2022年酶的分析研究与应用DNA和蛋白质技术植物有效成分的提取 .pdf

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1、1 / 15 酶的研究与应用 DNA和蛋白质技术植物有效成分的提取检测题山东省青岛市城阳第一中学辛建福基础篇 A 卷）时间： 30 分钟满分： 50 分）一 选择题 每小题只有一个选项符合题意。每小题2 分，共 20 分）1从几千年前到现在，酶制剂就安全地在被使用在工业、美容和口腔护理产品、纺织品、食品 如酸奶酪）以及芝士、啤酒和白酒等的发酵生产过程中。下列各项中，不属于酶制剂的是 ）A蛋白酶 B脂肪酶 C淀粉酶 D麦芽糖酶2提取植物芳香油的方法可以根据其原料不同而不同。从柑橘、柠檬等植物原料中提取植物芳香油，通常采用的方法是A固定化酶技术就是固定反应物, 将酶依附着载体围绕反应旋转的技术B固

2、定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C固定化酶中的酶无法重复利用D固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术4下表是某种生物活性洗衣粉的成分及用法说明，下列对资料表明的信息理解不正确的是 ）A这种洗衣粉较易清除衣服上的蛋清污渍B该蛋白酶在60以上将会失去活性C这种洗衣粉可除去衣料上的各种污渍D这种洗衣粉不能用于洗涤真丝织物精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页，共 15 页2 / 15 5PCR技术又称聚合酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增。你认为下列符合在体外进行PCR反应条

3、件的一组是 A根据蛋白质分子不能通过半透膜的特性，可将样品中各种不同蛋白质分离B根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小，可通过电泳分离蛋白质C根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质D根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质7下列有关PCR技术的实验过程叙述，不正确的是A蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感，更易失活B蛋白质的空间结构多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有统一的方法C提取某种特定的蛋白质需据其特性摸索提取的程序D提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结

4、- - - - - - -第 2 页，共 15 页3 / 15 9生物组织中有机物的提取方法有多种，如电泳、压榨、萃取等，不同的有机物提取方法各不相同。下列有关的说法中不正确的是 ）A香料工业中“液体黄金”玫瑰油的提取中要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是水蒸气蒸馏B杏仁油富含矿物质和维生素，主要通过压榨法提取C用萃取法提取胡萝卜素，萃取的效率只受萃取剂的性质和使用量的影响D为了纯化提取的DNA ，往 DNA滤掖中加入嫩肉粉，其目的是木瓜蛋白酶能够分解蛋白质10下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤，其中正确的是 ）A蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴

5、定等4 步B蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、羊、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白C 对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等D 对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳二 非选择题 30 分）11。将步骤处理后的果胶酶和苹果泥混合，再次在10水浴中恒温处理lOmin( 如图B。将步骤处理后的混合物过滤，收集滤液，测量汁量( 如图 C。在不同温度条件下重复以上实验步骤，并记录果汁量如下：温度 / 10 20 30 40 50 60 70 80 果汁量 /ml 8 13 15 25 15 12 ll 10 根据上述实验，请分析回答下列问

6、题：(1果 胶酶 能 破除细 胞 壁， 是因为 果胶酶 可 以促 进细胞壁中的水解。(2 实 验 结 果 表 明 ， 当 温 度 为时 果 汁 量 最 多 ， 此 时 果 胶 酶 的 活性。当温度再升高时，果汁量降低，说明。(3实验步骤的目的是。1215 分）某生物兴趣小组在学习完“蛋白质的提取和分离”后，联系相关实验，准备从猪肝脏研磨液中初步提取过氧化氢酶，设计的“过氧化氢酶提取、分离流程图”如下：精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页，共 15 页5 / 15 试回答下列有关问题：向肝细胞悬液中加入一定量的pH=70 的缓冲液并

7、充分搅拌，可以破碎肝细胞，破碎细胞的原理是。与使用蒸馏水相比，使用缓冲液的优点是。蛋白质粗分离阶段透析的目的是。 电 泳 利 用 了 待 分 离 样 品 中 各 种 分 子的等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。实验小组以3% 过氧化氢溶液和获得的过氧化氢酶为材料进行温度对酶催化活性影响的探究，得到下图所示的结果，根据实验结果得出“过氧化氢酶能耐受100高温”的结论。请问这一结论是否可靠？为什么？。能力篇 B卷）时间： 30 分钟满分： 50 分）一 选择题 每小题只有一个选项符合题意。每小题2 分，共 20 分）1四瓶失去标签的无色透明的液体各装有：混有少量纤维素分解菌的清水、丙

8、球蛋白一种抗体）溶液、溶解有DNA分子的0015mol/L 的 NaCl 溶液、混有少量葡萄糖的生理盐水溶液。依次利用下列哪组物质即可鉴别出来 A蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油B压榨法适用于范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页，共 15 页6 / 15 C萃取法适用于提取柑橘、柠檬等易焦糊的原料D玫瑰油、薄荷油、熏衣草油等芳香油主要通过压榨法获得3某同学用实验来探究pH 值对酶活性的影响。他准备了5 份含有的等量果胶酶溶液的试管，用01% 的盐酸或氢氧化钠

9、溶液调节至不同的pH 值，每支试管加五块01cm3的正方体苹果块，试管均置于25室温条件下。下列的说法中，不合理的一项是 ）A选取 pH值梯度可以是5、6、7、8、 9B为使实验在更短的时间内完成，可以将温度由25提高到大约80C生成果汁量与酶活性强弱的关系是酶活性越大，果胶分解越快，生成的果汁越多D可根据果汁的澄清度来判断最适pH值4提取玫瑰精油的实验流程如下图所示。其中有关的说法不正确的是 A为使固定化酵母可以反复使用，实验过程一定要在无菌条件下进行B加入反应液后应保持活塞1 始终打开，活塞2 则必须关闭精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - -

10、 -第 6 页，共 15 页7 / 15 C装置的长导管主要是为了释放CO2并防止杂菌进入反应柱D加入的反应液浓度不能过高以免酵母细胞因失水过多而死亡6 在采用鸡血为材料对DNA进行粗提取的实验中，若需进一步提取杂质较少的DNA ，可以依据的原理是 ）A在物质的量浓度为014 mol/L的氯化钠溶液中DNA的溶解度最小BDNA遇二苯胺在沸水浴的条件下会染成蓝色CDNA不溶于酒精而细胞中的一些物质易溶于酒精D质量浓度为01g/ml 的柠檬酸钠溶液具有抗凝血作用7镰刀型细胞贫血症是一种基因突变引起的遗传病，患者的红细胞是弯曲的镰刀状。这样的红细胞容易破裂，使人患溶血性贫血，严重时会导致死亡。某科学

11、兴趣小组计划从血红蛋白的成分是否变化来开展研究性学习。下列是该小组成员获得纯度很高的血红蛋白的实验过程，不正确的一项是 ）A对红细胞进行洗涤，在加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放出血红蛋白后，将混合液静置于一段时间后分层获得血红蛋白溶液B将血红蛋白溶液装入透析袋中透析，可达到粗分离的目的C利用凝胶色谱操作对血红蛋白进行纯化D使用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定，以获得纯度很高的血红蛋白8从 2001 年初到现在，青岛某实验基地已孕育出上百只转基因克隆羊，它们的体内分别携带包括 干扰素、抗凝血酶素、乙肝表面抗原在内的多种药用蛋白基因。这意味着，它们可以通过产奶的方式源源不断地提供药用蛋白

12、基因，其应用前景非常光明。在其实验研究过程中，经常利用PCR技术制取大量的有关药用蛋白基因来供实验用。下列有关PCR技术的叙述中，不合理的是 ）APCR扩增反应中加人引物的作用是结合在模板DNA上，提供DNA延伸起始位点BDNA聚合酶的作用是从引物的5 端开始催化DNA链的延伸。CPCR技术依据是DNA的热变性原理DPCR的反应过程一般经历三十多个循环，每次循环都包括变性、复性、延伸精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页，共 15 页8 / 15 9右图为提取胡萝卜素的装置示意图，下列有关的叙述中不正确的是 ）A一般来说，要想萃取效

13、果好，需保证原料颗粒小，萃取温度高，时间长B萃取过程可以直接使用明火加热容易引起燃烧C在加热瓶口安装冷凝回流装置的目的是防止有机溶剂的挥发D提取的胡萝卜素用纸层析法进行鉴定，若出现了和标准样品一样的层析带，说明实验成功10某化工厂最新产生了一种高效加酶洗衣粉，准备投放市场，其包装印有如下部分说明。成分：含最新高效碱性蛋白酶。特点：洗涤奶渍、血渍等的效率是普通洗衣粉的数倍。用法：洗涤前先将衣物浸于含有该洗衣粉的水内数小时，使用温水效果更佳。注意：切勿用于丝质及羊毛衣料。用后彻底清洗双手。该地区质检部门为证明该洗衣粉是否有功效，从化工厂提取部分洗衣粉样品做了如下实验：下列的说法中，不正确的是 ）A

14、此题中的自变量是洗衣粉溶液是否煮沸过，A组是对照组B最佳的实验结果是A组胶片上的蛋白膜快速消失C胶片上蛋白膜消失的原因是碱性蛋白酶的催化作用的缘故D洗衣粉经过0和 75处理后，温度再度回到45，两者的催化作用已不能恢复二 非选择题 30 分）精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页，共 15 页9 / 15 11 血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：_、 _ 、 _和_。(2实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是_ _ 。以上所述的过程即是样品处理，它包括

15、、分离血红蛋白溶液、透析。(3收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是。透析的原理是。(4然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。此步样品纯化的目的是_ _ 。12中进行分离和分析或用作亲子鉴定。下图是电泳装置和电泳结果：精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页，共 15 页10 / 15 与 电 泳 和 叶 绿 体 色 素 分 离 采 用 的 纸 层 析 法 比 较 ， 后 者 使 用 的 介 质是； 叶 绿 体 中 的 色 素 能 够 在 滤 纸 上 彼

16、此 分 离 开 的 原 因是。根据电泳的原理，你认为可以用它来分离核苷酸吗？_。 PCR 技 术 能 把 某 一DNA 分 子 片 断 进 行 扩 增 ， 所 依 据 的 原 理是_，每次循环需要经过_三步，所用的引物是一段设计的_。图 3 是把含有21 个氨基酸的多肽进行水解，得到的氨基酸混合物进行电泳的结果，故可推知该多肽由种氨基酸构成。图4 通过提取某小孩和其母亲，以及待测定的四位男性的DNA ，分别由酶处理后，生成含有若干DNA片段，并进行扩增得到的混合物，然后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱，请分析F1 F4中，谁是该小孩真正生物学上的父亲？为什么？，。电泳过程中分子的迁移速率除与

17、本身所带净电荷的多少有关外，你认为还受什么因素的影响？ ( 列出 3 种【参考答案】A卷1D 解读：目前常用的酶制剂有四大类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污渍从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素等水解成小分子物质，使洗衣粉具有更强的去污能力。2C 解读：柑橘、柠檬原料特殊，采用水中蒸馏的方法容易导致原料焦糊和有效成分的水解，所以柑橘、柠檬植物芳香油的提取一般采用压榨法，以保证原料中植物芳香油的成分不变精选学习资料 -

18、 - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页，共 15 页11 / 15 3D 解读：固定化酶是利用物理或化学方法将酶固定在一定空间内的技术，其优点是酶被固定在一定装置内可重复利用，不足是无法同时解决一系列酶促反应。4C 解读：酶具有专一性。因为成分中有蛋白酶，只能洗涤一些含有蛋白质的奶渍等污渍，但不能除去衣料上的其它污渍。5D 解读: 体外 DNA 扩增PCR 技术）是模拟生物细胞内DNA 复制的条件，只是无需解旋酶 可热变性），也不需要基因工程的工具酶限制性核酸内切酶），但需要耐高温的DNA 聚合酶。6A 解读：考查了蛋白质的分离与提纯技术。根据蛋

19、白质相对分子质量的大小，可通过离心沉降法分离蛋白质；根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小，可通过电泳分离蛋白质。7C 解读： PCR 技术是体外 DNA 扩增技术，需要变性解链，变性过程中破坏的是 DNA 分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现。DNA 分子复制利用碱基互补配对的原理，需要的原料是四种脱氧核苷酸。8D 9C 解读：用萃取法提取胡萝卜素时，萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量的影响，还受到原料颗粒大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。10D 解读：蛋白质的提取和分离一般可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定 4 步；一般选择可以以猪、牛、羊等动物的血液为

20、材料，这些材料来源广泛，价格低廉，而很少选蛙做实验材料。对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白、透析等；对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 11 页，共 15 页12 / 15 11 蒸馏 2 分） 压榨 萃取剂的性质和使用量 果胶 (2 40 最高酶活性降低 避免果汁和果胶酶混合时影响混合物温度，从而影响果胶酶活性2分）解读：生物组织中有机物的提取方法很多，如采用蒸馏法提取玫瑰油，采用压榨法提取杏仁油，采用萃取法提取胡萝卜素，DNA 的鉴定是

21、用二苯胺试剂鉴定，水浴加热后呈现蓝色。细胞壁和胞间层的主要组成成分之一是果胶，而果胶酶叫是水解果胶的一类酶的总称。通过表中数据可知：在40时，产生的果汁量最多，在题中所给的温度范围内，40时酶活性最高。当温度升高时，出汁量降低，酶的催化活性降低。酶具高效性，将底物与酶的温度都达预定值后再混等，避免其事先发生反应，而引起结果的不准确。12共 15分，除标明外每空2 分）渗透原理 当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水胀破）3分）可以保证酶溶液pH基本稳定，避免因 pH变化影响过氧化氢酶活性 3分）除去小分子化合物 杂质）带电性质、分子大小、形状答对两项得分 3 分）不可靠高温也能使过氧化

22、氢分解B卷1D 解读：用刚果红培养基来培养混有少量纤维素分解菌的清水，结果是产生纤维素酶的菌落周围会出现透明圈。用双缩脲试剂鉴别蛋白质会产生紫色反应，脂肪可被苏丹染液染成橘黄色。DNA 遇到二苯胺经过沸水浴后变成蓝色。班氏试剂或斐林试剂均可鉴定可溶性还原性糖，加入后水浴加热后会出现砖红色沉淀。淀粉遇到碘液变成蓝色。2A 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 12 页，共 15 页13 / 15 3B 解读：影响酶的因素有pH 、温度、酶的抑制剂等。此题中自变量是为温度，因变量是单位时间内生成果汁的量，可以根据单位时间内生成果汁的多少来表示

23、酶活性的强弱，从而判断果胶酶的最适pH 。可以通过适当提高温度、将苹果磨成泥等方法，来增大与酶的接触面积，可以缩短实验的时间。但是过高的温度，会使酶的空间结构发生改变从而失去活性。4 C 5B 解读: 固定化酵母在无菌条件下能延长使用时间，若感染了杂茵，一些杂茵能产生一些对酵母菌有害的代谢产物。装置中的长导管既能释放酵母茵发酵产生的 C02 ，又能防止杂菌进入反应柱。若加入的反应液浓度过高，会导致酵母菌渗透失水死亡。加入反应液后，活塞应关闭，防止杂茵进入，活塞2应打开，使发酵产物流出。6C 解读:DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理，可以将DNA 与蛋白质进一步

24、地分离。7A 解读：对样品进行处理时，应先通过低速短时间离心的方法对红细胞进行洗涤，再加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放出血红蛋白。后将混合液置于离心管中，以2000r/min 的转速离心 10min 后分层获得血红蛋白溶液。8B 解读： PCR 是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA 拷贝。 PCR 技术依据是 DNA 的热变性原理； PCR 扩增反应中加人引物的作用是结合在模板DNA 上，提供 DNA 延伸起始位点。 DNA 聚合酶的作用是从引物的3 端开始催化 DNA 链的延伸；具有耐高温的特点。 PCR的反应过程一般经历三十多个循环

25、，每次循环都包括变性：90以上时，双链 DNA 解旋为单链；复性：温度下降到50左右时，溶液中的两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；延伸：温度上升到72左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA 聚合酶的作用下，根据剪辑互补配对原则合成新的 DNA链。这样可以在几小时内复制出百万个基因。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 13 页，共 15 页14 / 15 9B 解读：一般来说原料颗粒小，萃取温度高，时间长，需要提取的物质能够充分溶解，萃取效果较好。萃取过程要避免明火加热，采用水浴加热，其原因是有机溶剂都是易燃物，直接使用明火加

26、热容易引起燃烧、爆炸。在加热瓶口安装冷凝回流装置的目的是防止有机溶剂的挥发。提取的胡萝卜素用纸层析法进行鉴定，看萃取样品是否出现了和标准样品一样的层析带，若出现说明实验成功，否者不成功。10D 解读：主要考查了酶的专一性和温度对酶活性的影响。高温和低温虽然都降低了酶的活性，但高温破坏了酶的空间结构，低温并没有破坏酶的活性。 A组胶片上的蛋白膜快速消失，证明该高效加酶洗衣粉含有高效碱性蛋白酶，并且催化效率高。在0和 75时，洗衣粉中酶的催化效率基本都接近为零，但温度再度回到45，后者的催化作用已不能恢复，前者却可以，这是因为高温时酶的结构已遭破坏。11 (1 样品处理粗分离纯化纯度鉴定(2防止血

27、液的凝固红细胞的洗涤 (2 分 血红蛋白的释放 (2 分 (3将样品中分子量较小的杂质蛋白除去(2 分 透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内 (2 分 (4 通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去 (2 分 解读：主要考查蛋白质分裂与鉴定的基本原理及实验流程。分离、提取血红蛋白的实验流程大致是样品处理粗分离纯化纯度鉴定四个步骤。柠檬酸钠是一种抗凝剂，加入柠檬酸钠可以防止血液凝固；样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液；洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化。透析袋一般是用硝酸纤维素制成的，透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内，透析可

28、以去除样品中分子量较小的杂质或用于更换样品的缓冲液。凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法，因此通过凝胶色谱法去除相对分子质量较大的杂质。12(15 分 (1 层析液各种色素随层析液在滤液上的扩散速度不同(2分 能(2碱基互补配对原理变性、复性和延伸 (2分 DNA(36 (4F2C和 F2两者的 DNA 指纹图谱完全相同 (2 分 (5 电泳的电压、被测分子的大小、被测分子的形状、凝胶的种类密度等( 任写 3 个，3分 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 14 页，共 15 页15 / 15 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 15 页，共 15 页