2022年高考生物真题分类汇编专题现代生物科技.docx
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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 学习好资料 欢迎下载1. (2022 江苏卷 .33 )(9 分)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图 1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注;请回答以下问题:(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用_两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过 _酶作用后获得重组质粒;为了扩增重组质粒,需将其转入处于 _ 态的大肠杆菌;(2)为了挑选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在挑选平板培育基中添加 _,平板上长出的菌落,常用 PCR鉴定,所用的引物组成为图 2 中_;(3)如 BamH I 酶切的 DNA末
2、端与 Bcl I 酶切的 DNA末端连接,连接部位的 6 个碱基对序列为,对于该部位,这两种酶(填“ 都能”、“ 都不能” 或“ 只有一种能”)切开;(4)如用 Sau3A I 切图 1 质粒最多可能获得种大小不同的 DNA片段;【答案】(1)BclI 和 Hind 连接 感受( 2)四环素 引物甲和引物丙(3)都不能(4)7 (2)为了挑选出转入了重组质粒的大肠杆菌,依据质粒上的抗性基因,应在挑选平板培名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 10 页精选学习资料 - - - - - - - - - 养基中添加四环素;学习好资料欢迎下载沿相反的方向合PCR技术要求两种引物分别和
3、目的基因的两条单链结合,成子链;【考点定位】基因工程,限制酶,连接酶,重组质粒【名师点睛】此题是对基因工程的考查,解答此题的关键在于懂得重组质粒中标记基因的作用,在插入目的基因时不能破坏标记基因,故挑选限制酶须留意;PCR扩增基因时,两种引物结合的部位相反,延长的方向相反;限制酶具有特异性,不同的限制酶识别不同的序列,判定某种限制酶能否切割某片段,应依据该片段中是否含有限制酶的识别序列;2. (2022 课标 1 卷 .40 )某一质粒载体如下列图,外源 DNA插入到 Amp r 或 Tet r 中会导致相应的基因失活(Amp r 表示氨苄青霉素抗性基因,Tet r 表示四环素抗性基因) ;有
4、人将此质粒载体用 BamHI酶切后,与用 BamHI酶切获得的目的基因混合,加入 DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化;被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌;回答以下问题:(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有 可);_(答出两点即而作为基因表达载体,除满意上述基本条件外,仍需具有启动子和终止子;(2)假如用含有氨苄青霉素的培育基进行挑选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其缘由是_ ;并且_和_的细胞也是不能区分的,
5、其缘由是 _;在上述挑选的基础上,如要挑选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落,仍需使用含名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 10 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习好资料 欢迎下载有是 _的固体培育基;(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其 _ DNA复制所需的原料来自于【答案】(1)能够自我复制、具有标记基因、具有一个至多个限制酶切割位点(答出两 点即可)(2)二者均不含氨苄青霉素抗性基因,在该培育基上都不能生长 含有质粒载体含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒)在该培育基上均能生长 四环素(3)受体细胞【考点定位
6、】 基因工程二者都含氨苄青霉素抗性基因,【名师点睛】 此题以图文结合的形式,综合考查同学对基因工程技术的熟记和懂得 才能;解决此类问题的关键是,熟记并懂得相关的基础学问、形成学问网络,从题图中挖掘 出隐含的信息,据此结合每个问题情境进行图文转换、实现对学问的整合和迁移;名师归纳总结 3. (2022 新课标卷 .40 ) 图( a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR I 、 BamH I第 3 页,共 10 页和 Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体示意图(载体上的EcoR I 、 Sau3A I的切点是唯独的);- - - - - - -精选学习资
7、料 - - - - - - - - - 学习好资料 欢迎下载依据基因工程的有关学问,回答以下问题:(1)经 BamH I 酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被 产物连接,理由是 _;_酶切后的(2)如某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子,如图( c)所示;这三种重组子中,不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有 _,不能表达的缘由是 _;(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶, 常见的有 _和_,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是 _;【答案】(1)Sau3A两种梅切割后产生的片段具有相同的黏性末端(2)甲和丙甲中目的基因插入在启动子的上游,丙中
8、目的基因插入在终止子的下游,两者目的基因均不能转录名师归纳总结 (3)EcoliDNA 连接酶 T4DNA连接酶 T4DNA连接酶第 4 页,共 10 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习好资料 欢迎下载【考点定位】基因工程的原理及技术【名师点睛】 1确定限制酶的种类1 依据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类应挑选切点位于目的基因两端的限制酶,如图甲可挑选 Pst;不能挑选切点位于目的基因内部的限制酶,如图甲不能挑选 Sma;为防止目的基因和质粒的自身环化和随便连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如图甲也可挑选用 点 ;Pst 和
9、EcoR两种限制酶 但要确保质粒上也有这两种酶的切2 依据质粒的特点确定限制酶的种类 所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一样,以确保具有相同的黏性末端;质粒作为载体必需具备标记基因等,所以所挑选的限制酶尽量不要破坏这些结构,如图乙中限制酶Sma会破坏标记基因;假如所选酶的切点不止一个,就切割重组后可能丢失某些片段,如丢失的片段含复制起点区,就切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制;2基因表达载体中启动子、终止子的来源 1 假如目的基因是从自然界中已有的物种中分别出来的,在构建基因表达载体时,不需 要在质粒上目的基因的前后端接上特定的启动子、终止子,由于目的基因中已含有启动子、终止子;2
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