【步步高】2021年高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术 多聚酶链式反应扩增DNA片段同步训练 新人教版选修1.doc

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1、多聚酶链式反应扩增DNA片段基础过关知识点一PCR原理1下列有关PCR的描述，不正确的是()A是一种酶促反应B引物决定了扩增的特异性CPCR反应中的目的片段一般以2n指数扩增D扩增对象是氨基酸序列2PCR技术扩增DNA，需要的条件是()目的基因引物四种脱氧核苷酸 DNA聚合酶等mRNA核糖体ABCD3PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比，主要有两点不同，它们是()PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNAPCR过程不需要DNA聚合酶PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通过对反应温度的控制来实现的PCR过程中，DNA不需要解旋，直接以双链DNA为模板进行复制ABCD4DNA的复制

2、需要引物，其主要原因是()A可加快DNA的复制速度B引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合C引物的5端有助于DNA聚合酶延伸DNA链DDNA聚合酶只能从3端延伸DNA链知识点二PCR的反应过程和操作提示5如图为DNA变性和复性示意图，下列相关说法正确的是()A向右的过程为加热(80100 )变性的过程B向左的过程是DNA双链迅速致冷复性C变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同D图中DNA片段共有4个游离的磷酸基、4个3端6标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是()A92 、50 、72 B72 、50 、92 C50 、92 、72 D80 、50 、72

3、 7下图所示为PCR扩增的产物，请分析此产物是哪次循环的产物 ()A第一次循环B第二次循环C第三次循环D第四次循环8PCR操作过程中，对于温度的控制，应当控制在()A37 B室温C80 D先为95 ，然后降至55 ，最后调至72 能力提升9有关PCR技术，下列叙述不正确的是()A多聚酶链式反应，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术B在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似CPCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸DPCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸10关于PCR技术的应用，错误的一项是()A古生物学、刑侦破案、DNA序列测

4、定B诊断遗传病、基因克隆、古生物学CDNA序列测定、基因克隆、刑侦破案D诊断遗传病、合成核苷酸、DNA序列测定11PCR利用了DNA的热变性原理，PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器。下列对PCR过程中“温度的控制”的说法，错误的是()APCR反应需要高温，是为了确保模板是单链B延伸的温度必须大于复性温度，而小于变性温度C要用耐高温的DNA聚合酶D需要耐高温的解旋酶12在PCR扩增DNA的实验中，预计一个DNA分子经过30次循环后，应该得到230个DNA分子,但是结果只有约210个DNA分子，那么出现该现象的原因不可能是()ATaq DNA聚合酶的活力不够，或活性受到抑制B系统设计欠妥C

5、循环次数不够D引物不能与亲链结合13PCR一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物延伸而成的DNA单链做模板时将()A仍与引物结合进行DNA子链的延伸B无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链C同时与引物和引物结合进行子链延伸D与引物结合进行DNA子链的延伸14PCR是一种体外快速扩增DNA的方法，用于放大特定的DNA片段，数小时内可使目的基因片段扩增到数百万个。PCR需要模板DNA、引物、脱氧核苷酸和DNA聚合酶等条件。下图为模板DNA分子及2种引物，请据图回答相关问题：(1)PCR的全称是_。PCR与体内DNA复制的不同之外主要表现在温度环境的不

6、同，在PCR技术中先用95 高温处理的目的是_，而这一过程在细胞内是通过_实现的。(2)在PCR技术中所需要的引物实质上是一种_。请在图中绘出引物结合的位置。(3)若将1个DNA分子拷贝10次，则需要在缓冲液中至少加入_个引物。(4)DNA子链复制的方向是_，这是由于_。15PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题，而被广泛应用，此过程需要一种Taq DNA聚合酶。请回答有关问题：(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用_。(2)Taq DNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢？_。Taq D

7、NA聚合酶的功能是_。(3)与体内DNA复制相比较，PCR反应要在_中才能进行，并且要严格控制_条件。(4)PCR中加入的引物有_种，加入引物的作用是_。个性拓展16PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，操作步骤简介如下：第步：准备“汤”和模板DNAA配制多聚酶链式反应“汤”配方：蒸馏水100 SPU缓冲液15 SPU氯化镁溶液8 SPU引物3 SPU引物3 SPUDNA聚合酶1 SPU矿物油1 SPUdNTP每一种各加4 SPU注：SPU是一种溶液的计量单位；矿物油可防止聚合酶在冻结时受伤害，以保证酶的活性；dNTP有四种：dATP、dGTP、dCTP、dTTP。B准备要拷贝的DNA

8、如要拷贝自己的DNA，可以用一牙签轻刮口腔内壁，将牙签放入蒸馏水中摇动。加热使蒸馏水沸腾，使细胞破碎释放出DNA。用离心机离心后，去除蒸馏水中较大的细胞碎片。这时上清液中就有了较纯的DNA。第步：多聚酶链式反应将DNA(B)放入汤(A)中。水浴加热。首先，95 ，使DNA双螺旋打开，历时1 min；然后，55 ，使引物结合到DNA上，历时30 s；最后，72 ，与DNA聚合酶结合使DNA复制，历时1 min。重复步骤。每重复一次，即完成一次拷贝。根据上述操作过程回答下列问题：(1)以上材料可以说明()ADNA的复制必须在活细胞中才能完成BDNA能指导蛋白质的合成C在合适的条件下，非细胞环境也能

9、进行DNA的复制DPCR技术是一种无性生殖技术(2)若用人体细胞内的遗传物质做PCR扩增，则扩增后的几百亿个DNA分子起码可分为46种。要将其分开，可用电泳、染色等技术，常用的试剂有溴化乙锭等。有些试剂毒性较强，因此应戴上化学实验专用手套作为保护措施，以免其与皮肤接触。溴化乙锭是一种强烈的诱变物，若接触皮肤活细胞，很可能会引起()A基因重组B该个体会产生变异较大的后代C癌变D皮肤外层是死细胞，该物质接触皮肤后对人体不会有影响(3)PCR技术中用到的DNA聚合酶，取自生长在热泉中的一种细菌。就PCR技术来讲，你认为使用这种细菌中提取的酶较普通的动植物体内提取的DNA聚合酶的优势是_。(4)PCR

10、技术能将某一DNA分子扩增成许多相同的DNA片段，原因是：DNA分子具有_结构；DNA复制时遵循_原则。(5)DNA分子进行扩增时，除了所要扩增的DNA片段外，还需要四种_、_和_等条件。若已知DNA的一条单链的碱基组成为ATCCGAT，则与它互补的另一条单链的碱基组成为_。6答 案1D2.A3.C4.D5.A6.A7.A8.D9.C10.D11.D12.D13.D14(1)多聚酶链式反应使DNA变性(使DNA的两条链解开)解旋酶的催化(2)单链DNA或RNA分子如图所示(3)2112(4)从5端到3端DNA聚合酶只能从引物的3端开始连接单个脱氧核苷酸分子15(1)高温使DNA分子热变性(2)热泉70 80 的高温条件淘汰了绝大多数微生物催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键(3)一定的缓冲溶液温度(4)2作为DNA复制的起点16(1)C(2)C(3)耐高温，在较高的温度下不变性(4)规则的双螺旋碱基互补配对(5)脱氧核苷酸能量酶TAGGCTA