单克隆抗体ppt课件.ppt

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1、单：单：克隆：克隆：抗体：抗体：？抗原抗原 动物体内动物体内刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体抗体不纯抗体不纯筛选单一筛选单一浆细胞浆细胞不能增殖不能增殖产生大量产生大量抗体抗体如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？瘤细胞和癌细胞有何区别？瘤细胞和癌细胞有何区别？单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程 注射抗原注射抗原B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选，继续培养筛选，继续培养足够数量的、能产生足够数量的、能产生特定抗体的细胞群特定抗体的细胞群体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔单克隆

2、抗体单克隆抗体（选择性培养基）（选择性培养基）选择性培养基：选择性培养基：使亲本细胞不能使亲本细胞不能存活而杂种细胞可存活存活而杂种细胞可存活诱导其融合的诱导其融合的方法有哪些？方法有哪些？2.2.制备过程：制备过程：诱导其融合的方法有哪些？诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞融合后培养液中有几种细胞?怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点瘤细胞有何优点?注射抗原的目的是什么注射抗原的目的是什么?为何要进行克隆化培养和专一为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，并多次筛选？抗体检测，并多次筛选？获得单抗的方法有哪些？获得单抗的方法有哪些？B BB B瘤瘤 瘤

3、瘤瘤瘤 瘤瘤细胞融合后培养液中有几种细胞？细胞融合后培养液中有几种细胞？筛选杂种细胞筛选杂种细胞 已知细胞合成已知细胞合成DNADNA有有D D和和S S两条途径，其中两条途径，其中D D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条两条DNADNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有髓瘤细胞中尽管没有S S途径，但能不断分裂增途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加殖，将这两种细胞在试管中混合，加PEGPEG促融，促融，获得杂种细胞。获得杂种细胞。1. 1. 小鼠骨髓瘤细胞与小鼠骨髓瘤细胞与B B淋巴

4、细胞融合？淋巴细胞融合？2. 2. 制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？（作为载体，运载抗癌药物，（作为载体，运载抗癌药物，形成形成“生物导弹生物导弹”治疗肿瘤）治疗肿瘤） 单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用 应用应用: : 疾病的诊断、治疗和预防。疾病的诊断、治疗和预防。 优点优点: :特异性强、灵敏度高。特异性强、灵敏度高。 实例实例: :1 1、各种癌症、肝炎病毒、各种癌症、肝炎病毒、SARSSARS病毒、细菌病毒、细菌 及血吸虫等数百种疾病的诊断；及血吸虫等数百种疾病的诊断；2 2、在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人

5、体卫士, ,能识别能识别“自己自己”与与“异己异己”，一旦发现，一旦发现 致病致病因素便与之结合将其杀死。因素便与之结合将其杀死。3 3、若在单抗上带上抗癌药物制成若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。细胞又不会伤害健康细胞。两个过程两个过程动物细胞培养过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程三个三个“一一”一个诱导细胞融合的新方法一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒灭活病毒一个新细胞一个新细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞一个优势一个优势单克隆抗体特异单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势性强、灵敏度高的优势