱时,在凝胶装填色谱柱后,需要用缓冲液处理较长时间,其目的是洗涤平衡凝柱后,需要用缓冲液处理
18、较长时间,其目的是洗涤平衡凝胶,并使凝胶装填紧密;若胶,并使凝胶装填紧密;若F8F8比某些杂蛋白先收集到,说比某些杂蛋白先收集到,说明明F8F8的相对分子质量较这些杂蛋白较大。的相对分子质量较这些杂蛋白较大。(5 5)要使乳腺细胞合成)要使乳腺细胞合成F8F8,构建表达载体时,必须将,构建表达载体时,必须将F8F8基因基因cDNAcDNA与猪乳腺蛋白基因的启动子和终止子等调控组件重组与猪乳腺蛋白基因的启动子和终止子等调控组件重组在一起。在一起。F8F8基因基因cDNAcDNA可通过克隆筛选获得,该可通过克隆筛选获得,该cDNAcDNA比染色比染色体上的体上的F8F8基因短,原因是该基因短,原因
19、是该cDNAcDNA没有内含子。没有内含子。(6 6)为获得更多的转基因母猪,可以采用体细胞克隆技术,将)为获得更多的转基因母猪,可以采用体细胞克隆技术,将纯合转基因母猪的体细胞核注入去核卵细胞,构成重组胚纯合转基因母猪的体细胞核注入去核卵细胞,构成重组胚胎进行繁殖。胎进行繁殖。 “汉水丑生的生物同行”超级群大型公益活动:历年高考题PPT版制作。本课件为公益作品,版权所有,不得以任何形式用于商业目的。2012年1月15日,汉水丑生标记。16(2011广东)广东) 5.以下关于猪血红蛋白提纯的描述,以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确不正确的的是(是( )A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细
20、胞破裂洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢白移动慢D【解析】【解析】:D项考查凝胶色谱法分离蛋白质的原理,相对分项考查凝胶色谱法分离蛋白质的原理,相对分子质量越大的通过凝胶色谱柱的速度越快,故子质量越大的通过凝胶色谱柱的速度越快,故D错误。错误。17【解析】【解析】A正确,洗涤的目的是
21、去除杂蛋白以利于后续步骤正确,洗涤的目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化,加入的是生理盐水,缓慢搅拌的分离纯化,加入的是生理盐水,缓慢搅拌10min,低速短,低速短时间离心,重复洗涤三次,直至上清液不再呈现黄色,表明时间离心,重复洗涤三次,直至上清液不再呈现黄色,表明红细胞已洗涤干净。红细胞已洗涤干净。B正确,哺乳动物成熟的红细胞没有细正确,哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核与众多的细胞器,提纯时杂蛋白较少。胞核与众多的细胞器,提纯时杂蛋白较少。C正确,血红蛋正确,血红蛋白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集
22、洗脱液(如果操作都正确,能清楚的判断什么时候应该收集洗脱液(如果操作都正确,能清楚的看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整,随着洗脱液缓看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整,随着洗脱液缓慢流出)。这使得血红蛋白的分离过程非常直观,简化了操慢流出)。这使得血红蛋白的分离过程非常直观,简化了操作。作。18抑菌实验抑菌实验柚柚 皮皮糊状液体糊状液体柚皮精油柚皮精油乳酸菌乳酸菌A A培培 养养 液液乳酸菌素乳酸菌素(20112011山东)山东) 3434【生物【生物生物技术实践】生物技术实践】研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,
23、两者的提取及应用如图所示。用,两者的提取及应用如图所示。(3 3)培养基中的尿素可为乳酸菌)培养基中的尿素可为乳酸菌A A生长提供生长提供_。电泳法。电泳法纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其相对分纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其相对分子质量越大,电泳速度子质量越大,电泳速度_。氮源氮源越慢越慢19(20092009广东)第广东)第3838题(生物技术实践)和题(生物技术实践)和3939题(现题(现代生物科技专题)是选做题,考生只需作答其中一代生物科技专题)是选做题,考生只需作答其中一题。请根据下述材料,回答第题。请根据下述材料,回答第3838题或题或3939题。题。
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