医院检验科微生物检验仪器标准操作规程.doc

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1、医院检验科微生物检验仪器标准操作规程微生物检验实验室CO2培养箱标准操作规程 48微生物检验实验室生物安全柜标准操作规程 50微生物检验实验室普通冰箱标准操作规程52微生物检验实验室低温冰箱标准操作规程53微生物检验实验室普通离心机标准操作规程55微生物检验实验室电热恒温水浴箱标准操作规程57微生物检验实验室压力蒸汽灭菌效果检测标准操作规程58PREVI 全自动革兰染色仪标准操作规程 60Bact/Alert 3D型自动血培养分析仪准操作规程 62Autobact全自动微生物分离培养仪标准操作规程66VITEK 2 COMPACT全自动鉴定药敏分析仪标准操作规程 67DNP电热恒温培养箱标准操

2、作规程 75OLYMPUS显微镜标准操作规程77电热灼烧器标准操作规程78旋涡混合器标准操作规程79移液器标准操作规程80VITEK比浊仪标准操作规程 82紫外线消毒车标准操作规程85MI-01恒温金属浴标准操作规程87MB-80微生物快速动态检测系统标准操作规程 89XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书CO2培养箱标准操作规程文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0501版本：20140601生效日期：20140615共 2 页 1. 目的确保CO2培养箱工作稳定，正常运转。2. 授权操作人经培训并通过考核的微生物实验室工作人员。3. 原理（略）4. 适用范围微生物室CO2培养箱。5.

3、 操作程序5.1 二氧化碳培养箱开启程序5.1.1 打开培养箱外门及玻璃门，向水盘中注汝蒸馏水，关门。5.1.2 将温度控制器旋纽调至37C。5.1.3 插上电源，打开电源开关。5.1.4 仪器将自动执行常规检测功能。5.1.5 40秒后，常规检测完毕，控制面板上的显示窗内均显示箱内实际值。5.1.6 启动AUTOSTART，参见“5.3 AUTO-START的启动”。5.1.7 此时仪器温度显示35.00.1，CO2显示5.00.1%CO2。5.1.8 如果温度或CO2显示偏差较大，可通过和键进行调整。5.1.9 当测定温度和CO2达到使用要求，即可使用。5.2 培养箱的紫外线消毒5.2.1

4、 确保启动紫外线消毒功能前，仪器内无培养物。5.2.2 打开电气安装抽屉面板上的紫外线灯保护开关，将CO2设定为0。5.2.3 按钥匙键+或钥匙键+调节数字为222（紫外线灯开关）。5.2.4 按钥匙键+设定为（1），即打开紫外线灯，按i键确认。紫外线灯亮，仪器前面板CO2显示窗将显示-。5.2.5 约30分钟后，消毒结束，内腔紫外线灯熄灭，显示面板显示实际数值，打开玻璃门，使腔内臭氧散出，关闭电气安装抽屉面板上的紫外线灯保护开关。5.3 AUTO-START的启动5.3.1 启动AUTO-START前，先将温度调至37，CO2调至0。5.3.2 打开培养箱们约1分钟放出空气体，在培养箱内放2

5、升水，确定仪器内无培养物后关门。5.3.3 同时按下和键约10秒，直至CO2显示0.0,GAS指示灯熄灭，AUTO-START灯亮，放开两键。5.3.4 仪器将自动启动AUTO-START功能。5.3.5 建议AUTO-START状态时不要开门，等待1824小时。6. 质量控制（不需要）7. 维护及保养7.1 每日由专人负责观察和记录培养箱温度、CO2浓度及CO2钢瓶压力。7.2 每周做1次紫外线消毒，参见“5.2 AUTO-START的启动”。8. 校正8.1 例行校正 包括温度和CO2浓度，至少每年1次。8.2 故障校正 质控失控或仪器监测指标失控、仪器移位后及仪器因故障进行维修后需要校正

6、。8.3 校正后验收 仪器校正后，微生物负责人对各项指标进行核实，指标达到要求方可。9. 应急处理9.1 外接电源、电压必须匹配，并要求有良好的接地。9.2 出现影响检验质量的故障，应立即转移内容物，放入备用CO2培养箱。10. 注意事项10.1 培养箱外壳必须有效接地，以保证使用安全。10.2 培养箱应放置在具有良好通风条件的室内，在其周围不可放置易燃易爆物品。10.3 箱内物品放置切勿过挤。10.4 箱内外应经常保持清洁。参考文献 1 CO2培养箱配套说明书2 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.20073

7、中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2008医学实验室质量和能力认可准则（ISO15189：2007）.2008编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人： XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室生物安全柜标准操作规程文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0502版本：20140601生效日期：20140615共 2 页 1. 目的规范生物安全柜操作规程，确保生物安全柜正常使用、洁净、无污染。2. 授权操作人经培训并通过考核的微生物检验实验室工作人员。3. 原理高效粒子过滤器（HEPA） 可有效过滤并滞留99.99%的0.3um的颗粒。层流 气体沿着

8、一个方向以一固定的速度流动为层流。安全柜内由上向下的层流，能捕捉安全柜工作区域内产生的全部浮尘，并将它们引导到HEPA过滤器。定向气流 从安全柜前面的栅格定向引入安全柜的气流，对生物安全柜的性能也起着关键的作用。空气导流板可阻止安全柜内的浮尘从工作区域跑到外部环境中去。4. 适用范围可能产生气溶胶标本的处理；所有需要基因扩增的标本。5. 操作程序5.1 将安全柜门抬起至正常工作位置，注意不得高于安全柜左边的警戒线（SASF LEVEL）.5.2 打开安全柜电源开关及内置风机，仪器报警自检，约需3秒。5.3 检查、记录压力指示读数。5.4 无任何阻碍状态下，让安全柜至少工作15分钟。5.5 在正

9、式操作前将实验用品放入安全柜，不得过载，不得挡住前后风口。5.6 安全柜内所有的实验材料须离玻璃门至少4cm。5.7 放入实验材料后，让安全柜开启23分钟后再开始工作。5.8 操作期间，避免工作时人员进出室内或在操作者背后走动，以减少气流干扰。5.9 操作过程中，如有物质溢出或液体溅出，应对所有被污染的物体消毒，并用75%酒精消毒安全柜内表面。5.10 工作结束后，须让安全柜在无任何阻碍状态下继续至少工作5分钟，以清除工作区域内浮尘污染。5.11 关闭生物安全柜玻璃门，打开紫外线灯消毒30分钟。5.12 消毒结束后，把System按钮置于“OFF”档，关闭紫外灯。6、维护保养6.1每日维护 使

10、用前观察并记录生物安全柜内的压力表，压力表正常工作范围为0.71.3英尺水柱，如1.3英尺水柱，参见“9.1压力异常”。工作结束后，用75%酒精消毒安全柜内部和工作台表面。工作结束后，紫外线照射生物安全柜内30分钟。6.2 每月维护 拆卸并抬起工作区域底板，用75%酒精擦拭底板下空间。6.3其他 每3个月检测并记录紫外线的消毒效果。7、校正7.1例行校正 厂方工作人员至少每年维护1次，校正指标见表5-1。表5-1 校正指标测试项目测试方法正常值烟雾试验垂直气流速度断面平均值热球式风速针55FPM进风速度热球式风速针105FPM工作面中线上0.15M烟雾发生器 观察窗内0.025M、上沿0.15

11、M烟雾发生器观察窗外沿0.04M烟雾发生器工作口边沿烟雾发生器安全内锁装置及UV灯测试手动内博电源插座测试万用表7.2故障校正7.2.1仪器检测指标失控时，需要矫正。7.2.2仪器移位后，需要矫正。7.2.3仪器因故障进行维修后，需要矫正。8、应急处理8.1 压力异常 安全柜压力表正常工作范围为0.71.3英尺水柱（1ftH20=2988.98Pa），如果1.3英尺水柱，表示滤膜有问题，应通知厂方技术人员更换滤膜。更换滤膜或者清洗滤膜应记录在仪器设备维护保养记录表中。8.2故障处理 出现故障，电话联系工程师，按照工程师意见进行处理并通知实验室负责人。9、注意事项9.1生物安全柜需要放在远离门窗

12、的位置，以防门窗部位的不稳定气流影响安全柜内气流流动路径。9.2生物安全柜不可用作物品储藏。9.3注意纸张、棉签等可能造成生物安全柜过滤器的堵塞。9.4生物安全柜使用前后需要用适当的消毒剂对柜内工作区域进行擦拭。9.5不可堆放过多的物品于操作台上，易导致柜内后部进风不畅。9.6安全柜内禁止使用易燃、易爆及腐蚀性气体。9.7更换、维护安全柜内机件（过滤器、风机等）的工作需要由厂家专业人员完成。参考文献1 生物安全柜配套使用说明书2 申子瑜，李金明.正确认识临床实验室认可与提高检验质量之间的关系.中华检验医学杂志，2007，30（2）：1363 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:20

13、08医学实验室质量和能力认可准则（ISO15189：2007）.2008编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人： XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室普通冰箱标准操作规程文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0503版本：20140601生效日期：20140615共 1 页 1. 目的规范普通冰箱使用的操作规程,保证检验质量。2. 授权操作人经培训并通过考核的临床基因扩增检验学实验室工作人员。3. 使用范围临床基因扩增检验学实验室普通冰箱。4. 工作环境相对湿度:10%-85%;运行温度:32以下。5操作程序5.1 冰箱按说明书要求放好后，插上电源。5.2

14、 冷藏室温度开关设置于4，冷冻室温度开关设置于-20。5.3 2小时后用温度计确认温度。5.4 冷藏室正常温度范围为28，冷冻室正常温度范围为-15-20。5.5 系统进入正常运行状态后即可正常使用。6维护保养6.1每日保养 每日观察冰箱温度并记录6.2每月保养 保持冰箱出水口通畅，月底清洁冰箱。清洁时切断电源。擦拭冰箱内外，必要时可用中性洗涤剂清洁。7校正 7.1 例行校正 温度校正至少每年1次。7.2故障校正 检测指标失控、维修后校正。、7.3校正后验收 校正后，临床基因扩增检验学实验室负责人对各项指标核实，达标后方可。8. 应急处理8.1出现不能自行解决故障，应即时联系厂商维修处理，并告

15、知临床基因扩增检验学实验室负责人。8.2出现影响检验质量的故障，应立即转移冰箱内容物，放入备用冰箱。9. 注意事项9.1 冰箱应放置于水平地面并留有一定散热空间。9.2 外接电源电压必须匹配，并要求有良好的接地线。参考文献1 普通冰箱配套使用说明书编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人： XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室低温冰箱标准操作规程文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0504版本：20140601生效日期：20140615共 2 页 1. 目的规范-25度低温冰箱的使用规程，确保冰箱内温度恒定，运转正常。2. 授权操作人经培训并通过考核的临床

16、基因扩增检验学实验室工作人员。3. 使用范围 临床基因扩增检验学实验室-25度低温冰箱。4. 工作环境相对湿度:10%-85%;运行温度:32以下。5操作程序5.1 冰箱启用。5.1.1 按要求放置冰箱，插上电源，调试。5.1.2 等半小时后有明显降温感觉，表示冷柜工作正常。5.2 温度的调节 面板上显示冰箱内温度。5.2.1 快速按下并释放“SET”键，显示“SET”。5.2.2 按“SET”键，显示设定温度。5.2.3 按“”或“”键增加或降低数字，调节至需要的温度。5.2.4 按“SET”键，确认。5.2.5 按“FNC”键返回，面板上显示箱内温度。5.3 报警限制设定 为保证箱内储存物

17、的质量，电子温控器具有报警功能。当箱内温度高于报警上线或低于报警下线时，蜂鸣器会报警，同时显示屏上的报警指示灯会闪烁，按任意键报警消除（但显示屏上的报警指示灯继续闪烁）。当箱内温度恢复到正常范围时，报警消失。报警限值设定的标准操作如下。5.3.1 按“SET”键至少5秒以上，显示“CP”。5.3.2按“”键，显示“AL”。5.3.3按“SET”键，显示“AFD”。5.3.4按“”键，显示“HAL”。5.3.5按“SET”键，显示设定的报警上限值。5.3.6按“”或“”增加或降低数字，调节至需要的温度。5.3.7按“SET”键确认，显示“HAL”；按“”键，显示“LAL”。5.3.8按“SET”

18、键，显示设定的报警下限值。5.3.9按“”或“”增加或降低数字，调节至需要的温度。5.3.10按“SET”键确认，显示“LAL”。5.3.11按2次“FNC”返回，面板上显示箱内温度。6维护保养6.1每日保养 每日观察冰箱温度并记录6.2每月保养 每月擦拭冰箱表面，必要时可用中性洗涤剂清洁。7. 校正 7.1 例行校正 温度校正至少每年1次。7.2故障校正 检测指标失控、维修后校正。、7.3校正后验收 校正后，临床基因扩增检验学实验室负责人对各项指标核实，达标后方可。8. 应急处理8.1出现不能自行解决故障，应即时联系厂商维修处理，并告知临床基因扩增检验学实验室负责人。8.2出现影响检验质量的

19、故障，应立即停止使用，并转移冰箱内容物，放入备用冰箱。9注意事项9.1 冰箱应放置于水平地面并留有一定散热空间。9.2 外接电源电压必须匹配，并要求有良好的接地线。参考文献1 普通冰箱配套使用说明书编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人： XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室普通离心机标准操作规程文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0505版本：20140601生效日期：20140615共 2 页 1. 目的规范普通离心机操作规程,保证检验质量。2. 授权操作日经培训通过考核的微生物实验室工作人员。3. 适用范围临床基因扩增检验学实验室普通离心机。4.

20、工作环境相对湿度：15%85%；运行温度：15-30。5. 操作程序5.1 开机准备5.1.1 插上电源5.1.2 打开离心机电源开关（在离心机右后方）。5.1.3 按OPEN键，按手动安全门扣，打开机盖。5.1.4 装入离心套管。5.2 程序设定5.2.1 时间设定按按“time”键1次，时间“分钟”开始闪烁。按 键和键设定分钟。按按“time”键1次，时间“秒”开始闪烁。按 键和键设定秒。5.2.2 转速设定按“RCF”键，选择离心力，或按“RPM”键，选择离心速度。按 键和键设定速度。5.2.3 程序储存 共可储存0-10个离心程序。上述时间和转速确定后，按“ATORE”键。5.3离心5

21、.3.1 按“OPEN”键，按手动安全门扣，打开机盖。5.3.2 选择所需要的程序，按“RECALL”键，按“PROG”键多次，选择所需要的程序号码，按“RECALL”键确定。如显示的程序已是需要的程序，直接进入下一步。5.3.3 标本平衡后，放入离心机。5.3.4 关上离心机盖，按“START”键开始离心（等达到离心速度时，时间显示开始倒计时）。5.3.5 离心结束，发出“嘟”声，按“OPEN”键，按手动安全门扣，打开机盖。取出标本。6.维护保养7.1每日保养 每日观察离心机运转情况并记录。使用完毕后，进行清洁保养。7.2每月保养 每月用消毒液清洁离心机。7.校正7.1 例行校正 离心速度的

22、校正至少每年1次。7.2 故障校正 故障进行维修后，需要校正。7.3 校正后验收 校正后，临床基因扩增检验学实验室负责人对各项指标进行核实，达标后方可。8.应急处理8.1 样本在离心机内破碎时的处理8.1.1 听到离心机有标本破碎的声音，应立即停机。8.1.2 不可立即打开离心机盖子，30分钟后才可打开。8.1.3 工作人员应戴手套、口罩，尽可能在生物安全柜内用镊子将破碎的玻璃移除，用2000mg/L有效氯消毒液擦拭，再用清水清洁离心机。8.2 出现故障由使用者及时通知仪器工程师并告知临床基因扩增检验学实验室负责人。8.3 实验室内离心机互为备用。9.注意事项外接电源电压必须匹配，并要求有良好

23、的接地线。参考文献1 普通离心机配套说明书编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人： XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室电热恒温水浴箱标准操作规程文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0506版本：20140601生效日期：20140615共 1 页 1.目的规范电热恒温水浴箱的操作规程，确保正确使用电热恒温水浴箱。2.授权操作人经培训并通过考核的检验科微生物检验实验室工作人员。3.适用范围微生物检验实验室电热恒温水浴箱。4.工作环境相对湿度:10%-85%;运行温度:15-30度。5.操作程序5.1 浴箱内注入清洁温水至总高度的1/3-1/2处。5.2

24、接通水浴箱电源，打开开关，调节温度控制旋钮至设定温度。5.3 当水槽内温度达到设定温度时，加热中断。再通电，90分钟内温度可保持稳定。5.4 水浴箱工作温度波动范围应控制在设定温度1以内。5.5 水浴箱使用完毕，关闭开关，切断电源。6维护保养6.1使用水浴箱时，记录温度。6.2 使用完毕，应用清洁干布擦净水浴箱外壳，忌用腐蚀性溶液擦拭。7校正7.1 例行校正 温度的校正至少每年1次。7.2 故障校正 维修后需要校正。7.3 校正后验收 校正后，微生物检验实验室负责人对各项指标核实，达标后方可。8应急处理出现不能解决的故障，应及时联系维修人员并通知微生物检验实验室负责人。9注意事项9.1 水浴箱

25、外壳必须有效触地。9.2 未加水之前，切勿打开电源，以防电热管烧坏。参考文献1 电热恒温水浴箱配套说明书2全国临床检验操作规程编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人： XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室压力蒸汽锅灭菌效果检测标准操作规程文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0507版本：20140601生效日期：20140615共 2 页 1. 目的规范压力蒸汽锅灭菌效果检测标准操作规程，确保检验质量。2. 授权操作人经培训并通过考核的微生物检验实验室工作人员。3. 适用范围微生物检验实验室压力蒸汽锅。4. 工作环境相对湿度:10%-85%;运行温度:1

26、5-30度。5. 操作程序5.1化学监测法5.1.1 化学指示卡监测方法 需每包监测。将既能指示蒸汽温度，又能指示温度持续时间的化学指示管放入每一待灭菌的物品包中央，经一个灭菌周期后，取出指示管，根据其颜色及形状的改变判断是否达到灭菌条件。5.1.2 化学指示胶带监测法 需每包监测。将化学指示胶带黏贴于每一待灭菌物品包外，经一个灭菌周期后，观察其颜色的改变，以指示是否经过灭菌处理。5.1.3 B-D试验 对与预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌，每日进行一次B-D试验。将测试纸水平放于灭菌柜内灭菌架的底层靠近排气口处，柜内除测试包外无其他任何物品。5.2 生物监测法5.2.1 将两个菌片分别放入灭菌小

27、纸袋内，置于标准试验包中心部位。5.2.2 灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包5.2.3 经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经560C10C培养7日，观察培养基颜色变化。5.2.4 检测时设阴性对照和阳性对照。5.3 结果判定5.3.1 化学监测法所放置的指示管、胶带的形状或颜色均变至规定的条件，判为灭菌合格；若其一未达到规定的条件，则灭菌过程不合格。B-D试验：经1320C，3-5分钟后，取出一次性B-D包观察颜色变化。均匀一致变色，说明冷空气排除效果良好，灭菌器可以使用，反之，则有冷气残留，测试不合格。新安装的

28、设备和大修后设备应该进行B-D试验标准包测试，测试应该重复3次。5.3.2 生物监测法 每个指示菌片接种的培养基都不变色，判定为灭菌合格；指示菌片之一接种的培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌过程不合格。6. 质量控制每次高压灭菌时都用标准菌株检测灭菌效果，并做记录。7. 维护保养7.1 使用高压灭菌时，观察工作状态，并记录。7.2 使用后，擦洗外壳，并关闭锅盖，放出剩余水。8. 校正8.1 例行校正 温度的校正至少每年1次。8.2 故障校正 维修后需要校正。8.3 校正后验收 校正后，微生物检验实验室负责人对各项指标核实，达标后方可。9. 应急处理出现不能解决的故障，应及时联系维修人员并通知微生

29、物检验实验室负责人。10. 注意事项10.1 化学监测 监测所用化学指示物须经卫生部批准，并在有效期内使用。10.2 生物监测 生物指示物监测应1月1次。参考文献1 中华人民共和国医政司（叶应妩，王毓三，申子瑜）全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社，2006：927-9312金华彰，马彦冰.2000版标准质量管理体系德建立与文件编制 北京：中国计量出版社，2002：177-2023申子瑜，李金明.正确认识临床实验室认可与提高检验质量之间的关系.中华检验医学杂志，2007，30（2）：136编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人： XXX医院检验科微生物检验实验室作

30、业指导书PREVI全自动革兰染色仪标准操作规程文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0508版本：20140601生效日期：20140615共 2 页 1.目的规范PREVI全自动革兰染色仪的操作规程，保证检验质量。2.授权操作人经培训并通过考核的检验科微生物检验实验室工作人员。3.工作原理染液中的结晶紫可以迅速透过微生物细胞，并将其染成蓝黑色，聚乙烯吡咯烷酮稳定的碘试剂穿透微生物细胞并与结晶紫形成复合物，脱色时由于细胞壁成分的不同，只有革兰阴性细菌的碘结晶紫复合物会被清除，革兰阳性细菌不会被脱色，复染后革兰阳性菌依然是蓝黑色，革兰阴性菌被复染液染成粉红色。染色后，全自动革兰染色仪会干燥载玻片

31、。4.工作环境相对湿度:20%-80%;运行温度:15-30度；电源电压：100240V，50/60HZ 5.操作程序5.1 开启仪器：按下位于仪器后部左下角的开机按钮。5.2 仪器屏幕显示“press clean to reprime”,放入空染片转盘，点击“clean”，仪器将灌注试剂于管路中。5.3 把玻片放入玻片架：标本正面位于顺时针面，标签朝外，对称放置，如果标本小于6张，按编号由小到大排列，放玻片架于仪器中，盖上盖子。5.4 通过数字按钮输入染片数量：2,4,6；如6张以上仪器视为满载，无需输入染片数量。5.5 点击“RUN”，仪器开始运行染片。5.6 染片结束后，取出玻片架，取出

32、玻片镜检。5.7 染片结束后，用布擦干仪器滚筒，放回玻片架，盖上盖子。5.8 下班关机前，按“CLEAN”按钮运行喷嘴清晰程序，当屏幕显示“press clean to reprime”,关机。6质量控制6.1每次更换染液进行一次质控菌株ATCC25922和ATCC29523的染色效果观察。6.2每周进行一次常规质控，即用质控菌株ATCC25922和ATCC29523的染色,观察结果。7仪器保养7.1 日保养：管路染料再灌注，清洗管路、腔体以及盖子。7.2 周保养：喷嘴体积测试，清洁腔体、盖子，冲洗废液管，倒空废液桶。7.3 月保养：喷嘴保养，清洗B管路，喷嘴体积测试。8注意事项8.1 仪器运

33、行前，检查所有染液是否足够，确保蒸馏水、无水酒精量足够。8.2 每日下班前要进行管路清洗，关机后要用酒精冲洗腔体和喷嘴，再用蒸馏水冲洗并擦干。参考文献1 PREVI全自动革兰染色仪配套使用说明书2全国临床检验操作规编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人： XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书Bact/Alert 3D型自动血培养分析仪器操作文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0509版本：20140601生效日期：20140615共 3 页 1目的规范Bact/Alert 3D120型自动血培养分析仪操作规程，保证检验质量。2授权操作人经培训考核通过的工作人员可操作仪器

34、。3检测原理BacT/ALERT 3D系统中所使用的每一培瓶內底部都含有颜色感应器，其中有半滲透性硅胶膜隔离了培养基及颜色感应器，只有CO2可透过硅胶膜。当血液培养瓶內有微生物生长时，释出的CO2滲透至感应器经水饱和后，产生氢离子(H+)改变感应器酸碱度值，使感应器颜色产生变化，从灰色变为黄色，由颜色变化计算有无微生物生長。其反应如下：CO2 + H2O H2CO3 H+ + HCO3 BacT/ALERT 3D120孵育箱內, 每一测试槽底部都有一组激光器及反射光感应器，反射光感应器隨瓶底颜色感应器颜色改变，产生不同的反射值。光度信息经扩大、传送至电脑后，系统会自动连续分析及记录，然后判断阳

35、性或阴性。系统随之以图象及声音报警。电脑有下列三种阳性生长计算图表4工作环境相对湿度：1085%；运行温度：10-30；电源电压：220/240V，50/60Hz.5操作程序5.1 培养瓶种类：SA标准成人需养培养瓶、SN、标准成人厌养培养瓶、FA成人需氧中和抗生素培养瓶、FN成人厌氧中和抗生素培养瓶、PF小儿需氧培养瓶 、MP非血液标本结核培养瓶、MB血液标本结核培养瓶、MAC抗生素补充试剂盒（MP瓶用）和抗生素补充试剂盒复溶液。5.2 开机5.2.1 打开仪器的UPS电源，孵育组件和其他链接组件开关。5.2.2 系统开启启动并最终进入开始监视屏幕，待温度达到要求后即可使用。5.3 关机5.

36、3.1 遇到下列情况需关闭或重启组合箱或控制箱：电源断开、移位、修理无应答的操作控制箱或键盘。5.3.2 操作程序 取出控制箱或组合箱键盘 按键盘左上边的Esc键，然后输入YES命令，几十秒钟之后程序自动退出到MS-DOS状态（即C:状态），然后关闭仪器电源，关闭UPS电源。（不可非法关机）。5.4 培养瓶的装载5.4.1 点击放瓶键 ，出现装瓶界面。可见每个抽屉底部显示出当前有效单元数，同时含有有效单元的孵育箱指示灯会亮绿灯。5.4.2 使用条码扫描器将培养瓶上的条码输入进去，依次输入培养瓶ID号，医院ID号、病人信息。5.4.3 打开孵育箱，将培养瓶放入到有亮绿灯的孵育单元，单元指示灯闪烁

37、确认培养瓶已被加载。5.4.4 重复步骤5.4.2、5.4.3加载其他培育瓶。加载完毕，关闭孵育箱，点击确认图标 完成此操作。5.5 更改最长检测时间 5.5.1 输入条码后，装瓶界面左侧的最大测试时间设置纽变兰，可按要求更改时间。5.5.2 如瓶已经装入孵育箱，则进入瓶的详细细节屏幕，在屏幕左侧最大测试时间设置纽更改最大测试时间，点击 即可保存更改。5.6 卸瓶5.6.1 卸载匿名瓶 轻触卸哉匿名瓶按纽。匿名瓶所在的单元指示灯亮（阴性瓶为绿光，阳性瓶为红光）。卸下匿名瓶，只是灯闪烁表示瓶已卸下。随后按5.4步骤重新装载培养瓶。依次其余卸下匿名瓶。关闭孵育箱，点击确认图标 完成操作。5.6.2

38、 卸阳性/阴性瓶 当有阳性标本出现时，仪器会发出报警提示，屏幕相背景相应变成黄色，同时阳性瓶键 会亮起，点击取阳性瓶键，仪器相应的抽屉指示灯的绿灯会亮起，打开抽屉，其抽屉内相应有阳性瓶位置的指示灯会亮起，可依次取出，然后关闭抽屉，完成此操作。当有阴性标本出现时，阴性标本键 会亮起，点击取阴 性瓶键，仪器相应的抽屉指示灯的绿灯会亮起，打开抽屉，其抽屉内相应有阴性瓶位置的指示灯会亮起，可依次取出，然后关闭抽屉，完成此操作。阳性标本处理5.7.1 用75%酒精消毒瓶口，颠倒混匀培育瓶数次。5.7.2 用无菌注射器针头插入瓶口，抽取培养液接种于血平板、巧克力平板，35、CO2培养1824小时。5.7.

39、3 同时抽取少量培养液涂布于玻片上作革兰氏染色镜检，结果作为危急值报告临床，并纪录。5.7.4 如果临床要求立即做药敏试验，则从阳性瓶中抽取一些培养液直接做药敏试验，此结果仅供参考，待培养出细菌后再做药敏试验并出具最终报告。6. 质量控制6.1 瓶孔质控 仪器每天自检。6.2 温度质控 每次开门时需查看温度计与仪器监视器显示的温度（应在35.52）,两者误差0.56.3 血培养瓶的质量6.3.1 外观检查 检查外观是否完整，有否破损，有否污染等。6.3.2 无菌试验 每新进一批号或货号应做无菌试验。随机抽一只培养瓶，直接放入仪器培养，结果应是无细菌生长。7. 维护保养7.1 日保养 查看仪器监

40、视温度与仪器内部温度计温度。清洁仪器及电脑外表面。7.2 月保养 清洁瓶孔，清洁检查区块。7.3 年保养 由厂家进行一次全面保养。8. 校正8.1 例行校正 瓶孔、温度的校正，至少每年一次。8.2 故障校正 质控失控、监测指标失控时、移位、维修后需校正。8.3 校正后，微生物实验室负责人对各项指标核实，达标后方可。9.应急处理9.1 出现不能自行解决故障，应及时联系工程师维修处理，并告知微生物实验室负责人。9.2 温度失控的处理 温度降低可能是操作时门开启时间过长，关闭半小时以上，再观察。10.注意事项10.1 关门时应确认关紧。10.2 装载、卸瓶时应尽量快，避免开启时间长。参考文献1 Ba

41、ct/Alert 3D120型自动血培养分析仪配套说明书2 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:2007医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.20073 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL31:20082008医学实验室质量和能力认可准则（ISO15189：2007）.2008编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人： XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书Autobact全自动微生物分离培养仪标准操作规程文件编号：XXX-JY-CZ-WSW-0510版本：20140601生效日期：20140615共 2 页 1目的规范Autoba

42、ct全自动微生物分离培养仪标准操作规程，保证检验质量。2授权操作人经培训考核通过的工作人员可操作仪器。3检测原理Autobact全自动微生物分离培养仪是配套专用微生物分离培养装置使用的自动化设备。用专用微生物分离培养装置一起使用的自动化设备。用专用样本采集管采样后插入分离培养装置的特定位置（仪器样本盘中），仪器自行阅读识别条形码，自动进行样本前处理。仪器施压装置将样本采集管底部压破，采集管中的样本经过特定通道流到培养板底端的样本池中，位于样本池中的接种环蘸区样本，仪器机械手握住接种器前端的驱动手柄，使接种环按照设定的划线方式自动进行划线接种，同时仪器通过事先设定好的程序自动提供相应的温度环境以及气体浓度，培养周期末取出培养装置中培养板观察细菌生长情况，挑取可疑菌落以做进一步的检测。4工作环境相对湿度：85%；运行温度：5-40；电源电压：220/240V，50Hz.5.操作程序5.1培养装