2022年分子生物学复习重点.docx

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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载1.孟德尔（奥地利）的遗传学规律最先使人们对性状遗传产生了理性熟悉；Morgan（美）的基因学说就进一步将 “性状”与“基因 ”相耦联,成为分子遗传学的奠基石；2.1962 年, Watson和 Crick 由于在 1953 年提出 DNA 的反向平行双螺旋模型而 与 Wilkins 共获 Noble 生理医学奖,3.1961 年,法国科学家 Jacob和 Monod 提出并证明了操纵子（ operon）作为调剂 细菌细胞代谢的分子机制；4.基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子,构成遗传物 质的新组合,使之

2、进入原先没有这类分子的寄主细胞内并进行连续稳固的繁殖和表达；5.基因工程技术是核酸操作技术的一部分,种不同的寄主细胞中的繁殖与性状表达；只不过它强调了外源核酸分子在另一6.染色体具备哪些作为遗传物质的特点 :1,结构稳固； 2,能稳固的自我复制； 3,其上的基因能够掌握蛋白质合成；4,能够产生可遗传的变异；7.组蛋白的特性：. 进化上的极端保守性. 无组织特异性. 肽链上氨基酸分布的不对称性（碱性氨基酸分布在 N 端；疏水基团在 C 端）. 存在较普遍的修饰作用（甲基化、乙酰化、磷酸化等）8.在 RNA 的合成中, DNA 的二条链中仅有一条链可作为转录的模板,称为转录的不对称性；9.与 mR

3、NA 序列相同的那条DNA 链称为编码链； 将另一条依据碱基互补原就指导 mRNA 合成的 DNA 链称为模板链；10.转录单元（ transcription unit）一段从启动子开头至终止子终止的 DNA 序列；11.启动子定义：指能被 RNA 聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段 DNA 序列；12.TATA 区：酶的紧密结合位点（富含 AT 碱基,利于双链打开）TTGACA 区：供应了 RNA 聚合酶全酶识别的信号13.核心启动子 定义：指保证 RNA 聚合酶转录正常起始所必需的、 最少的 DNA序列,包括转录起始位点及转录起始位点上游 TATA 区14.转录起始位点的识别： RNA

4、聚合酶与启动子 合的过程；DNA 双链相互作用并与之相结15.帽子结构功能：能被核糖体小亚基识别,促使 mRNA 和核糖体的结合；m7Gppp 结构能有效地封闭 mRNA 5 末端,以爱护 mRNA 免受 5 核酸外切酶的降解,增强 mRNA 的稳固；多聚腺苷酸尾巴功能：提高了 mRNA 在细胞质中的稳固性；16.RNA 合成与 DNA 合成异同点：相同点： 1、都以 DNA 链作为模板, 2、合成的方向均为 5 3 ,3、聚合反应均是通过核苷酸之间形成的 3 ,5 -磷酸 二酯键,使核苷酸链延长；17.RNA 合成与 DNA 合成不同点：名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共

5、 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载18.抗菌素对蛋白质合成的作用： 1、阻挡 mRNA 与核糖体结合； 2、阻挡 AA-tRNA与核糖体结合； 3、干扰 AA-tRNA 与核糖体结合而产生错读；4、作为竞争性抑制剂抑制蛋白质合成；如链霉素能干扰 fMet-tRNA 与核糖体的结合,而阻挡蛋白质合成的正确起始,也会导致 mRNA 的错读；19. 在生理条件下,核酸分子中的磷酸基团是离子化的,所以,DNA 和 RNA实际上呈多聚阴离子状态（Polyanions）；将 DNA 、RNA 放到电场中,它就会由负极正极移动；20. 在大多数核酸杂交反应中,常用的

6、滤膜有尼龙滤膜、硝酸纤维素滤膜等等；21.核酸分子杂交试验包括如下两个步骤：1.将核酸样品转移到固体支持物滤膜上,这个过程特称为核酸印迹 nucleic acid blotting 转移,主要有电泳凝胶核酸印迹法、斑点和狭线印迹法 dot and slot blotting、菌落和噬菌斑印迹法 colony and plaque blotting；2.将具有核酸印迹的滤膜同带有放射性标记或其它标记的 杂交；所以有时也称这类核酸杂交为印迹杂交；DNA 或 RNA 探针进行22. 细菌的转化 -所谓细菌转化, 是指一种细菌菌株由于捕捉了来自另一种细菌 菌株的 DNA ,而导致性状特点发生遗传转变的

7、生命过程；这种供应转化 DNA 的菌株叫做供体菌株,而接受转化DNA 的寄主菌株就称做受体菌株；大肠杆菌是最广泛使用的试验菌株；在加入转化 DNA 之前,必需预先用 CaCl2 处理大肠杆菌细胞,使之呈感受态（Competent Cells）；Mg2+对维护外源 DNA 的稳固性起重要作用,质粒 DNA 中的抗生素是选择标记；23. PCR（聚合酶链式反应）技术：是一种在体外快速扩增特定基因或 DNA 序列的方法；也是体外酶促合成特异 DNA 片段的方法；24.一个 PCR 体系的基本组成：超纯水,缓冲液,Mg 2+,dNTPs,DNA 模板,引物, TaqDNA 聚合酶25. PCR 的主要

8、步骤： .高温变性 -在高温（ 93-95）下,待扩增的双链 DNA模板受热变性成为两条单链 DNA 模板； .低温退火 -在低温（ 3760）情形下,两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA 模板结合,形成部分双链；.适温延长 -在 TaqDNA 聚合酶的最适温度（ 72）下,以引物3-OH 端为合成的起点,以脱氧核苷三磷酸（dNTPs）为原料,按53方向延长 ,合成单链 DNA 模板的互补链；26.转化子选择指示系统蓝白斑选择 在培育基中加入诱导物 IPTG（异丙基硫代半乳糖苷）和底物 x-gal, IPTG 诱导 LacZ 表达产生 .-半乳糖苷酶,.-半乳糖苷酶使 x-gal 水解

9、,产生兰色化合 物,形成兰色菌落；当插入外源片段,使LacZ 基因失活,形成无色菌斑；名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载27. 基因组 genome一个细胞或病毒所携带的全部遗传信息或整套基因；28.* 基因表达 gene expression基因经过转录、翻译,产生具有特异生物学功能的蛋白质分子的过程；29.基因表达是受调控的,可在多个层次上进行,包括：基因水平、转录水平、转录后水平、翻译水平、翻译后水平的调控；30.基因表达的时间性及空间性（一）时间特异性 -按功能需要,某一特定基因的表达严格按

10、特定的时间次序发生,称之为基因表达的时间特异性temporal specificity；多细胞生物基因表达的时间特异性又称阶段特异性 stage specificity；（二）空间特异性 -在个体生长全过程,某种基因产物在个体按不同组织空间次序显现,称之为基因表达的空间特异性 spatial specificity；基因表达相伴时间次序所表现出的这种分布差异, 实际上是由细胞在器官的分布打算的,所以空间特异性又称细胞或组织特异性cell or tissue specificity；31.操纵子：是原核生物在分子水平上基因表达调控的单位,由结构基因、启动 子、操纵基因和调剂基因组成； 通过调剂基

11、因编码的调剂蛋白与诱导物、辅阻遏物协同作用,开启或关闭操纵基因,对操纵子结构基因的表达进行正、负掌握；32.乳糖操纵子与色氨酸操纵子的基本组成以及调控机理；（略,请自行总结）33.色氨酸操纵子的弱化系统是色氨酸操纵子的其次水平掌握,它打算着已经启 动的转录是否能够连续进行下去；34.转录衰减（ attenuation）： 是指转录可正常起动,但在转录进入第一个结构基 因前即突然停止的过程； 由于这一终止作用并不能使正在进行的结构基因转录中途停止,而仅是部分中途停止转录, 所以称为转录衰减； 衰减子（attenuator）： 操纵子前导区内类似于终止子结构的一段 操纵子的转录；DNA 序列,称为

12、衰减子；其作用是减弱35.衰减作用和负控阻遏的关系：1、负控阻遏系统和衰减作用同样对色氨酸水平应答 2、衰减作用使色氨酸操纵子结构基因的转录被抑制了 10 倍（细调）；3、色氨酸阻遏蛋白的阻遏作用使转录被抑制了70 倍（粗调）；4、色氨酸水平对色氨酸操纵子结构基因的表达施加了 700 倍的调剂成效； 意义：原核生物细致的精 细调控机制,增强原核生物对环境的适应性 36.（七）衰减作用的重要性（衰减子的生物学意义）1. 活性阻遏蛋白和非活 aa 主要用 性阻遏蛋白的转变可能较慢,而 tRNA 负载与否可能更为灵敏； 2. 途是合成蛋白质,因而以 tRNA 负载情形为标准来进行掌握可能更为恰当；3

13、. 大多数这样的操纵子又同时需要阻遏蛋白；37.真核细胞与原核细胞在基因转录、 翻译及 DNA 的空间结构方面存在以下几个 方面的差异；（略；请自行找答案）38.真核生物的基因组中有许多来源相同、结构相像、功能相关的基因,将这些 基因称为基因家族；39.同一家族中的成员有时紧密地排列在一起,成为一个基因簇 gene cluster ；40.假基因是基因组中因突变而失活的基因,无蛋白质产物；一般是启动子显现 问题；41.基因丢失 -在细胞分化过程中, 可以通过丢失掉某些基因而去除这些基因的活 性；42.基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象,它使得细胞在短期 内产生大量的基因产物以满意

14、生长发育的需要,是基因活性调控的一种方式；名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载43.将一个基因从远离启动子的地方移到距它很近的位点从而启动转录,这种方 式被称为基因重排；44.按功能状态的不同可将染色质分为活性染色质和非活性染色质；活性染色质 是指具有转录活性的染色质；非活性染色质是指没有转录活性的染色质45.（二）顺式作用元件定义：影响自身基因表达活性的非编码 DNA 序列；46.启动子：在 DNA 分子中, RNA 聚合酶能够识别、结合并导致转录起始的序 列；增强子：指能使与它连锁的基因转录频率明

15、显增加的 DNA 序列；缄默子：某些基因含有负性调剂元件缄默子,起阻遏作用；当其结合特异蛋白因子时, 对基因转录47.反式作用因子定义：能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件的核心 序列上,参加调控靶基因转录效率的蛋白质；48.蛋白质直接和 DNA 结合：螺旋 -转折 -螺旋（ Helix-turn-helix ,H-T-H）锌指结 构（zinc finger）,碱性 -亮氨酸拉链（ basic - leucine zipper）,碱性 -螺旋 -环-螺旋（basic helix /loop /helix ,bHLH）,同源异形结构域真核生物可能在哪些水平上实现对基因的表达调控真核生物基因

16、表达的调控远比原核生物复杂,可以发生在 DNA 水平、转录水平、转录后的修饰、翻译水平和翻译后的修饰等多种不同层次；但是,最经济、最主 要的调控环节仍旧是在转录水平上；（一） DNA 水平的调控 DNA 水平上的调控是通过转变基因组中有关基因的数量、结构次序和活性而掌握基因的表达； 这一类的调控机制包括基因的扩增、有些转变是可逆的；重排或化学修饰； 其中1、基因剂量与基因扩增2基因丢失3DNA 重排（基因重排）酵母交配型转换；啤酒酵母交配型转换是DNA 重排的结果；（2）动物抗体基因重排 4. DNA 甲基化和去甲基化（二）转录水平的调控持家基因和浪费基因在多细胞的高等真核生物中,各种类型的细

17、胞中都有相同的一些基因在表达,这些基因的产物是维护细胞的正常结构、运动、以及参加新成代谢等生命活动所必需的, 由于它们的功能对于每一个细胞开说都是必不行少的,所以将这些基因称为持家基因（house keeping gene）；另一类基因是组织特异性基因（tissue-specific gene）,又称为浪费基因 luxury gene；这类基因与细胞的特定功能有关,是在各种组织中选择性表达的基因；如表皮的角蛋白基因、 肌细胞中的肌动蛋白基因和肌球蛋白基因等；据估量,各类细胞中的浪费基因的总和大于持家基因的数目；持家基因和浪费基因的表达调控通常发生在转录水平；前面介绍了细菌中的基因经诱导可使表达

18、效率提高千倍以上；这种极端的调控水平很难发生在真核生物基因表达中（酵母菌除外）；大多数真核生物基因经诱导可提高几倍至数十倍的表达效率；多数真核生物基因转录水平的调控是正调控；1、真核基因表达调控的顺式作用元件 顺式作用元件 cis-acting element是指 DNA 分子上对基因表达有调剂活性的特定核苷酸序列；顺式作用元件的活性只影响同一DNA 分子上的基因；这种名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载DNA 序列多位于基因上游或内含子中；真核基因的顺式作用元件按其功能可以分为：启动子、增强子和静止

19、子；启动子的结构和功能启动子是转录因子和RNA 聚合酶的结合位点,位于受其调控的基因上游,邻近基因转录起始点,是基因的一部分（图 真核生物启动子元件） ；TATA 框（TATA box）：中心位于 30位置,是 RNA 聚合酶 识别和结合位点；富含 AT 碱基,一般有 8bp,转变其中任何一个碱基都会显著降低转录活性,又称为 Hogness box；如人类的 珠蛋白基因启动子中 珠蛋白产量就会大幅度下降而引起贫血症；TATA 序列发生突变, CAAT 框（CAAT box ）：位于 7080位置,共有序列 GGCCTCAATCT ；打算启动子的起始频率；兔的 转录效率只有原先的 12； 珠蛋白

20、基因的 CAAT 框变成 TTCCAATCT ,其GC 框GC box： 110位置, GGGCGG；增强转录活性；真核基因的启动子有三个元件构成,而原核基因的启动子一般只有两个元 件, -10位置的 TATAbox 和 35位置的 TTGACAbox ；增强子的结构和功能 增强子（ enhancer）,又称强化子（ transcriptional enhancer）,是一种远端调控元件,至少距转录起始点上游100bp 以上,通常位于 700 1000处,所以又称为上游激活序列 upstream activator sequence, UAS；增强子区的跨度一般有 100200bp,和启动子一

21、样, 由一个或多个各具特点 的 DNA 序列组成,常由 812bp 的核心序列和其他序列相间排列；增强子也要通过与特定的蛋白质因子 强作用；静默子转录因子 结合而实现其对转录的增是一种类似增强子但起负调控作用的顺式作用元件；有人称为缄默基因； 静止子与相应的反式作用因子结合后,可以使正调控系统失去作用；2、真核基因调控的反式作用因子不论是启动子仍是增强子序列,他们的转录调剂功能都是通过与特定的DNA 结合蛋白的相互作用而实现的；真核生物的 RNA 聚合酶与原核生物的RNA 聚合酶不同,它本身不能启动转录,纯化了的真核生物 RNA 聚合酶在体外是不能启动转录的；因此必需事先有一套转录因子装配到启

22、动子上,RNA 聚合酶才能启动转录；这些转录因子一般并不是 RNA 聚合酶的组成成分；能直接或间接识别各种顺式调控元件并与之结合从而调控基因转录效率的各种蛋白质分子称为反式作用因子 trans-acting factor；能激活真核生物基因转录的蛋白质称为转录因子transcription factor, TF；转录因子是参加正调控的反式作用因子,是转录起始过程中 RNA 聚合酶所需要的帮助因子；名师归纳总结 这类 DNA 结合蛋白有许多种,顺式调控元件也有多种,正是不同的DNA第 5 页,共 8 页序列和不同的 DNA 结合蛋白之间在空间结构上的相互作用,以及蛋白质与蛋白- - - - -

23、- -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载质之间的相互作用,构成了复杂的基因转录调控机制；反式作用因子的结构特点 反式作用因子一般都具有三个不同功能结构域 domain；DNA 结合结构域与顺式调控元件结合的部位；对大量转录调控因子结构的讨论说明,DNA 结合结构域大多在 100bp 以下；大体上有 4种结构特点： 螺旋转角 螺旋 helix-turn-helix, HTH 结构（图 螺 旋-转角 -螺旋）、锌指 zinc finger结构（图 锌指结构）、亮氨酸拉链 leucine zipper结构（图 亮氨酸拉链）等；激活基因转录的功能结构域一般有 2010

24、0个氨基酸组成；有时一个反式作用因子可能有一个以上的转录激活区；结构特点有：含有许多带负电荷的 螺旋、富含谷氨酰胺或者富含脯氨酸；与其他蛋白质因子结合的结构域 不同的反式调控因子 （转录因子） 与顺式调控元件相互作用, 启动转录的效 率不同；2选择性启动子 有些真核生物基因具有两个或两个以上的启动子,用于在不同细胞中表达；不同启动子可产生不同的初级转录产物和不相同的蛋白质编码序列；（三）转录后调控在真核生物中,蛋白质基因的转录产物统称为核不均一 RNA ,必需经过加 工才能成为成熟的 mRNA 分子；在第三章已经讲过,加工过程包括三个方面：加帽、加尾和去掉内含子；转录后的内含子剪切过程在基因表

25、达的调控中具有重要意义；选择性 mRNA 切割 我们知道,在 DNA 水平上,真核生物基因与原核生物基因有一个明显的不同之处,也就是真核生物的基因是不连续的,外显子与内含子相间排列, 而转录的时候外显子和内含子是一起转录的；转录以后必需降内含子切除, 才能形成成熟的 mRNA 分子；这个过程成为剪接（splicing）；同一初级转录产物在不同细胞中可以用不同方式切割加工,形成不同的成熟mRNA 分子,使翻译成的蛋白质在含量或组成上都可能不同（图 选择性剪接）；（四）翻译水平的调控在真核生物中, 基因表达的调控主要发生在转录水平上,但是,翻译水平的调控也是非常重要的；阻遏蛋白与 mRNA 结合,

26、可以阻挡蛋白质的翻译；铁蛋白的功能是在细胞内贮存铁；铁蛋白mRNA 的翻译取决于铁的供应；铁供应充分, 就铁蛋白合成就多； 当细胞中没有铁时, 阻遏蛋白与铁蛋白 mRNA 结合,阻挡翻译的进行；当细胞中有铁存在时,阻遏蛋白就不与铁蛋白 mRNA 结合,使翻译得以进行；成熟的 mRNA 可以失活状态贮存起来；（五）翻译后调控 从 mRNA 翻译成蛋白质,并不意味着基因表达的调控就终止了；直接来自核糖体的线状多肽链是没有功能的,必需经过加工才具有活性； 在蛋白质翻译后的加工过程中,仍有一系列的调控机制；名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 8 页精选学习资料 - - - - -

27、- - - - 学习必备 欢迎下载1蛋白质折叠线性多肽链必需折叠成肯定的空间结构,才具有生物学功能； 在细胞中, 蛋白质的折叠必需有伴蛋白的作用下才能完成折叠；2蛋白酶切割 末端切割 有些膜蛋白、 分泌蛋白, 在氨基端具有一段疏水性强的氨基酸序列,称为信 号肽,用于前体蛋白质在细胞中的定位；信号肽必需切除多肽链才具有功能；脊椎动物胰腺中形成的胰岛素,最初的长度是105个氨基酸,称为前胰岛素原,在加工中第一将氨基端的 24个氨基酸残基切除, 成为前体胰岛素, 再将中间 的一段切除, 留下两端有活性的部分, 即21个氨基酸残基的 A 链和 30个残基的 B链,这两条链再由两个二硫键连接成有生物活性

28、的胰岛素；多聚蛋白质的切割有些新合成的多肽链含有几个蛋白质分子的序列,能的蛋白质分子；如脑下丘腺产生的一种多肽链,包括切割以后产生具有不同功 4种不同的激素分子,经蛋白酶切割以后成型； 在不同的细胞中切割的方式和位点不同,从而产生多种不同的激素,适应不同细胞生长发育的需要；3、蛋白质的化学修饰简洁的化学修饰是将一些小的化学基团,如乙酰基、 甲基、磷酸基加到氨基酸侧链上, 或者加到氨基端或羧基端； 这种修饰的方式是特异的, 不同蛋白质可 以有完全相同的修饰, 相同的蛋白质可以有完全不同的修饰；有些蛋白质经磷酸 化活化以后,在基因表达中具有重要的调控作用；复杂的修饰是蛋白质的糖基化 （glycos

29、ylation）,就是将一些分子量很大的碳 水化合物加到多肽链上；人类的 ABO 血型也是蛋白质化学修饰的典型例子；掌握 ABO 血型的是一 个复等位基因座位, 编码负责将糖基加到红细胞膜上的糖蛋白分子上的酶；这个 座位上有三个基因 （alleles）,编码三个不同的酶； 一个是将 N乙酰半乳糖胺（Nacetygalactosamine）加到糖蛋白上,表现为A 血型；其次个酶是将半乳糖（galactose）加到糖蛋白上,表现为 B 血型；第三个基因编码的是一个没有功能的酶,不能将任何糖加到糖蛋白上,表现为 O 血型；4、切除蛋白质内含子有些 mRNA 翻译的最初产物同 DNA 转录的最初产物一

30、样,具有内含子（intein）序列,位于多肽链序列的中间,经剪接后,蛋白质的外显子（extein）才能连接成为成熟的蛋白质；蛋白质内含子的切割位点非常保守；内含子前面的氨基酸通常是半胱氨酸,仅有少数是丝氨酸, 而后面总是组氨酸天门冬酰氨,紧接着内含子的外显子序列通常是半胱氨酸、丝氨酸或苏氨酸；内含子内的有些序列也是非常保守的；内含子的一个重要特点是具有自动切割加工的才能；例如,果蝇胚胎发育有 一种蛋白质 Hedgehog,其内含子就能将本身的前提蛋白切割成两个有功能的蛋 白质分子；内含子的另一个特点是, 有些切割下来的内含子具有核酸内切酶活性；这种 酶可以识别 DNA 序列中与编码自身序列对应

31、但没有自身编码序列的位置,并将其切开,使内含子的编码序列插入这个位置；假如一个细胞中与这个内含子有关名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载的基因是杂合体,一个含有编码内含子的序列,另一个不含编码内含子的序列,加工切割下来的蛋白质内含子可以切开没有编码内含子序列的 DNA ,使其插入相应序列,使杂合体成为纯合体；49.HGP 的主要任务 -人类的 DNA 测序 -四张图： 物理图、 转录图、 遗传图 、序列图 -此外仍有测序技术、人类基因组序列变异、功能基因组技术、比较基 因组学、社会、法律、伦理讨论、生

32、物信息学和运算生物学、训练培训等目的；50.、 遗传图（连锁图）距离指基因或 DNA 标记在染色体上的相对位置与遗传51.多态性：人的 DNA 序列上平均每几百个碱基会显现一些变异（variation）,并依据孟德尔遗传规律由亲代传给子代,为多态性（ Polymorphism）；从而在不同个体间表现出不同, 因而被称52.SNP：是由于单个核苷酸转变而导致的核酸序列多态；53.、物理图以已知核苷酸序列的DNA 片段（序列标签位点, sequence-tagged site,STS）为“ 路标” ,以碱基对作为基本测量单位（图距）的基因组图；54.3、转录图 以 EST（expressed se

33、quence tag ,表达序列标签）为标记,依据 转录次序的位置和距离绘制的图谱；55.EST：通过从 cDNA 文库中随机选择的克隆进行测序所获得的部分 cDNA 的5或 3端序列称为表达序列标签（56.序列图（分子水平的物理图）也是最详尽的物理图；EST）,一般长 300-500bp 左右；序列图是指整个人类基因组的核苷酸序列图,57.DNA 杂交测序原理：应用一套已知序列的寡核苷酸探针去查找靶 DNA 链上的互补序列, 靶 DNA 上的序列依据杂交情形来确定； （1）只有完全互补的 DNA序列才能杂交形成完全的双链分子；杂交效率最高；（2）有个别不互补碱基时,杂交效率下降；（3）非互补

34、碱基越多,杂交效率越差；（4）用一段寡聚核苷酸（8-mer）的全部可能的碱基排列序列作探针；8mer 探针有 4 8= 65536 种序列；（5）依据杂交效率可推断出靶 DNA 的序列；58.基因敲除技术又称基因打靶（gene targeting）；这种技术是通过基因工程的方法将一个结构已知但功能未知的基因去除,或用其他序列相近的基因取代 （又称基因敲入）,然后从整体观看试验动物,从而估量相应基因的功能；这种人为地把试验动物某一种有功能的基因完全缺失的技术称为基因敲除技术；基因敲除技术是指通过DNA 同源重组定向将外源基因插入宿主细胞染色体DNA ,从而使特定基因在细胞内或生物体内失活的过程；59.反义 RNA 技术60. RNA 干涉技术 月一次试验中,将双链最早是由 Andrew Fire 和 Craig Mellocai 两人在 1998年 2 RNA 注射给线虫,发觉其可以引起一种高效、特异的基因抑制效应,他们将这种由双链RNA 引起的特异性基因抑制现象称为RNA 干涉；RNA 干涉技术是指由短的双链 RNA 诱导的同源 RNA 降解的过程,可使基 因的表达受到抑制； 它是在基因的转录后水平抑制基因表达的一种讨论基因功能 的方法；名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页,共 8 页