华蟾素宫颈癌细胞论文-精品文档.docx

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1、华蟾素宫颈癌细胞论文材料与方法实验方法法检测华蟾素对宫颈癌细胞生长的影响根据参考文献提供方法，将宫颈癌细胞培养至对数生长期，调整其细胞密度后接种于孔细胞培养板中，孔，分组为：调零孔组只含培养液，无细胞、对照组含培养液、细胞、华蟾素组浓度分别为、，待细胞贴壁后参加药物，其中对照组参加等体积的培养液，然后置于细胞箱内继续培养、后弃掉上清，参加孔，继续于细胞培养箱中培育后，每孔参加，在振荡器上震荡使结晶充分溶解。用酶标仪检测各孔的吸光度值，其中波长为，按下面公式计算细胞的增殖抑制率：抑制率实验组平均值对照组平均值。流式细胞术检测华蟾素对宫颈癌细胞周期的影响宫颈癌细胞培养至对数生长期，将细胞用胰酶消化

2、后，重新接种，分组同步骤，其中药物组每组参加华蟾素浓度分别为、，对照组参加等体积培养液，培养后收集细胞，用固定液固定细胞过夜后，离心弃上清，洗涤，用含、的混合液将细胞重悬，参加避光孵育半小时后，用尼龙网过滤，然后流式细胞仪进行检测分析。划痕实验检测华蟾素对宫颈癌细胞侵袭能力的影响根据参考文献划痕实验方法，将宫颈癌细胞接种于孔细胞培养板中，分组为：对照组以及药物华蟾素组、。将细胞于细胞培养箱中培养后，用加样枪头于细胞层中竖向划一宽度均匀、一致的细胞伤口模型，每孔划条伤口，然后药物组参加含有相应浓度的华蟾素培养液，而对照组参加等体积培养液，分别在细胞培养箱中孵育、后，于光学显微镜下测算各划痕的宽度

3、每条划痕各取个固定位置计算距离，取其平均值。细胞迁移能力以迁移率表示：细胞迁移率原划痕宽度现划痕宽度原划痕宽度。统计学方法应用统计软件分析，所有数据均用珋表示，行单因素方差分析、重复测量方差分析以及检验。结果华蟾素抑制宫颈癌细胞的增殖法测定结果示：当、华蟾素作用于宫颈癌细胞、后，可见细胞生长显著变缓。且随着华蟾素药物浓度的增加以及作用时间的延长，这种抑制作用有加强趋势，具有时间、剂量效应关系，各药物组与对照组比拟，差异有统计学意义。华蟾素对宫颈癌细胞周期的影响流式细胞术结果示：当、华蟾素作用于宫颈癌细胞后，与对照组相比拟，华蟾素各浓度组期细胞所占比例不断增加，期细胞比例减少，期细胞比例无显著变

4、化，各药物组与对照组比拟，差异有统计学意义。华蟾素抑制宫颈癌细胞的迁移细胞划痕实验结果示：当、华蟾素作用于宫颈癌细胞、后，划痕宽度均大于对照组，通过上述公式计算各组细胞的迁移率发现：华蟾素组作用于宫颈癌细胞、后，迁移率均小于对照组，差异有统计学意义，见表。显示药物华蟾素对宫颈癌细胞的迁移有一定的抑制作用，能够降低宫颈癌细胞向远处转移的能力。讨论随着医学技术的发展，传统中医药材逐步成为当今治疗肿瘤的重要手段以及新的策略之一，中药材的优势主要在于不仅对肿瘤具有显著的抑制作用，不易产生耐药性，且对机体的损伤以及不良反响小。因而，研究中药材抗肿瘤效应具有广阔的临床应用价值。华蟾素系传统中药中华大蟾蜍皮

5、的水制剂，其主要成分是蟾毒灵及吲哚生物碱等，具有消炎、止痛、抗肿瘤以及提高宿主免疫力等多种作用。近年来研究表明，华蟾素对如乳腺癌、骨肉瘤、前列腺癌等多种肿瘤细胞具有抑制作用并可诱导其凋亡。且动物实验显示华蟾素具有升白细胞的作用，具有安全有效、不良反响小的优点，已被广泛应用于多种肿瘤的辅助治疗。但是其对于宫颈癌的作用还未见有相关文献报道，因而，我们进行了相关研究，希望为华蟾素在宫颈癌的临床应用提供一定的理论根据和基础。本实验用不同浓度的华蟾素作用于宫颈癌细胞后，通过法观察发现，华蟾素作用于宫颈癌细胞后，可显著抑制细胞的生长，且对细胞的抑制作用随着药物浓度的增加及作用时间的延长而逐步加强，这讲明华

6、蟾素对细胞生长的抑制作用具有一定的量效、时效性，表明华蟾素可显著抑制细胞的增殖。我们通过流式细胞术结果发现，不同浓度华蟾素作用于宫颈癌细胞后，华蟾素各浓度组将细胞周期主要阻滞在期，使细胞期所占比例明显减少，进而抑制宫颈癌细胞的增殖。而有研究显示，华蟾素能将肿瘤细胞阻断在期，进而抑制肿瘤的增殖。这表明华蟾素能够通过阻滞细胞周期的进展进而发挥其抗肿瘤效应，但对不同类型肿瘤细胞周期的详细机制还有待深化的研究和讨论。另外，华蟾素还可抑制宫颈癌细胞的迁移能力。综上所述，我们通过细胞增殖、细胞周期及侵袭这些生物学行为的研究初步证实了华蟾素对宫颈癌细胞生长的影响，为中药化疗研究提供了新的思路和相应的实验根据，但是对于华蟾素抗肿瘤作用的详细机制等还有待更进一步的深化研究，为华蟾素发挥其抗肿瘤作用提供相应基础。