2022年食品微生物检验技术复习重点 .pdf
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1、食品微生物检验技术1、细菌总数 :可以反映食品的卫生质量和清洁状态。2、食品中细菌总数检验的意义:(1)细菌总数作为食品被污染的标志,(2)反映食品的卫生质量和清洁状态:1.食品在加工、运输、销售等各个环节的清洁卫生;2.预测食品耐存放的程度与期限。3、大肠菌群最近似数(MPN ):100g 或 100mL 食品中含有大肠菌群的可能数。4、MPN 超标的 含义 :1. 食品曾受到粪便污染;2. 食品可能被肠道致病菌污染。5、病原微生物(病原体): 可以侵犯人体引起感染甚至传染病的微生物。6、病原微生物检验的意义:1. 防止病原微生物的传播;2. 促使病原微生物在食品加工过程中消灭; 3. 防止
2、病原微生物通过食品途径传染给家禽、家畜; 4. 进一步促进畜牧业和国民经济的发展,提高人民群众的生活水平和生活质量。7、指示菌 :常规卫生检测中,以指示被检样品卫生状况及安全性的指示微生物8、常规检验指示菌的目的: 以指示菌在被检样品中存在与否以及数量的多少为依据,对照国家卫生标准,对检品的饮用、食用或使用的安全性作评价。9、样品的采集与处理 : 采集的样品具有代表性 ,采集的样品能够代表食物的所有成分。10、大肠杆菌与魏氏梭菌空气被粪便的尘土污染;变形杆菌空气被各种腐败物质的分解物污染;需氧芽孢杆菌空气被尘土污染。11、空气样品的采集与处理: 气流撞击法 最完善,其能较为准确的表示空气中细菌
3、的真正含量。12、 食品微生物检验的采样方法: 能采取最小包装的食品就采取完整包装,需拆包取样的应无菌操作。不同类型的食品采样时采用不同的工具与方法。液态食品 :混匀后无菌开启包装后,用无菌注射器抽取于无菌盛样容器。半固体食品 :无菌拆包,用无菌勺子从几个部位挖取样品于无菌盛样容器。固体食品 :大块整体食品用无菌刀具和镊子从不同部位割取,兼顾表面与深部,注意样品的代表性;小块大包装食品应从不用部位的小块上切取置于无菌盛样器。冷冻食品: 大包装小块食品按小块个体采取;大块冷冻食品用无菌刀削取样品或无菌小手锯锯取样品,也可用无菌钻头钻取碎屑样品于盛样容器。固体食品与冷冻食品的采样需注意检验目的,若
4、需检验污染情况,取表层; 检验品质, 取深部。13、一般 固体食品的样品处理方法有一下几种 : 捣碎均质方法、剪碎振摇法、研磨法、整粒振摇法、胃蠕动均质法。14、 染色的意义 :通过染色强化细胞或细胞组分与周围环境之间的反差,利用普通光学显微镜观察微生物细胞。15、革兰氏染色: 染色为蓝色的是革兰氏阳性菌(G+ ) ,染色为红色的是革兰氏阴性菌(G -)染色流程:制片干燥固定初染水洗媒染水洗脱色水洗复染水洗干燥镜检16、有显微直接计数法(直接计数法)和平板计数法(间接计数法)两种。直接计数法 : 利用血细胞板在显微镜下直接计数,可立即获得数值, 但死活细胞都计数在内;间接计数法 :在平板上长成
5、菌落后计数,反应真实,但费时长,只计数活细胞。17、血细胞计数板构造:名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 1 页,共 11 页 - - - - - - - - - 血细胞计数板是一块特制的厚型载玻片。计数板上有一个方格网,方格网是有9个大方格, 中间的大方格是计数室,供微生物计数用。大方格长宽各1mm ,面积为 1mm2 ,深度为 0.1mm,体积为 0.1mm3 。计数室有两种规格: (16 25 ) ,大方格有16 中格,每中格有25 小格; (25 16 ) ,大方
6、格有25 中格,每中格有16 小格。两种计数室均有400 个小方格。18、 使用: 10 倍稀释法,无菌生理盐水稀释。19、大方格双线上的菌,计数要数下方和左方线上或上方和右方的细胞,以减少误差。20、已出芽的酵母菌,芽体达细胞一半时可作连个菌体计算;每个样品重复计数3 次(误差值不宜过大),取平均值,按以下公式计算每1mL菌液中还有的菌个数:21、计算公式:22、 16 25 的计数板 25 16 的计数板:22、 消毒:杀死病原微生物;灭菌:杀灭物体中的所有微生物(包括芽孢与孢子);23、 同温度下,湿热灭菌效果优于干热灭菌:湿热的热穿透力比干热大;湿热的蒸汽有潜热存在, 可迅速提高被灭菌
7、物体生物温度,增加灭菌效率; 菌体吸水后, 蛋白质含水量增加,容易凝固变性。24、巴氏杀菌发 : 71 , 15-30s 煮沸杀菌: 10-15min;芽孢需 1-2h 高压蒸汽灭菌: 121蒸汽维持15-30min 超高温灭菌法 (UHT ):135-150维持 2-8s 紫外灭菌法: 紫外线波长为253.7nm 25、化学灭菌法:没有选择性! 浓度为75的乙醇杀菌效果最好!食醋主要用于控制呼吸道感染!26、土壤 是开发利用微生物资源的重要基地。27、菌种分离与纯化方法:最常用的方法:稀释涂布平板法、稀释倾注平板法、平板划线法。 10 倍稀释法,稀释使用无菌生理盐水。28、菌种保藏的目的:保
8、存菌株的生命本身,保持菌株的遗传性状不变。29、标准菌株 :由国内或国际菌种保藏机构保藏的,遗传学特性得到确认和保证并可追溯的菌株,如美国标准菌种收藏所(ATCC )等。标准储备菌株 :由标准菌株经一次传代得到的培养菌。工作菌株 :由标准储备菌株经传代得到的培养物。商业派生菌株 :由供应商提供的所有特性与标准菌株等效的菌株。30、真空冷冻干燥保藏方法原理:先将微生物在极低温度(-70左右)下快速冷冻,然后减压下利用升华现象除去水分(真空干燥),是微生物始终处于低温、干燥、缺氧条件下。31、霉菌的鉴定步骤:分离纯化菌种、培养特征的观察、镜下特征的检查(洁净载玻片上滴一滴乳酸 -苯酚液)、查对资料
9、,鉴定菌种。32、真菌毒素:真菌产生的次级代谢产物。33、真菌毒素的检测方法有:化学检验、免疫学检验、生物学检验等。34、生物学检验法:测定毒素的毒性与“三致”性(致癌、致畸、致突变)35、病毒:是有一个核酸分子(DNA或 RNA) 与蛋白质构成的非细胞形态的靠寄生生活的生命体。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 2 页,共 11 页 - - - - - - - - - 36、二倍体细胞株:凡是由受精卵发育而来,且体细胞中含有两个染色体组的生物个体,均称为二倍体。37、原
10、代细胞培养37、传代细胞培养38、常见的分离病毒的方法有:组织培养法、鸡胚接种法、动物接种法、分子生物学技术、基因克隆等。39、 细胞病变效应 (cytopathiceffect,CPE):病毒在细胞内增殖后,可引起细胞不同的变化,常见的形态学改变是细胞圆缩、坏死、溶解或脱落等。40、 血吸附 :病毒感染细胞后,细胞膜上可镶嵌着病毒基因编码产生的糖蛋白,其中一些可以吸附特定种类的红细胞,这一现象就是血吸附。41、 血凝集 :有的病毒感染细胞后,将细胞单层培养刮下来后经适当处理可凝集特定种类的红细胞,这类糖蛋白在细胞表面形成刺突,称为血凝素。42、 干扰现象 :一种病毒感染细胞后并在细胞内繁殖,
11、能同时干扰另一种病毒在该细胞中繁殖。43、核酸类型鉴定:目的:验证是否为DNA/RNA病毒。脂溶剂敏感实验目的:验证病毒是否有包膜。耐酸性实验目的:验证病毒是否是肠道类病毒。中和试验目的:测定病毒的感染能力44、 食品腐败变质: 食品受到内外有害因素的污染后,其原有色、香、 味和营养成分发生了从量变到质变的变化,降低或失去其营养价值和商品价值的过程。45、蛋白质:过程:食物 +分解 Pr 的微生物多肽AA+ 胺+硫化氢等46、碳水化合物:过程:碳水化合物+分解糖类的微生物有机酸+酒精 +气体;47、脂肪:过程:脂肪食物+解脂微生物脂肪酸+甘油及其它产物。48、酸性食品:pH 值在 4.5 以下
12、者非酸性食品:pH 值在 4.5 以上者。49、非酸性食品适合大多数细菌、酵母菌及霉菌生长;酸性食品适合酵母和霉菌生长。50、某些微生物分解食品中的糖类产酸,结果引起食品的pH 值下降;某些微生物分解Pr 产碱,结果导致食品的pH 值出现上升趋势。微生物对营养物质利用的选择性;在含有糖和蛋白质的食品中,首先利用糖类再利用蛋白质,因此经常见到的首先是pH 值下降,而后出现上升。51、 制备腌菜时, pH 的变化趋势分析。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 3 页,共 11
13、页 - - - - - - - - - 初期:由于LAB (乳酸菌)利用菜液中的糖分而产酸,pH 值就逐渐下降,直至有大量的酸积累时,由于酸度过高,LAB 生长即被抑制。中期: 一些真菌因具有耐酸的特性,它们并能利用酸性物质而获得生长的机会,这样就造成了 pH 值逐渐上升。后期:当pH 值接近中性时,若原来加入的盐分不足和在其它条件的影响下,还可以出现一些腐败细菌的生长繁殖,最后的结果造成pH 值显著向碱性转化。52、对高渗透压的适应性不同,微生物可分为:高度耐盐细菌,中等耐盐细菌,低等耐盐细菌,耐糖细菌。53、食品安全储藏的防霉含水量Aw 为 0.65,Aw 为 0.60 以下时,微生物不能
14、生长。含水量百分率也常用来表示食品的含水量,并以此作为控制微生物生长的衡量指标。54、低温微生物: 食品在冷藏中出现的因微生物繁殖而引起的食品变质,这类低温条件下引起食品变质的微生物为低温微生物(5左右或更低的温度-20以下55、环境中含有较高浓度的CO2 或 O3 可显著抑制好氧细菌和霉菌的生长,延长食品的保质期。56、紫外线可促进油脂氧化和酸败。57、食品腐败变质的化学过程:蛋白质 - 多肽 -氨基酸 -无机物质、含氮有机碱、有机酸类、有机分解产物脂肪 -甘油脂肪酸 - 过氧化物、氧化物、酸败物质碳水化合物 -水、气体、有机物质、其他物质58、 挥发性盐基总氮:测定氨基酸或蛋白质含量高的样
15、品中氨和胺类(二甲胺和三甲胺)含量,如低温有氧条件下,鱼类挥发性盐基氮含量达30mg/100g 是变质的标志。59、 组胺 :测定样品中的组胺含量(组氨酸经组胺脱羧酶脱羧产生),如鱼肉中组胺含量达4-10mg/100g,会引起食品中毒。60、 K 值:ATP 分解肌苷和次黄嘌呤低级产物占ATP 系列分解物的百分比,主要使用与鱼类早起腐败的鉴定,K 20%说明鱼体新鲜;K40%说明鱼已开始腐败。61、例如 牲畜屠宰后,肌肉pH 的变化趋势分析。初期:肌肉中因碳水化合物产生消化作用,结果造成乳酸和磷酸在肌肉中积累以致引起pH 值下降;后期:因腐败微生物繁殖,肌肉被分解,造成氨积累,又促使pH 上升
16、;故借助于pH 值测定可评价食品变质的程度62、肉类表面有粘性物质产生。发黏的原因: 微生物繁殖形成的菌苔和分解蛋白质的产物63、腐败肉类的微生物学分析生产、保藏条件不适时,肉及肉制品会由表到内的腐败,同时会出现菌群交替的现象。1.需氧菌期腐败前 3-4d;主要发生在肉制品表面。微生物:各种球菌、八叠球菌大肠杆菌、变性杆菌、枯草杆菌等。表面微生物多,且是有氧环境,分解作用旺盛。2.兼性厌氧菌期腐败 3-4d 后;细菌在肉制品中层。微生物:产气荚膜梭菌、双酵母、产芽孢杆菌等。有氧性分解和厌氧性分解同时进行。宰杀后若不立即去除脏器,腐败首先发生在肠道和内脏。3.厌氧菌期名师资料总结 - - -精品
17、资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 4 页,共 11 页 - - - - - - - - - 腐败 7-8d 后;细菌在肉制品深层。微生物:主要是腐败梭菌64、 肉类卫生学检验的意义意义: 排除肉制品的安全隐患;减少食源性疾病的发生;保障人民健康、防止人畜共患疾病及其他畜禽疫病的传播;促进畜牧业生产的发展。65、鲜乳中微生物来源:来自乳房内部:乳房细菌,是正常的乳房菌群,主要是无害的球菌,如小球菌属、链球菌数等。来自外界环境:乳畜的体表,用具,工作人员,空气水源,饲料及褥草,其他。66、链球菌:嗜热
18、链球菌、乳酸链球菌、乳酪链球菌等。乳酸杆菌:保加利亚乳酸杆菌、嗜酸乳酸杆菌、干酪乳杆菌(干酪制作)等。67、腐败鲜乳的微生物学分析1.牛乳在室温下贮存时微生物的活动抑制期 :刚挤出的鲜乳放置一定时间不出现变质现象(乳过氧化氢酶系统、乳铁蛋白、溶菌酶)。乳酸链球菌期 :乳链球菌、乳酸杆菌、大肠杆菌和一些蛋白质分解菌等开始生长繁殖。其中以乳酸链球菌生长繁殖占绝对优势,当酸度升高到一定限度时(pH=4.5左右),乳链球菌本身也受到抑制。现象:凝乳。乳酸杆菌期 :在乳链球菌生长过程中,也伴随着乳杆菌的生长,当pH 降到 4.5 左右时,乳杆菌由于有较强的酸抵抗力,因而继续进行繁殖产酸,这时乳中出现大量
19、凝块,并伴随有乳清的析出。真菌期 :随着酸度的上升,当pH 达 3.5-3.0 时,绝大多数的细菌生长受到抑制,甚至死亡,此时仅有酵母菌和霉菌尚能适应强酸环境,并利用其中的乳酸或其它有机酸而存活,由于酸被利用, pH 值回升,并逐渐接近中性腐败期(胨化细菌期):经过以上几个阶段,乳中的乳糖含量已基本上消耗掉,而蛋白质和脂肪含量相对增高,因此,此时能分解蛋白质和脂肪的细菌开始活跃,凝乳块逐渐被消化,乳的 pH 值不断上升, 向碱性转化, 并伴随有腐败细菌的生长繁殖,如芽孢杆菌、 假单孢菌、变形杆菌等都可能生长,于是牛奶出现腐败的臭味。2.牛乳在低温条件下微生物的活动规律名师资料总结 - - -精
20、品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 5 页,共 11 页 - - - - - - - - - 低温条件下嗜温微生物被抑制,低温微生物能增值,如假单胞菌、产碱杆菌等。冷藏乳的变质主要是乳脂肪的分解,脂肪酶耐热,加热消毒后仍可以分解脂肪。冷藏乳中低温细菌可分解蛋白质,使牛乳胨化。68、 鲜乳中的病原微生物来自乳畜的病原微生物:患有传染病或乳房炎的乳畜,如结核分支杆菌、炭疽杆菌等。来自认为因素的病原微生物:工作人员患有传染病或是带菌(毒)者,生产过程中受蝇、蚊等的污染。来自饲料被霉菌污染所产生的有毒代谢
21、产物:如长期摄食含有黄曲霉毒素的饲料,其牛乳中也会收到污染。69、 引起炼乳的变质现象:凝乳: 一种是凝乳而酸度并不升高,这种凝固称作甜性凝固,主要是由于芽孢菌引起,如枯草芽孢杆菌等。 这种凝固主要是由于细菌产生凝乳酶的作用。另一种现象是凝乳并出现酸度增高,这种凝固称作酸凝固,是由于细菌分解乳糖产酸而引起凝固(LAB ),个别凝乳芽孢菌,不仅使炼乳变稠凝固,使酸度升高,而且会呈现干酪样的气味,如蜡样芽孢杆菌是需氧菌,可在乳液的表面繁殖使乳酸产生柔软的凝固并伴随有干酪样气味产生。70、引起鲜蛋变质的病原菌最常见的是沙门氏菌。71、鱼类的腐败现象:腐败现象:腹部和肌肉失去弹性,肌肉与骨骼脱离;眼珠
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