2022年微生物实验教案实验.docx

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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案课程名称：医学微生物学 任课老师：授课对象：授课地点：外形学试验室课时量：个学时授课日期：讲授方法：示教法、试验教学法 教具： CAI 课件、显微镜、玻片、香柏油、去油剂等讲授课题：试验一细菌的外形与结构【目的要求】1、学会正确使用显微镜油镜及其爱护法 2、熟识细菌的基本外形 3、熟识细菌的鞭毛、荚膜、芽胞【教学重点】油镜的使用和爱护、细菌的基本外形、特别结构【教学难点】油镜的使用原理及方法【摸索题】 1、如何识别油浸镜？油浸镜的使用步骤怎么样？2、镜下观看细菌染色标本时应留意哪些方面？【参考文献 】名师归纳总结 1、刘晶星主

2、编 . 医学微生物学与寄生虫学（第三版）. 人民卫生出版第 1 页,共 45 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案社, 2002,7 2、唐珊熙主编 . 微生物学与微生物学检验 卫生部规划教材 . 人民卫生出版社, 2001,2；【板书设计】一、试验一细菌的外形与结构试验目的1、学会正确使用显微镜油镜及其爱护法2、熟识细菌的基本外形 3、熟识细菌的鞭毛、荚膜、芽胞 二、试验内容（一）试验室规章（二） CAI 课件学习（三）油镜的使用 1 、原理 2 、使用方法 3 、爱护法（四）细菌的基本外形的观看（操作）（五）细菌的特别结构的观看（

3、操作）【教学步骤】导言 : 细菌的外形学检查是细菌检验的重要方法之一, 可依据其外形、 结构和染色性初步确定其种属,对准时选用抗生素治疗疾病有肯定参考意义；试验一 细菌的外形与结构 一、试验目的 1、学会正确使用显微镜油镜及其爱护法 2、熟识细菌的基本外形名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案3、熟识细菌的鞭毛、荚膜、芽胞 二试验内容 一 试验室规章 庄重认真,室内保持寂静；认真听讲,认真操作,课前预习,按时完成试验报告；留意安全,防止发生事故和试验室感染；穿好工作服 , 不要用手 摸头面部, 禁止将

4、食物带入试验室或将试验室物品带出；用过的试验器材 放在指定地方；如发生事故,应立刻报告老师；离开试验室前,请洗手；爱惜公物, 节省使用试验材料；如有损坏应立刻报告老师并进行 登记,听候处理；试验后打扫卫生,关好水电门窗； 二 CAI课件学习细菌的三种外形、排列、镜下可见的三种特别结构（三）显微镜油镜的使用及爱护法 1、油镜的识别“ 油” 、“ oil ” 、“ HI” Homogeneous Immersion 放大倍数“ 100 ” 2、油浸镜的使用原理（绘图讲解）香柏油的折光率近似于玻片的折光率,滴加香柏油能削减光线的折 射；名师归纳总结 3、油浸镜的使用及爱护法第 3 页,共 45 页-

5、 - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案低倍镜对光 开 ；光线宜强：用凹面采光； 聚光器上升； 光圈全部打滴油,转换油浸镜； （留意油量,载物台应平放）调焦（先粗后细,留意油浸镜始终浸泡在油中）；爱护法：洁净纸二甲苯 去油剂 洁净纸（一字法擦） ； 四 细菌基本外形的观看 操作 1、葡萄球菌（ G+,菌体球形,葡萄状排列） 、2、痢疾杆菌（ G-、杆状、短小、散在排列）3、水弧菌 G- ,菌体弯曲成弧状、散在排列 五 细菌特别结构的观看 操作 留意菌体和各特别结构的颜色,鞭毛的数目、外形、长短和位置,荚膜的厚度,芽胞的外形、大小、位置； 1、

6、鞭毛 变形杆菌 ：周鞭毛,有的脱落了；菌体和鞭毛都呈红色； 2、荚膜 肺炎球菌 ：菌体成双排列,紫色,荚膜无色； 3、芽胞 破伤风杆菌 ：菌体 G+杆状,顶端有一个圆形较菌体大的不着色的芽胞；小结：油浸镜的使用关键是： 光线宜强, 调焦过程中始终保持油镜头浸在油名师归纳总结 中,即油镜头与玻片间无空气段；第 4 页,共 45 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案课程名称：医学微生物学 任课老师：授课对象：授课地点：外形学试验室课时量：个学时授课日期：讲授方法：示教法、试验教学法 教具： CAI 课件、显微镜、玻片、香柏油、去油剂等 讲

7、授课题： 试验二 革兰氏染色法【目的要求】把握革兰氏染色法、熟识细菌涂片的制备【教学重点】革兰氏染色方法、结果【教学难点】脱色时间的把握 授课时数： 2 学时 讲授方法：试验教学法、示教法 教具：示教用玻片、混合菌液、染液、显微镜、粉笔等板书设计：试验二革兰氏染色法（ Gram Stain ）一、试验目的 二、试验器材 1 、混合菌液（葡萄球菌与水弧菌） 、水弧菌名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案2、染色液：结晶紫染液、卢戈氏碘液、95%酒精 , 稀释复红3、其它：玻片、酒精灯、接种环、显微镜等

8、三、试验原理（略）四、试验步骤及方法 五、试验结果（绘图）六、临床意义 七、留意事项 教学步骤：导言：最经典、 最常用的细菌鉴别染色法是革兰氏染色法；由丹麦学 者革兰首创；试验二 革兰氏染色法（ Gram Stain ）一、原理G+菌细胞壁致密、含粘肽多、95%的酒精不易进入,且能使细胞壁脱水浓缩、通透性减低,使胞内染料一碘复合物不易脱出,仍为紫色；而 G一菌细胞壁疏松、含粘肽少、脂质多、而使之脱色,复染后为红色；二、步骤 1、制片：涂片：要求薄而匀称95%的酒精溶解脂质后易进入细胞干燥：可自然干燥或在火焰上方利用热空气干燥名师归纳总结 固定：涂膜面对上,在火焰外焰以中等速度通过三次,以玻片反

9、面第 6 页,共 45 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案触及手背皮肤不烫为宜 . 固定的目的是什么？ 2、染色：初染：结晶紫染液 1 分钟 媒染：卢戈氏碘液 1 分钟 脱色： 95%酒精约 30 秒复染：稀释复红1 分钟G+菌,染成红色的为G菌3、结果：（绘图）染成紫色的为4、临床意义（提问）5、留意事项：涂片要薄而匀称 固定温度要相宜脱色时间要把握好 染液的质量、菌龄等要留意（5）染液要匀称掩盖在菌膜上 小结：革兰氏染色的关键在于严格把握脱色程度,此外,其结果与培育基 成分,培育条件,菌龄及操作技术等有关；摸索题：影响革兰氏染色

10、结果的因素有哪些？参考文献：1、柴顺根主编 . 临床微生物学及检验试验指导 . 吉林科技出版社,1995 名师归纳总结 2 、 刘晶星主编 . 医学微生物学与寄生虫学（第三版）. 人民卫生出第 7 页,共 45 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案版社, 2002,7 课程名称：医学微生物学 任课老师：授课对象：授课地点：外形学试验室课时量：个学时授课日期：讲授方法：示教法、试验教学法教具： CAI 课件、显微镜、玻片、香柏油、去油剂等讲授课题：试验三细菌的生理【目的要求】 1、明白培育基的制备程序； 2、把握细菌在液体、半固体、固体

11、培育基中的生长现象； 3、把握细菌的接种法；【教学重点】细菌在液体、半固体、固体培育基中的生长现象【教学难点】细菌的接种法；授课时数： 2 学时 讲授方法：试验教学法、示教法 教具：培育基成分、菌钟、接种环、酒精灯等名师归纳总结 板书设计：试验三 细菌的生理学第 8 页,共 45 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案一试验目的 1 、明白培育基的制备程序； 2 、把握细菌在液体、半固体、固体培育基中的生长现象； 3 、把握细菌的接种法；二试验内容 一 培育基的种类及制备程序（示教）操作 二 细菌的接种法 三 细菌培育法 四 细菌在培育

12、基中生长现象的观看 示教 教学步骤：试验三 细菌的生理学 一、培育基的种类及制备程序（示教）（一）培育基的种类：1、按用途可分为：基础培育基、养分培育基、鉴别培育基、挑选培 养基、厌氧培育基；2、按理化性状可分为：固体培育基、液体培育基、半固体培育基；（二）基础培育基的制备程序：调配溶化订正 PH值（目测比色 法）过滤澄清分装灭菌（此两步依详细情形而定）检定 质量检 验、无菌检验 冰箱储存；1、调配 量筒取 800ml 蒸馏水,先加入少量到三角烧瓶中、 再按基础培育基配名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优

13、秀教案方用天平精确称取各成分, 称好后连用纸一并放入三角烧瓶,然后再以剩 余的水冲洗瓶壁；2、溶化 用玻棒轻轻搅拌, 并将称量纸轻轻挑出, 也可放在电炉上隔着石棉网加热溶化或（在水浴箱中）隔水溶化；4、矫正 PH值： 矫正时应比实际需要的PH用比色法（单管法、在四孔比色架上进行高 0.1 0.2 留意加碱或加酸时要精确缓慢,加其次滴（有时需掌握半滴）4、过滤澄清：可省 5、分装：量不宜超过 2/3 每加一滴后要充分混匀, 比色不足再琼脂斜面：试管的,制成斜面长度约试管长度的,趁热将试管斜置,保持试管下端有1cm柱高；平板：9cm平皿倾注培育基 1315ml,倾注平板先轻摇, 使培基平铺再静置

14、, 待凝固； 倾平板时,让培育基盖过平板底部 4/5 ,此时量即可）斜面、平板都先灭菌后分装、倾注平板、需先冷至 500C再倾注、避免过多冷凝水；（斜面可先分装后灭菌、防止污染）6、灭菌：高压蒸气法121.30C,15 30 分钟 15磅/ 英寸2、0.103MPa/cm2、1.05Kg/cm2 滤过除菌法：用于糖溶液、尿素、血清及其他因加热即破坏的物质；名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案7、检定：无菌检验和质量检查 8、储存； 40C冰箱、主要是防止干枯、变质、污染、不宜贮存过久,液体培育基应

15、直立放置,琼脂平板应将底朝上,盖在下（倒置）,用牛皮 纸包裹或装于保鲜袋内,以削减水分蒸 二、细菌的接种法 操作 人工培育细菌时,需将标本（细菌）接种于培育基再行培育；（一）、接种工具的有关学问 接种环：常用于挑标本、菌液、划线接种；接种针：常用于挑菌落、穿刺接种、斜面接种；（二）、接种程序 灭菌接种环（针）俟冷沾取细菌标本进行接种（包括启盖或塞、接 种划线、加盖或塞）进行接种环（针）灭菌（三）、接种法（依不同用途和不同培育基而定）1、平板划线接种法（1）、曲线划线法（2）、分区划线法接种环与培育基表面呈45 度角划线,利用手腕的力气快速在平板上左右来回作密而不重的曲线连续划线,充分利用平板；

16、分区划线时,每画一区要烧灼接种环, 后一区的划线与前一区相交数次后,后面的划线不相交；名师归纳总结 2、斜面划线法第 11 页,共 45 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - （1 ）纯培 养名师精编存优秀教案,可用接种环和保菌种 时也 可 用 接 种 针 ； 先 从 斜 面 底 部 沿 斜 面 向 上 划 一 条 直 线 , 再 在 斜面作“S” 划线；（ 2 ）、 鉴 别 培 养 基 中 用 接 种 针 、 先 穿 接 种 、 再 在 斜面作“S” 划线；留意：挑了菌的接种环不要接触试管壁；3、液体培育基接种法此 接 种 法 应 避 免 接 种 环

17、与 液 体 过 多 的 接 触 ,以免形成气溶胶,造成试验室污染；4 、半固体 培养基接种法 （穿刺接种法）不能穿透究竟,退出时应按原路线退出；三、培育法1、需氧培育法 370C恒温箱倒置培育 （平板）,试管就竖直在试管架上培育, 1824h 后观看；2、厌氧培育法 3、二氧化碳培育法四、细菌在培育基中生长现象的观看 示教 接种后细菌经一般培育法 1. 在液体培育基中 需氧培育法 37 24h 后观看结果；名师归纳总结 匀称混浊如葡萄球菌 ; 第 12 页,共 45 页沉淀形成如链球菌 ; - - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案形成菌膜

18、如枯草杆菌； 2. 在固体培育基中 菌落：不同细菌的菌落其大小、 外形、边缘、凹凸、色泽、透亮度、溶血等不同；菌苔； 3. 在半固体培育基中 沿穿刺线生长 : 无动力 ; 向穿刺线四周扩散生长: 有动力；留意事项： 1. 接种时不能划破培育基； 2. 严格无菌操作；3、分区划线每划完一区需烧灼接种环；液体接种时防止将接种环在 液体培育基中搅拌形成气溶胶造成污染；4、接种后准时标上标鉴,标明菌种、时间、姓名；小结：细菌接种在适当的培育基中, 经适当的培育基可形成肉眼可见的生长现象,并依不同的生化反应结果进行鉴定；摸索题： 1. 固体、液体、半固体培育基各有何用途？2、简述平板划线接种的目的；参考

19、文献：名师归纳总结 - - - - - - -第 13 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案1. 刘晶星主编 . 医学微生物学与寄生虫学（第三版）. 人民卫生出版社, 2002,7 名师归纳总结 2.倪语星主编,微生物学与微生物学检验试验指导 卫生部规划教第 14 页,共 45 页材 ,人民卫生出版社,2000,2；- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案课程名称：医学微生物学 任课老师：授课对象：授课地点：外形学试验室课时量：个学时授课日期：讲授方法：示教法、试验教学法教具： CAI 课件、

20、显微镜、玻片、香柏油、去油剂等讲授课题：试验四细菌的分布、消毒灭菌【目的要求】1、 证明细菌在自然界和人体的分布 2、树立无菌观念 3、验证高温、紫外线、化学消毒剂对细菌的影响 4、熟识常用的消毒灭菌器【教学重点】细菌在自然界和人体的分布【教学难点】无菌观念的树立 授课时数： 2 学时 讲授方法：试验教学法名师归纳总结 - - - - - - -第 15 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案教具：菌种、培育基、棉签、化学消毒剂等 板书设计：试验四 细菌的分布、消毒灭菌 一、试验目的 1、实细菌在自然界和人体的分布 2、树立无菌观念 3、验证高温、

21、紫外线、化学消毒剂对细菌的影响 4、熟识常用的消毒灭菌器 二、试验内容 1、空气中细菌的检查（操作）2、咽喉部细菌的检查（操作）3、手指皮肤消毒前后的细菌的检查（操作）4、煮沸消毒试验 示教 5、紫外线杀菌试验（操作）6、药敏试验（操作） 7、常用消毒灭菌器的介绍 示教 教学过程：导言：细菌广泛存在于自然界和人体,今日用试验的方法证明细菌在自然界和人体的存在以及外界因素对细菌的影响；名师归纳总结 一、试验四细菌的分布、消毒灭菌第 16 页,共 45 页空气中细菌的检查（操作）- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案沉降法：取一般琼脂,打开皿

22、盖、露于空气中10 分钟,盖盖 , 在皿底注明班组、姓名,倒置于 370C温箱培育, 24h 后观看；结果：计数琼脂平板上的菌落数及外形分析：空气中有细菌的分布二、咽喉部细菌的检查（操作）1、咽拭子法：用无菌棉拭在咽部涂取分泌物,然后将此棉拭涂布于血平板表面, 37 0C24h培育；2、咳碟法：取血平板一个,打开盖,置口腔前 3-5 次,然后盖盖, 37 0C24h培育；结果：观看菌落数、外形,是否有溶血环；三、手指皮肤消毒前后的细菌检查（操作）10cm 处,用力咳嗽取大琼脂平板、分五等份,底部贴标鉴,甲、乙两同学在“ 消毒前”区用手指涂抹,然后取络合碘消毒此手指,再分别在“ 消毒后” 区涂抹

23、,盖盖, 370C24h培育；结果：观看各区菌落数、外形 分析：皮肤表面有细菌存在,络合碘可用于皮肤的消毒； 四 煮沸消毒试验 示教 依下表操作：试管号 1 2 3 4 名师归纳总结 接种菌大肠杆菌大肠杆菌枯草杆菌第 17 页,共 45 页水浴煮沸 5煮沸煮沸- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 24h 培育培育名师精编优秀教案培育培育培育结果澄清混浊菌膜澄清 五 紫外线杀菌试验 操作 原理： 复习提问 方法：遍；1、在平板上涂布接种葡萄球菌,每涂 1 遍后转 60 再涂 1 遍,共 3 2、贴放纸片； 3、紫外线照耀 2030分钟 去盖 ； 4、去掉纸片

24、, 3724h 培育；结果：原 E 字纸片掩盖处有菌苔生长；分析： 1. 紫外线有杀菌作用； 2. 紫外线穿透力弱； 六 药敏试验 操作 方法： 1、接种细菌 涂布接种 ； 3 2、贴放药物纸片；、滤菌器、培育后观看结果,测量抑菌圈直径； 1 七 常用消毒灭菌器的介绍 示教 、高压蒸气灭菌器 2、干烤箱 3小结：名师归纳总结 细菌分布广泛,应树立严格的无菌观念,在试验操作及临床实践应第 18 页,共 45 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案严格无菌操作；在临床工作中应依不怜悯形挑选适当的消毒灭菌方法；摸索题：1、紫外线的杀菌机理是什

25、么？适用范畴是什么？ 2、明白微生物的分布对护理工作有何指导意义？参考文献：1、倪语星主编微生物学和微生物学检验指导（第 1 版,卫生部规 划教材）人民卫生出版社, 1999,7 2、李振林主编,微生物学及检验技术试验指导,广西科技术出版社, 1997,5 名师归纳总结 - - - - - - -第 19 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案课程名称：医学微生物学任课老师：授课对象：授课地点：外形学试验室课时量：个学时授课日期：讲授方法：示教法、试验教学法教具： CAI 课件、显微镜、玻片、香柏油、去油剂等讲授课题：试验五病原性球菌【目的要求】1

26、. 把握常见化脓性细菌的外形、染色特点和培育特点； 2. 熟识葡萄球菌的色素, 金葡菌、甲、乙型溶血性链球菌的溶血现象； 3. 把握血浆凝固酶试验、 ASO试验的临床意义；【教学重点】血浆凝固酶试验、 ASO试验的临床意义；【教学难点】ASO试验胶乳法原理授课时数： 3 学时讲授方法：讲授法、示教法名师归纳总结 - - - - - - -第 20 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案教具：显微镜、细菌培育物、玻片、接种环等板书设计：试验五 病原性球菌一、试验目的 1、把握常见化脓性细菌的外形、染色特点和培育特点； 2、熟识葡萄球菌的色素,金葡菌、

27、甲、乙型溶血性链球菌的溶血现象； 3、把握血浆凝固酶试验、ASO试验的临床意义；二、试验内容 一 病原性球菌外形的观看 示教 二 葡萄球菌、链球菌培育物的观看 示教 三 血浆凝固酶试验 操作 四ASO试验 胶乳法 教学过程：试验五病原性球菌 示教 一、病原性球菌外形的观看留意观看其外形、大小、排列及染色性；二、葡萄球菌、链球菌培育物的观看 示教 1、一般琼脂上葡萄球菌可产生三种不同的脂溶性色素,依此分为三类：金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、表皮葡萄球菌；名师归纳总结 2、血液琼脂上金葡菌有宽而透亮的溶血环,而白葡菌、表葡菌无溶第 21 页,共 45 页- - - - - - -精选学习资料 -

28、- - - - - - - - 名师精编 优秀教案血环； 3、血液琼脂上,乙链菌落四周有宽而透亮的溶血环,甲链四周有窄的草绿色溶血环,丙链四周无溶血环； 三 血浆凝固酶试验 -玻片法 操作 1、原理：致病性的葡萄球菌能产生血浆凝固酶,可使血浆中纤维蛋白原变为不溶性纤维蛋白,附着于细菌表面,在玻片上形成凝块； 2、方法：在玻片的左右两侧各滴 1 滴生理盐水,左侧加金葡菌培育物少许,右侧加表皮葡萄球菌培育物少许,磨成细菌悬液,左右两侧各加血浆 1 滴,混匀,立刻观看结果； 3、结果：左侧显现凝集块,右侧匀称混浊； 4、意义：为鉴定葡萄球菌有无致病性的一个重要指标； 四 ASO 试验 胶乳法 1、原

29、理：ASO高滴度的病人血清被适量的溶血素“ O” ASO中和后,失去了正常水平量的抗体, 余外的 ASO与 SLO胶乳试剂反应, 显现清楚均匀的凝集颗粒； 2、方法：在反映板三孔上分别滴加稀释血清,阳性和阴性对比血清 1 滴50 l ；各孔内滴 1 滴溶血素“O” 溶液,轻摇 1 分钟混匀；各孔内滴 1 滴 ASO胶乳试剂,轻摇 3 分钟 室温 1820 ,观看结果； 3、结果：显现清楚凝集者为阳性 ASO 400IU/ml; 不凝集为阴性 ASO250IU/ml ；名师归纳总结 - - - - - - -第 22 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优

30、秀教案 4、临床意义： ASO阳性可认为患者近期受溶血性链球菌感染过,可帮助诊断风湿热,肾小球肾炎等疾病；留意事项： 1、血浆凝固酶试验滴加生理盐水不应过多,以免影响结果观看,观察结果时应在暗视野背景下观看； 2、ASO胶乳试剂加入后应在规定时间内观看结果,超过规定时间出现凝集的不列为阳性；待检血浆、SLO、ASO胶乳所加的量应等同；待检血清与 SLO须反应 2 分钟后才能加 ASO胶乳；3、血浆凝固酶试验、 ASO试验所用过的玻片 , 应立刻投入消毒液缸,防止试验室污染；三、浓汁标本的细菌检验程序 简介 摸索题： 1、固体、液体、半固体培育基各有何用途？. 2、ASO试验、血浆凝固酶试验的原

31、理是什么参考文献：1、刘晶星主编 . 医学微生物学与寄生虫学（第三版）. 人民卫生出版社,2002,7 名师归纳总结 2、倪语星主编,微生物学与微生物学检验试验指导 卫生部规划教第 23 页,共 45 页材 ,人民卫生出版社,2000,2；- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案课程名称：医学微生物学 任课老师：授课对象：授课地点：外形学试验室课时量：个学时授课日期：讲授方法：示教法、试验教学法教具： CAI 课件、显微镜、玻片、香柏油、去油剂等讲授课题：试验六、肠道杆菌【目的要求】 1 、明白肠道杆菌外形与常用的生化反应； 2 、明白粪便

32、中致病性肠道杆菌的分别与鉴定； 3 、把握肥达氏反应的原理、临床意义；【教学重点】肥达氏反应的原理、临床意义；【教学难点】粪便中致病性肠道杆菌的分别与鉴定；授课时数： 3 学时名师归纳总结 - - - - - - -第 24 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案讲授方法：讲授法、示教法 教具：显微镜、细菌培育物、试管等 板书设计：试验六 肠道杆菌 一试验目的 1、明白肠道杆菌外形与常用的生化反应； 2、明白粪便中致病性肠道杆菌的分别与鉴定；二试验内容 一 肠道杆菌外形观看 示教 二 肠道杆菌培育物与生化反应结果的观看 示教 三 粪便标本的细菌检验

33、程序 简介 四 肥达氏反应 示教 教学过程：试验六 肠道杆菌 一、肠道杆菌外形观看 示教 肠道杆菌为 G-短小杆菌、无芽胞,多有鞭毛,从外形上不能鉴定菌 种；二、肠道杆菌培育物与生化反应结果的观看 示教 将大肠杆菌、痢疾杆菌、乙型副伤寒杆菌接种到 琼脂上,培育 37 0C、24h 后观看菌落外形；SS琼脂和伊红美蓝名师归纳总结 - - - - - - -第 25 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 培育基接种菌名师精编优秀教案菌落特点SS琼脂 大肠杆菌 中等大小、红色痢疾杆菌 中等大小、无色透亮乙型副伤寒杆菌 中等大小、无色透亮伊红美蓝琼脂 大肠杆菌 中等大小、

34、紫红色痢疾杆菌 中等大小、无色透亮乙型副伤寒杆菌中等大小、无色透亮将大肠杆菌、痢疾杆菌、乙型副伤寒杆菌菌落转种到 KIA、MIU上,培育 370C、24h 后观看生化反应结果； KIA MIU 接种菌 底层 斜面 产气 H 2S 动力 吲哚 尿素酶大肠杆菌 黄色 黄色 + + + 痢疾杆菌 黄色 红色 + 乙型副伤寒杆菌 黑色 红 + + + 三、粪便标本的细菌检验程序 简介 粪便标本分别致病菌初步鉴定最终鉴定方法：取材： 依据不同疾病与病程采集不同标本；实行粪便标本应取脓血、粘液便置清洁器内立刻送检；如不能准时送检,用甘油缓冲盐水储存；无法获得粪便时,可用无菌棉拭经生理盐水潮湿后,插入肛门内

35、45cm处轻轻沿肠壁转动一圈后取出,放入含少量甘油缓冲盐水的无菌试管中送检；名师归纳总结 - - - - - - -第 26 页,共 45 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案分别培育：将标本划线接种于S.S 琼脂平板上或 EMB琼脂平板上；鉴别培育： 从上述平板中挑取无色透亮的可疑菌落,接种在半固体 双糖铁培育基上进行纯培育及初步鉴定；最终鉴定：依据初步的鉴定,用诊断血清做玻片凝集试验,再挑选 其它的生化反应 单糖发酵、靛基质试验等 ,得出最终结果；四、肥达氏反应 12 周即可在血 1、原理：人感染伤寒杆菌、副伤寒杆菌之后,约经 清中显现相应的抗体 凝集素

36、,此种抗体与伤寒、 副伤寒杆菌相混合,在 适量电解质参加下可显现凝集现象；肥达氏反应是用已知的伤寒杆菌的 O抗原、 H抗原、甲型、乙型副伤寒杆菌的H抗原与病人血清作定量试管凝集,以测定血清中是否含相应的抗体及抗体的效价,来帮助诊断伤寒和副伤寒；2、试验步骤 A、稀释待检血清取干燥洁净的小试管28 支,以四排七列摆于试管架上并标记序号；以 5ml 吸管吸取生理盐水 3.8ml ,放入另一较大的稀释试管内,再以 1ml 吸管吸取待检血清0.2ml 加入生理盐水中混匀, 即成 1：20 的稀释血清；吸取 2ml 分别加入第一列各管中,每管 0.5ml ；再向盛有 1：20 血清的稀释管内加入生理盐水

37、2ml 混匀,即稀释成名师归纳总结 1：40 血清,吸取 2ml,分别加入其次列各管中,每管0.5ml ,如上述继第 27 页,共 45 页续操作至第六列各管, 此时血清之稀释度从第一管到第六管分别为1：20、- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师精编 优秀教案1：40、1：80、1：160、1：320、1：640； B向第七管各管中加入生理盐水 0.5ml 不加血清 以作对比；、加诊断菌液 依据第一排 1-7 管加入伤寒杆菌“H” 菌液,其次排各管加入伤寒杆菌“O” 菌液,第三排各管加入甲型副伤寒杆菌“H” 菌液 PA ,第四排加入乙型副伤寒杆菌“H

38、” 菌液 PB ,每管均加入菌液 0.5ml ；这样血清原有稀释度又被稀释了一倍,各排从第 16 管中的血清最终稀释度为 1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280；振荡试管架,使其混合匀称,置37温箱过夜或8 小时,其次天观看结果；结果观看：按试管定量凝集反应结果的观看方法,确定凝集效价；即试管底部见到明显凝集块, 上液呈中度混浊的试管为效价管 + ；临床上应以两次标本 病程早期, 复原或中期 的血清效价有无明显上升, 作为新近是否感染的指征；单位血清凝集效价“O” 应达到 1：80 以上,“ H”应达到 1：160 以上, PA或 PB应达到 1：80 以上,才具

39、有帮助诊断伤寒、副伤寒的价值；摸索题：1、肥达氏反应的原理是什么？ 2 、为什么肥达氏反应中 参考文献：O抗原只用一种,而 H抗原就用三种？名师归纳总结 1、本教研室编写的医学微生物学试验指导,2000,1；第 28 页,共 45 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 2名师精编优秀教案 卫生部规划教、倪语星主编,微生物学与微生物学检验试验指导材 ,人民卫生出版社,2000,2；课程名称：医学微生物学 任课老师：授课对象：授课地点：外形学试验室课时量：个学时授课日期：讲授方法：示教法、试验教学法 教具： CAI 课件、显微镜、玻片、香柏油、去油剂等讲授课题：试验七弧菌、厌氧菌